2012高考生物一輪復(fù)習(xí)-專題1-基因工程課件-新人教版選修3

2012高考生物(shēngwù)一輪復(fù)習(xí)-專題1-基因工程課件-新人教版選修3第一頁，共52頁。第二頁，共52頁。知識(zhīshi)研讀(對應(yīng)(duìyìng)學(xué)生用書P154)專題(zhuāntí)１基因工程(一)第三頁，共52頁。1．基因工程的誕生。2．基因工程的原理及技術(shù)(jìshù)。3．DNA的粗提取與鑒定。課程標(biāo)準第四頁，共52頁。(即時穩(wěn)固解析為教師用書獨有)考點一基因工程的根本工具一、與DNA分子(fēnzǐ)相關(guān)的酶種類項目限制酶DNA連接酶DNA聚合酶解旋酶作用底物DNA分子DNA分子片段脫氧核苷酸DNA分子作用部位磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵堿基對間的氫鍵作用結(jié)果形成黏性末端或平末端形成重組DNA分子形成新的DNA分子形成單鏈DNA分子考點整合第五頁，共52頁。二、載體1．作用(zuòyòng)(1)作為運載工具，將目的基因轉(zhuǎn)移到宿主細胞內(nèi)。(2)利用它在宿主細胞內(nèi)對目的基因進行大量復(fù)制。2．具備的條件(1)能在宿主細胞內(nèi)穩(wěn)定保存并大量復(fù)制。(2)有多個限制酶切割位點，以便與外源基因連接。(3)具有某些遺傳標(biāo)記基因，以便進行篩選。3．種類第六頁，共52頁。(1)質(zhì)粒：一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于細菌擬核DNA之外，能夠自我復(fù)制的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子。(2)λ噬菌體的衍生物。(3)動植物病毒?！練w納總結(jié)】①一般來說，天然載體往往不能滿足(mǎnzú)人類的所有要求，因此人們根據(jù)不同的目的和需要，對某些天然的載體進行人工改造。②限制酶切割位點所處的位置必須是在所需的標(biāo)記基因之外，這樣才能保證標(biāo)記基因的完整性，有利于對目的基因的檢測。【案例1】(2019·福建理綜)轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程第七頁，共52頁。如下(rúxià)圖。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點。請答復(fù)：(1)構(gòu)建含抗病基因的表達載體A時，應(yīng)選用限制酶_____，對____________進行切割。(2)培養(yǎng)基中的卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細胞，應(yīng)使基因表達載體A中含有____________，作為標(biāo)記基因。第八頁，共52頁。(3)香蕉組織細胞具有________，因此，可以利用(lìyòng)組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細胞培育成植株。圖中①②依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細胞的_________________。【解析】此題主要考查基因工程的相關(guān)知識。(1)由于限制酶SmaⅠ的切割位點在抗病基因中間，因此不能用限制酶SmaⅠ來進行切割目的基因。要將目的基因從含抗病基因的DNA分子中切割下來，從圖中看需要用限制酶PstⅠ和EcoRⅠ同時進行切割。而運載體要和目的基因含有相同的黏性末端才能進行連接，所以質(zhì)粒也要用限制酶PstⅠ和EcoRⅠ同時進行切割。(2)由于卡那霉素能抑制香蕉愈傷組織細胞的生長，所以構(gòu)建的基因表達載體A中應(yīng)含抗卡那霉素基因，作為標(biāo)記基因。(3)第九頁，共52頁。由于香蕉組織細胞具有全能性，因此利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)(jìshù)可將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細胞培育成植株?！敬鸢浮?1)PstⅠ、EcoRⅠ含抗病基因的DNA、質(zhì)粒(2)抗卡那霉素基因(3)全能性脫分化、再分化【即時穩(wěn)固1】(2010·江蘇)下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請答復(fù)以下問題：限制酶BamHⅠHindⅢEcoRⅠSmaⅠ識別序列及切割位點G↓GATCCCCTAG↑GA↓AGCTTTTCGA↑AG↓AATTCCTTAA↑GCCC↓GGGGGG↑CCC第十頁，共52頁。(1)一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割(qiēgē)前后，分別含有________個游離的磷酸基團。(2)假設(shè)對圖中質(zhì)粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越________。