醫(yī)學(xué)微生物學(xué)(第八)第三十三章其他病毒和朊粒

犬狗具有忠誠、勇敢兩大天性，為人類作出了許多有益的事，如看門、獵守、勞役、偵察、破案。沙皮犬——世界上最珍貴的犬種之一威爾斯柯基犬——英國王室的寵物法蘭德斯牧牛犬——牧牛犬、導(dǎo)盲犬、,警衛(wèi)犬、搜索犬目前一頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)藏獒-----犬王目前二頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)

患狂犬病的病狗圖——英國倫敦皇家醫(yī)學(xué)院巴斯德目前三頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)死亡之謎李尋歡，55歲，因肌肉高度緊張和唾液分泌過多而入院。他妻子說他最近出現(xiàn)發(fā)熱和寒顫，身體虛弱，拒絕進(jìn)食，因不明原因脾氣暴躁，難以自控。他是一個狂熱的戶外運(yùn)動者和洞穴探險者。病人入院后不久，便有恐水癥和癲癇發(fā)作，神志清醒和幻覺交替。4天后，病人死亡，常規(guī)血和腦脊液細(xì)菌培養(yǎng)均為陰性。大腦尸檢表明有內(nèi)基小體的存在。4目前四頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)其他病毒目前五頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)本章重點(diǎn)1狂犬病毒的致病性和防治原則2HPV的致病性目前六頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)目前七頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)★呈彈狀(75×180nm)★有囊膜，衣殼螺旋對稱?！飭喂刹环止?jié)負(fù)鏈RNArabiesVirus生物學(xué)特性目前八頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)基因組長約12kb★M1、M2蛋白：衣殼和囊膜的基質(zhì)★L(fēng)蛋白：聚合酶★G蛋白：病毒刺突與致病性有關(guān)★N蛋白：核蛋白保護(hù)RNA目前九頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)病毒復(fù)制能在很多體細(xì)胞上復(fù)制，與乙酰膽堿受體有特異親和作用吸附后靠胞吞作用進(jìn)入細(xì)胞由病毒RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄出5個mRNA在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)出芽方式釋放目前十頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)內(nèi)基小體（Negribody）

侵犯宿主中樞神經(jīng)細(xì)胞（主要是大腦海馬回錐體細(xì)胞）中增殖，于細(xì)胞漿中可形成嗜酸性包涵體。目前十一頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)宿主范圍廣所有的溫血動物蝙蝠無癥狀感染狗、貓、鼠、家兔豚鼠、馬、牛、羊致命目前十二頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)病犬(80%-90%)，少數(shù)來自野生動物。儲存宿主和傳播媒介的動物多達(dá)30余種?？袢∈侨诵蠊不嫉募毙詡魅静?，病毒主要在野生動物

(狼、狐貍、臭鼬、蝙蝠和浣熊等)及家畜

(犬和貓)中傳播。多數(shù)動物發(fā)病后死亡，少數(shù)病后成為病毒攜帶者,蝙蝠、鼠類、犬等感染后為無癥狀攜帶者，為重要傳染源。外觀健康家犬平均帶毒率14.9%(8-25%)傳染源13目前十三頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)提醒大家引起重視狂犬病并非必須有野狗咬傷史;狂犬病中88%是由豢養(yǎng)寵物引起,最多的是寵物狗,2%是由貓引起;生食狗肉,增加了患病機(jī)會;沾有狗體液的手去觸摸眼睛和嘴唇可感染病毒。目前十四頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)傳播途徑:

病毒主要通過咬傷傳播，其次為經(jīng)抓傷、舔傷的粘膜和皮膚侵入。少數(shù)通過對病犬宰殺等感染。人被蝙蝠咬傷或吸入蝙蝠洞內(nèi)的空氣而患狂犬病。易感性:

自然界所有溫血動物均敏感而易患。人被病犬咬傷后的發(fā)病率為15-30%，被病狼咬傷后為50-60%

。若及時傷口處理和接種疫苗，發(fā)病率可降至0.15%。2023/4/2815目前十五頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)●可于雞胚中培養(yǎng)●人二倍體細(xì)胞、地鼠腎細(xì)胞、鴨胚細(xì)胞中培養(yǎng)增殖疫苗目前十六頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)抵抗力對熱、紫外線、日光、干燥的抵抗力弱●加溫50℃1小時、60℃5分鐘即滅活?！褚妆粡?qiáng)酸、強(qiáng)堿、甲醛、碘、乙酸、乙醚、肥皂水及離子型和非離子型去污劑滅活?！?℃可保存1周，如置50%甘油中于室溫下可保持活性1周。目前十七頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)

