細菌病的一搬診斷程序

細菌病的一搬診斷程序第1頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六二、培養(yǎng)基種類液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基三種。液體培養(yǎng)基：含有各種營養(yǎng)成分的水溶液。

固體培養(yǎng)基：在液體培養(yǎng)基中加入2～3%瓊脂即為固體培養(yǎng)基。半固體培養(yǎng)基：加入0.3～

0.5%瓊脂即為半固體培養(yǎng)基。(一)按其物理性狀分為第2頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基

含有培養(yǎng)一般細菌的最基本成分。可供大多數(shù)細菌人工培養(yǎng)用。如肉湯培養(yǎng)基、普通瓊脂培養(yǎng)基和蛋白胨水等。(二)按其用途分為第3頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六2、營養(yǎng)培養(yǎng)基于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入高營養(yǎng)物質(zhì)如葡萄糖、血液、血清、腹水、生長因子等，以滿足營養(yǎng)要求較高的細菌生長需要。有的細菌還需加入特殊物質(zhì)，如結(jié)核桿菌需加入雞蛋清、馬鈴薯、甘油等才能良好生長。第4頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六3、選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某些化學物質(zhì)，而選擇性地讓欲分離的細菌旺盛生長的培養(yǎng)基，使用后可以達到選擇分離的目的。如膽鹽和薔薇色酸可以選擇性地抑制G+菌的生長，而不影響Gˉ菌的生長。在培養(yǎng)基中加入二藥后可選擇性地分離出腸道桿菌。第5頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六

利用細菌分解底物及其代謝產(chǎn)物的不同，可在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)和指示劑，即制為鑒別培養(yǎng)基，目的是使得混合在一起的多種細菌在同一種培養(yǎng)基上生長時，表現(xiàn)出不同的、肉眼可鑒別的變化，從而達到鑒別細菌的目的。

4、鑒別培養(yǎng)基第6頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六5.厭氧培養(yǎng)基厭氧菌不能在有氧環(huán)境中生長。將培養(yǎng)基與空氣隔絕，或向培養(yǎng)基中加入一些物質(zhì)，使培養(yǎng)基中的氧氣耗盡，則可用于培養(yǎng)厭氧菌。如肝片肉湯培養(yǎng)基，應(yīng)用時于液體表面加蓋液體石蠟以隔絕空氣。第7頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六區(qū)分選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基上的菌類，有2種或兩種以上時，只有適應(yīng)環(huán)境（選擇培養(yǎng)基的基底）的菌種才能存活。鑒別培養(yǎng)基上的菌類，有兩種或兩種以上時，在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學藥品，使培養(yǎng)后會發(fā)生某種變化，從而區(qū)別不同類型的微生物（但培養(yǎng)基上的各個菌種均不死亡）。第8頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六三、制備培養(yǎng)基的基本程序配料溶化測定及矯正pH過濾分裝滅菌無菌檢驗備用培養(yǎng)基的基本要求1.含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，不含任何抑菌物質(zhì)。2.具有適當?shù)膒H值和水分。3.均勻透明，易于觀察。4.經(jīng)過滅菌和無菌檢驗。第9頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六1、細菌在固體培養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象：

觀察細菌在平板上的菌落特征：菌落：細菌接種在固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過一定時間的培養(yǎng)后，表面可出現(xiàn)肉眼可見的單個細菌集團，稱為菌落。四、細菌在培養(yǎng)基上的生長情況形態(tài)、大小、邊緣、表面構(gòu)造（濕潤度和光滑度）、隆起度、透明度、顏色等，及在血平板上的溶血現(xiàn)象（β溶血、α溶血）。第10頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六2、細菌在半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象有鞭毛的細菌，沿穿剌線呈模糊羽毛狀生長。無鞭毛的細菌，沿穿剌線呈清晰的線狀生長。第11頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六3、細菌在液體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象觀察肉湯培養(yǎng)物的混濁度、管底沉淀、肉湯表面菌膜或菌環(huán)，以及有無汽泡等。⑴⑵

⑶⑷第12頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六臨床標本預(yù)處理增菌接種培養(yǎng)基，分離單個菌落各種鑒定試驗涂片染色快速診斷試驗生化試驗血清學實驗涂片染色藥敏試驗動物試驗初步診斷報告最終診斷報告第四節(jié)細菌病的一般診斷程序第13頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六一、病料的采集、保存及運送1）盡早采集一旦懷疑細菌感染，應(yīng)及時采集標本進行細菌學檢驗，盡早獲得病原學診斷和抗生素敏感資料，對細菌感染的治療具有極其重要意義；2）標本采集盡量在用藥前進行；3）根據(jù)可疑病原菌和實驗方法的不同選擇合適的采集時期；第14頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六4）注意無菌操作，盡量避免雜菌污染；5）注意采集的方法和部位；6）標本必須新鮮，及時運送；7）標本的保存、處理要嚴格。第15頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六二、細菌的形態(tài)檢查1.單染色法2.復(fù)染色法革蘭氏（G）染色法革蘭氏陽性菌（G+菌）－藍紫色革蘭氏陰性菌（G-菌）－紅色第16頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六第17頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六細菌的接種培養(yǎng)方法1.傾注平皿接種法2.平板劃線分離法3.斜面接種法4.穿刺接種法5.液體培養(yǎng)基接種法三、細菌的分離培養(yǎng)第18頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六必須用純培養(yǎng)物鑒定——選用單個菌落第19頁，共21頁，2023年，2月20日，星期六四、細菌的生化試驗1.糖分解試驗2.維-培試驗3.甲基紅試驗4.枸櫞酸鹽利用試驗5.吲哚試驗6.硫化氫試驗7.觸媒試驗8.氧化酶試驗9.脲