(3)用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaⅠ切割(qiēgē)，原因是______________________________________。(4)與只使用EcoRⅠ相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止______________。第十一頁，共52頁。(5)為了獲取(huòqǔ)重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并參加________酶。(6)重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了__________。(7)為了從cDNA文庫中別離獲取(huòqǔ)蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在______的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達的初步檢測?！窘馕觥看祟}綜合考查基因工程的過程及應(yīng)用。(1)質(zhì)粒是雙鏈環(huán)狀DNA分子，在SmaⅠ切割前沒有游離的磷酸基團，SmaⅠ作用于兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵，切割產(chǎn)生的DNA片段末端是平末端，因而質(zhì)粒經(jīng)切割后含有2個游離的磷酸基團。(2)質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性主要由氫鍵的數(shù)量決定，氫鍵數(shù)量越多，第十二頁，共52頁。質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高，反之那么低，DNA分子中A與T之間存在2個氫鍵，C與G之間存在3個氫鍵，因此DNA分子中G—C堿基對越多，熱穩(wěn)定性就越高，SmaⅠ識別CCCGGG序列，并在C和G之間將這段序列切開，也就是(jiùshì)質(zhì)粒中SmaⅠ酶切位點越多，G—C堿基對越多，熱穩(wěn)定性越高。(3)據(jù)圖1可知，SmaⅠ切割的位點在抗生素抗性基因之中，抗生素抗性基因是標(biāo)記基因，應(yīng)盡量防止破壞，據(jù)圖2可知SmaⅠ切割的位點在目的基因之中,破壞了目的基因,所以不能使用SmaⅠ切割。(4)用同種限制酶切割后的質(zhì)粒和目的基因,在基因表達載體構(gòu)建時，常形成三種直接方式，其中目的基因與目的基因的連接、質(zhì)粒與質(zhì)粒的連接是無效的連接，用兩種限制酶可防止此類現(xiàn)象。(5)基因表達載體的構(gòu)建第十三頁，共52頁。過程中需加DNA連接酶，連接脫氧核糖和磷酸。(6)抗生素抗性基因?qū)儆跇?biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。(7)目的基因是蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將其導(dǎo)入喪失吸收(xīshōu)蔗糖能力的大腸桿菌突變體后，應(yīng)進行目的基因的檢測與鑒定，可根據(jù)受體細胞是否含有蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白，即是否具備吸收(xīshōu)蔗糖的能力判斷基因工程是否成功，因而可在含有蔗糖(唯一碳源)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)?！敬鸢浮?1)0、2(2)高(3)SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因(4)質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化(5)DNA連接第十四頁，共52頁。(6)鑒別和篩選含有目的基因的細胞(7)蔗糖(zhètáng)為唯一含碳營養(yǎng)物質(zhì)第十五頁，共52頁。考點(kǎodiǎn)二基因工程根本操作程序分析一、目的基因的獲取途徑1．直接別離：從自然界已有的物種中別離，如從基因組文庫中獲取。2．人工合成目的基因常用的方法有：(1)核苷酸序列的較小基因，直接利用DNA合成儀用化學(xué)方法合成，不需要模板。(2)以RNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶作用下人工合成。3．PCR技術(shù)與DNA復(fù)制的比較第十六頁，共52頁。PCR技術(shù)DNA復(fù)制相同點原理DNA雙鏈復(fù)制(堿基互補配對)原料四種游離的脫氧核苷酸條件模板、ATP、酶等不同點解旋方式DNA在高溫下變性解旋解旋酶催化場所體外復(fù)制主要在細胞核內(nèi)酶熱穩(wěn)定的DNA聚合酶(Taq酶)細胞內(nèi)含有的DNA聚合酶結(jié)果在短時間內(nèi)形成大量的DNA片段形成整個DNA分子第十七頁，共52頁。二、基因表達載體的構(gòu)建1．