清潔驗證培訓(xùn)講座

深圳九新藥業(yè)有限公司清潔驗證徐影

2023年5月9日第一頁，共一百頁。

講座內(nèi)容

清潔驗證目的法規(guī)要求什么要求清潔驗證了解清潔過程方案內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)樣本類型測試方法類型與問題09五月20232第二頁，共一百頁。清潔驗證目的提供文件依據(jù)證明清潔程序能夠有效地將產(chǎn)品殘留和清潔劑殘留去除到不會危害到病人安全的水平。

3第三頁，共一百頁。

法規(guī)要求

中國新版GMP:第八十四條應(yīng)當(dāng)按照詳細(xì)規(guī)定的操作規(guī)程清潔生產(chǎn)設(shè)備。

生產(chǎn)設(shè)備清潔的操作規(guī)程應(yīng)當(dāng)規(guī)定具體而完整的清潔方法、清潔用設(shè)備或工具、清潔劑的名稱和配制方法、去除前一批次標(biāo)識的方法、保護(hù)已清潔設(shè)備在使用前免受污染的方法、已清潔設(shè)備最長的保存時限、使用前檢查設(shè)備清潔狀況的方法，使操作者能以可重現(xiàn)的、有效的方式對各類設(shè)備進(jìn)行清潔。

如需拆裝設(shè)備，還應(yīng)當(dāng)規(guī)定設(shè)備拆裝的順序和方法；如需對設(shè)備消毒或滅菌，還應(yīng)當(dāng)規(guī)定消毒或滅菌的具體方法、消毒劑的名稱和配制方法。必要時，還應(yīng)當(dāng)規(guī)定設(shè)備生產(chǎn)結(jié)束至清潔前所允許的最長間隔時限。09五月20234第四頁，共一百頁。

法規(guī)要求

第一百四十三條清潔方法應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗證，證實其清潔的效果，以有效防止污染和交叉污染。清潔驗證應(yīng)當(dāng)綜合考慮設(shè)備使用情況、所使用的清潔劑和消毒劑、取樣方法和位置以及相應(yīng)的取樣回收率、殘留物的性質(zhì)和限度、殘留物檢驗方法的靈敏度等因素09五月20235第五頁，共一百頁。歐盟法規(guī)清潔驗證12.70清潔程序通常應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗證。一般來說,清潔驗證應(yīng)當(dāng)針對那些如果污染或偶然帶入異物對原料藥質(zhì)量產(chǎn)生最大威脅情況或工藝步驟。例如,在早期的產(chǎn)中,設(shè)備清潔程序可能不需驗證,在此遺留物可以在后續(xù)的精制過程中除去。12.71清潔程序的驗證應(yīng)當(dāng)反映出設(shè)備實際使用的模式。如果有不同的原料藥或中間體在同一設(shè)備中制造,并且用相同的方式對設(shè)備進(jìn)行清潔,應(yīng)當(dāng)選用一種具有代表性的中間體或原料藥來進(jìn)行清潔驗證。這種選擇應(yīng)當(dāng)跟據(jù)溶解性以及不同的清潔難度,藥效,毒性和穩(wěn)定性計算出殘留限度來進(jìn)行。09五月20236第六頁，共一百頁。12.72清潔驗證方案中應(yīng)當(dāng)對所要清潔的設(shè)備,程序,物料,可接受的清潔水平,監(jiān)測和控制的參數(shù),以及分析方法進(jìn)行描述。該方案同樣應(yīng)當(dāng)闡明得到樣品的類型,以及如何進(jìn)行取樣和標(biāo)識。12.73取樣應(yīng)當(dāng)包括擦拭法,沖洗法或其他可用的方法(即,直接萃取),如果可能,同時檢測可溶解或不可溶解的殘留。所使用的取樣方法應(yīng)當(dāng)能夠定量測量清潔后在設(shè)備表面殘留水平。在由于設(shè)備的設(shè)計和/或工藝限制(即,軟管的內(nèi)表面,導(dǎo)管,小口反應(yīng)器或處理毒性物料,以及小的復(fù)雜,如微粉機和微型流化床),產(chǎn)品接觸表面不容易接觸的時候,設(shè)備擦拭取樣可能不切實際。09五月20237第七頁，共一百頁。12.74所使用的分析方法應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗證,具有檢測殘留物或污染物的靈敏性。每一種分析方法的檢測限度應(yīng)當(dāng)具有足夠的靈敏度來檢測已經(jīng)制訂的殘留或污染接受水平。應(yīng)當(dāng)制訂該方法的回收率水平。殘留限度應(yīng)當(dāng)具有實用性,可操作性,可證實性,以及最有害的殘留。限度可以制訂在已知的原料藥或其最有害成份的藥理學(xué),毒理學(xué),或生理學(xué)活性基礎(chǔ)上。12.75對于需要降低原料藥中的的總微生物數(shù)或內(nèi)毒素的工藝,或擔(dān)心此類污染的其它工藝(如,用于生產(chǎn)無菌產(chǎn)品的非無菌原料藥),設(shè)備清潔/消毒的研究應(yīng)當(dāng)著眼于微生物和內(nèi)毒素污染。09五月20238第八頁，共一百頁。12.76進(jìn)行驗證后,應(yīng)當(dāng)在適當(dāng)?shù)拈g隔對清潔程序進(jìn)行監(jiān)測,以便保證這些程序在日常生產(chǎn)中有效。如果可行,應(yīng)當(dāng)用分析檢驗和目測檢查來監(jiān)測設(shè)備的清潔程度。允許以目測的方法測定用其他取樣和/或分析方法不能測定的小區(qū)域大致的污染程度。12.8分析方法驗證12.80分析方法應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗證,除非所采用的是相關(guān)藥典或其它公認(rèn)參照的標(biāo)準(zhǔn)方法。09五月20239第九頁，共一百頁。FDA的要求

