T-SPOT介紹多媒體課件

T-SPOT?.TB

——結(jié)核感染T細胞檢測

（免疫斑點法）列入歐美等20多個國家結(jié)核診療指南內(nèi)容結(jié)核病基礎(chǔ)概念T-SPOT.TB產(chǎn)品知識T-SPOT.TB臨床應(yīng)用病例分享T-SPOT介紹內(nèi)容結(jié)核病基礎(chǔ)概念T-SPOT.TB產(chǎn)品知識T-SPOT.TB臨床應(yīng)用病例分享T-SPOT介紹2000-2008年我國肺結(jié)核報告發(fā)病情況結(jié)核分枝桿菌（MTB）是結(jié)核病的致病菌，通過呼吸道傳播，可以侵入人體全身各種器官，主要感染肺部全世界約三分之一的人群感染了結(jié)核分枝桿菌，《2012年全球結(jié)核病報告》顯示，在2011年有870萬新發(fā)病例，140萬人死于結(jié)核病T-SPOT介紹活動性結(jié)核與潛伏性結(jié)核新發(fā)TB病例來自潛伏性結(jié)核感染人群潛伏性結(jié)核感染（hiddenepidemic）人群數(shù)量巨大——“定時炸彈”若想控制活動性TB，必須先控制潛伏性結(jié)核感染鑒別高危人群預(yù)防性治療免疫接種活動性TB

–全球每年900萬新發(fā)病例僅為冰山一角LatentTB-“hiddenepidemic”-2billionpeopleinfectedT-SPOT介紹活動性結(jié)核與潛伏性結(jié)核接觸活動性結(jié)核病患者暴露程度不足，結(jié)核桿菌被機體免疫力清除沒有癥狀,結(jié)核桿菌仍舊存在而不能被偵測

X-光/CT掃描顯示正常沒有抗體應(yīng)答診斷困難傳統(tǒng)的結(jié)核感染檢測只有PPD機體被感染受免疫抑制沒有臨床癥狀終身處于感染狀態(tài)潛伏性結(jié)核有臨床癥狀具有傳染性結(jié)核桿菌可以通過涂片、培養(yǎng)檢測出胸部的X-光或CT掃描顯示異常

肺外結(jié)核難以診斷(特別是兒童)活動性結(jié)核-結(jié)核病5%5%再次激活？T-SPOT介紹LTBI活動的危險因素ErkensJERJ2010T-SPOT介紹結(jié)核病常規(guī)診斷技術(shù)耗時長涂陰PTB檢出低肺外結(jié)核難結(jié)核診斷X射線分子診斷接觸史涂片鏡檢細菌培養(yǎng)特異性差主觀肺外結(jié)核難操作復(fù)雜技術(shù)要求高涂陰PTB檢出低肺外結(jié)核難不能區(qū)分NTMPTB近半陰性肺外結(jié)核難試劑靈敏度低；不能區(qū)分既往感染和發(fā)病病人抗體檢測WHO關(guān)于血清學(xué)檢測聲明2011年7月20日，世界衛(wèi)生組織（WHO）發(fā)出正式聲明，要求禁止將血清學(xué)檢測方法（抗原，抗體，蛋白芯片等）用于肺結(jié)核和肺外結(jié)核的診斷。WHOwarnsagainsttheuseofinaccuratecommercialserologicaltestsforpulmonaryandextra-pulmonaryTB小結(jié)活動性結(jié)核病與潛伏性結(jié)核感染的區(qū)別LTBI危險因素結(jié)核中有20%左右的肺外結(jié)核，診斷困難傳統(tǒng)結(jié)核診斷方法不能滿足臨床需要內(nèi)容結(jié)核病基礎(chǔ)概念T-SPOT.TB產(chǎn)品知識T-SPOT.TB臨床應(yīng)用病例分享T-SPOT?.TB原理T-SPOT?.TB原理：結(jié)核感染者體內(nèi)存在特異的效應(yīng)T淋巴細胞，效應(yīng)T淋巴細胞再次受到結(jié)核抗原（ESAT-6，CFP10）刺激時會分泌多種細胞因子（IFN-γ）。因此，檢測效應(yīng)T淋巴細胞可用于結(jié)核病或結(jié)核潛伏感染者的診斷列入美國、英國等歐美20多個國家結(jié)核診療指南美國CDC推薦：BCG接種人群結(jié)核感染檢測首選國內(nèi)風(fēng)濕科/消化科指南T-SPOT?.TB原理由于效應(yīng)T細胞存活時間很短（6周左右），而且具有特異性，因此可以作為機體是否正處于被感染的指標(biāo)，無論是否有臨床癥狀結(jié)核桿菌特異抗原T-SPOT?.TB—準(zhǔn)確、可信、快速特異性好只針對結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群敏感，與絕大多數(shù)環(huán)境分枝桿菌和卡介苗（BCG）無交叉反應(yīng)

