生物安全及生物安全概論

生物安全及生物安全概論第1頁/共47頁高危人群分類

美國國立衛(wèi)生研究院有關(guān)DNA分子重組研究準(zhǔn)則2002年版世界衛(wèi)生組織有關(guān)實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)2004年第三版高危人群1與健康成年人有關(guān)疾病無關(guān)的介質(zhì)（不具有或者具有較低個(gè)人和社會(huì)風(fēng)險(xiǎn)）不可能導(dǎo)致人類或動(dòng)物疾病的微生物。高危人群2鮮少具有危險(xiǎn)性并通常具有預(yù)防及干預(yù)治療措施的人類疾病相關(guān)介質(zhì)（具有中等個(gè)人風(fēng)險(xiǎn)及較低社會(huì)風(fēng)險(xiǎn)）一種對(duì)人類或動(dòng)物可致病的病原體，但對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員、社區(qū)、牲畜及環(huán)境不具顯著危害性。實(shí)驗(yàn)室解除可能導(dǎo)致嚴(yán)重感染，但通過有效治療及預(yù)防措施可以控制感染傳播危險(xiǎn)性。高危人群3嚴(yán)重及致命并可能具有預(yù)防措施或干預(yù)治療措施的人類疾病相關(guān)介質(zhì)（高度個(gè)人風(fēng)險(xiǎn)但具有較低社會(huì)風(fēng)險(xiǎn)）。（高度個(gè)人風(fēng)險(xiǎn)，較低社會(huì)風(fēng)險(xiǎn)）一種通常會(huì)導(dǎo)致人類或動(dòng)物嚴(yán)重疾病，但一般不會(huì)造成個(gè)體間傳播的病原體。針對(duì)該種類具有有效治療及預(yù)防措置。高危人群4一種通常會(huì)引起人類或動(dòng)物嚴(yán)重或致命疾病，并且通常不具有有效治療措施及預(yù)防措施的相關(guān)介質(zhì)。（高度個(gè)體風(fēng)險(xiǎn)及高度社會(huì)風(fēng)險(xiǎn)）（高度個(gè)人風(fēng)險(xiǎn)及社會(huì)風(fēng)險(xiǎn)）一種通常會(huì)引起人類或動(dòng)物嚴(yán)重疾病并且會(huì)直接或間接在個(gè)體間傳播的病原體。通常不具有有效治療措施及預(yù)防措施。表格1以高危人群分類的傳染微生物分類第2頁/共47頁實(shí)驗(yàn)室設(shè)施被指定為基礎(chǔ)——生物安全水平1,基礎(chǔ)——生物安全水平2，封閉——生物安全水平以及最高水平封閉——生物安全水平針對(duì)各種風(fēng)險(xiǎn)人群分類下不同介質(zhì)工作要求的設(shè)計(jì)特點(diǎn)、建造、封閉設(shè)施、設(shè)備、做法及業(yè)務(wù)程序等各種因素進(jìn)行綜合考慮，對(duì)生物安全水平級(jí)別進(jìn)行分類。表格2中相關(guān)高危人群，與各高危人群內(nèi)，指定進(jìn)行相關(guān)有機(jī)物工作的實(shí)驗(yàn)室生物安全水平所指高危人群類似，但不相同。第3頁/共47頁表格2.高危人群與生物安全水平、準(zhǔn)則及設(shè)備儀器的關(guān)系高危人群生物安全水平實(shí)驗(yàn)室類型實(shí)驗(yàn)室規(guī)范安全設(shè)備1基礎(chǔ)——生物安全水平1基本教學(xué)及研究GMT(良好微生物學(xué)儀器)無；開放式工作平臺(tái)2基礎(chǔ)——生物安全水平2初級(jí)健康服務(wù)；診療服務(wù)及研究GMT(良好微生物學(xué)儀器)附加防護(hù)服及生化危險(xiǎn)標(biāo)志開放式工作平臺(tái)附加BSC(生物安全柜)以應(yīng)對(duì)潛在氣溶膠3封閉——生物安全水平3特殊診療服務(wù)及研究水平2相關(guān)措施附加特殊著裝、訪問控制及定向氣流等BSC(生物安全柜)以及\或者所有行為相關(guān)初級(jí)設(shè)備4最高水平封閉——生物安全水平4危險(xiǎn)病原體單位水平3基礎(chǔ)上附加艙入口、淋浴出口及特殊廢料處理第三級(jí)BSC(生物安全柜)，或與正壓服相結(jié)合的第二級(jí)BSC(生物安全柜)，雙端高雅過濾空氣（通過墻面）BSC指生物安全柜GMT指良好微生物學(xué)儀器（見手冊(cè)第四部分）第4頁/共47頁生物安全水平1.有機(jī)體致病性2.傳播方式和有機(jī)體宿主范圍。將受到已存有的當(dāng)?shù)厝巳好庖吡?、寄主人群密度及遷移、適當(dāng)載體表現(xiàn)及環(huán)境衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)等各種因素的影響。3.當(dāng)?shù)赜行ьA(yù)防措施措施。將包括以下內(nèi)容：以免疫抗體或者管理抗體進(jìn)行預(yù)防（被動(dòng)免疫）；衛(wèi)生措施，例如：食物及水源衛(wèi)生；動(dòng)物水庫及節(jié)肢動(dòng)物媒介控制。4.當(dāng)?shù)赜行е委煷胧?。將包括被?dòng)免疫，暴露后預(yù)防接種及抗菌藥運(yùn)用，抗病毒藥物和化療藥物，并且考慮耐藥菌株出現(xiàn)的可能性。第5頁/共47頁生物安全水平實(shí)驗(yàn)室工作中指定給各介質(zhì)的生物安全水平須以風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估為基礎(chǔ)。該評(píng)估將綜合考慮包括高危人群在內(nèi)的其他因素以建立相應(yīng)的生物安全水平。例如，為保證安全工作行為，分配給高危人群2的相關(guān)介質(zhì)可能通常需要生物安全水平2相關(guān)設(shè)施、設(shè)備、準(zhǔn)則及程序。盡管如此，如果相關(guān)實(shí)驗(yàn)需要提供新一代的高濃度氣溶膠，那么生物安全水平3對(duì)于保障必要安全程序可能更為合適，因?yàn)樵撍娇梢愿玫谋Ｕ蠈?shí)驗(yàn)室工作環(huán)境中的遏制氣溶膠。所以，對(duì)于相關(guān)工作的生物安全水平指定將由風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估為基礎(chǔ)的專業(yè)評(píng)價(jià)進(jìn)行決定，而非根據(jù)對(duì)將要使用的致病劑的特定高危人群指定，對(duì)實(shí)驗(yàn)室生物安全水平進(jìn)行自動(dòng)指定。第6頁/共47頁生物安全水平1234實(shí)驗(yàn)室分離否否是是防止感染的房間密封性否否是是通風(fēng)——外來氣流否需要是是——通風(fēng)系統(tǒng)控制否需要是是——高效空氣過濾否否是/否是雙門入口否否是是氣壓過濾艙否否否是帶淋浴氣壓過濾艙否否否是休息室否否是——帶淋浴休息室否否是/否否污水處理否否是/否是高壓滅菌器——現(xiàn)場(chǎng)否需要是是——實(shí)驗(yàn)室內(nèi)否否需要是——雙頭否否需要是生物安全柜否需要是是個(gè)人安全監(jiān)控能力否否需要是表格3.生物安全水平要求概要