基因表達載體的組成：啟動子、目的基因、終止子以及(yǐjí)標(biāo)記基因等。2．基因表達載體的構(gòu)建方法第十八頁，共52頁。三、將目的(mùdì)基因?qū)胧荏w細胞生物種類植物細胞動物細胞微生物細胞常用方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射技術(shù)Ca2＋處理法受體細胞體細胞受精卵原核細胞轉(zhuǎn)化過程將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上→農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細胞→整合到受體細胞的DNA→表達將含有目的基因的表達載體提純→取卵(受精卵)→顯微注射→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動物Ca2＋處理細胞→感受態(tài)細胞→重組表達載體與感受態(tài)細胞混合→感受態(tài)細胞吸收DNA分子第十九頁，共52頁。四、目的基因的檢測與鑒定1．分子水平檢測(1)導(dǎo)入檢測：DNA分子雜交技術(shù)，即使用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA片段作探針檢測。2．個體生物學(xué)水平鑒定：對轉(zhuǎn)基因生物進行抗蟲或抗病的接種實驗(shíyàn)。【案例2】(2019·海南)如圖為某種質(zhì)粒表達載體簡圖，第二十頁，共52頁。小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tctR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori為復(fù)制原點。目的(mùdì)基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點。據(jù)圖答復(fù)：(1)將含有目的(mùdì)基因的DNA與質(zhì)粒表達載體分別用EcoRI酶切,酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有______、______、______三種。假設(shè)要從這些連接物中別離出重組質(zhì)粒，需要對這些連接產(chǎn)物進行______。第二十一頁，共52頁。(2)用上述3種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉(zhuǎn)化實驗。之后(zhīhòu)將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是________；假設(shè)接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是________________________________。(3)目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點是____，其合成的產(chǎn)物是________。(4)在上述實驗中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應(yīng)選用的酶是________?！窘馕觥磕康幕虻腄NA與質(zhì)粒表達載體分別用EcoRI酶切后黏性末端相同，可以連接成目的基因與目的基因、目的基因與第二十二頁，共52頁。載體、載體與載體，需要別離純化才能得到重組質(zhì)粒。EcoRI酶切破壞了載體中的四環(huán)素抗性基因，只有載體與載體轉(zhuǎn)化的原核宿主細胞在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中能生長。因為青霉素基因沒有被破壞，所以目的基因與載體、載體與載體轉(zhuǎn)化的原核宿主細胞在含青霉素的培養(yǎng)基中能生長。EcoRI和BamHI酶切后有2種黏性末端，不能任意(rènyì)連接?！敬鸢浮?1)目的基因—載體連接物載體—載體連接物目的基因—目的基因連接物別離純化(其他合理答案也可以)(2)載體—載體連接物目的基因—載體連接物、載體—載體連接物(3)啟動子mRNA第二十三頁，共52頁。(4)EcoRI和BamHI【即時穩(wěn)固2】(2019·廣東)天然釀酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶類,用作發(fā)酵原料的淀粉需經(jīng)一系列復(fù)雜的轉(zhuǎn)化過程才能被利用。研究者從某絲狀真菌中獲取淀粉酶基因并轉(zhuǎn)入釀酒酵母菌，獲得的釀酒酵母工程菌可直接利用淀粉產(chǎn)生酒精。請答復(fù)以下問題：(1)將淀粉酶基因切割下來所用的工具是____，用___將淀粉酶基因與載體拼接(pīnjiē)成新的DNA分子，下一步將該DNA分子___，以完成工程菌的構(gòu)建。(2)假設(shè)要鑒定淀粉酶基因是否插入釀酒酵母菌，可采用的檢測方法是________；假設(shè)要鑒定淀粉酶基因是否翻譯成淀粉酶，第二十四頁，共52頁。