美國FDA數(shù)據(jù)：特異性97.1%(297/306)國內(nèi)臨床數(shù)據(jù)：特異性94.1%(478/508)靈敏度高基本不受免疫力低下/受抑制影響，在肺外結(jié)核患者中有很高的檢出率美國FDA數(shù)據(jù)：靈敏度95.6%(175/183)國內(nèi)臨床數(shù)據(jù)：靈敏度95.3%(624/655)快速簡便簡單的血液檢測，隔天報告結(jié)果陰性預(yù)測值：93.9%（478/509）陽性預(yù)測值：95.4%（624/654）16ReferenceSensitivityKobashietal.JInfect.2009;58(3):197-20490.0%(36/40)Domínguezetal.DiagnMicrobiolInfectDis.

2009;63(1):43-5184.2%(32/38)Bosshardetal.RespirMed.2009;103(1):30-4.98.4%(62/63)HiguchiMedMicrobiolImmunol.2009;198(1):33-795.9%(47/49)Kimetal.AmJMed2009;122(2):189-9594.6%(53/56)Nicoletal.Pediatrics.2009;123:38-4350.0%(5/10)Markovaetal.Biotechnol.&Biotechnol.2009;23(1):1103-110861.5%(8/13)SoysaletalIJTLD200812(1):50-56*80.8%(80/99)DominguezetalClinVaccImmunol200815(1);168-71*85.7%(36/42)CheeetalJClinMicrobiol.2008;46(6):1935-4094.1%(254/270)ConnelletalPLoSONE2008.3;7:e2624*100.0%(9/9)Kobashietal.ScandJInfectDis2008.40;8:629-34*87.5%(42/48)Golettietal.PLoSONE.2008.3;10:e3417.*89.9%(62/69)KangetalChest.2007Sep;132(3):959-65*92.2%(59/64)JanssensetalERJ200730(4):722-898.3%(57/58)ClarkeetalClinExpImmunol2007150(2):238-44.90.0%(27/30)DetjenetalCID20071;45(3):322-8*92.9%(26/28)OzekincietalJIntMedRes2007;35:696-70392.9%(26/28)VincentietalClinExpImmunol.2007Oct;150(1):91-8*84.6%(11/13)WangetalEmergingInfectDis200713;4:553-887.2%(34/39)LosietalEurRespirJ.2007Dec;30(6):1173-9100.0%(10/10)KimetalArchInternMed167;20:2255-2259100.0%(22/22)Jafarietal2006AJRCCM174;9:1048-53100.0%(12/12)FerraraetalLancet2006376;1328-34*83.3%(20/24)LeeetalEurRespirJ200628;24-30*96.6%(84/87)GolettietalClinMicrobiolInfect200612;6:544-50*91.3%(21/23)MeieretalEJCMID200524;529-53695