[1]

針對(duì)一般交通的環(huán)境及功能性隔離[2]

根據(jù)排氣設(shè)備位置確定（見第四部分）[3]

根據(jù)試驗(yàn)中使用介質(zhì)確定[4]

例如：窗戶、閉路電視及雙向溝通第7頁/共47頁風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估進(jìn)行微生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估最有效的方法之一即為對(duì)相關(guān)微生物介質(zhì)的高危人群進(jìn)行列表。盡管如此，對(duì)相關(guān)介質(zhì)的高危人群的簡單列舉并不足以進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。還需要對(duì)以下因素予以考慮：1、致病介質(zhì)及感染劑量2、暴露的可能性結(jié)果3、天然傳播方式4、由于實(shí)驗(yàn)室操作（腸外傳播、空氣傳播及攝取傳播）而造成的其他傳播方式5、特定環(huán)境中的穩(wěn)定劑6.劑量濃度及所需集中材料數(shù)量7.合適寄主的存在（人類或動(dòng)物）8.從動(dòng)物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)室所需報(bào)告或者臨床報(bào)告中獲得的信息9.計(jì)劃實(shí)驗(yàn)活動(dòng)（超聲、氣溶膠化及離心分離等方法）10.所有可能擴(kuò)大介質(zhì)寄主范圍或者改變介質(zhì)敏感度的對(duì)有機(jī)體基因的操控，以及有效治療方案。11.當(dāng)?shù)氐挠行ьA(yù)防及干預(yù)治療措施。第8頁/共47頁風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估有限信息條件下的標(biāo)本如果信息充足，那么上述風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估程序?qū)⒌玫搅己玫膱?zhí)行。盡管如此，某些情況下由于信息不充分將導(dǎo)致無法適當(dāng)執(zhí)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，例如，在野外收集臨床標(biāo)本及流行病學(xué)樣本。在此情況下，應(yīng)謹(jǐn)慎的對(duì)標(biāo)本進(jìn)行如下操作：1、應(yīng)當(dāng)遵守標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防措施（2）的規(guī)定，當(dāng)樣本取自病人時(shí)，應(yīng)當(dāng)使用障礙保護(hù)規(guī)定（手套、長袍及護(hù)眼罩）。2、基礎(chǔ)密封——對(duì)于標(biāo)本處理，生物安全水平2的操作及程序?yàn)樽畹鸵蟆?.樣本運(yùn)輸須遵守國家及/或者國際規(guī)范及規(guī)則。第9頁/共47頁風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估以下信息可能得以獲知以協(xié)助確定這些標(biāo)本處理風(fēng)險(xiǎn)：1.病患醫(yī)療數(shù)據(jù)2.流行病學(xué)資料（發(fā)病率和死亡率數(shù)據(jù)，懷疑的傳播途以及其他流行暴發(fā)調(diào)查數(shù)據(jù)）3.標(biāo)本地理來源信息。在爆發(fā)病因不明疾病時(shí)，將由國家主管當(dāng)局以及/或者世界衛(wèi)生組織在世界范圍網(wǎng)站上發(fā)布適當(dāng)及特許的行為指南以指導(dǎo)如何對(duì)樣品進(jìn)行委托托運(yùn)或者根據(jù)其應(yīng)當(dāng)被分析的程度進(jìn)行生物安全水平指定。（適用于2003年嚴(yán)重急性呼吸系統(tǒng)綜合癥SARS的爆發(fā)）第10頁/共47頁風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估在實(shí)驗(yàn)室中得以傳播的主要可能方式為：與相關(guān)介質(zhì)進(jìn)行直接的皮膚、眼睛或者黏膜接觸以注射器針頭或者其他被污染銳器進(jìn)行腸外接種，或者被已感染動(dòng)物和節(jié)肢動(dòng)物媒介咬傷；3)一種被感染介質(zhì)懸浮液的吸入，或者被污染手部與嘴部的接觸；4)感染性氣溶膠吸入對(duì)于天然人類疾病的傳播方式的了解，有助于辨認(rèn)實(shí)驗(yàn)室中可能的傳播方式以及對(duì)于公共健康的潛在風(fēng)險(xiǎn)。例如，與被感染患者的呼吸道粘膜流出物的接觸可以導(dǎo)致被感染介質(zhì)的傳播，這可充分說明實(shí)驗(yàn)室工作人員在對(duì)相關(guān)介質(zhì)進(jìn)行處理時(shí)由于粘膜暴露于處理過程中產(chǎn)生的液滴，從而處于被感染的風(fēng)險(xiǎn)之中。第11頁/共47頁風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估對(duì)于處理相關(guān)介質(zhì)的人員以及其他實(shí)驗(yàn)室使用人而言，一種可以通過粘膜暴露于被感染氣溶膠從而得以傳播的傳染疾病是一種嚴(yán)重的實(shí)驗(yàn)室危險(xiǎn)。由于被感染氣溶膠可能不是一種對(duì)于天然性疾病傳播的公認(rèn)方法，這種危險(xiǎn)需要進(jìn)行特殊的預(yù)防措施。對(duì)于建立起通過空氣傳播的疾病的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定感染劑量以介質(zhì)穩(wěn)定劑非常重要。例如，在運(yùn)用貝氏柯克斯體下實(shí)驗(yàn)室中發(fā)生的多重感染報(bào)告中，低量吸入感染劑量（估計(jì)其

