評(píng)估絕經(jīng)期女性雌孕激素治療后體內(nèi)羰基化水平,病理學(xué)論文

評(píng)估絕經(jīng)期女性雌孕激素治療后體內(nèi)羰基化水平,病理學(xué)論文女性絕經(jīng)體內(nèi)氧化應(yīng)激反響致使心血管循環(huán)系統(tǒng)紊亂風(fēng)險(xiǎn)增加。當(dāng)前普遍應(yīng)用雌孕激素治療來(lái)減輕或消除更年期前后臨床異常感覺(jué)和狀態(tài)。雌孕激素治療能否影響蛋白質(zhì)氧化、減緩細(xì)胞老化當(dāng)前沒(méi)有確切的結(jié)論，本研究評(píng)估絕經(jīng)期女性，雌孕激素治療后體內(nèi)羰基化水平，為臨床治療提供根據(jù)。1資料與方式方法1.1對(duì)象研究對(duì)象為就診于我院婦產(chǎn)科的絕經(jīng)期女性，既往無(wú)血栓、高血壓、糖尿病、代謝疾病等影響心血管系統(tǒng)的疾病，血漿17--雌二醇均50pg/ml的健康絕經(jīng)后女性，無(wú)吸煙史、飲酒史、甲狀腺疾病、肝臟疾病。研究前未服用降膽固醇藥物、抗氧化維生素制劑及影響新陳代謝的性激素藥物。隨機(jī)分成三組，各組受試者平均年齡、絕經(jīng)時(shí)間、體重指數(shù)(BMI)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。見(jiàn)表1?？诜幬锝M予17--雌二醇1mg，1次/d，去氧孕酮5mg，1次/d。經(jīng)皮給藥組予17--雌二醇50g，1次/d，19-炔諾酮250g，1次/d;對(duì)照組Ⅲ無(wú)治療措施。本研究經(jīng)勝利油田醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，征得納入研究患同意并簽署書(shū)面文件。1.2實(shí)驗(yàn)室檢查研究開(kāi)場(chǎng)前例行子宮頸細(xì)胞學(xué)分析、經(jīng)陰道超聲評(píng)估生殖器官、乳房觸診及X射線等婦科檢查。只要乳腺X線成像及細(xì)胞學(xué)檢查正常的女性才能夠接受激素治療。血液檢查標(biāo)本采集于隔夜空腹后晨起8:00～9:00，采血位置為肘前靜脈。標(biāo)本均去除血小板。本研究前儲(chǔ)存溫度為－70℃。使用MultifibrenU-kit(Dade-BehringDiagnostics，Warsaw，Po-land)測(cè)定葡萄糖、17--雌二醇、卵泡刺激素(FSH)、纖維蛋白原(Fg)濃度;使用Baker810血小板計(jì)數(shù)儀測(cè)定血小板計(jì)數(shù)(PLT);使用PathromtinSL試劑(Dade-Behring)測(cè)定部分活化凝血酶原時(shí)間;血甘油三酯(TG)水平測(cè)定在勝利油田醫(yī)院檢驗(yàn)科完成。根據(jù)Alamdari等報(bào)道的方式方法，使用-二硝基苯酚抗體試劑(Sigma-Aldrich)通過(guò)敏感ELISA法測(cè)定血漿羰基化蛋白水平。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方式方法應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析。計(jì)量資料以xs表示，組間比擬采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。2結(jié)果各組血清纖維蛋白原濃度有顯著差異(P=0.000)。經(jīng)治療后雌二醇水平顯著增加，而FSH水平在三組女性中無(wú)明顯差異。激素治療6個(gè)月后，其血漿蛋白羰基化水平〔口服給藥組(1.790.068)nmol/mg;經(jīng)皮給藥組(1.810.074)nmol/mg〕低于對(duì)照組〔(2.200.107)nmol/mg〕(P=0.000)，但兩種給藥方式血漿蛋白羰基化水平?jīng)]有顯著差異(P=0.326)。見(jiàn)表2。3討論人體內(nèi)的氧化應(yīng)激反響取決于活性氧(ＲOS)的產(chǎn)生與抗氧化系統(tǒng)去除之間的平衡。ＲOS能夠與體內(nèi)各種生物分子產(chǎn)生反響使之失去正常功能，尤其是蛋白質(zhì)分子。蛋白質(zhì)分子超氧化、羥基化、過(guò)氧化、臭氧化、氧化、過(guò)氧硝酸鹽化等導(dǎo)致蛋白質(zhì)功能紊亂。氧自由基與氨基酸殘基互相作用產(chǎn)生酮或醛衍生物統(tǒng)稱(chēng)為羰基化。羰基化蛋白質(zhì)與二硝基苯肼(DNPH)誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反響。機(jī)體老化及多種疾病經(jīng)過(guò)體內(nèi)的血漿蛋白羰基化均有增加。很多神經(jīng)退行性疾病與組織內(nèi)抗蛋白質(zhì)水解的羰基化蛋白質(zhì)堆積直接相關(guān)。已經(jīng)證明氧自由基激活蛋白質(zhì)氧化損傷在老化經(jīng)過(guò)中主要作用。多數(shù)的氧化應(yīng)激研究都是通過(guò)測(cè)定蛋白的過(guò)氧化反響進(jìn)行評(píng)估，并未關(guān)注血漿蛋白氧化反響。固然荷爾蒙激素能夠減輕絕經(jīng)期異常感覺(jué)和狀態(tài)，能夠預(yù)防骨質(zhì)疏松以及冠心病，但其抗氧化作用尚存在爭(zhēng)議。雌激素的類(lèi)固醇環(huán)能夠有效去除羥自由基，產(chǎn)生羥基化產(chǎn)物。雌激素在體內(nèi)外都能夠減少ＲOS種類(lèi)，減輕氧化應(yīng)激異常感覺(jué)和狀態(tài)。絕經(jīng)后女性卵巢產(chǎn)生雌激素減少可導(dǎo)致體內(nèi)氧化應(yīng)激反響的增加。當(dāng)前的研究部分解釋了雌激素怎樣起到抗氧化作用，并解釋了雌孕激素口服給藥途徑作用強(qiáng)于經(jīng)皮給藥。雌激素分子本身的化學(xué)構(gòu)造特性決定了其本身具有抗氧化作用。