.9%(70/73)TOTAL91.5%(1205/1317)國外文獻匯總——靈敏度國外文獻匯總——特異性實驗效果圖陰性結(jié)果陽性結(jié)果空白對照抗原AESAT-6抗原BCFP10陽性對照（PHA）報告單根據(jù)抗原A或/和抗原B孔的反應(yīng)判斷結(jié)果:檢測結(jié)果為“有反應(yīng)性”，參照以下標(biāo)準(zhǔn)：空白對照孔斑點數(shù)為0-5個時且（抗原A或抗原B孔的斑點數(shù)）-（空白對照孔斑點數(shù)）≥6空白對照孔斑點數(shù)大于6個時且（抗原A或抗原B孔的斑點數(shù)）≥2×（空白對照孔斑點數(shù)）如果上述標(biāo)準(zhǔn)不符合且陽性質(zhì)控對照孔正常時檢測結(jié)果為“無反應(yīng)性”實驗結(jié)果判斷斑點數(shù)的意義—活動性or潛伏性多少個斑點是活動性結(jié)核？結(jié)果陽性說明患者結(jié)核感染，是潛伏性還是活動性需要結(jié)合臨床癥狀。因個體差異，沒有具體的斑點數(shù)字可以依據(jù)。但斑點數(shù)越多越傾向于活動性結(jié)核CheeetalEurJClinMicrobiolInfectDis(2008)（IF=3.02）活動性與潛伏性結(jié)核感染患者中，T-SPOT.TB斑點數(shù)比較JanssensetalERJ(2007)（IF=6.35）活動性與潛伏性患者中T-SPOT.TB斑點數(shù)的比較(TST+和TST-)斑點數(shù)的意義—現(xiàn)癥感染之前得過結(jié)核治愈了，T-SPOT結(jié)果如何？T-SPOT檢測的是現(xiàn)癥感染。如果徹底治愈，體內(nèi)無結(jié)核分枝桿菌，則結(jié)果陰性；如果結(jié)果是陽性，則說明患者體內(nèi)還存在結(jié)核分枝桿菌，還在結(jié)核感染中陳舊性結(jié)核體內(nèi)會存在記憶T細胞，但記憶T細胞在全血中的數(shù)量非常少，而且抗原再次激活孵育時間遠遠超過24h，不會因為記憶細胞的存在而產(chǎn)生斑點文獻顯示，大概只有38%左右的活動性結(jié)核患者經(jīng)過治療，T-SPOT結(jié)果會轉(zhuǎn)陰Cheeetal.,AJRCCM(2006)（IF=11.04）——RibeiroS,DooleyK,etal.BMCInfectDis,2009（IF=3.02）方法：在肺結(jié)核治療中，用T-SPOT.TB方法評估治療效果。在治療開始前，治療16周和24周后，分別計數(shù)ESAT-6和CFP-10刺激產(chǎn)生的斑點數(shù)圖1.所有研究對象ESAT-6,CFP-10和總RD1在治療前，16周后和24周后的平均斑點數(shù)（n=58）在24周完整療程后，ESAT-6,CFP-10和總RD1產(chǎn)生的平均SFCs分別從42.7,41.2和83.8降到23.3,23.2和46.5，有顯著性差異結(jié)論：T-SPOT.TB試驗中檢測的由RD1特異T細胞產(chǎn)生的γ-干擾素與肺結(jié)核患者在治療中的結(jié)核桿菌量直接相關(guān)斑點數(shù)的意義—治療前后變化注意事項采血量：6-10ml采血管：肝素抗凝樣本保存：當(dāng)天送樣，常溫運輸注意：PET-CT與輸血方法學(xué)優(yōu)點特異性95%左右，不受卡介苗（BCG）接種與環(huán)境分枝桿菌影響靈敏度95%左右，幾乎不受個體免疫功能低下影響快速，24小時報告結(jié)果國內(nèi)外指南推薦，多篇文獻數(shù)據(jù)支持斑點數(shù)意義：斑點越多越傾向活動性結(jié)核、現(xiàn)癥感染、能反應(yīng)療效送樣的注意事項方法學