吸入感染顆粒為10）、以及相關(guān)介質(zhì)在環(huán)境壓力的抵抗力使其介質(zhì)可以在生活寄主或者傳播媒介之外長時(shí)間生存以至于成為一種氣溶膠危害。第12頁/共47頁風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估在涉及試驗(yàn)用動(dòng)物的情形下，人畜共患劑的危險(xiǎn)特征需要進(jìn)行審慎的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。在實(shí)驗(yàn)中試驗(yàn)用動(dòng)物的唾液，尿液或糞便可以散發(fā)人畜共患劑以及其他感染性介質(zhì)是一種重要的危險(xiǎn)信號(hào)。一靈長類研究中心實(shí)驗(yàn)室工作人員由于Cercopithecine皰疹病毒1型感染而導(dǎo)致的死亡，是由于眼部飛濺接觸到由恒河猴帶來的生物材料，該案例說明了該危害的嚴(yán)重性。對(duì)于這種潛在危險(xiǎn)的忽視將導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室員工對(duì)于涉及不可預(yù)料的多重感染的暴發(fā)不具抵抗力。通過7次試驗(yàn)，來自被感染動(dòng)物的傳染疾病傳染給了同籠健康動(dòng)物是該危害的可靠證明。上述實(shí)驗(yàn)中沒有傳染性的案例并不能排除改為還行。例如，被感染弗朗西斯tularensis菌、貝氏柯克斯體、Coccidioides絲蟲或者衣原體鸚鵡熱的試驗(yàn)用動(dòng)物以及可以導(dǎo)致多種LAIs的介質(zhì)鮮少感染同籠物種。第13頁/共47頁評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)轉(zhuǎn)基因介質(zhì)危害。對(duì)于轉(zhuǎn)基因介質(zhì)危害特征的確認(rèn)和評(píng)估涉及因素與野生型動(dòng)物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估考慮因素相同。其中需要重視的是，轉(zhuǎn)基因?qū)?dǎo)致介質(zhì)致病性可能性提高或者可能導(dǎo)致對(duì)藥物或者其他有效治療的抗藥性。對(duì)于新設(shè)計(jì)介質(zhì)而言，由于某些重要信息的缺失，可能導(dǎo)致風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估非常困難或者不甚完整。一些調(diào)查研究人員對(duì)于新設(shè)計(jì)介質(zhì)的最新研究中報(bào)告，觀察到預(yù)料之外的毒性增強(qiáng)。上述觀察研究為應(yīng)對(duì)毒力基因可能導(dǎo)致風(fēng)險(xiǎn)提升的可能性保持警覺提供理由。上述研究還說明風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是一項(xiàng)持續(xù)性過程，要求其根據(jù)研究進(jìn)展不斷更新。第14頁/共47頁風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

細(xì)胞培養(yǎng)。如果暴露于包含在細(xì)胞和組織中的潛伏期感染介質(zhì)以及偶然劑之下，處理或者操作上述人類或者動(dòng)物細(xì)胞及組織的工作人員面臨風(fēng)險(xiǎn)。美國民眾眾被感染個(gè)體中存在的，潛伏期皰疹病毒恢復(fù)、對(duì)于器官接受者非故意性疾病傳播以及人類免疫缺陷病毒（HIV）、乙肝病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）的持續(xù)性對(duì)該風(fēng)險(xiǎn)予以了說明。另外，人類腫瘤移植意外的傳染給健康接受者的案例表明，對(duì)于處理上述細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)室工作人員而言具有潛在危害性。此外，如果人類和動(dòng)物細(xì)胞系未經(jīng)特色化或者來自二手資料可能對(duì)實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生感染危害。例如，在裸鼠腫瘤細(xì)胞系接種過程中，如該細(xì)胞系已不知不覺中受淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒的感染將導(dǎo)致多種LIAs。第15頁/共47頁風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

