T淋巴細(xì)胞相關(guān)腫瘤免疫療法

T淋巴細(xì)胞相關(guān)腫瘤免疫療法第1頁(yè)/共18頁(yè)腫瘤免疫療法是一種通過(guò)激發(fā)或調(diào)動(dòng)機(jī)體免疫系統(tǒng)來(lái)增強(qiáng)腫瘤微環(huán)境抗腫瘤免疫力，控制和殺傷腫瘤細(xì)胞的一種治療方法。近年來(lái)，腫瘤免疫療法在臨床使用中明顯延長(zhǎng)了黑色素瘤、前列腺癌和肺癌等腫瘤患者的生存時(shí)間，逐漸成為繼手術(shù)、放療和化療后的第4類(lèi)腫瘤治療方法。T淋巴細(xì)胞作為免疫系統(tǒng)最重要的細(xì)胞之一，在機(jī)體對(duì)抗腫瘤細(xì)胞的免疫反應(yīng)中以間接和/或直接的方式發(fā)揮著重要作用，以T淋巴細(xì)胞為基礎(chǔ)的腫瘤免疫療法具有重要的研究意義。第2頁(yè)/共18頁(yè)1T淋巴細(xì)胞在腫瘤免疫療法中的作用

T淋巴細(xì)胞、自然殺傷（NK）細(xì)胞、細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK）、樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）和DC-CIK等細(xì)胞均具有一定的抗腫瘤活性，但機(jī)體腫瘤免疫療法的核心執(zhí)行者為T(mén)淋巴細(xì)胞。T淋巴細(xì)胞的作用是區(qū)分“自我”和“非自我”的抗原，有助于去除“非自我”抗原，但可能會(huì)過(guò)度激活免疫系統(tǒng)并對(duì)“自我”抗原造成損害。因此，應(yīng)增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞識(shí)別腫瘤相關(guān)抗原為“非自我”的潛力并消滅腫瘤細(xì)胞。第3頁(yè)/共18頁(yè)T淋巴細(xì)胞分泌的白細(xì)胞介素2（IL-2）在治療黑色素瘤中顯示出較好的療效，從而促進(jìn)了機(jī)體免疫對(duì)抗腫瘤的免疫療法的研究。隨后的研究發(fā)現(xiàn)，一些腫瘤特異性抗原存在于不同類(lèi)型的腫瘤患者體內(nèi)，能被T淋巴細(xì)胞識(shí)別，并特異性殺傷腫瘤細(xì)胞。T淋巴細(xì)胞能穿透復(fù)雜的血腦屏障（BBB），在整個(gè)機(jī)體中遷移，故T淋巴細(xì)胞對(duì)大部分轉(zhuǎn)移性疾病有著理想的治療作用。這種有效的組織穿透特性使得T淋巴細(xì)胞可以用于一般藥物難以到達(dá)的病灶部位第4頁(yè)/共18頁(yè)的治療，如原發(fā)性腦瘤、腦轉(zhuǎn)移瘤和前列腺惡性腫瘤等免疫抑制細(xì)胞可產(chǎn)生有利于腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的腫瘤微環(huán)境，限制T淋巴細(xì)胞的功能。決定腫瘤免疫療法效果的關(guān)鍵在于能否充分調(diào)動(dòng)T淋巴細(xì)胞的功能。以免疫檢查點(diǎn)療法和嵌合抗原受體T細(xì)胞免疫療法（CAR-T）為代表的腫瘤免疫療法均能顯著提高患者的生存質(zhì)量，延長(zhǎng)生存期。第5頁(yè)/共18頁(yè)2免疫檢查點(diǎn)療法

