熒光衍生試劑在高效液相色譜和電泳中的應(yīng)用課件

熒光衍生試劑在高效液相色譜和電泳中的應(yīng)用導(dǎo)師：張玉奎學(xué)生：張琳引言常用熒光衍生化試劑應(yīng)用簡介

展望

匯報(bào)內(nèi)容衍生的目的

衍生發(fā)應(yīng)方式熒光衍生試劑的構(gòu)成引言熒光衍生試劑的基本構(gòu)成取代基熒光團(tuán)（試劑分子母體）反應(yīng)基團(tuán)膽磺酰肼DNS-HI胺類化合物的衍生試劑芳香鄰二醛類OPA

異硫氰酸酯類FITC

酰氯類FMOC

活性鹵類NBD-Cl

N-羥基琥珀酰亞胺活性酯類AQC

鄰苯二甲醛OPA4-氯-7-硝基-2,1,3-苯并惡二唑

NBD-Cl熒光素異硫氰酸酯FITCFMOC芴代甲氧基酰氯6-氨喹啉基琥珀酰亞胺碳酸酯AQC常用胺的衍生試劑分子式集成化微流控芯片氨基酸分析儀高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報(bào)2004,25:189~190FMOC衍生分離氨基酸的色譜圖JChromatorgr.1990,499:557FMOC與CEOC衍生分離氨基酸的比較Anal.Biochem2003,31317~27II醇、酚的衍生試劑

羰基氯類：FMOCCEOC

磺酰氯類:DNs-Cl

鹵代三嗪類:EDTN1-乙氧基-4-(二氯-三嗪)萘（EDTN）CEOC衍生醇類熒光檢測色譜分離分析化學(xué)2003,31,62~651.苯酚2.對(duì)氯苯酚3.2,5-二甲基苯酚4.2,4-二氯苯酚5.1,4對(duì)苯二酚CEOC衍生酚類熒光檢測色譜分離肼和胺與羰基化合物的反應(yīng)1.乳糖2.甘露糖3.葡萄糖4.鼠李糖5.山梨糖(FLdetection)咔唑-9-乙氧基羰基肼(CEOC-H)柱前衍生中性糖高效液相色譜分離IV羧酸類化合物的衍生試劑溴甲基類BrMMC

哌嗪基類DBD-Pz

重氮甲烷基類ADAM

其它類9-(2-羥乙基)-吖啶酮HEA4-氨甲基-6，7-二甲基香豆素(ADMC)7-N-哌嗪-4-二甲氨基苯并呋喃9-蒽重氮甲烷9-蒽重氮甲烷(4-溴甲基-7-甲氧基香豆素)4-氨甲基-6,7-二甲基香豆素(ADMC)衍生羧酸色譜分離圖Anal.Sci.1996,12:189Fig.1膽汁酸分離色譜圖（熒光檢測）.衍生物的激發(fā)和發(fā)射波長分別為ex=404,em=440nm9-(2-羥乙基)-吖啶酮HEA衍生膽汁酸色譜分離圖V分離對(duì)映體的手性熒光衍生試劑

OPA與手性硫醇衍生分離DL氨基酸N-異丁?；?D(L)-半胱氨酸(IBDC和IBLC)J.C.A1999832123VI蛋白質(zhì)的衍生試劑目前常用衍生蛋白質(zhì)的熒光標(biāo)記試劑有：

鄰苯二甲醛(OPA)4-氟-7-硝基苯并惡二唑(NBD-F)

熒光素異硫氰酸酯(FITC)3-呋喃甲酰喹啉-2-羰醛(FQ)VII核酸的衍生試劑DNA序列分析中所用的四種熒光衍生試劑Nature1986,327:674DNA測序儀及電泳圖展望分析化學(xué)中的有機(jī)試劑在分析化學(xué)中占有與分析儀器同等重要的地位，熒光衍生化試劑則是有機(jī)分析試劑的一類重要分支。性能優(yōu)良的熒光衍生化試劑可能將成為某些物質(zhì)的高靈敏高選擇性分析的關(guān)鍵，熒光衍生試劑的開發(fā)與應(yīng)用也正朝這個(gè)方向發(fā)展。