另一方面，雌激素能夠間接增加如谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(Gpx)和錳超氧化物歧化酶(Mn-SOD)的活性。很多研究證實(shí)單純口服雌激素的抗氧化作用更強(qiáng)。本研究也顯示雌激素經(jīng)口服給藥途徑比經(jīng)皮給藥途徑血漿蛋白羰基化水平要低，但是沒(méi)有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。雌激素口服后經(jīng)消化道吸收入肝，在肝細(xì)胞內(nèi)抑制催化蛋白1和k-B因子進(jìn)而中和氧化應(yīng)激反響。本研究中口服給藥組和經(jīng)皮給藥兩組患者均給予雌孕激素復(fù)合給藥，治療后羰基化水平降低，雌孕激素復(fù)合應(yīng)用時(shí)作用明顯強(qiáng)于單獨(dú)應(yīng)用。多數(shù)研究通過(guò)不同方式方法關(guān)注脂質(zhì)氧化易感性，重點(diǎn)不在脂質(zhì)氧化。本研究的重點(diǎn)關(guān)注女性荷爾蒙激素治療后血漿蛋白質(zhì)氧化應(yīng)激，發(fā)現(xiàn)絕經(jīng)后女性未經(jīng)荷爾蒙激素治療血漿蛋白質(zhì)氧化應(yīng)激水平高于治療組。因而得知，絕經(jīng)后女性血漿蛋白質(zhì)高羰基化是由于卵巢失功能，雌激素替代療法能夠使體內(nèi)氧化復(fù)原反響重新到達(dá)平衡?？傊?，無(wú)論通過(guò)何種給藥途徑，女性雌孕激素聯(lián)合治療均能減少血漿蛋白質(zhì)氧化應(yīng)激反響，而口服給藥效果更好。4以下為參考文獻(xiàn)1CastelaoJE，Gago-DominguezM.Ｒiskfactorsforcardiovasculardiseaseinwomen:relationshiptolipidperoxidationandoxidativestress〔J〕．MedHypotheses，2008;71(1):39-44.2FarquharC，MarjoribanksJ，LethabyA，etal.Longtermestrogenpluspro-gestogentherapyforperimenopausalandpostmenopausalwomen〔J〕．Co-chraneDatabaseSystＲev，2018;(2):281.3StadtmanEＲ.Proteinoxidationandaging〔J〕．Science，1992;257:1220-4．4NowakP，ZbikowskaHM，PonczekM，etal.Differentvulnerabilityoffi-brinogensubunitstooxidative/nitrativemodificationsinducedbyperixyni-trite:functionalconsequences〔J〕．ThrombＲes，2007;121(21):163-74.5Dalle-DonneI，ＲossiＲ，GiustariniD，etal.Proteincarbonylgroupsasbi-omarkersofoxidativestress〔J〕．ClinChimActa，2003;329(1-2):23-38.6AlamdariDH，KostidouE，PaletasK，etal.Highsensitivityenzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA)methodformeasuringproteincarbonylinsampleswithlowamountsofprotein〔J〕．FreeＲadicBiolMed，2005;39:1362-7.7PatonLN，MocattaTJ，ＲichardsAM，etal.Increasedthrombin-inducedpolymerizationoffibrinogenassociatedwithhighproteincarbonyllevelsinplasmafrompatientspostmyocardialinfarction〔J〕．FreeＲadicBiolMed，2018;48(2):223-9.8BaltaciogluE，AkalinFA，AlverA，etal.Proteincarbonyllevelsinserumandgingivalcrevicularfluidinpatientswithchronicperidontitis〔J〕．ArchOralBiol，2008;53(8):716-22.9BealMF.Oxidativelymodifiedproteinsinaginganddisease〔J〕．FreeＲadicBiolMed，2002;32(9):797-803.10ThibodeauPA，KachadourianＲ，LemayＲ，etal.Invitropro-andantiox-idantpropertiesofestrogens〔J〕．JSteroidBiochemMolBiol，2002;81(3):227-36.11Bednarek-TupikowskaG，TupikowskiK，BidzinkaB.Serumlipidperox-idesandtotalantioxidantststusinpostemenopausalwomenonhormonereplacementtherapy〔J〕．GynecolEndocrinol，2004;19(2):57-63.12VihmaV，VehkavaaraS，Yki-JarvinenH，etal.Differentialeffectsoforalandtransdermalestradioltreatmentoncirculatingestradiolfattyacides-terconcentrationsinposmenopausalwomen〔J〕．JClinEndocrinol-Metab，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