狂犬病病毒↓咬傷處，1－3月進(jìn)入機(jī)體，肌纖維細(xì)胞增殖沿神經(jīng)軸索上行至中樞神經(jīng)系統(tǒng)↓進(jìn)入中樞神經(jīng)細(xì)胞增殖引起損傷↓離心性，沿傳出神經(jīng)唾液腺，淚腺，角膜，鼻粘膜，皮脂腺，心肌，骨骼肌，肺，肝，腎等不引起病毒血癥病死率最高傳染病近乎100%目前十八頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)Rabies：胡說、亂罵，患者常表現(xiàn)為：①發(fā)熱、頭痛、乏力；②異常興奮、狂躁，恐風(fēng)恐水；③不認(rèn)親人，咬人、學(xué)狗的姿態(tài)；④局部感覺異常；⑤步態(tài)蹣跚如醉漢；⑥咽喉肌、呼吸肌痙攣，繼之流涎、會厭麻痹，呼吸衰竭、停止，在極度痛苦中死去。目前十九頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)目前二十頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)被狂犬咬傷的部位和程度被咬傷者的健康狀態(tài)、抵抗力的強(qiáng)弱救治措施是否及時合理人被狂犬咬傷以后是否發(fā)病該狂犬所帶狂犬病病毒的毒力大小進(jìn)入人體內(nèi)病毒的多少目前二十一頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)微生物學(xué)診斷檢查咬人動物●觀察7～10天，是否發(fā)病?！駳⑺?，取腦?！镒鞑±砬衅瑱z查包涵體?！餆晒鈽?biāo)記抗狂犬病毒血清染色，檢查抗原?！镉猛凰貥?biāo)記的合成寡核苷酸探針檢測狂犬病毒RNA。目前二十二頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)檢查患者●熒光抗體染色檢查細(xì)胞內(nèi)病毒抗原。唾液沉渣涂片，瞼、頰皮膚活檢?！馬T-PCR目前二十三頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)防治原則●捕殺野犬，管理家犬，注射犬用疫苗?！耧曫B(yǎng)員應(yīng)進(jìn)行預(yù)防接種。地鼠腎原代細(xì)胞或二倍體細(xì)胞培養(yǎng)制備滅活病毒疫苗目前二十四頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)目前二十五頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)人被瘋狗咬傷后，應(yīng)立即:(1)傷口處理：20％肥皂水，0.1％新潔爾滅，70％酒精。(2)注射狂犬病毒免疫血清，必要時在傷口周圍作浸潤注射，使殘余病毒滅活。(3)注射狂犬疫苗，在病毒未侵入中樞神經(jīng)系統(tǒng)之前獲得免疫。目前采用的五針免疫程序是0、3、7、14、30天各注射一針。全程免疫后7－10天出現(xiàn)中和抗體，并保持免疫力1年左右。24h內(nèi)接種最好，最晚不要超過72h目前二十六頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)治療●單室嚴(yán)密隔離患者●避免一切刺激目前二十七頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)第二節(jié)人乳頭瘤病毒屬于乳多空病毒科（Papovaviridae）乳頭瘤病毒屬（papillomavirus）

主要引起人類皮膚粘膜的增生性病變高危性HPV（16型、18型等）與子宮頸癌等惡性腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)低危性HPV（6型、11型等）引起生殖器尖銳濕疣

目前二十八頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)HPV型別與疾病的關(guān)系目前二十九頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)形態(tài)結(jié)構(gòu)呈球形，20面體立體對稱，無包膜。病毒基因組環(huán)狀dsDNA，

早期區(qū)(E區(qū))晚期區(qū)(L區(qū))非編碼的上游調(diào)節(jié)區(qū)(URR)。生物學(xué)性狀目前三十頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)早期區(qū)E1、E2基因與病毒復(fù)制、轉(zhuǎn)錄調(diào)控有關(guān)；