可采用________檢測；將該工程菌接種在含淀粉的固體平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一定時間后，參加碘液，工程菌周圍出現(xiàn)透明圈,請解釋該現(xiàn)象發(fā)生的原因。______________________。(3)如何進一步鑒定不同的轉(zhuǎn)基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？____________________________________。(4)微生物在基因工程領(lǐng)域中有哪些重要作用？______?！窘馕觥看祟}考查了與基因工程相關(guān)的知識。將基因切割下來的工具是限制酶，將基因與運載體結(jié)合在一起的是DNA連接酶，基因工程的根本流程是：獲取目的基因，基因表達載體的構(gòu)建，將目的基因?qū)胧荏w細胞，目的基因的檢測與鑒定。目的基因的檢測與鑒定包括分子水平的檢測，如用DNA分子雜交技術(shù)來檢測基因或?qū)?yīng)的mRNA，用抗原－抗體(kàngtǐ)雜交來檢測蛋白第二十五頁，共52頁。質(zhì)，也包括(bāokuò)個體生物學(xué)水平的鑒定。淀粉在工程菌分泌的淀粉酶的作用下被分解，參加碘液后，因工程菌周圍無淀粉而不變藍，故出現(xiàn)透明圈?！敬鸢浮?1)限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶導(dǎo)入釀酒酵母菌(2)DNA分子雜交抗原－抗體雜交或淀粉酶活性該工程菌產(chǎn)生的淀粉酶可分泌至培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基中淀粉被水解的區(qū)域，遇碘不再變藍色，產(chǎn)生透明圈(3)測定相同培養(yǎng)條件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精產(chǎn)量第二十六頁，共52頁。(4)①工具酶主要來自微生物；②最重要(zhòngyào)的目的基因供體庫之一；③目的基因的載體之一；④作為受體細胞；⑤提供用于發(fā)酵的工程菌第二十七頁，共52頁。知識(zhīshi)研讀(對應(yīng)(duìyìng)學(xué)生用書P157)基因工程(jīyīngōngchéng)(二)第二十八頁，共52頁。1．基因工程(jīyīngōngchéng)的應(yīng)用。2．蛋白質(zhì)工程。課程標(biāo)準第二十九頁，共52頁。(即時穩(wěn)固解析為教師用書獨有)考點一基因工程的應(yīng)用成果一、植物基因工程的成果1．抗蟲轉(zhuǎn)基因植物：主要抗蟲基因有Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制劑基因、淀粉酶抑制劑基因、植物凝集素基因等。抗蟲棉、抗蟲番茄、抗蟲煙草都已獲得成功，既減少了殺蟲劑的使用，又保護了環(huán)境(huánjìng)。2．抗病毒轉(zhuǎn)基因植物：主要抗病毒的病毒外殼基因、病毒的復(fù)制酶基因、抗真菌的幾丁質(zhì)酶基因和抗毒素合成基因?？键c整合第三十頁，共52頁。多種抗病毒植株已培育成功并開始進行田間實驗、栽培。3．抗逆轉(zhuǎn)基因植物：主要有抗鹽堿、抗干旱的滲透壓調(diào)節(jié)基因、耐寒的抗凍蛋白基因、抗除草劑基因等，減輕了不利環(huán)境條件對農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成的影響。4．利用轉(zhuǎn)基因改進植物品質(zhì)：主要成果有培育賴氨酸含量較高的玉米、耐儲存的番茄、花色變異的矮牽牛花等。二、動物(dòngwù)基因工程的成果1．提高動物(dòngwù)生長速度：導(dǎo)入外源生長激素基因、培育轉(zhuǎn)基因綿羊和轉(zhuǎn)基因鯉魚。2．改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)：如導(dǎo)入腸乳糖酶基因，生產(chǎn)低乳糖乳汁。第三十一頁，共52頁。3．用轉(zhuǎn)基因動物生產(chǎn)藥物：利用乳腺反響器生產(chǎn)抗凝血酶、血清白蛋白、生長激素等醫(yī)藥產(chǎn)品。4．用轉(zhuǎn)基因動物作器官移植的供體：利用基因工程抑制抗原決定(juédìng)簇基因的表達或除去抗原決定(juédìng)基因，培育出沒有免疫排斥反響的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官。三、基因工程藥物利用轉(zhuǎn)基因工程菌生產(chǎn)出人類蛋白質(zhì)藥物。四、基因治療第三十二頁，共52頁。項目類型外源基因類型及舉例過程特點成果舉例體外基因治療腺苷酸脫氨酶基因①從病人體內(nèi)獲得某種細胞②細胞培養(yǎng)③體外完成基因轉(zhuǎn)移④篩選并擴增培養(yǎng)⑤重新輸入患者體內(nèi)操作復(fù)雜，但成功率高治療復(fù)合型免疫缺陷癥體內(nèi)基因治療治療遺傳性囊性纖維化病的基因外源基因→載體攜帶體內(nèi)相應(yīng)組織細胞操作簡單，成功率低治療遺傳性囊性纖維化病第三十三頁，共52頁?！