在FDA的GMP211.67章節(jié)中規(guī)定了設(shè)備清潔驗證的要求：建立書面標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP），其中必須詳細(xì)規(guī)定設(shè)難關(guān)備各部件的清洗過程；必須建立書面的清洗方法驗證通則；清洗方法驗證通則應(yīng)規(guī)定執(zhí)行驗證的負(fù)責(zé)人、批準(zhǔn)驗證工作的負(fù)責(zé)人、驗證標(biāo)準(zhǔn)（合格標(biāo)準(zhǔn)）、再驗證的時間；對各生產(chǎn)系統(tǒng)或設(shè)備部件進(jìn)行清洗驗證之前，應(yīng)制定專一特定的書面驗證計劃，其中應(yīng)規(guī)定取樣規(guī)程、分析方法（包括分析方法的靈敏度）。第十頁，共一百頁。FDA的要求按上述驗證計劃進(jìn)行驗證工作，記錄驗證結(jié)果。做出最終的驗證報告，報告應(yīng)由有關(guān)管理人員批準(zhǔn)，并說明該清洗方法是否有效。第十一頁，共一百頁。09五月202312什么需要驗證一般來說只有對設(shè)備與產(chǎn)品接觸的表面進(jìn)行清潔的程序需要進(jìn)行驗證。對于產(chǎn)物可能轉(zhuǎn)移到的非接觸部件，如密封，法蘭，攪拌軸，烘箱的風(fēng)扇，加熱裝置等，應(yīng)給予考慮。一般來說在連續(xù)批次生產(chǎn)的情況下，無需在每一批次完成后進(jìn)行清潔。但是清潔間隔與方法應(yīng)該被確立。PICSJUL2004第十二頁，共一百頁。09五月202313什么需要驗證:FDA“當(dāng)清潔只用于同一產(chǎn)品的不同批次生產(chǎn)中（或在原料生產(chǎn)中同一中間體的不同批）時，公司只需要滿足設(shè)備的“看的見的清潔”即可。這種批次間清潔工藝無需驗證.”

FDA清潔工藝的驗證1993年7月第十三頁，共一百頁。清潔驗證的失敗案例1992年，F(xiàn)DA對一家進(jìn)口原料廠發(fā)出警告，該廠使用同一臺設(shè)備生產(chǎn)甾體及非甾體類物質(zhì)，F(xiàn)DA認(rèn)為清潔驗證不當(dāng)，只對前一種產(chǎn)品殘留做了驗證，但用TLC法對后一產(chǎn)品淋洗水檢測發(fā)現(xiàn)了副產(chǎn)物及降解物的證據(jù)。09五月202314第十四頁，共一百頁。監(jiān)管要求最終的目標(biāo)降低交叉污染的風(fēng)險使得產(chǎn)品受污染報廢的可能性最小患者的負(fù)面效應(yīng)可能性最小降低產(chǎn)品投訴的發(fā)生率降低衛(wèi)生部門或其他機構(gòu)檢查不合格的風(fēng)險延長設(shè)備的使用壽命09五月202315第十五頁，共一百頁。

化學(xué)污染，如活性成分、產(chǎn)品、清潔劑殘留

污染類別16第十六頁，共一百頁。

物理污染，如機械雜質(zhì)、外來異物污染類別17第十七頁，共一百頁。微生物污染特別注意那些具有促生長和含有大量水分的物料污染類別18第十八頁，共一百頁。19污染控制

廠房：溫濕度、流型、換氣次數(shù)及微生物監(jiān)測

設(shè)備：設(shè)計和材質(zhì)的可清潔性、規(guī)定的清潔和維修規(guī)程人員：更衣、清潔和人流物料和廢物流向第十九頁，共一百頁。20清潔等級