實(shí)驗(yàn)室流程危險(xiǎn)特征

包括：利用注射器針頭或者其他被污染銳器進(jìn)行腸外接種、溢漏和飛濺到皮膚和粘膜上傳播、通過口部吸液的攝入、動(dòng)物叮咬和劃傷以及感染氣溶膠的吸入性接觸。上述四種實(shí)驗(yàn)室傳播途徑容易被檢測(cè)，但是只占報(bào)告LAIs情形中的20%。這種感染的絕大部分報(bào)告中，并不包括充分的信息以確認(rèn)傳染傳播途徑。研究表明可能感染源（動(dòng)物或體外寄生物、臨床標(biāo)本、機(jī)制以及氣溶膠）在將近50%的情形下是非常明顯的。第16頁/共47頁風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

實(shí)驗(yàn)室流程危險(xiǎn)特征由于氣溶膠在試驗(yàn)中無處不在、不易察覺并且極易蔓延，氣溶膠是一項(xiàng)嚴(yán)重危險(xiǎn)，使得實(shí)施相關(guān)程序的實(shí)驗(yàn)室工作人員以及其他實(shí)驗(yàn)室人員處于受感染的風(fēng)險(xiǎn)之下。在生物安全學(xué)界已達(dá)成共識(shí)，對(duì)由于相關(guān)程序和操作產(chǎn)生的LAIs氣溶膠進(jìn)行調(diào)查的實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和主要調(diào)查人員，尤其在涉及相關(guān)工作人員僅知道風(fēng)險(xiǎn)因素來自于其工作相關(guān)介質(zhì)或者工作完成區(qū)域的情況下，上述人員是許多LAIs的主要傳染源。第17頁/共47頁風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

實(shí)驗(yàn)室流程危險(xiǎn)特征

對(duì)微生物懸架傳遞能量的程序?qū)a(chǎn)生氣溶膠。在實(shí)驗(yàn)室中日常運(yùn)用于傳染性介質(zhì)處理的相關(guān)程序和設(shè)備，如吸液、攪拌機(jī)、非自備離心機(jī)、近距離聲波定位器和旋渦混合器被證明為氣溶膠來源。這些程序和設(shè)備將產(chǎn)生可吸入尺寸的顆粒，可在空氣中長期存在傳播。當(dāng)被吸入后，這些顆粒將滯留在肺部，并對(duì)執(zhí)行操作工作的人員、實(shí)驗(yàn)室同事以及使用相連空間從而與實(shí)驗(yàn)室空氣相接觸的人員產(chǎn)生危害。一些調(diào)查人員已經(jīng)確定普通實(shí)驗(yàn)室流程過程中的氣溶膠輸出量。另外，調(diào)查人員已經(jīng)提出對(duì)實(shí)驗(yàn)室來源氣溶膠吸入量的估量模式。氣溶膠危害特征的參數(shù)包括感染性介質(zhì)吸入量、氣溶膠生存能力、氣溶膠濃度以及顆粒尺寸。第18頁/共47頁風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

實(shí)驗(yàn)室流程危險(xiǎn)特征

可產(chǎn)生可吸入尺寸顆粒的流程及設(shè)備也可產(chǎn)生可以含有一種感染性介質(zhì)多種類型版本的較大尺寸的滴液。較大尺寸滴液可以迅速擴(kuò)散到空氣中，污染手套和工作表面并且可能污染到執(zhí)行流程工作人員的粘膜。對(duì)實(shí)驗(yàn)室操作中可吸入顆粒及滴液兩種物質(zhì)的釋放的估算中，可確定可吸入性組成部分相對(duì)較小并且變化較少；相對(duì)而言，手部和表面的污染較為嚴(yán)重且變化很多。滴液污染接觸的潛在風(fēng)險(xiǎn)要求其得到與可吸入氣溶膠風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估一樣的關(guān)注。第19頁/共47頁風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

實(shí)驗(yàn)室流程危險(xiǎn)特征

所用設(shè)備將顯著影響氣溶膠輸出和劑量。仔細(xì)優(yōu)秀的工作人員將大大降低氣溶膠的產(chǎn)生。粗心急躁的工作人員將大大的增加氣溶膠危害。例如，急躁的工作人員在聲波均質(zhì)操作中可能會(huì)導(dǎo)致最高曝氣，而細(xì)心的工作人員會(huì)時(shí)刻把握器械以降低曝氣。實(shí)驗(yàn)表明最大曝氣下的氣溶膠負(fù)擔(dān)是最小曝氣下氣溶膠負(fù)擔(dān)的200倍。在泡沫吸液及最少泡沫的試驗(yàn)中，具有相同的結(jié)果。密封得當(dāng)及運(yùn)用得當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)操作亦可降低風(fēng)險(xiǎn)。第20頁/共47頁

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

與工作操作、安全設(shè)備及設(shè)施安全保障相關(guān)的潛在風(fēng)險(xiǎn)

工作人員保護(hù)其自身、實(shí)驗(yàn)室其他人員及公眾暴露于危險(xiǎn)介質(zhì)的第一道防線。良好微生物準(zhǔn)則是否得到良好及熟練地遵守，以及安全設(shè)備的是否正確使用決定著保護(hù)措施的有效性。風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估需要確認(rèn)在實(shí)驗(yàn)室工作人員操作程序中潛在的所有缺陷。粗心大意是最嚴(yán)重的問題，因?yàn)樗麑p弱所有實(shí)驗(yàn)室安全保障設(shè)施的功效并且增加對(duì)工作同事的風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于與危險(xiǎn)介質(zhì)打交道的人員來說，培訓(xùn)、經(jīng)驗(yàn)、關(guān)于相關(guān)介質(zhì)和流程危害的了解、良好的習(xí)慣、慎重、關(guān)注以及對(duì)于工作伙伴健康的關(guān)注都是一位實(shí)驗(yàn)室工作人員所必備的先決品質(zhì)，以將降低固有風(fēng)險(xiǎn)。盡管擁有優(yōu)秀的科學(xué)知識(shí)，但并非所有實(shí)驗(yàn)室工作人員擁有上述先決條件。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或者主要調(diào)查人員應(yīng)當(dāng)對(duì)新進(jìn)員工進(jìn)行多次培訓(xùn)以保證無菌技術(shù)和安全預(yù)防措施成為第二天性。第21頁/共47頁