免疫抑制細(xì)胞因子和生物活性分子均可抑制T淋巴細(xì)胞功能。T淋巴細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞與腫瘤微環(huán)境中的其他細(xì)胞之間的相互作用可激活免疫檢查點(diǎn)，腫瘤利用免疫檢查點(diǎn)通路進(jìn)行免疫逃避。因此免疫檢查點(diǎn)療法重點(diǎn)是抑制免疫檢查點(diǎn)的功能。研究發(fā)現(xiàn)，僅有T淋巴細(xì)胞受體（TCR）信號(hào)并不足以產(chǎn)生對(duì)外來(lái)抗原的T淋巴細(xì)胞激活，還需要其他分子的參與，即第二信號(hào)共刺激分子的作用。免疫抑制性受體/配體對(duì)或一系列共刺激受體/配體對(duì)調(diào)控免疫第6頁(yè)/共18頁(yè)系統(tǒng)，維持自身免疫攻擊和清除腫瘤間的平衡。免疫檢查點(diǎn)為抑制性配受體通路，通常在保持自我耐受性、調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞反應(yīng)的幅度和持續(xù)時(shí)間以及防止組織損傷方面起著重要作用。其中，腫瘤免疫逃逸的主要機(jī)制為通過(guò)免疫檢查點(diǎn)通路逃避識(shí)別腫瘤特異性抗原的T淋巴細(xì)胞免疫應(yīng)答。檢查點(diǎn)抑制劑的主要目的是解除免疫系統(tǒng)的抑制，使免疫系統(tǒng)恢復(fù)正常功能并攻擊腫瘤細(xì)胞。近年來(lái)，研究較為透徹的免疫檢查點(diǎn)有CTLA-4、PD-1及其配體、LAG-3和TIM-3。第7頁(yè)/共18頁(yè)2.1CTLA-4

CTLA-4又名CD152，是腫瘤免疫療法中第一個(gè)具有臨床潛力的免疫檢查點(diǎn)。CTLA-4主要通過(guò)與CD28競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合以及調(diào)節(jié)B7-1（又名CD80）和B7-2（又名CD86）為T(mén)淋巴細(xì)胞積極傳遞抑制信號(hào)來(lái)調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞活化早期階段的強(qiáng)度。CTLA-4被認(rèn)為處于免疫檢查點(diǎn)抑制劑的“領(lǐng)袖”位置，其在幼稚T淋巴細(xì)胞活化的初始階段可阻滯潛在的自身反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞增殖。臨床前研究發(fā)現(xiàn)，抑制CTLA-4可導(dǎo)致T淋巴細(xì)胞增殖速度加快1.5～第8頁(yè)/共18頁(yè)2倍，IL-2生產(chǎn)速度加快6倍。CTLA-4抑制劑對(duì)小鼠卵巢、膀胱、腦腫瘤和纖維肉瘤等均有具有抗腫瘤作用，而阻斷CTLA-4對(duì)B16黑色素瘤、SM1乳腺癌、EL4淋巴瘤、M109肺癌和MOPC-315漿細(xì)胞瘤模型均無(wú)效。第9頁(yè)/共18頁(yè)2.2PD-1及其配體

PD-1又名CD279，與CTLA-4有著相似的T淋巴細(xì)胞負(fù)反饋調(diào)節(jié)作用，CTLA-4在免疫應(yīng)答的早期階段發(fā)揮著不可或缺的作用，而PD-1和PD-L1于免疫應(yīng)答的后期階段在組織部位發(fā)揮作用以限制T淋巴細(xì)胞功能。PD-1主要調(diào)節(jié)正在進(jìn)行免疫反應(yīng)的組織和腫瘤內(nèi)的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞活性。第10頁(yè)/共18頁(yè)P(yáng)D-1與其配體結(jié)合時(shí)，在效應(yīng)階段的腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（TIL）中呈高表達(dá)，并用于慢性抗原暴露時(shí)抑制T淋巴細(xì)胞活性。PD-1的2個(gè)配體分別為PD-L1和PD-L2，PD-L1通過(guò)與表面受體PD-1或CD80分子相互作用，抑制活化T淋巴細(xì)胞的信號(hào)。PD-L2是T淋巴細(xì)胞增殖和干擾素產(chǎn)生的關(guān)鍵。PD-L2可刺激PD-1受體信號(hào)，導(dǎo)致T淋巴細(xì)胞耗竭，可通過(guò)去除逆轉(zhuǎn)PD-1信號(hào)暫時(shí)抑制T淋巴細(xì)胞活化和增殖。第11頁(yè)/共18頁(yè)2.3LAG-3

LAG-3又名CD223，是免疫球蛋白（Ig）超基因家族的一員，在T淋巴細(xì)胞功能中發(fā)揮多種生物影響，主要表達(dá)于活化的CD4和CD8T淋巴細(xì)胞中。LAG-3結(jié)構(gòu)與CD4表面分子高度同源，與CD4一樣與LAG和MHCⅡ結(jié)合，但LAG-3的結(jié)合更密切。在各種類(lèi)型的腫瘤中均可觀察到LAG-3的表達(dá)，LAG-3抗體在腫瘤免疫治療中有很大的研究潛力。第12頁(yè)/共18頁(yè)2.4

