血球計(jì)數(shù)板使用及相關(guān)計(jì)算課件

血球計(jì)數(shù)板使用及相關(guān)計(jì)算

計(jì)數(shù)培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的要點(diǎn)：1．每天同一時(shí)間，各組取出本組的試管，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)酵母菌個(gè)數(shù)，并作記錄，連續(xù)觀察7天。2．從試管中吸出培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾下，這樣使酵母菌分布均勻，求得的培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量誤差小。3．如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋。具體方法是：搖勻試管，取1mL酵母菌培養(yǎng)液，加入成倍的無菌水稀釋，稀釋n倍后，再用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)。以每小方格內(nèi)含有4—5個(gè)酵母細(xì)胞為宜。4．活酵母有出芽生殖現(xiàn)象，若芽體達(dá)到母細(xì)胞大小的一半時(shí)，即可作為兩個(gè)菌體計(jì)數(shù)，若芽體小于母細(xì)胞一半時(shí)為1個(gè)酵母細(xì)胞。5．對(duì)于壓在方格界線上的酵母菌應(yīng)當(dāng)計(jì)數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的菌體數(shù)，一般可采取“數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線”的原則處理，另兩邊不計(jì)數(shù)。6．計(jì)數(shù)一個(gè)樣品要從兩個(gè)計(jì)數(shù)室中計(jì)得的平均數(shù)值來計(jì)算，對(duì)每個(gè)樣品可計(jì)數(shù)三次，再取其平均值。例1、有關(guān)“探究培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量動(dòng)態(tài)變化”的實(shí)驗(yàn)，正確的敘述是A．改變培養(yǎng)液的pH值不影響K值（環(huán)境容納量）大小B．用樣方法調(diào)查玻璃容器中酵母菌數(shù)量的變化C．取適量培養(yǎng)液滴于普通載玻片后對(duì)酵母菌準(zhǔn)確計(jì)數(shù)D．營(yíng)養(yǎng)條件并非影響酵母菌種群數(shù)量變化的唯一因素（參考答案：D）

例2、為探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化，某同學(xué)進(jìn)行了如下操作。其中操作正確的有▲(填下列操作的序號(hào))。①將適量干酵母放入裝有一定濃度葡萄糖溶液的錐形瓶中，在適宜條件下培養(yǎng)②靜置一段時(shí)間后，用吸管從錐形瓶中吸取培養(yǎng)液③在血球計(jì)數(shù)板中央滴一滴培養(yǎng)液，蓋上蓋玻片④用濾紙吸除血球計(jì)數(shù)板邊緣多余培養(yǎng)液⑤將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)中央，待酵母菌沉降到計(jì)數(shù)室底部，在顯微鏡下觀察、計(jì)數(shù)參考答案：①④⑤推導(dǎo)：1mm×1mm方格的計(jì)數(shù)

1mm×1mm表示計(jì)數(shù)室的邊長(zhǎng)，即一個(gè)大方格的邊長(zhǎng)。由于計(jì)數(shù)室厚度為0.1mm，所以計(jì)數(shù)室的總體積為0.1mm3。

1．16×25型的計(jì)數(shù)公式：

酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)／1mL=100個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/100×400×10000×稀釋倍數(shù)

2．25×16型的計(jì)數(shù)公式：

酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)／1mL＝80個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/80×400×10000×稀釋倍數(shù)

假設(shè)：計(jì)數(shù)室內(nèi)酵母菌為a個(gè)，稀釋倍數(shù)為b，則10mL培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)為：a×105×b

例4、通常用血球計(jì)數(shù)板對(duì)培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，若計(jì)數(shù)室為1mm×1mm×0.1mm方格，由400個(gè)小方格組成，如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過多，難以計(jì)數(shù)，應(yīng)先▲后再計(jì)數(shù)。若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后，算得每個(gè)小方格中平均有5個(gè)酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有▲個(gè)。（參考答案：稀釋；2×108）5×400×10000×10＝2×108。例6、在用血球計(jì)數(shù)板（2mm×2mm方格）對(duì)某一稀釋50倍樣品進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，發(fā)現(xiàn)在一個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)（蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0.1mm）酵母菌平均數(shù)為16個(gè)，據(jù)此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌

▲個(gè)。（參考答案：2×107）

總結(jié)：2mm×2mm方格的計(jì)數(shù)

2mm×2mm表示計(jì)數(shù)室的邊長(zhǎng)，即一個(gè)大方格的邊長(zhǎng)。由于計(jì)數(shù)室厚度為0.1mm，所以計(jì)數(shù)區(qū)的總體積為0.4mm3。

計(jì)數(shù)室通常也有兩種規(guī)格：一種是16×25型，另一種是25×16型。

假設(shè)：計(jì)數(shù)室內(nèi)酵母菌為a個(gè)，稀釋倍數(shù)為b，則10mL培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)為：a/4×105×b1．16×25型的計(jì)數(shù)公式為：

酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)／1mL=100個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/100×100×10000×稀釋倍數(shù)

2．25×16型的計(jì)數(shù)公式為：

酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)／1mL

＝80個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/80×100×10000×稀釋倍數(shù)

例7、跳蟲、甲螨和線蟲是土壤中的主要?jiǎng)游镱惾?，?duì)動(dòng)植物的分解起重要作用。請(qǐng)回答：（1）由于跳蟲和甲螨活動(dòng)能力

，身體

，不適合用手直接捕捉，常采用吸蟲器等進(jìn)行采集。(2)現(xiàn)要采集大量的跳蟲用于實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)，最好選擇下圖中的吸蟲器

，理由是

。若要采集大量的甲螨作為標(biāo)本保存，最好選擇吸蟲器

，理由是

。（3）現(xiàn)在一培養(yǎng)罐內(nèi)同時(shí)培養(yǎng)跳蟲、甲螨和線蟲三個(gè)種群，若他們均僅以罐內(nèi)已有的酵母菌為食，則跳蟲與甲螨之間的關(guān)系是

，線蟲與酵母菌之間的關(guān)系是

。若跳蟲種群所含能量增長(zhǎng)nKJ，則跳蟲消耗的酵母菌所儲(chǔ)存的能量至少為

KJ。解析：從例5來看，是按照血球計(jì)數(shù)板的原理進(jìn)行設(shè)