細胞專業(yè)知識講座

緒論一、組織學與胚胎學研究內容二、組織學與胚胎學在醫(yī)學中地位三、組織學與胚胎學研究方法四、組織學與胚胎學學習方法細胞專業(yè)知識講座第1頁一、組織學與胚胎學研究內容組織學（histology）與胚胎學（embryology）是醫(yī)學課程中一門基礎學科。組織學：是借助于顯微鏡重點研究人體微細結構與功效。胚胎學：是重點研究人體結構發(fā)育分化程序和生長改變規(guī)律性。細胞專業(yè)知識講座第2頁組織學（histology）研究內容：人體組織是由細胞和細胞間質發(fā)育分化形成，而器官系統(tǒng)則又是由幾個不一樣組織發(fā)育分化而成。所以組織學研究內容包含：細胞、組織和器官系統(tǒng)三部分。細胞專業(yè)知識講座第3頁細胞（cell）定義：是人體形態(tài)結構基本單位，是一切生物體新陳代謝、生長發(fā)育、繁殖分化形態(tài)學基礎。形態(tài)各異、大小不等：人體含有許多形態(tài)各異、大小不一樣細胞，參加機體各種機能活動。相互調整、相互協(xié)同：各種細胞在機體內相互調整、相互協(xié)同，以維持整體生命活動。細胞專業(yè)知識講座第4頁組織(tissue)組成：是由一些形態(tài)相同、功效相近細胞和細胞間質所組成。分類：因為細胞特征不一樣，機體內組織也對應分為：上皮組織、結締組織、肌組織、神經組織。細胞專業(yè)知識講座第5頁器官和系統(tǒng)(organandsystem)形成：是在胚胎發(fā)育早期由幾個不一樣組織發(fā)育、分化和相互結合所形成。組織特征：成體各器官、系統(tǒng)分別含有其微細結構組織特征，執(zhí)行著特定功效。如：口腔、食道、胃、腸均由不一樣組織發(fā)育、分化和結合而成，含有不一樣形態(tài)結構特點，但卻執(zhí)行著共同功效－－消化食物、吸收營養(yǎng)、排除糟粕。細胞專業(yè)知識講座第6頁胚胎學(embryology)在醫(yī)學中稱人體胚胎學(humanembryology)研究內容：生殖細胞、受精與卵裂植入、三胚層形成與分化胎膜與胎盤人體各器官系統(tǒng)生長與分化先天性畸形。細胞專業(yè)知識講座第7頁二、組織學與胚胎學在醫(yī)學中地位組織學與胚胎學在醫(yī)學課程中是與基礎和臨床各學科都有一定聯(lián)絡。在基礎各學科中，尤其與解剖學、病理學、生理學、生物化學、免疫學都有親密聯(lián)絡。在臨床各學科中，為婦產科學、男性學、生殖工程學、兒科學等臨床學科提供了必要基礎知識，也是計劃生育與優(yōu)生學賴以發(fā)展學科之一。在近代生物學和基礎醫(yī)學快速發(fā)展，各學科內容相互滲透、相互推進、緊密相關。細胞專業(yè)知識講座第8頁三、組織學與胚胎學研究方法組織學與胚胎學研究主要包括兩方面：即顯微鏡和標本。顯微鏡包含：光學顯微鏡（lightmicroscopy，LM）：又稱光鏡。最高分辨率為0.2m，放大倍數(shù)約為1000倍；電子顯微鏡（electronmicroscopy，EM）：又稱電鏡。最高分辨率為0.2nm，放大倍數(shù)幾萬倍到幾十萬倍。比光鏡高1000倍。所以電鏡能觀察到細胞更微細結構。計量單位：光鏡與電鏡下進行觀察，慣用計量單位之間關系：1m(微米)＝10-3mm(毫米)；1nm(納米)＝10-3m(微米)。細胞專業(yè)知識講座第9頁光學顯微鏡激光共聚焦掃描顯微鏡電子顯微鏡其它技術細胞專業(yè)知識講座第10頁(一)光學顯微鏡技術應用普通光學顯微鏡觀察組織標本(切片)是最慣用方法。細胞專業(yè)知識講座第11頁光學顯微鏡細胞專業(yè)知識講座第12頁標本制作：組織學標本制作比較復雜，基本包含以下幾個步驟：取材、固定、脫水、包埋、切片、染色等。取材、固定：為使所獲材料形態(tài)結構靠近活體狀態(tài)，故取材要快速，得到材料應及時用固定液（fixative）固定（fixation）。慣用固定液為甲醛、乙醇等，它們能夠使蛋白質快速凝固，預防其分解和變性。脫水、包埋、切片：為使組織與包埋劑相融合，所獲材料需經乙醇或丙酮脫水；為便于將材料切成薄片，需將其包埋在石蠟或火棉膠內，然后再用切片機將其切成厚約5～10m薄片。細胞專業(yè)知識講座第13頁染色：切片需經染色后方可在顯微鏡下觀察。蘇木精（hematoxylin）、伊紅（eosin）染色（簡稱HE）：蘇木精：是藍色堿性染料，可將細胞核和細胞內一些物質染成藍紫色；伊紅：是紅色酸性染料，可將細胞質染成粉紅色?；靖拍睿簩A性染料親和力強稱為嗜堿性(basophilia)；對酸性染料親和力強稱為嗜酸性(acidophilia)；對兩種染料親和力都不強稱中性(neutrophilia)。細胞專業(yè)知識講座第14頁（二）共聚焦激光掃描顯微鏡共聚焦激光掃描顯微鏡（confocallaserscanningmicroscope，CLSM）是20世紀80年代初研制成功一個高光敏度、高分辨率新型生物學儀器。