不同產(chǎn)品的批次之間

Productresidue

產(chǎn)品殘留Cleaning

agentsresidue,ifapplicable清潔劑殘留（如適用）

同一產(chǎn)品的批次之間

Cleaning

agentsresidue,ifapplicable清潔劑殘留（如適用）Degradants降解物第二十頁，共一百頁。清洗方法手工清洗由操作人員用檫洗或用高壓軟管進(jìn)行的清洗自動清洗由自動控制對容器及管道進(jìn)行高壓沖洗直至干燥的清洗半自動清洗結(jié)合以上兩者的清洗過程09五月202321第二十一頁，共一百頁。清潔需注意的要點清潔速率同流速的關(guān)系清潔速率流速～～層流湍流湍流公式：

NRe=ρVD/μ其中：V：流速D：特征距離（管子/管道直徑）ρ：流體密度μ

：動態(tài)流體粘度管子或管道：如果NRe≤2000如果NRe≥4000層流湍流第二十二頁，共一百頁。清潔需注意的要點

湍流的清潔速率大大大于層流的清潔速率；盲管和垂直管道中的清潔液的速率要大于湍流所需的速率，通常要求大于1.52米/秒（5英寸/秒）；在設(shè)備設(shè)計時需要考慮盲管的清潔問題，通常要求L/D<2.0

噴淋球的覆蓋率檢查；溶液分布在噴淋球上部的25%-30%區(qū)域

CIP清洗中避免設(shè)備底部的積水；有效、可靠和反復(fù)的清潔要求湍流。

第二十三頁，共一百頁。24時間限度生產(chǎn)完成至清潔開始清潔完成至干燥開始同一產(chǎn)品的生產(chǎn)周期中批次之間的清潔頻次

對未用的、已清潔的設(shè)備進(jìn)行額外清潔第二十四頁，共一百頁。清潔規(guī)程的制定

制定SOP是清潔驗證的先決條件；通常參照設(shè)備的說明書制定詳細(xì)的規(guī)程，規(guī)定每一臺設(shè)備的清潔程序，保證每個操作人員都能以可重復(fù)的方式對其清洗，并獲得相同的清潔效果。第二十五頁，共一百頁。清潔規(guī)程應(yīng)考慮以下因素：設(shè)備的設(shè)計，如材質(zhì)、可拆卸程度、難清洗的位置等26清潔規(guī)程第二十六頁，共一百頁。清潔規(guī)程應(yīng)考慮以下因素：生產(chǎn)工藝：待去除殘留物的特性（如油性、脂肪性、水溶性等）27

清潔規(guī)程第二十七頁，共一百頁。

制造產(chǎn)品的類型和數(shù)目產(chǎn)品處方/材料的特性評價清潔過程的潛在問題第二十八頁，共一百頁。清潔規(guī)程應(yīng)考慮以下因素：操作人員：人工清洗或在線清洗29

清潔規(guī)程第二十九頁，共一百頁。物料和工具物料和工具的控制清潔劑的選擇變更控制規(guī)程應(yīng)對任何的清洗物料和清洗工具的改變進(jìn)行評估30

清潔規(guī)程第三十頁，共一百頁。SOP內(nèi)容?準(zhǔn)備程序?文檔記錄程序?????拆卸程序清潔程序完成程序檢查程序干燥程序?打包/覆蓋/儲藏程序?清潔后文檔記錄程序?設(shè)備清潔失效程序?使用前檢查程序?準(zhǔn)備空間，工具與清潔劑?狀態(tài)標(biāo)簽，檢查單，清潔與使用記錄?????Explodeddiagramsordigitalphotos或數(shù)碼照片Step-Wise,Tools,TACT,Measures工具，籃筐，推車的清潔方法與工具，檢查部位環(huán)境/控制?材料，處理，部位?再次標(biāo)簽，清潔與使用記錄?DatingRequirements,再清潔要求?失效驗證，包裹/封蓋的完整性第4模塊–SOP制定第28頁第三十一頁，共一百頁。清潔驗證程序包括以下內(nèi)容:策略可接受的殘留限度計劃及執(zhí)行32第三十二頁，共一百頁。

清潔驗證策略包括以下步驟進(jìn)行選擇：最壞條件產(chǎn)品最壞條件設(shè)備

定義污染限度的科學(xué)依據(jù)

取樣方法

分析方法33第三十三頁，共一百頁。最壞條件產(chǎn)品--目標(biāo)化合物選擇一般藥品都由活性成分和輔料組成。對于接觸多個產(chǎn)品的共同設(shè)備，所有這些殘留物都是必須清潔干凈的，在清潔驗證中不必為所有殘留物都制定限度標(biāo)準(zhǔn)并一一檢測通常清潔的過程是個溶解的過程從各組分中確定最難清潔（溶解）的物質(zhì)，以此作為參照物質(zhì)。相對于輔料，人們最更關(guān)注活性成分的殘留，因為它可能直接影響下批產(chǎn)品的質(zhì)量、療效和安全性。第三十四頁，共一百頁。

毒性在清洗時的溶解度已知難于清洗，如對設(shè)備表面材質(zhì)有一定附著力包含色料、芳香劑或矯味劑的產(chǎn)品設(shè)備的生產(chǎn)量（生產(chǎn)頻率高的產(chǎn)品相應(yīng)的清洗頻率也高）清洗過程中如果使用清洗劑，則其殘留物也應(yīng)視為標(biāo)記物最壞條件產(chǎn)品的選擇第三十五頁，共一百頁。36