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

與工作操作、安全設(shè)備及設(shè)施安全保障相關(guān)的潛在風(fēng)險(xiǎn)

某些危害需要在安全玻璃、實(shí)驗(yàn)室長袍以及手套之外附加特殊個(gè)人防護(hù)設(shè)備。例如，具有飛濺危險(xiǎn)的操作流程可能需要口罩及面罩的使用以提供充分的保護(hù)。個(gè)人保護(hù)型設(shè)備的培訓(xùn)不足可能降低其使用有效性，或者導(dǎo)致錯(cuò)誤的安全感，還可能增加實(shí)驗(yàn)室工作人員的風(fēng)險(xiǎn)。例如，獨(dú)立于操作用介質(zhì)，呼吸器配搭者可能會(huì)產(chǎn)生風(fēng)險(xiǎn)。第22頁/共47頁

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

與工作操作、安全設(shè)備及設(shè)施安全保障相關(guān)的潛在風(fēng)險(xiǎn)

如生物安全柜（BSC）、離心機(jī)安全杯以及密封轉(zhuǎn)子類的安全設(shè)備，被運(yùn)用于向?qū)嶒?yàn)室工作人員提供高度的安全保護(hù)，以防止其與微生物和液滴進(jìn)行接觸。為正常運(yùn)作的安全設(shè)備具有危害性，尤其在使用者沒有注意到機(jī)器失常的時(shí)候。由于錯(cuò)誤的安裝位置、房間空間循環(huán)、下降氣流、漏水的過濾器、開啟的窗扇、擁擠的工作表面以及較差的使用技巧將會(huì)減低生物安全柜（BSC）的密封能力。只有在正確操作相關(guān)設(shè)備的前提下，現(xiàn)代離心機(jī)的安全性能才能有效。針對(duì)設(shè)備正確使用、正確流程、日常監(jiān)測(cè)以及潛在機(jī)器失常，以及設(shè)備定期再認(rèn)證的必要培訓(xùn)是非常重要的。第23頁/共47頁

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

與工作操作、安全設(shè)備及設(shè)施安全保障相關(guān)的潛在風(fēng)險(xiǎn)

安全保證設(shè)置防止實(shí)驗(yàn)室相關(guān)介質(zhì)意外外泄事故的發(fā)生。在BSL-3和BSL-4的情況下，他們的使用尤其關(guān)鍵，因?yàn)樵诖饲闆r下指定到該水平的相關(guān)介質(zhì)可以通過吸入途徑進(jìn)行疾病傳播或者將導(dǎo)致致命疾病。例如，一種定向氣流安全保障設(shè)施。該保障設(shè)施可以防止氣溶膠從實(shí)驗(yàn)室傳播到建筑物的其他區(qū)域。由實(shí)驗(yàn)室取暖設(shè)備的操作性能、通風(fēng)設(shè)備以及空調(diào)系統(tǒng)（HVAC）決定氣流定向。HVAC系統(tǒng)要嚴(yán)格監(jiān)控以及定期維護(hù)以保持其操作性能。定向氣流的缺乏將減低安全實(shí)驗(yàn)室操作。BSL-4密封設(shè)施提供更為完備的安全保障，這要求更為專業(yè)的設(shè)計(jì)和操作。第24頁/共47頁

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

與工作操作、安全設(shè)備及設(shè)施安全保障相關(guān)的潛在風(fēng)險(xiǎn)

設(shè)施安全保障是風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估不可或缺的一個(gè)考慮因素。安全生物安全專業(yè)、建筑和配備人員以及IBC將抱住設(shè)置向計(jì)劃工作提供相應(yīng)保護(hù)，并在必要時(shí)提出改變建議。在舊BSL-3設(shè)施重建或者翻修的基礎(chǔ)上，風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估可以提供包括附加設(shè)施安全保障在內(nèi)的需求。第25頁/共47頁

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)及選擇合適安全保障措施的途徑

生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估是一個(gè)需要考慮各種介質(zhì)和流程諸多危險(xiǎn)特性的主管過程，并且通常在不甚完全的信息基礎(chǔ)上作出判斷。在此，對(duì)于執(zhí)行生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估并沒有一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)途徑，但是在知道過程中一些結(jié)構(gòu)具有借鑒意義。第26頁/共47頁

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)及選擇合適安全保障措施的途徑

首先，確認(rèn)介質(zhì)危險(xiǎn)性并且作出初步風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估?？紤]相關(guān)介質(zhì)的主要危險(xiǎn)特征，其中包括在易感人群宿主中的傳染能力和致病力，疾病嚴(yán)重程度以及預(yù)防措施和有效治療方式的可行性。第27頁/共47頁

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)及選擇合適安全保障措施的途徑

第二，確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室流程中的危險(xiǎn)。主要實(shí)驗(yàn)室流程危險(xiǎn)包括介質(zhì)濃度、懸浮量、在設(shè)備和操作流程中產(chǎn)生的細(xì)小顆粒氣溶膠以及較大空氣顆粒（滴液），以及銳器的使用。涉及動(dòng)物的流程中存在咬傷和劃痕、與動(dòng)物介質(zhì)相解除，以及試驗(yàn)中產(chǎn)生感染性氣溶膠的處理在內(nèi)的諸多危險(xiǎn)，復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)操作流程也存在危險(xiǎn)。對(duì)于介質(zhì)處理中所用典型日常流程相關(guān)的主要實(shí)驗(yàn)室危險(xiǎn)，相關(guān)介質(zhì)綜述提供了相關(guān)信息。在流程危險(xiǎn)不同于相關(guān)介質(zhì)情況綜述的擬議試驗(yàn)流程時(shí)，或者無法獲取相關(guān)介質(zhì)簡要說明的情況下，風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估需要指出相關(guān)程序的具體危險(xiǎn)。第28頁/共47頁