E5、E6、E7基因與細(xì)胞轉(zhuǎn)化有關(guān)。晚期區(qū)基因編碼病毒結(jié)構(gòu)蛋白(L1和L2)。目前三十一頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)應(yīng)用基因克隆和分子雜交方法來確定HPV的型別。至目前為止已發(fā)現(xiàn)HPV有100多個型別。分型目前三十二頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)組織親嗜性：HPV具有宿主和組織特異性，對人的皮膚和黏膜上皮細(xì)胞有高度的親嗜性。

HPV的復(fù)制依賴于細(xì)胞的分化階段。

HPV復(fù)制誘導(dǎo)上皮細(xì)胞增殖形成乳頭狀瘤，稱為疣。目前三十三頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)致病性與免疫性傳播途徑：

HPV主要通過直接接觸傳播、間接接觸傳播。生殖器感染主要由性接觸傳播；新生兒通過產(chǎn)道時可被病毒感染。病毒感染僅限于局部皮膚和黏膜中，形成各種疣，不產(chǎn)生病毒血癥。目前三十四頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)不同型別的所侵犯的部位和所致的疾病也不盡相同目前三十五頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)尖銳濕疣侵犯女性外陰、陰道和宮頸男性陰莖、肛周及肛門，

是常見的性傳播疾病(STD)

病損部位形成突出于黏膜表面、粗糙的疣，有蒂柄連接，多個疣?？删奂扇喊l(fā)生融合。

尖銳濕疣可以發(fā)生癌變目前三十六頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)尖銳濕疣目前三十七頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)HPV與宮頸癌HPVl6、18、31和33等型別感染與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)。90%宮頸癌可檢出HPVDNA。HPV與宿主細(xì)胞基因整合是腫瘤發(fā)生的前提。致癌機(jī)制主要與HPV早期基因及表達(dá)產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化作用有關(guān)。E5、E6、E7與抑癌基因P53和Rb的產(chǎn)物結(jié)合，干擾其正常功能，使細(xì)胞向惡性轉(zhuǎn)化。目前三十八頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)微生物學(xué)檢查法臨床上典型的乳頭瘤或疣容易診斷。組織學(xué)檢查電鏡檢查免疫學(xué)檢查：CD-14免疫染色法核酸檢測:DNA雜交法目前三十九頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)防治原則目前無有效的預(yù)防性疫苗，HPV基因工程疫苗正在研制中。局部治療方法：局部涂藥，如5%5-氟尿嘧啶(5-FU)；

用激光、冷凍、電灼或手術(shù)等方法除去疣體；局部注射干擾素。這些方法可將局部病灶去除，但不能根除周圍正常組織中的病毒，因此常有復(fù)發(fā)。目前四十頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)細(xì)小DNA病毒Parvoviridae最小且最簡單的DNA病毒，可分成兩類，一類可自己進(jìn)行復(fù)制，另一類則要依賴其他種類的病毒才能進(jìn)行復(fù)制。人細(xì)小病毒B19：引起傳染性紅斑、慢性溶血性貧血患者發(fā)生再障危象、免疫抑制患者慢性貧血、孕期流產(chǎn)、死胎目前四十一頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)細(xì)小DNA病毒Parvoviridae人類博卡病毒

HBoV：引起嬰幼兒急性下呼吸道感染。腺病毒伴隨相關(guān)病毒AAV：屬于缺陷病毒，可用于基因治療。目前四十二頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)痘病毒