最壞條件產(chǎn)品的選擇基于以下條件：

Pharmacologicalactivity

藥理

Solubility溶解性Concentration濃度Analyticaldetection分析檢測限度根據(jù)產(chǎn)品的相似性進(jìn)行分組，如活性成分相同但規(guī)格不同，或活性成分相同但輔料不同

類似的毒性類似的處方在清洗溶劑中的溶解特性類似的管理方法和危險水平產(chǎn)品在類似的設(shè)備上進(jìn)行生產(chǎn)并采用相同的清潔程序第三十六頁，共一百頁。目標(biāo)化合物選擇產(chǎn)品名稱毒性溶解性已知的清洗問題顏色香味與味道產(chǎn)量A10ug/cm3易溶無無10%B40ug/cm3溶解無無20%C50ug/cm3溶解無無50%D50ug/cm3微溶有有20%第三十七頁，共一百頁。目標(biāo)化合物選擇依據(jù)

從活性成分的毒性來講，A的毒性最大，其他依次為B，C，D

從溶解性方面來講，D產(chǎn)品屬于微溶除產(chǎn)品D外，其他均沒有已知的清洗問題除產(chǎn)品D外，其他產(chǎn)品均沒有顏色及氣味的問題基于上核定帥，產(chǎn)品A與產(chǎn)品D確定為清洗驗證的標(biāo)記產(chǎn)品第三十八頁，共一百頁。39

最壞條件設(shè)備的選擇如果設(shè)備具備以下條件，可進(jìn)行分組：完全相同，可互換，并采用相同的清潔規(guī)程多個活性成分共同接觸某個產(chǎn)品/活性成分單獨使用哪些設(shè)備是包括在清潔驗證中的，哪些設(shè)備是不包括在清潔驗證中的操作原理相同，清潔規(guī)程相同，可是產(chǎn)品的接觸表面積不同（產(chǎn)品接觸面積以計算殘留限度的接受標(biāo)準(zhǔn)。），但可互換產(chǎn)品接觸的設(shè)備----直接接觸產(chǎn)品的設(shè)備，例如：溶液罐、儲存桶。對于產(chǎn)品接觸設(shè)備的無效清潔可能造成產(chǎn)品間的交叉污染；第三十九頁，共一百頁。非產(chǎn)品接觸的設(shè)備----在生產(chǎn)工藝中涉及，但沒有和產(chǎn)品直接接觸的設(shè)備，例如：封閉設(shè)備的外表面。對于非產(chǎn)品接觸設(shè)備的無效清潔一般不會造成產(chǎn)品間的交叉污染；非直接或偶然接觸產(chǎn)品的設(shè)備---在生產(chǎn)工藝中涉及，沒有和產(chǎn)品直接接觸，但有可能污染產(chǎn)品的設(shè)備，例如：冷凍干燥儀或盤式干燥儀的內(nèi)表面、機械監(jiān)護(hù)裝置的內(nèi)部，還有某些情況下地面、墻面和天花板。對于非直接產(chǎn)品接觸設(shè)備的無效清潔，有可能造成產(chǎn)品間的交叉污染。通常清潔驗證包括產(chǎn)品接觸的設(shè)備，不包括非產(chǎn)品接觸的設(shè)備，非直接產(chǎn)品接觸的設(shè)備是否包括在內(nèi)依實際情況而定。一次性單用途設(shè)備（如硅膠管）可不包括在清潔驗證中。第四十頁，共一百頁。09五月202341難清洗位置

第四十一頁，共一百頁。

殘余物標(biāo)準(zhǔn):PICS“在后續(xù)產(chǎn)品的日最大劑量中，任何其他產(chǎn)品不得超過其正常有效劑量0.1%的”“任何產(chǎn)品中其他產(chǎn)品不得超過10ppm”第四十二頁，共一百頁。ISPE-CCPIECHINACONFERENCE2009殘余物標(biāo)準(zhǔn):PICS

“.在完成清潔程序后，設(shè)備不 得有任何肉眼可見殘余物?！?“對于特定的致敏成分，青霉 素，頭孢菌素或強效類固醇激 素與細(xì)胞毒藥物，其限定值應(yīng) 低于目前最佳分析方法的檢測 值” “實踐中，這標(biāo)志著這些產(chǎn)品 是由特定的專門工廠生產(chǎn)的”第四十三頁，共一百頁。

殘余物標(biāo)準(zhǔn):FDA

“FDA并非試圖為決定清潔程序的驗證設(shè)立接受標(biāo)準(zhǔn) 或方法?！?“業(yè)屆代表在文獻(xiàn)或講座內(nèi)提出了某些限定值，包括 分析檢測水平如10ppm” “生物學(xué)活性水平，如正常治療劑量的1/1000” “感官感知水平，如無肉眼可見殘余物”FDA清潔工藝驗證檢查指南1993年7月第四十四頁，共一百頁。45

