飼料 分析蛋白測定

飼料分析蛋白測定第1頁，共13頁，2023年，2月20日，星期日Contents1.適用范圍2.測定意義3.測定原理4.儀器設(shè)備及試劑5.測定步驟第2頁，共13頁，2023年，2月20日，星期日適用范圍飼料中含氮物質(zhì)包括真蛋白質(zhì)和氨化物（非蛋白氮），兩者總稱為粗蛋白質(zhì)。本方法適用于配合飼料、濃縮飼料和單一飼料等粗蛋白質(zhì)含量的測定。第3頁，共13頁，2023年，2月20日，星期日適用范圍蛋白氮（真蛋白質(zhì)提供氮源）非蛋白氮（氨基酸、酰胺、銨鹽）粗蛋白質(zhì)第4頁，共13頁，2023年，2月20日，星期日測定意義蛋白質(zhì)是生命的基礎(chǔ)，是細(xì)胞組成、酶、激素免疫抗體等的主要成分，是組織更新、修補(bǔ)的原料。飼料中蛋白質(zhì)的質(zhì)和量直接關(guān)系到動(dòng)物生命生長、發(fā)育、繁殖和生產(chǎn)，因此，測定飼料中粗蛋白質(zhì)含量對(duì)動(dòng)物生活和生產(chǎn)有重要作用。測定飼料原料和成品料中粗蛋白質(zhì)含量的，為科學(xué)配置飼料提供可靠依據(jù)。第5頁，共13頁，2023年，2月20日，星期日測定原理

凱氏法測定試樣中含氮量，即在催化劑作用下，用硫酸破壞有機(jī)物，使含氮物轉(zhuǎn)化成硫酸銨。加入強(qiáng)堿進(jìn)行蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，在用標(biāo)準(zhǔn)濃度的酸滴定，測出氮含量，將結(jié)果乘以換算系數(shù)6.25，計(jì)算出粗蛋白質(zhì)含量。第6頁，共13頁，2023年，2月20日，星期日儀器設(shè)備及試劑樣品粉碎機(jī)40目分析篩分析天平消化爐消化管凱氏蒸餾裝置滴定管98%濃硫酸硫酸鉀硫酸銅硼酸溶液標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液混合指示劑蔗糖第7頁，共13頁，2023年，2月20日，星期日

試樣選取——四分法樣品第8頁，共13頁，2023年，2月20日，星期日測定步驟1.試樣的消化稱取0.5~1g試樣，準(zhǔn)確至0.0001g，無損地放入消化管中，加入硫酸銅0.4g，硫酸鉀6g，與試樣混合均勻，再加濃硫酸10ml，將消化管放置在消化爐上加熱（此裝置需安裝在通風(fēng)櫥內(nèi)），待樣品焦化，泡沫消失，加大火力至410℃，直至溶液呈透明的藍(lán)綠色。將試樣消化液冷卻，無損失地轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中，冷卻后用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，則為試樣分解液。第9頁，共13頁，2023年，2月20日，星期日測定步驟2.試樣的蒸餾取2%硼酸溶液20ml至錐形瓶中作為反應(yīng)吸收液，并加混合指示劑2滴，將半微量蒸餾裝置的冷凝管末端浸入該液面下。準(zhǔn)確移取試樣分解液10ml注入蒸餾裝置的反應(yīng)腔中，用少量蒸餾水沖洗進(jìn)樣入口，塞好玻璃塞，并在入口處加水密封好。再在堿液入口緩慢加入10～20ml40%氫氧化鈉溶液，亦使之流入反應(yīng)腔中，并把堿液入口封存好。進(jìn)行蒸餾。以錐形瓶中溶液變藍(lán)綠色開始計(jì)時(shí)3min，然后將冷凝管末端離開錐形瓶液面，再蒸餾1min，用少量蒸餾水沖洗冷凝管末端，洗液亦流入吸收液中。第10頁，共13頁，2023年，2月20日，星期日測定步驟3.滴定用硼酸吸收氨后，立即用0.05mol/L的HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定，溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛壹t色為終點(diǎn)。4.空白測定稱取蔗糖0.01g，以代替試樣，按上述測定步驟進(jìn)行空白測定，消耗0.05mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積應(yīng)不得超過0.3ml。5.計(jì)算粗蛋白質(zhì)（%）=第11頁，共13頁，2023年，2月20日，星期日注意事項(xiàng)每個(gè)試樣取兩平行樣進(jìn)行測定，以其算術(shù)平均值作為結(jié)果。本方法不能區(qū)別蛋白氮和非蛋白氮。每次蒸餾結(jié)束后，應(yīng)用蒸汽將