景咐?】(2019·江蘇)蘇云金桿菌(Bt)能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白。以下(yǐxià)圖是轉(zhuǎn)Bt毒素蛋白基因植物的培育過程示意圖(ampr為抗氨芐青霉素基因)，據(jù)圖答復(fù)以下(yǐxià)問題。第三十四頁，共52頁。(1)將圖中①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ限制酶切后，反響管中有________種DNA片段。(2)圖中②表示HindⅢ與BamHⅠ酶切、DNA連接酶連接的過程，此過程可獲得________種重組質(zhì)粒；如果換用BstⅠ與BamHⅠ酶切，目的(mùdì)基因與質(zhì)粒連接后可獲得________種重組質(zhì)粒。(3)目的(mùdì)基因插入質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒的________。(4)圖中③的Ti質(zhì)粒調(diào)控合成的vir蛋白，可以協(xié)助帶有目的(mùdì)基因的T-DNA導(dǎo)入植物細胞，并防止植物細胞中________對T-DNA的降解。第三十五頁，共52頁。(5)轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲腸上皮細胞外表的特異性受體，使細胞膜穿孔，腸細胞裂解，昆蟲死亡。而該毒素蛋白對人類的風(fēng)險相對較小，原因是人類腸上皮細胞_______________。(6)生產(chǎn)上常將上述轉(zhuǎn)基因作物與非轉(zhuǎn)基因作物混合播種(bōzhǒng)，其目的是降低害蟲種群中的______基因頻率的增長速率?！窘馕觥看祟}考查基因工程的相關(guān)知識。(1)圖中①的DNA有1個HindⅢ酶切位點和2個BamHⅠ酶切位點，故用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反響管中有4種DNA片段。(2)從圖中①可知，HindⅢ、BamHⅠ酶切后有2種片段有相應(yīng)的末端,可與質(zhì)粒重組；而BstⅠ和BamHⅠ酶切后只有1種片段有相應(yīng)的末端，可與第三十六頁，共52頁。質(zhì)粒重組。(3)質(zhì)粒要進行復(fù)制才能更多的表達出產(chǎn)物，所以重組之后要能復(fù)制。(4)酶具有專一性，T-DNA的降解酶為DNA水解酶。(5)生物的細胞外表的受體具有特異性，人類腸上皮細胞沒有昆蟲腸上皮細胞外表的特異性受體，所以該毒素蛋白對人類的風(fēng)險相對(xiāngduì)較小。(6)自然選擇是普遍存在的，純種種植自然選擇會使害蟲抗性基因頻率快速增長，所以混合種植能降低害蟲的抗性基因頻率的增長速率。【答案】(1)4(2)21(3)復(fù)制(4)DNA水解酶(5)外表無相應(yīng)的特異性受體(6)抗性【即時穩(wěn)固1】(2019·山東理綜)為擴大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國科第三十七頁，共52頁。學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育了耐鹽水稻新品系。(1)獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的________處，DNA連接酶作用于________處。(填“a〞或“b〞)(2)將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細胞的常用(chánɡyònɡ)方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和________。(3)由導(dǎo)入目的基因的水稻細胞培養(yǎng)成植株需要利用_____技術(shù)，該技術(shù)的核心是________和________。第三十八頁，共52頁。(4)為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的________作探針進行分子雜交檢測，又要用________方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。【解析】此題以社會的熱點和科技新進展為背景，通過轉(zhuǎn)基因水稻的培育綜合考查了基因工程的根本工具、根本操作程序和植物細胞工程等知識，屬于識記內(nèi)容，要求簡單。(1)限制性核酸內(nèi)切酶破壞的是相鄰兩個脫氧核苷酸之間的化學(xué)鍵。DNA連接酶的作用部位也是該處，但作用與限制酶正好相反。(2)重組DNA分子導(dǎo)入植物細胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化(zhuǎnhuà)法，也可以使用基因槍法或花粉管通道法。(3)目的基因的受體細胞是植物體細胞或受精卵，因此，要經(jīng)過植物組織培養(yǎng)過程才能成第三十九頁，共52頁。為植株。該過程的核心是脫分化和再分化。