定義污染限度的科學(xué)依據(jù)選擇基于以下數(shù)據(jù)：毒理學(xué)數(shù)據(jù)藥理劑量絕對限度污染物濃度的log減少度第四十五頁，共一百頁。污染限度和接受標(biāo)準(zhǔn)

（1）目測潔凈，干燥&無嗅限度在每個清洗驗證的方案中都必須包括該接受限度；在每次清洗完成后都必須進(jìn)行檢查并對檢查結(jié)果進(jìn)行記錄目測檢查時應(yīng)包括地面、墻面和天花板等；應(yīng)該作為清洗驗證接受限度的第一個接受標(biāo)準(zhǔn)。注意：在進(jìn)行無嗅檢查時考慮到產(chǎn)品的安全問題。第四十六頁，共一百頁。限度和接受標(biāo)準(zhǔn)

（2）化學(xué)殘留可接受限度濃度限度：十萬分之一（10ppm）

在下一產(chǎn)品中的殘留物數(shù)量級別應(yīng)不超過十萬分之一（10ppm）最高允許十萬分之一殘留源于食品法規(guī)，食品法規(guī)允許某一有害物質(zhì)作為食物鏈存于動物和家禽中存在的水平。第四十七頁，共一百頁。計算接受殘留限度需考慮的要素影響因素最小日治療劑量/毒性溶解度批量最大日治療劑量接觸產(chǎn)品的面界難清洗位置取樣面界回收率清洗前產(chǎn)品√√清洗后產(chǎn)品√√設(shè)備√√取樣方法√√清洗劑√√第四十八頁，共一百頁。09五月202349第四十九頁，共一百頁。09五月202350第五十頁，共一百頁。09五月202351第五十一頁，共一百頁。參考資料：當(dāng)代結(jié)構(gòu)藥物全集（上）TheCompleteWorksofContemporaryStructure-basedDrug(1stVolume)

半數(shù)致死量數(shù)據(jù)來自化學(xué)品安全技術(shù)說明書（MSDS）數(shù)據(jù)庫09五月202352第五十二頁，共一百頁。

設(shè)備表面積的確定：

1、應(yīng)測定每個設(shè)備的產(chǎn)品接觸面積，以計算殘留限度的接受標(biāo)準(zhǔn)；

2、產(chǎn)品接觸面積測定的準(zhǔn)確度應(yīng)具有實際意義，不必絕對地精確。可將復(fù)雜設(shè)備轉(zhuǎn)化成基本幾何圖形以便于計算和測量；

3、測量的原始記錄和計算將作為原始數(shù)據(jù)進(jìn)行保存。第五十三頁，共一百頁。附錄1產(chǎn)品列表09五月202354編號產(chǎn)品水溶解度MTDD(mg)LDSD(mg)LD50(g/kg)最小批量Min.BatchSize(kg)大鼠小鼠1ASlightlysoluble40006000>20>200.52BFreelysoluble22501000010>100.53CFreelysoluble10004000>10>100.254DFreelysoluble50040003.84.70.55EFreelysoluble2000120004.263.840.756FFreelysoluble20006000>20>2017GFreelysoluble100060002.763.900.5第五十四頁，共一百頁。09五月202355選擇MTDD的最小值，以及批量與LDSD比值的最小值選擇LD50的最小值，以及批量與LDSD比值的最小值選擇最小的批量值第五十五頁，共一百頁。最終選擇：0.1609五月202356第五十六頁，共一百頁。清潔劑的限定值?清潔劑的組分不應(yīng)該具有治療作用?為了確定清潔劑的安全性，各家公司經(jīng)常采用唯一可知的清潔力活力的指標(biāo)-LD50?LD50根據(jù)動物模型的不同(e.g.,大鼠,幾內(nèi)亞豬,小鼠等)以及給藥方法的不同(e.g.,口服,外用,靜脈注射,i.p.,皮下等）?由于我們希望保證殘余量對于使用下一劑藥物的患者是安全的，我們不能直接引用LD50的數(shù)據(jù)。?因而大部分公司首先計算ADI（可接受的每日攝入）或NOEL（無觀察效應(yīng)水平）這兩個值?NOEL或ADI公式的形式與藥理學(xué)特性限定值的形式相同第五十七頁，共一百頁。

清潔劑的限定值

NOEL，根據(jù)大鼠口服給藥的LD50得出的典型公式為：NOEL=LD50mg/kgx(5.6x10-4)x70kg轉(zhuǎn)換因子與安全因子將大鼠口服的LD50轉(zhuǎn)換為人體的NOEL注意:安全因子可以防范:個體反應(yīng)差異,因劑量/應(yīng)答曲線變異而可能造成的最壞情況，以及使得未觀察到的效應(yīng)被外顯出來。平均成人體重注意:可能更安全的方法是采用兒童體重或不考慮，盡管前文所述的安全因子被更多認(rèn)為已經(jīng)可以彌補這一問題。Ref:DoursanandStara,J.RegulatoryToxicologyandPharmacology,3,224-238,1983.OtherRefs:D.W.Layton,etal.,J.RegulatoryToxicologyandPharmacology,7,961987. Doursan,Toxicology,Vol.1,No.1,pp.35-48,1986. Doursan,ToxicologyandIndustrialHealth,Vol.4,No.4,pp.23-33,1985.