結構組成：激光光源共聚焦成像掃描系統(tǒng)電子光學系統(tǒng)微機圖像分析系統(tǒng)外接探測器彩色顯示器攝影裝置細胞專業(yè)知識講座第15頁（三）電子顯微鏡技術依據分辨率、放大倍數(shù)以及功效等不一樣可分為兩種：透射電子顯微鏡，又稱透射電鏡或電鏡；掃描電子顯微鏡，又稱掃描電鏡。細胞專業(yè)知識講座第16頁透射電子顯微鏡（transmissionelectronmicroscope）透射電鏡觀察組織須用戍二醛或鋨酸固定，樹脂包埋，切厚50～80nm超薄切片，經鉛鹽等重金屬鹽染色后鏡下觀察。電鏡下所見結構稱超微結構（ultrastructure）。超微結構被金屬所染部位，在熒光屏上顯得暗，圖象較黑，稱為電子密度高；反之則稱為電子密度低。被檢結構與重金屬鹽相結合稱正染色；被檢結構本身不與重金屬鹽結合，而其周圍著重金屬鹽稱負染色。普通染色都是正染色。細胞專業(yè)知識講座第17頁掃描電子顯微鏡技術（scanningelectronmicroscope）掃描電子顯微鏡技術要觀察組織不需制成切片。固定后標本，在其表面噴鍍金，在熒光屏上即可顯示細胞或組織表面立體結構，如細胞表面突起、微絨毛、纖毛等。細胞專業(yè)知識講座第18頁（四）其它技術冷凍切片技術冷凍蝕刻復型術組織化學技術免疫組織化學技術原位雜交技術體外培養(yǎng)技術其它標本制作技術細胞專業(yè)知識講座第19頁冷凍切片技術為防止細胞、組織內一些物質不被固定液所破壞，又要使組織變硬，便于將其切成薄片，同時又要快速得到切片，可將獲取新鮮組織馬上投入液氮(-196℃)內快速凍結，然后用恒冷箱切片機（cryostat）制成冷凍切片（frozensection）。冷凍切片技術（frozensectionmethod）制片快速，細胞內酶活性保留很好，慣用于酶組織化學染色。細胞專業(yè)知識講座第20頁冷凍蝕刻復型術該技術包含冷凍、斷裂、鍍鉑、分離復制面等主要步驟。冷凍蝕刻術既能夠看到細胞膜外表面，又可見細胞膜內表面，也可探測細胞膜斷面結構。冷凍蝕刻復型術(freezeetchreplica)：細胞專業(yè)知識講座第21頁組織化學技術組織化學（histochemistry）方法：是利用化學試劑與組織細胞內一些物質展現(xiàn)化學反應，在局部形成有色沉淀物，經過顯微鏡觀察而對組織細胞內化學成份進行定位、定性和定量研究。如過碘酸希夫反應，簡稱PAS(periodacidSchiffreaction)。該方法是顯示細胞內糖原或多糖一個方法，其化學反應基本過程是經過過碘酸氧化作用，使多糖釋放出醛基，醛基與無色鹼性品紅結合反應，于多糖存在部位形成紫紅色沉淀物，從而證實細胞內含有糖原或粘多糖成份。細胞專業(yè)知識講座第22頁免疫組織化學技術免疫組織化學（immunohistochemistry）是利用抗原、抗體特異性結合，檢測組織中多肽、蛋白質等物質。該方法先將蛋白質或多肽作為抗原，注入動物體內，使其產生對應抗體。從血清中提取該抗體，并用熒光染料、鐵蛋白或辣根過氧化物酶等標識。用標識抗體處理切片；標識抗體與切片上對應抗原特異性結合。切片中有標識物展現(xiàn)部位，即顯示該物質在組織中分布。細胞專業(yè)知識講座第23頁其它組織制片技術涂片（smear）：血細胞、分離細胞或脫落細胞可直接涂在玻片上；鋪片：機體內疏松結締組織可撕成薄片鋪在玻片上；磨片：牙和骨等堅硬組織可磨成薄片；以上標本再經固定染色后顯微鏡下觀察。細胞專業(yè)知識講座第24頁四、組織學與胚胎學學習方法理論和試驗親密聯(lián)絡形態(tài)與機能結合斷面和立體關系動態(tài)改變概念細胞專業(yè)知識講座第25頁理論和試驗親密聯(lián)絡組織學與胚胎學是一門以形態(tài)結構為主學科，許多結構不要死記硬背，而是在實習課中經過觀察、分析、比較，然后再記憶。這種聯(lián)絡既不會感到枯燥而又能認識深刻。所以學習時要重視實習課這個主要步驟。細胞專業(yè)知識講座第26頁形態(tài)與機能結合形態(tài)結構總是與一定機能親密相關。神經細胞有細長突起結構特點，以傳遞神經沖動；紅細胞含豐富血紅蛋白，則含有結合和攜帶氧功效；腺細胞含有豐富內質網和發(fā)達高爾基復合體，能合成份泌物。總之，結構與功效有著親密聯(lián)絡。細胞專業(yè)知識講座第27頁斷面和立體關系在顯微鏡下觀察組織切片，所觀察到形態(tài)都是結構斷面形態(tài)。一個細胞因為所切部位不一樣，在有斷面可見細胞核，在有斷面沒有細胞核。又如身體內許多管狀器官，因為所切方位不一樣，往往呈完全不一樣形態(tài)，所以在觀察切片上形態(tài)結構時，要考慮斷面和立體關系細胞專業(yè)知識講座第28頁細胞專業(yè)知識講座第29頁細胞專業(yè)知識講座第30頁細胞專業(yè)知識講座第31頁動態(tài)改變概念從受精卵到胎兒娩出，胚胎經過一系列改變，這種改變是個連續(xù)過程。在學習人體胚胎課時一定要把握住每一過程改變，包含時間、地點、相互關系，從而建立起動態(tài)概念。細胞專業(yè)知識講座第32頁細胞（復習）細胞專業(yè)知識講座第33頁細胞是人體形態(tài)結構、生理功效和生長發(fā)育基本單位。