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)及選擇合適安全保障措施的途徑

第三，最后確定合適的生物安全水平并且根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估顯示選擇附加的預(yù)防措施。最終選定的合適生物安全水平以及任何附加實(shí)驗(yàn)預(yù)防措施都要求綜合考慮所有操作流程、安全設(shè)備以及安全保障設(shè)施的配合。另外，還需注意實(shí)驗(yàn)室工作人員在疾病易感性上存在個(gè)體差異。已患疾病、藥物、免疫力降低以及可能提高嬰兒接觸某些介質(zhì)可能性的妊娠或哺乳，都是可能提高個(gè)體得到LAI風(fēng)險(xiǎn)的情形。在此情況下，建議與具有傳染疾病方面執(zhí)業(yè)醫(yī)師知識(shí)的人員進(jìn)行咨詢。第29頁/共47頁

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)及選擇合適安全保障措施的途徑

第四，根據(jù)安全操作準(zhǔn)則以及安全設(shè)備統(tǒng)一性的考慮對(duì)員工資質(zhì)進(jìn)行評(píng)估。對(duì)于實(shí)驗(yàn)室工作人員、實(shí)驗(yàn)室相關(guān)其他人員以及公眾的保護(hù)最終依靠于實(shí)驗(yàn)室工作人員自身。在執(zhí)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí)，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或者主要調(diào)查人員需要保證，在處理相關(guān)介質(zhì)時(shí)，相關(guān)實(shí)驗(yàn)室工作人員已經(jīng)取得執(zhí)行微生物準(zhǔn)則和安全設(shè)施所需資質(zhì)，并且已經(jīng)養(yǎng)成在上述準(zhǔn)則執(zhí)行中保持良好表現(xiàn)的習(xí)慣。個(gè)人培訓(xùn)、處理受感染介質(zhì)經(jīng)驗(yàn)、運(yùn)用無菌技術(shù)及BSC的相關(guān)資質(zhì)、危機(jī)應(yīng)對(duì)能力以及保護(hù)自身及其他人員的責(zé)任感都是非常重要的評(píng)估因素，以保障實(shí)驗(yàn)室工作人員能夠安全進(jìn)行工作。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或者主要調(diào)查人員還應(yīng)當(dāng)保證必須安全設(shè)備以及予以適當(dāng)操作。例如，一個(gè)生物安全柜并不能充分代表其對(duì)于實(shí)驗(yàn)室使用工作人員以及其他人員具有顯著的危害性。負(fù)責(zé)人應(yīng)當(dāng)在開始處理相關(guān)介質(zhì)前修復(fù)所有的設(shè)備缺陷。第30頁/共47頁

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)及選擇合適安全保障措施的途徑

第五，將風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提交一位具有生物安全專業(yè)知識(shí)在標(biāo)的物領(lǐng)域進(jìn)行研究的專家以及國際生物倫理委員會(huì)(IBC)進(jìn)行復(fù)審。由具有相關(guān)知識(shí)的個(gè)人對(duì)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估以及選定安全保障措施進(jìn)行復(fù)審十分有益，并且符合一些相關(guān)規(guī)范機(jī)構(gòu)的要求。由當(dāng)?shù)貒H生物論理委員會(huì)（IBC）對(duì)潛在高度風(fēng)險(xiǎn)議定書進(jìn)行復(fù)審應(yīng)當(dāng)成為操作標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于該步驟的自愿履行，將促進(jìn)在微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中危險(xiǎn)介質(zhì)處理工作安全準(zhǔn)則的運(yùn)用。第31頁/共47頁

生物安全

生物安全原則所有生物安全項(xiàng)目的基本目標(biāo)在于對(duì)潛在危害性生物介質(zhì)的密封。術(shù)語“密封”運(yùn)用于描述在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中，對(duì)于受感染材料進(jìn)行處理或者保存時(shí)，所需的安全方法、設(shè)施以及設(shè)備。密封的目的在于減小或者消除對(duì)于實(shí)驗(yàn)室工作人員、其他人員以及潛在危害介質(zhì)外部環(huán)境的接觸暴露。疫苗的使用可能提供更高水平的個(gè)人保護(hù)。對(duì)于具體介質(zhì)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估工作的完成將決定這些因素的適當(dāng)組合。第32頁/共47頁

生物安全

實(shí)驗(yàn)室操作準(zhǔn)則及技巧密封措施中最為關(guān)鍵的因素在于嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)微生物操作準(zhǔn)則和技巧。與受感染介質(zhì)或者潛在受感染材料進(jìn)行工作的個(gè)體必須對(duì)潛在危險(xiǎn)保持警惕，并且必須經(jīng)過相應(yīng)培訓(xùn)且具有實(shí)踐操作的相應(yīng)資質(zhì)，另外還需要能夠安全處理這種材料的技巧。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人對(duì)提供或者安排適當(dāng)?shù)膫€(gè)人培訓(xùn)負(fù)有責(zé)任。所有實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)指定或者采納一種生物安全或者操作指南，以確認(rèn)將會(huì)或者可能遭遇的危險(xiǎn)，以及能夠降低或者消除暴露于這種危害之中的具體操作和流程。必須指派一位經(jīng)過培訓(xùn)，對(duì)實(shí)驗(yàn)技巧、安全流程以及在處理受感染介質(zhì)過程中相關(guān)危險(xiǎn)具有相應(yīng)知識(shí)的科學(xué)家，對(duì)所有受感染介質(zhì)或者材料的工作進(jìn)行負(fù)責(zé)。此人須與生物安全或其他健康安全專業(yè)人士就風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估進(jìn)行咨詢。第33頁/共47頁