第五十八頁，共一百頁。

清潔劑的限定值采用NOEL的全部公式為：ResultxRinseorDiluentVolumeSurfaceAreaxRecovery(decimal)LD50mg/kgx(5.6x10-4)x70kgxBatchNP1xSizexDoseNPSFopt>

Sampled?大部分公司仍執(zhí)行1/1000的安全因子；就像基于治 療劑量的公式一樣，盡管計算出的值是“可接受” 的，這并不意味著你希望下一名患者攝入該劑量。?采用的安全因子的數(shù)值經(jīng)常會由公司慎重決定，并 且取決于生產(chǎn)環(huán)境的危險因素，可能受到污染的產(chǎn) 品的風(fēng)險以及殘留物的性質(zhì)。

第6模塊–限定值 第34頁第五十九頁，共一百頁。清潔劑殘留可接受限度清潔劑殘留的可接受標(biāo)準(zhǔn)一般對最終淋洗水取樣分析清潔劑和溶劑的總殘留，瞬息的分析方法如下：

TOC（總有機碳）≤10×10-6

紫外分光光度法吸光度≤0.05，波長范圍210-360nm限度和接受標(biāo)準(zhǔn)第六十頁，共一百頁。09五月202361

微生物殘留可接受標(biāo)準(zhǔn)

清洗的微生物驗證應(yīng)該和清洗的化學(xué)驗證同步進(jìn)行；棉簽擦拭法：洗出液取樣或壓痕法采樣；淋洗液法：取定量的淋洗液過濾后，取濾膜培養(yǎng)。第六十一頁，共一百頁。應(yīng)該考慮何種微生物殘余物，何時考慮?如果您的最終產(chǎn)品，根據(jù)產(chǎn)品規(guī)格，需要限制生物負(fù)荷與內(nèi)毒素，清潔驗證則必須包括這兩項

?生物負(fù)荷包括細(xì)菌，酵母菌與霉菌。它們可以在水系統(tǒng)與 環(huán)境中出現(xiàn)，可能由原材料，設(shè)備與人員產(chǎn)生。

?內(nèi)毒素是一種脂多糖，見于葛蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞膜；當(dāng) 細(xì)菌死亡時釋放，進(jìn)入血液循環(huán)時會引起患者發(fā)熱。

第6模塊–限定值 第36頁第六十二頁，共一百頁。微生物與內(nèi)毒素污染的特征是什么??生物負(fù)荷是由活體生物造成的，內(nèi)毒素由活體系統(tǒng)產(chǎn) 生，所以致熱源負(fù)荷與生物負(fù)荷水平主要取決于環(huán)境 條件?設(shè)備是干燥，覆蓋并密閉的嗎??環(huán)境是否為無菌環(huán)境或至少清潔生產(chǎn)區(qū)域以減少活體/非活體 微粒水平，并對溫度與相對濕度進(jìn)行控制？（對于生產(chǎn)與清潔 設(shè)備儲存都適用）?環(huán)境條件由于四季更替會產(chǎn)生多大的變化？?就像環(huán)境監(jiān)測一樣，生物負(fù)荷與致熱源評估不是一次性行為?推薦做法是，應(yīng)該對生物與內(nèi)毒素負(fù)荷水平進(jìn)行監(jiān) 測，設(shè)定警報與行動值，并且在每一次超過限定值后 進(jìn)行適當(dāng)?shù)募m正行動。第6模塊–限定值第37頁第六十三頁，共一百頁。

微生物與內(nèi)毒素污染的預(yù)防?可以采用某些方法以減少殘余物，方法包括：去 除法（如沖洗，擦洗）與殺滅/滅活法（如化學(xué) 處理，干熱）?殺滅微生物污染可能造成內(nèi)毒素污染的可能性， 除非殺滅方法同時也是一種去內(nèi)毒素工藝（如干 熱）?清潔與消毒不能在一個步驟中完成：