(xué)缺點不能夠提示臨床患者的病變部位，需要結(jié)合臨床的判斷目前還不能夠根據(jù)斑點數(shù)量的多少來判斷患者是活動性結(jié)核病或是潛伏感染者內(nèi)容結(jié)核病基礎(chǔ)概念T-SPOT.TB產(chǎn)品知識T-SPOT.TB臨床應(yīng)用病例分享肺外結(jié)核結(jié)核分枝桿菌能侵染全身大部分器官，其中有20%發(fā)生在肺外臨床應(yīng)用科室應(yīng)用呼吸科/結(jié)核科呼吸系統(tǒng)疾病和結(jié)核的鑒別診斷；胸水/心包積液鑒別診斷；2周以上的不明原因發(fā)熱病人的結(jié)核感染排篩；菌陰肺結(jié)核的輔助診斷；特殊人群（矽肺等）的結(jié)核排篩傳染/感染科2周以上的不明原因發(fā)熱病人的肺結(jié)核排篩血液科血液病治療前后的結(jié)核篩查內(nèi)分泌科糖尿病患者結(jié)核的排篩神經(jīng)內(nèi)科結(jié)核性腦膜炎的輔助診斷臨床應(yīng)用科室應(yīng)用風(fēng)濕免疫科生物制劑/免疫抑制劑治療前后的篩查；劑量激素治療前后的結(jié)核篩查；自身免疫性疾病與結(jié)核病的鑒別診斷；發(fā)熱待查患者的結(jié)核排篩兒科兒童肺結(jié)核的輔助診斷；兒童肺外結(jié)核的輔助診斷消化科腹水（結(jié)核性腹膜炎）待查；CD（克羅恩病）與腸結(jié)核的鑒別診斷；生物制劑治療患者的結(jié)核篩查；發(fā)熱待查國內(nèi)外文獻舉例T-SPOT.TB的靈敏度為94.7%(71/75)，肺疾病組和肺外疾病組中分別為95.6%和93.3%，特異性為84.1%(90/107)，肺疾病組和肺外疾病組中分別為69.2%和88.9%。馮云,張文宏等.PLOSONE,2012（IF=3.73）北京協(xié)和醫(yī)院感染內(nèi)科2004年至2010年收治的997例不明原因發(fā)熱患者的病因分析顯示，感染性疾病一直是最主要的病因，占479例(48.0%)，其中結(jié)核病占45.3%(217/479)侍效春,劉曉清等.ChinMedJ,2013（IF=0.901）國內(nèi)外文獻舉例在84例CD或ITB患者中，T-SPOT是診斷ITB一個很好的指標(biāo)，其靈敏度、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值分別是84.2%、75.4%、50.0%和94.2%。李玥,錢家鳴等.JCrohnsColitis,2012（IF=2.566）在60例CD以及34例ITB患者中，T-SPOT.TB和PCR方法的鑒別診斷效能：雷媛,夏冰.JournalofDigestiveDiseases,2013（IF=1.853）敏感性%特異性%PPV%NPV%T-SPOT88.293.388.293.3PCR52.990.075.077.1國內(nèi)外文獻舉例293例懷疑結(jié)核病的非洲兒童，T-SPOT在年齡小于3歲、HIV感染和營養(yǎng)不良的兒童中靈敏度分別是85%、73%和78%。如果結(jié)合TST的結(jié)果，T-SPOT的靈敏度達到91%LiebeschuetzS,etal.Lancet,2004（IF=39.06）在77名結(jié)核病和51名健康兒童中，T-SPOT靈敏度為89.2%，特異性為94.1%，明顯高于TST（靈敏度77.0%，特異性70.6%），卡介苗是否接種對結(jié)果沒有顯著影響。孫琳,申阿東等.ChinMedJ,2010（IF=0.901）消化科--國內(nèi)外指南IBD診斷：在結(jié)核高流行區(qū)域要排除腸結(jié)核，方法包括PPD和γ-干擾素測定（T-SPOT.TB試驗）CD排除腸