生物安全

如果標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)操作準(zhǔn)則不足以控制某種介質(zhì)或者試驗(yàn)流程有關(guān)的危險(xiǎn)，那么則需要附加相關(guān)措施。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人須負(fù)責(zé)選定附加的安全操作流程，以控制相關(guān)介質(zhì)或流程造成的危害。實(shí)驗(yàn)室人員、安全操作準(zhǔn)則以及技巧須輔以適當(dāng)設(shè)施設(shè)計(jì)以工程特點(diǎn)、安全設(shè)備以及管理操作進(jìn)行。第34頁/共47頁

生物安全

安全設(shè)備（主要障礙以及個(gè)人防護(hù)設(shè)備）安全設(shè)備包括生物安全柜（BSC）、密封容器以及其他工程控制，以消除或者減小與危險(xiǎn)性生物材料的接觸。對(duì)于由微生物操作流程中產(chǎn)生的容易造成感染的飛濺或者氣溶膠，生物安全柜（BSC）是對(duì)其進(jìn)行密封的主要設(shè)備。在附錄A中，對(duì)三種生物安全柜（分類Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）在微生物實(shí)驗(yàn)室中的運(yùn)用進(jìn)行了闡述和說明。開放額生物安全柜分類Ⅰ、Ⅱ作為主要的障礙物，在運(yùn)用良好微生物技巧時(shí)對(duì)于實(shí)驗(yàn)室工作人員以及相關(guān)環(huán)境提供關(guān)鍵水平的保護(hù)。生物安全柜類別Ⅱ通過柜內(nèi)的操作，從材料的外部密封提供保護(hù)措施（例如：細(xì)胞培育，微生物儲(chǔ)存）。氣密生物安全柜類別Ⅲ對(duì)于個(gè)人和環(huán)境提供可實(shí)現(xiàn)的最高水平的保護(hù)措施。第35頁/共47頁

生物安全

另外一項(xiàng)重要的安全障礙措施范例為離心杯，這是一種設(shè)計(jì)來在離心過程中阻止氣溶膠泄漏的密封容器為減少氣溶膠的危害性，在處理受感染介質(zhì)的過程中必須使用如生物安全柜或者離心杯之類的容器控制。安全設(shè)備可能還包括個(gè)人防護(hù)道具，如手套、大衣、長袍、鞋套、靴子、呼吸器、面罩、安全玻璃罩或者護(hù)目鏡等。在處理相關(guān)介質(zhì)、動(dòng)物或者材料時(shí)，個(gè)人防護(hù)設(shè)備通常與生物安全柜和其他設(shè)備結(jié)合使用。在一些情形下，如果不能使用生物安全柜，那么個(gè)人防護(hù)設(shè)備可能組成個(gè)人與受感染材料之間的主要障礙。事例包括對(duì)某些動(dòng)物的研究、動(dòng)物尸檢、介質(zhì)繁殖活動(dòng)以及與實(shí)驗(yàn)室設(shè)施維護(hù)、服務(wù)或者支持有關(guān)的活動(dòng)。第36頁/共47頁

生物安全

設(shè)施設(shè)計(jì)和施工（第二重障礙）相關(guān)設(shè)施的設(shè)計(jì)與施工對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員的保護(hù)具有重大意義，他對(duì)于實(shí)驗(yàn)室以外的人們提供了一層障礙，保護(hù)了社會(huì)中的個(gè)人及動(dòng)物不受到可能從實(shí)驗(yàn)室中意外泄露的受感染介質(zhì)的威脅。實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人有責(zé)任提供與實(shí)驗(yàn)室功能以及相關(guān)介質(zhì)推薦生物安全水平相稱的保護(hù)設(shè)施。被推薦的第二重障礙將根據(jù)具體介質(zhì)的傳播風(fēng)險(xiǎn)決定。例如，在BSL-1和BSL-2設(shè)施中絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室工作中產(chǎn)生的暴露風(fēng)險(xiǎn)將與相關(guān)介質(zhì)，或者通過工作環(huán)境受到感染的非故意性接觸暴露直接相關(guān)。在這些實(shí)驗(yàn)室中的第二重障礙可能包括實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域與公共通道之間的隔離，凈化設(shè)施（例如：高壓消毒設(shè)施）以及手部清潔設(shè)施。第37頁/共47頁

生物安全

當(dāng)暴露于傳染病氣溶膠從而導(dǎo)致傳染病風(fēng)險(xiǎn)時(shí)，更高水平的主要密封措施和多種第二重障礙可能成為防止受感染介質(zhì)泄漏到外部環(huán)境的必要措施。這種設(shè)計(jì)特征包括特殊的培峰系統(tǒng)以保證定向氣流，空氣處理系統(tǒng)以從肺氣腫凈化或者消除相關(guān)介質(zhì)，存取控制區(qū)，實(shí)驗(yàn)室入口氣艙，或者單獨(dú)建筑物或者模塊以與實(shí)驗(yàn)室相隔離。實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)工程可能提及由美國社會(huì)制冷與空調(diào)工程師協(xié)會(huì)出版社（ASHRAE）出版的《實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)指導(dǎo)》中的具體通風(fēng)設(shè)計(jì)建議。第38頁/共47頁

