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文檔簡介
生化實驗酶切實驗?zāi)曛频?頁/共15頁DNA限制性內(nèi)切酶雙酶切分析第2頁/共15頁第3頁/共15頁
原理限制性內(nèi)切酶是一類具有嚴格識別位點，并在識別位點內(nèi)或者附近切割雙鏈DNA的脫氧核糖核酸酶。第4頁/共15頁BamHⅠGTCCAGGCCTAGGATCCG+GGATCCCCTAGGHindⅡGTCGACCAGCTGGACCTG+平端切口粘端切口第5頁/共15頁第6頁/共15頁XbaI:TCTAGAAGATCTSalI:GTCGACCAGCTG第7頁/共15頁實驗步驟10×CutsmartBuffer 2l質(zhì)粒DNA 1lXbaⅠ 1lSalⅠ 1lH2O 15l20l37℃水浴酶切2小時。1%瓊脂糖凝膠電泳鑒定。第8頁/共15頁第9頁/共15頁NEbuffer(pH7.9)150mMNaCl10mMTris-HCl10mMMgCl21mMDTT二硫蘇糖醇第10頁/共15頁基因組DNA加樣TE溶解液10ul6xloadingbuffer2ulDNA染料1ul第11頁/共15頁質(zhì)粒酶切體系加樣酶切體系20ul6xloadingbuffer4ul第12頁/共15頁第13
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