?殘余物會影響化學(xué)制劑的穿透

?沖洗，例如常用的清潔后沖洗可能引入額外的生物負(fù) 荷

?用于消毒的制劑往往是弱清潔劑，而清潔劑又不適于用于殘余物消毒第模塊–限定值第38頁第六十四頁，共一百頁。65

取樣方法的選擇有以下所知的三種取樣方法：Swabbing

Method

棉簽擦拭法Rinse

Sampling

Method沖淋取樣法Placebo

method模擬法第六十五頁，共一百頁。66

棉簽擦拭法優(yōu)點：

直接對表面污染進(jìn)行評估能將不溶物或難溶物從設(shè)備表面實際去除在最后數(shù)據(jù)評價中能夠包括可接觸但難于清洗部位的數(shù)據(jù)第六十六頁，共一百頁。67棉簽擦拭法缺點：不易在大型設(shè)備上實施從小面積獲得的結(jié)果外推至設(shè)備的整個產(chǎn)品接觸表面不易對難接近的區(qū)域進(jìn)行取樣第六十七頁，共一百頁。68棉簽擦拭法需考慮以下因素：Swabcharacterization,e.g.absorptioncapacityandinterference棉簽特性，如溶劑吸收能力、干擾性Swabrecovery,e.g.≥70%棉簽回收率，如≥70%Samplinglocationsandnumberofsamples取樣位置和取樣數(shù)量Samplesurfacearea,e.g.25–100cm2取樣面積，如25~100cm2Swabbingtechnique,e.g.directionandnumbersofstrokes取樣方法，如擦拭方向和次數(shù)Saturationandextractionsolvents浸濕和萃取溶劑第六十八頁，共一百頁。69沖淋取樣法Advantages:

優(yōu)點：

Easeofsampling

易于取樣

Evaluationofentireproductcontactsurface對整個產(chǎn)品接觸表面進(jìn)行評價

Evaluationofinaccessibleequipmentsorones

thatcannotbeeasilyorroutinelydisassembled可對難以接近、不易拆卸或日常生產(chǎn)中不拆卸的設(shè)備進(jìn)行評價第六十九頁，共一百頁。70Disadvantages:

缺點：

Nophysicalremovalofcontaminant

不會實際去除污染物

Rinsingsolventmaynotreachinaccessibleparts沖淋溶劑或許達(dá)不到一些難以觸及的部件

Useoforganicsolventsforwaterinsolublematerials對一些不溶于水的物質(zhì)使用有機溶劑進(jìn)行溶解

沖淋取樣法第七十頁，共一百頁。71

模擬法設(shè)備清潔干燥后，在該設(shè)備內(nèi)進(jìn)行模擬物料處理，然后取一部份進(jìn)行測試Discouragedvigorouslybyregulatoryauthoritiesdueto：法規(guī)部門強力不推薦使用此法，原因如下：Nomeanstoensureresiduesareuniformlydistributedthroughouttheequipment無人能確保殘留均勻地遺留在設(shè)備整個表面Residueoflargerparticlesizenotuniformlydispersedinplacebo

較大顆粒的殘留不能均勻地分散到模擬物料中第七十一頁，共一百頁。72分析方法的選擇Basicrequirements:

具備以下基本要求：Appropriatesensitivitytothecalculatedlimit適宜的靈敏度，可檢測到計算出的限度Practicalandrapid,asmuchaspossibleuseinstrumentationexistingincompany

實用、快速，盡量使用公司現(xiàn)有的儀器BevalidatedinaccordancewithICH,USP,EPandChinesePharmacopoeiarequirements按照ICH、美國藥典、歐洲藥典和中國藥典進(jìn)行了驗證Includearecoverystudytochallengesamplingandtestingmethod應(yīng)包括回收率測試，該測試對取樣方法和測試方法進(jìn)行了挑戰(zhàn)第七十二頁，共一百頁。73分析方法的選擇SpecificMethods:

特定法：Chromatographicmethod

–

Highlyspecific,sensitiveandquantitative(e.g.LC/MS,GC/MS,HPLC)

色譜法：具有高專屬性、高靈敏度，并且可定量（如液質(zhì)聯(lián)用儀、氣質(zhì)聯(lián)用儀、液相色譜儀）Thinlayerchromatography(TLC)–Highlyspecific,moderatelysensitive,semiquantitative

薄層色譜法：具有高專屬性、適度的靈敏性，可半定量Specificionmeter–Quantitative,onlybeusedifactiveingredientalonepossesaspecificion特定離子計：可定量，但只有當(dāng)活性成分本身擁有一個特定離子時才能采用第七十三頁，共一百頁。74

分析方法的選擇NonspecificMethods:

非特定法：Spectrophotometricmethodinvisible,infraredorUVranges

分光光度法（可見區(qū)、紅外區(qū)或紫外區(qū)）Totalorganiccarbon(TOC)

總有機碳Other

methods,e.g.pH,conductivity其他方法，如酸度、電導(dǎo)率第七十四頁，共一百頁。75

分析方法的驗證Shoulddemonstratethefollowings:

應(yīng)證實以下要素：

Accuracy(recovery)andrange

準(zhǔn)確度（回收率）和范圍

Precision精確度

Linearity線性

Selectivity選擇性

Detectionlimit檢測限度

Quantitationlimit定量限度

Stabilityofstandardandsamplesolution標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液的穩(wěn)定性第七十五頁，共一百頁。分析方法的驗證