生物安全

生物安全水平1操作準(zhǔn)則，安全設(shè)備和設(shè)施設(shè)計(jì)及施工在本科教育及第二教育培訓(xùn)與教學(xué)中較為合適，還合適于其他已界定的和已特征化的多樣微生物鏈相關(guān)實(shí)驗(yàn)室工作，而上述多樣微生物是與健康成年人中一貫造成疾病的相關(guān)微生物所不同的?？莶菅挎邨U菌、(非致病性)感染鼠（naegleriagruberi）、犬傳染性肝炎以及根據(jù)美國國立衛(wèi)生研究院（NIH）指南免除的生物體是符合這些標(biāo)準(zhǔn)的代表性微生物。許多介質(zhì)與人類患疾病通常不具關(guān)聯(lián)，盡管如此，這些介質(zhì)為機(jī)會(huì)性病原體并且可能傳染給年輕、年老以及患有免疫缺陷或者免疫抑制的個(gè)人。經(jīng)過多重體內(nèi)通道的疫苗株不應(yīng)當(dāng)因?yàn)槠涫且呙缰甓徽J(rèn)為是無毒的。BSL-1代表著基礎(chǔ)性密封水平，其由標(biāo)準(zhǔn)微生物操作規(guī)則所決定，不具有被推薦的特殊第一或第二重障礙，除了洗手之外。第39頁/共47頁

生物安全

生物安全水平2操作規(guī)則、設(shè)備以及設(shè)施設(shè)計(jì)和施工適用于臨床、診斷、教學(xué)和其他實(shí)驗(yàn)室工作，這些工作在固有中等風(fēng)險(xiǎn)介質(zhì)（該介質(zhì)出現(xiàn)在社會(huì)中，且與不同程度的人類疾病相關(guān)聯(lián)）的廣譜范圍內(nèi)完成?；诹己梦⑸锛记?，這些介質(zhì)可被安全的運(yùn)用于開放式工作臺(tái)上進(jìn)行的活動(dòng)中，過程中產(chǎn)生飛濺或者氣溶膠的可能性較低。乙型肝炎病毒、HIV、沙門菌以及屬弓形蟲是指定在這個(gè)密封水平內(nèi)的微生物代表物。當(dāng)工作是以任何一種人源性血、體液、組織或者主要人類細(xì)胞系完成，那么BSL-2是可適用的，在這種情況下出現(xiàn)的傳染病介質(zhì)可能是未知的。（運(yùn)用人源材料進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)室個(gè)人工作需要根據(jù)職業(yè)安全與衛(wèi)生署(OSHA)規(guī)定的具體防范措施進(jìn)行）。與這些介質(zhì)相關(guān)的個(gè)人工作的主要危險(xiǎn)在于意外經(jīng)皮或黏膜接觸，或者對(duì)于傳染性材料的攝入。當(dāng)使用被污染的枕頭或者尖銳器械時(shí)，需要極度小心。盡管通常而言BSL-2水平中的有機(jī)物被認(rèn)為不會(huì)通過氣溶膠途徑傳播，帶有氣溶膠或者高飛濺可能性的程序可能會(huì)增加這種個(gè)體接觸風(fēng)險(xiǎn)，所以必須使用初級(jí)密封設(shè)備，或者使用如生物安全柜或者安全離心杯等類設(shè)備進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。應(yīng)當(dāng)正確使用個(gè)人防護(hù)設(shè)備，如飛濺防護(hù)罩、面罩、長袍以及手套。第二重防護(hù)，必須安裝如洗手槽、廢物凈化設(shè)施類的設(shè)施以減低環(huán)境污染。第40頁/共47頁

生物安全

生物安全水平3操作準(zhǔn)則、安全設(shè)備以及設(shè)施設(shè)計(jì)與施工可適用于臨床、診斷、教學(xué)、研究或者培育設(shè)施，這些工作以固有或者外來介質(zhì)進(jìn)行，具有呼吸道傳播可能性，并且可能導(dǎo)致嚴(yán)重甚至致命性的傳染病。結(jié)核分枝桿菌、圣路易斯腦炎病毒以及貝氏柯克斯體是指定到該水平的微生物代表物。從事該介質(zhì)工作的個(gè)體主要危害在于自體疫苗接種、攝入以及傳染性氣溶膠接觸。在BSL-3水平中，更加重視第一重和第二重防護(hù)，以保護(hù)毗鄰區(qū)、社會(huì)以及可能接觸潛在傳染性氣溶膠的環(huán)境中的個(gè)體。例如，所有實(shí)驗(yàn)工作不惜在生物安全柜或者其他密封設(shè)備中進(jìn)行，如氣密氣溶膠培育室。這一水平的第二重防護(hù)包括實(shí)驗(yàn)室入口控制以及通風(fēng)要求以降低傳染性氣溶膠從實(shí)驗(yàn)室中泄露的危險(xiǎn)。第41頁/共47頁

生物安全

生物安全水平4操作準(zhǔn)則、安全設(shè)備以及設(shè)施設(shè)計(jì)與施工可適用于危險(xiǎn)外來介質(zhì)相關(guān)工作，這些介質(zhì)可能導(dǎo)致高度致命個(gè)人疾病風(fēng)險(xiǎn)，通過氣溶膠途徑進(jìn)行傳播，并且不具有疫苗或者治療方法。與BSL-4水平介質(zhì)具有接近或者相同抗原的相關(guān)介質(zhì)也需要以此水平標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行處理。當(dāng)獲得充分?jǐn)?shù)據(jù)后，可能繼續(xù)使用該水平標(biāo)準(zhǔn)或者降低標(biāo)準(zhǔn)從事該介質(zhì)相關(guān)工作。如馬爾堡或剛果克里米亞出血熱的病毒都以BSL-4水平進(jìn)行操作。以