痘病毒科體積最大和結(jié)構(gòu)最復(fù)雜的DNA病毒只感染人的是天花病毒和傳染性軟疣病毒

目前四十三頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)所致疾病天花人群普遍易感，唯一傳染源是患者通過呼吸道和直接接觸傳播引起高熱、面部及全身皮膚出現(xiàn)水皰或膿皰等癥狀WHO1980年5月正式宣布天花已在全世界滅絕由于計劃免疫的終止而形成的人群無免疫狀態(tài)，導(dǎo)致天花病毒成為潛在的生物武器而受到重視人類猴痘高熱、局部淋巴結(jié)腫大和全身發(fā)生水皰和膿皰，并伴有出血傾向目前四十四頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)牛痘是牛痘病毒引起的擠奶工人等密切接觸者的輕度皮膚水皰樣改變，一般無嚴(yán)重的全身感染痘苗病毒（vacciniavirus）是一種牛痘病毒的毒力變異株，與天花病毒具有交叉免疫原性，主要用于天花的計劃免疫預(yù)防接種后通常僅于接種部位引起輕微的皮膚反應(yīng)，但是在免疫缺陷的易感人群中可能引起嚴(yán)重的進(jìn)行性牛痘（progressivevaccinia）、疫苗接種后腦炎（post-vaccinalencephalitis）和擴(kuò)散性種痘疹（generalizedvacciniarash）等疾患

目前四十五頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)傳染性軟疣由傳染性軟疣病毒引起的皮膚白色的疣狀物主要通過皮膚接觸傳播，人是其唯一的感染宿主，兒童多見該病毒也可以經(jīng)過性接觸傳播，引起生殖器傳染性軟疣軟疣可自行消退，不留疤痕免疫接種痘苗病毒可以預(yù)防天花、人類猴痘的發(fā)生

目前四十六頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)

博爾納病病毒BDV是副粘病毒科（Paramyxoviridae）博爾納病病毒屬（Bornavirus）的原型病毒病毒顆粒呈球型，有包膜核酸為8,900bp的非分節(jié)段、線性、單負(fù)鏈RNA

轉(zhuǎn)錄和復(fù)制在細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行目前四十七頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)BDV具有非致細(xì)胞病變作用和高度的嗜神經(jīng)性主要通過密切接觸引起感染感染宿主范圍廣，可以引起幾乎所有溫血動物的持續(xù)性感染密切接觸傳播具有嗜神經(jīng)性，主要侵犯大腦邊緣系統(tǒng)、海馬等部位，形成持續(xù)性感染與人類的某些精神疾病相關(guān)目前四十八頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)簡述狂犬病的預(yù)防對策？什么是內(nèi)基小體？尖銳濕疣和宮頸癌與哪種病毒感染有關(guān)？復(fù)習(xí)思考題目前四十九頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)庫魯?。↘urudisease）目前五十頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)普魯西納（S.B.Prusiner）1982年美國學(xué)者普魯西納首次證實(shí)羊瘙癢病致病因子的本質(zhì)是一種不含核酸的傳染性蛋白顆粒（proteinaceousinfectiousparticle），命名為prion。榮獲1997年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。蓋達(dá)塞（）50年代末，美國學(xué)者蓋達(dá)塞克證明庫魯病是人類第一個由“慢病毒”感染所致的傳染性疾病，榮獲1976年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。

目前五十一頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)感染了瘙癢病的實(shí)驗(yàn)動物腦組織勻漿提取蛋白質(zhì)反轉(zhuǎn)重復(fù)聚焦凝膠電泳技術(shù)檢測，未發(fā)現(xiàn)核酸，蛋白質(zhì)仍具有強(qiáng)感染性紫外光照射DNA酶蛋白酶

RNA酶處理蛋白變性劑處理

仍有較強(qiáng)感染力失去感染力

目前五十二頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)本章重點(diǎn)1

朊粒的概念2

常見的朊粒有關(guān)疾病目前五十三頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)一、生物學(xué)性狀*

prion在電鏡下呈纖維狀或桿狀，稱羊瘙癢病相關(guān)纖維（SAF）。*在某些TSEs的腦組織中prion可聚集形成光鏡下可見的淀粉樣蛋白斑塊。SAF目前五十四頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)一、生物學(xué)性狀*

prion的本質(zhì)：異常折疊的朊蛋白*朊蛋白（prionprotein,PrP）：由宿主細(xì)胞PrP基因編碼產(chǎn)生

人類PrP基因(PRNP)位于第20號染色體小鼠PrP基因(Prnp)位于第2號染色體

目前五十五頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)當(dāng)大多數(shù)蛋白主鏈伸展形成β-折疊片時，PrPc就轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPsc。也就是說，細(xì)胞PrPc是PrP的展開形態(tài)，而它的重新折疊就變成PrPsc。目前五十六頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)PrPC與PrPSc的主要區(qū)別有致病性與傳染性無致病性感染動物正常及感染動物存在抗性不可溶敏感可溶對蛋白酶K的抗性在非變性去污劑中β-折疊占50％，ɑ-螺旋占20％ɑ-螺旋占40％，β-折疊僅占3％分子構(gòu)型