細胞大小不一樣，形態(tài)多樣：圓形、橢圓形、長圓柱形、星形、立方形、不規(guī)則形等等，有細胞還伸出長長突起。細胞專業(yè)知識講座第34頁細胞專業(yè)知識講座第35頁細胞專業(yè)知識講座第36頁細胞專業(yè)知識講座第37頁細胞專業(yè)知識講座第38頁細胞專業(yè)知識講座第39頁即使細胞體積不一樣，形態(tài)不一樣，但它們基本結構都是一樣，除了成熟紅細胞以外，都由細胞膜、細胞質和細胞核三大部分組成。細胞專業(yè)知識講座第40頁細胞專業(yè)知識講座第41頁

細胞膜cellmembrane

7～10nm厚（光鏡分辨率0.2μm）電鏡下，細胞膜能夠分為三層：中間一層電子密度低，比較亮，內外兩層電子密度高，比較暗，把這三層膜合稱為單位膜。細胞專業(yè)知識講座第42頁細胞膜細胞專業(yè)知識講座第43頁脂質雙分子層親水極

疏水極

細胞專業(yè)知識講座第44頁液態(tài)鑲嵌模型細胞專業(yè)知識講座第45頁

生理功效：Cellmembrane含有保護功效；物質交換經過細胞膜，單純擴散、易化擴散、泵是小分子物質經過細胞膜方式；而大分子物質則經過胞吞、胞吐方式進出細胞。在物質交換過程中，起主要作用是膜上蛋白質。膜上蛋白質有是酶，有含有受體性質，有有抗原性，都有主要功效意義。

細胞專業(yè)知識講座第46頁

細胞質cytoplasm

細胞器organelles：是細胞質主要成份。有一定形態(tài)結構，執(zhí)行一定功效，是細胞質內比較固定成份。包含有：線粒體、核糖體、內質網、高爾基復合體、溶酶體、微絲、微管、中心體等。細胞專業(yè)知識講座第47頁

包含物：是細胞質內另外一類有形成份，它數(shù)量不定，隨細胞生理狀態(tài)不一樣而改變，它們有是營養(yǎng)物質，有是代謝產物，如糖原、脂滴、色素等?；|：無定形物質。細胞專業(yè)知識講座第48頁細胞專業(yè)知識講座第49頁板狀嵴線粒體Mitochondria內有很多酶系，參加細胞內氧化，功效是產生能量–“能源工廠”。功效活躍、耗能多細胞，線粒體就很豐富。HE:嗜酸性細胞專業(yè)知識講座第50頁小腸上皮細胞-線粒體鐵蘇木素染色細胞專業(yè)知識講座第51頁由大、小兩個亞單位組成?；瘜W成份是核糖核酸和蛋白質。功效是合成蛋白質。HE:嗜堿性核糖體ribosome

細胞專業(yè)知識講座第52頁多為板層囊狀，它表面附著有核糖體，所以叫RER。它功效是合成和運輸?shù)鞍踪|。HE:較強嗜堿性。粗面內質網Roughendoplasmicreticulum,RER細胞專業(yè)知識講座第53頁