(4)目的(mùdì)基因是否導(dǎo)入受體細胞，用DNA分子雜交技術(shù)進行檢測，即以帶有放射性的目的(mùdì)基因的單鏈為探針，檢測受體細胞中是否含有能與探針進行配對雜交的DNA(目的(mùdì)基因)。檢測目的(mùdì)基因是否表達，可以用個體檢驗的方法,將植物栽培到高濃度鹽的環(huán)境中(如鹽堿地)，然后觀察其生活狀況?！敬鸢浮?1)aa(2)基因槍法(花粉管通道法)(3)植物組織培養(yǎng)脫分化(去分化)再分化(4)耐鹽基因(目的(mùdì)基因)一定濃度鹽水澆灌(移栽到鹽堿地中)第四十頁，共52頁?？键c二蛋白質(zhì)工程與基因工程(jīyīngōngchéng)的比較項目區(qū)別與聯(lián)系蛋白質(zhì)工程基因工程區(qū)別過程預(yù)期蛋白質(zhì)功能―→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)―→推測應(yīng)有的氨基酸序列―→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列獲取目的基因―→構(gòu)建基因表達載體―→將目的基因?qū)胧荏w細胞―→目的基因的檢測與鑒定實質(zhì)定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品結(jié)果可生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)只能生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系(1)蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程(2)基因工程中所利用的某些酶需要通過蛋白質(zhì)工程進行修飾、改造第四十一頁，共52頁?！景咐?】2019年諾貝爾化學(xué)獎授予(shòuyǔ)了三位在研究綠色熒光蛋白(GFP)方面做出突出奉獻的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光。借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細胞內(nèi)部的移動情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。GFP基因可作為目的基因用于培育綠色熒光小鼠，如圖表示培育綠色熒光小鼠的根本流程：第四十二頁，共52頁。請根據(jù)上述材料答復(fù)以下問題：(1)用于培育綠色熒光小鼠的基因表達載體的組成必須有啟動子、________、________和________等。圖中過程②常用的方法是________；過程③利用的生物技術(shù)(jìshù)是________；在進行過程④前，利用________可以獲得數(shù)目更多且基因型相同的綠色熒光小鼠。(2)GFP基因與目的基因一起構(gòu)建到載體上不影響目的基因的表達，也不影響由目的基因控制合成的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能，且對細胞無毒性，因此GFP基因可以作為基因表達載體上的________。第四十三頁，共52頁。(3)目前科學(xué)家們通過______工程制造出了藍色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，該工程是直接改造GFP分子，還是改造GFP基因？________。該工程的根本流程是______________?！窘馕觥炕虮磉_載體由4局部組成，分別是目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因。把目的基因?qū)雱游锸荏w細胞的常用方法是顯微注射技術(shù)。由受精卵培養(yǎng)得到早期胚胎，這屬于細胞培養(yǎng)技術(shù)，可以利用胚胎分割技術(shù)由一個胚胎獲得(huòdé)多個胚胎。GFP基因不影響目的基因控制合成的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能，且對細胞無毒性，又可以發(fā)出熒光，因此可以作為標(biāo)記基因。蛋白質(zhì)工程是指通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，獲得(huòdé)各種各樣的自然界中沒有的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)工程的第四十四頁，共52頁。根本流程：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)(jiégòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)基因的脫氧核苷酸序列→修飾(合成)相應(yīng)的基因→表達出相應(yīng)蛋白質(zhì)?！敬鸢浮?1)GFP基因終止子標(biāo)記基因顯微注射法早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)胚胎分割(2)標(biāo)記基因(3)蛋