TIM-3TIM-3是一種在活化的T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞和單核細(xì)胞中表達(dá)的免疫檢查點(diǎn)分子。S-型半乳糖凝集素9（Gal-9）已被確定是TIM-3的一個(gè)配體，其結(jié)合TIM-3的IgV域。TIM-3作為一類(lèi)T淋巴細(xì)胞表面抑制性分子，能夠引起腫瘤與慢性病毒感染過(guò)程中T淋巴細(xì)胞的衰竭，通過(guò)封閉性抗體或干擾RNA抑制TIM-3下游信號(hào)來(lái)激活人T淋巴細(xì)胞分泌人γ干擾素（IFN-γ）增加。研究表明，惡性黑色素瘤可通過(guò)阻斷TIM-3來(lái)逆轉(zhuǎn)CD4、CD8T淋巴細(xì)胞功能的耗竭。第13頁(yè)/共18頁(yè)3CAR-T療法

3.1CAR-T的作用與結(jié)構(gòu)

1989年，學(xué)者們首次提出將腫瘤單克隆抗體的單鏈可變區(qū)與TCR結(jié)合，再將編碼嵌合抗原受體（CAR）的基因插入T淋巴細(xì)胞，修飾后的T淋巴細(xì)胞經(jīng)體外擴(kuò)增和純化后回輸至體內(nèi)，被CAR修飾的T淋巴細(xì)胞不僅靶向腫瘤細(xì)胞表面特異性抗原，也使其在主要組織相容性復(fù)合體中起著獨(dú)立作用。

有針對(duì)性的腫瘤治療藥物目標(biāo)需要鎖定特定的腫瘤細(xì)胞，以避免對(duì)健康組織產(chǎn)生影響。CAR分子由一個(gè)抗原識(shí)別胞外結(jié)構(gòu)域和一個(gè)胞內(nèi)的信號(hào)域組成，胞外部分通常是一個(gè)針對(duì)細(xì)胞表面抗原的單鏈抗體（scFv），而胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域由TCR復(fù)合物和共刺激信號(hào)分子合并信號(hào)域組成[34]。為了能夠充分激活T淋巴細(xì)胞活化，需要通過(guò)一系列共刺激受體蛋白[如CD28、CD27、CD137（4-1BB）、ICOS和CD（OX40）]等聯(lián)合刺激TCR獲得抗原識(shí)別信號(hào)。第14頁(yè)/共18頁(yè)3.2CAR-T的臨床應(yīng)用通常通過(guò)結(jié)合抗CD3抗體、共刺激抗CD28抗體或共培養(yǎng)患者自體或供者的外周血單核細(xì)胞來(lái)激活和擴(kuò)增T淋巴細(xì)胞或病毒特異性T淋巴細(xì)胞。CAR-T在血液系統(tǒng)惡性腫瘤的治療中發(fā)揮著重要作用，通過(guò)靶向CD19抗原治療急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）、慢性淋巴細(xì)胞白血?。–LL）和多發(fā)性骨髓瘤，以CD19或CD20為靶抗原治療淋巴瘤，通過(guò)以L(fǎng)ewisY抗原或CD33為靶抗原治療急性髓系白血病（AML）。雖然CAR-T療法在根除血液系統(tǒng)惡性腫瘤中具有臨床療效，但對(duì)實(shí)體瘤的治療仍有待突破。CAR-T靶向?qū)嶓w腫瘤抗原受到較多限制。實(shí)體腫瘤微環(huán)境給CAR-T帶來(lái)了許多問(wèn)題，包括純粹的物理/解剖學(xué)屏障、腫瘤衍生的可溶性因子和細(xì)胞因子以及抑制免疫反應(yīng)的免疫細(xì)胞等。第15頁(yè)/共18頁(yè)4結(jié)論綜上所述，T淋巴細(xì)胞相關(guān)腫瘤免疫療法免疫檢查點(diǎn)療法和CAR-T在臨床前與臨床研究中取得了良好的成效。多個(gè)腫瘤免疫治療藥物，尤其是針對(duì)CTLA-4、PD-1和PD-L1這3個(gè)靶標(biāo)的腫瘤免疫治療藥物被各研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)藥企業(yè)作為研發(fā)熱點(diǎn)腫瘤免疫療法通過(guò)誘導(dǎo)自身免疫系統(tǒng)對(duì)抗腫瘤，但多種因素影響T淋巴細(xì)胞對(duì)腫瘤的識(shí)別，造成腫瘤免疫逃逸。StonenE