PrPC

PrPSC目前五十七頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)病毒：蛋白質(zhì)外殼+核心（核酸）保護(hù)核酸，遺傳上起重要作用

蛋白質(zhì)本身并無遺傳性Prion/PrP/朊粒/朊蛋白:是正常宿主基因編碼的結(jié)構(gòu)異常的蛋白質(zhì)傳染因子,具有傳染性，抵抗力強(qiáng)，潛伏期較長。引起致死性退化性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾?。瓊魅拘院＞d狀腦病/TSE（tansmissiblespongiformencephalopathy）目前五十八頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)朊粒的理化特性和生物學(xué)特性

至今未發(fā)現(xiàn)朊粒含有核酸。感染后潛伏期長，宿主無免疫應(yīng)答，無炎癥反應(yīng)，疾病不會康復(fù)，最終死亡。目前五十九頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)朊粒的超級抵抗力1320C高壓消毒5h，1mol/LNaOH浸泡污染物1h，含有效氯0.0165次氯酸鈉處理2h等方法可使PrP喪失感染性。目前六十頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)目前六十一頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)瘋牛病，與病牛接觸或進(jìn)食病牛肉是

人v-CJD最主要的發(fā)病原因。目前六十二頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)病原體所在

自然發(fā)生的感染，病原體主要存在于病牛的腦組織、脊髓和眼睛的視網(wǎng)膜里。通過實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，在病牛的小腸、骨髓和脊背神經(jīng)節(jié)內(nèi)也存在瘋牛病因子。目前六十三頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)瘋牛病瘋牛病是對牛海綿狀腦?。˙SE）的俗稱1985年4月英國首先發(fā)現(xiàn)該病，于1986年11月定名為BSE。

目前六十四頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)克-雅?。–reuzfeldt-JacobDisease,CJD）

20世紀(jì)20年代由Creutzfeldt和Jakob兩位神經(jīng)病理學(xué)家分別于1920年和1921年首次報道，后來發(fā)現(xiàn)該病可經(jīng)外科手術(shù)傳染，因此也叫做傳染性病毒性癡呆病,發(fā)病率約在百萬分之一。有散發(fā)性、家族性和醫(yī)源性。目前六十五頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)克-雅病變種（variantCJD,v-CJD）

本病是近年來在以英國為主的歐洲國家出現(xiàn)的一種新型人類傳染性海綿狀腦病。1996年，英國CJD監(jiān)測中心首次報道，目前，法國、德國、愛爾蘭、俄羅斯等歐洲國家也先后發(fā)現(xiàn)了該病病例。本病與典型的CJD在好發(fā)年齡、臨床特征、腦電圖改變和病理變化等方面有顯著差異。目前六十六頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)v-CJD病人大腦組織切片：示海綿狀病變（左）和淀粉樣蛋白沉淀（右）目前六十七頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)進(jìn)一步的研究結(jié)果顯示，從這些病例中提取的PrPsc與來源于BSE的PrPsc性質(zhì)相同，患者腦組織的病理變化也與BSE相似，這表明v-CJD與瘋牛病之間有著密切的聯(lián)系。目前普遍認(rèn)為v-CJD的來源可能是人食物鏈中含有的瘋牛病致病因子，但確切的致病機(jī)制尚不清楚。BSE和v-CJD的出現(xiàn)已受到國際社會的廣泛關(guān)注。目前六十八頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)動物TSE綿羊或山羊瘙癢?。⊿crapieofsheeporgoats）大耳鹿慢性消耗?。–hronicwastingdiseaseofmuledeer,CWD）牛海綿狀腦病（Bovinespongiformencephalopathy,BSE）貓海綿狀腦?。╢elinespongiformencephalopathy,FSE）傳染性雪貂白質(zhì)腦?。═ransmissibleminkencephalopathy,TME）目前六十九頁\總數(shù)七十五頁\編于十七點(diǎn)人類TSE人類顫抖病或庫魯?。↘urudisease）克-雅?。–reuzfel