通常清潔分析方法驗證包括取樣方法驗證和檢驗方法驗證棉簽取樣方法的驗證：取樣過程需經(jīng)過驗證，通過回收率試驗驗證取樣過程的回收率和重現(xiàn)性。通常取樣回收率和檢驗方法回收率結(jié)合進(jìn)行，總回收率一般（企業(yè)可以根據(jù)實際情況確定）不低于70%，多次取樣回收率的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于20%；棉簽取樣過程的驗證實際上是對取樣棉簽、溶劑的選擇、取樣人員操作、殘留物轉(zhuǎn)移到取樣棉簽、樣品溶出（萃?。┻^程的全面考察。第七十六頁，共一百頁。棉簽取樣方法的驗證（續(xù)）

驗證方法如下：

1）準(zhǔn)備一塊與設(shè)備表面材質(zhì)相同的板材，如平整光潔的316L不銹鋼板；

2）在鋼板上劃出100㎜×100㎜的區(qū)域；

3）將5倍限度量的待檢測物溶液，定量裝入校驗的微量注射器；

4）將其溶液盡量均勻地涂布在100㎜×100㎜的區(qū)域內(nèi)；

5）自然干燥或用電吹風(fēng)溫和地吹干不銹鋼板；

6）用選定的擦拭溶劑潤濕擦拭棉簽，按下圖所示進(jìn)行擦拭取樣；

7）重復(fù)以上規(guī)程3次；第七十七頁，共一百頁。棉簽取樣方法的驗證（續(xù)）

8）將擦拭棉簽分別放入棉簽管中，加入預(yù)定溶劑5ml，超聲；

9）用經(jīng)驗證的檢驗方法檢驗，計算回收率和回收率的RSD。下圖為棉簽擦拭取樣方法：第一步第二步第七十八頁，共一百頁。09五月202379第七十九頁，共一百頁。淋洗液取樣方法的驗證

通常淋洗法限度檢查不需做回收率驗證：定量檢查應(yīng)做回收率驗證，可以利用淋洗溶劑沖洗已知量（在限度附近）的分析物確定回收率，回收率通常應(yīng)不低于95%；淋洗的取樣方法為根據(jù)淋洗水流經(jīng)設(shè)備的線路，選擇淋洗線路相對最下游的一個或幾個排水口為取樣口。分別按照微生物檢驗樣品和化學(xué)檢驗品的取樣規(guī)程收集清潔程序最后一步淋洗即將結(jié)束時的水樣；淋洗法樣品可對沖洗液直接檢測，也可對沖洗液做稀釋后檢測；無論直接檢測還是稀釋檢測都應(yīng)在接到樣品后首先將樣品同空白溶劑做視覺檢查，確定是否有顏色差異和異物存在；如果有述現(xiàn)象發(fā)生，可直接判定樣品不合格。第八十頁，共一百頁。取樣方法和取樣點的確認(rèn)

（2）取樣點的確認(rèn)通?？赡懿潦迷O(shè)備的全部表面，因此，應(yīng)該選擇設(shè)備的最差區(qū)域作為取樣點。這些區(qū)域應(yīng)在清潔難度和殘留水平方面代表著對清潔規(guī)程最大程度的挑戰(zhàn)，例如：料斗的底部、槳拌槳葉底部和閥門的周圍。如果進(jìn)行微生物取樣，取樣計劃應(yīng)包括微生物的可能最差區(qū)域，例如：較難靠近的地方以及可收集水的排水區(qū)域。微生物和化學(xué)取樣應(yīng)在不同區(qū)域進(jìn)行，測試方案中應(yīng)包括設(shè)備及其取樣點的描述或圖表。第八十一頁，共一百頁。分析方法的驗證

通常清洗分析方法分為限度檢查和定量檢查，不同的檢查方法驗證的參數(shù)也不相同。（1）回收率

回收率的分析方法驗證已在取樣方法的驗證中詳細(xì)描述，不在此贅述。

（2）精密度精密度系指在規(guī)定的條件下，從同一個均勻樣品中，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。通常用相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）來表示。定量檢查的RSD應(yīng)不大于10%。淋洗法和棉簽法用于限度檢查通常不需要做精密度實驗。第八十二頁，共一百頁。分析方法的驗證

（3）線性/范圍線性系指在設(shè)計的范圍內(nèi)，測定結(jié)果與試樣中被測物濃度呈正比關(guān)系的程度。范圍系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。定量檢查應(yīng)至少測試5個濃度范圍并且包含清潔的最低限和最高限度，線性的相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.98%；濃度范圍應(yīng)達(dá)到殘留物限度的50%-150%。淋洗法和棉簽法用于限度檢查時不需做線性/范圍驗證。第八十三頁，共一百頁。分析方法的驗證

（4）檢測限和定量限檢測限系指在確定的試驗條件下，試樣中被測物能被檢測出的最小量；定量限系指在確定的試驗條件下，試樣中被測物能被準(zhǔn)確測定的最小量，其測定結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精密度。淋洗法和棉簽法用于限度檢查只需做檢測限實驗。通常檢測限是指信噪比為3：1時被分析物的濃度，定量限是指信噪比為10：1時被分析物的濃度。第八十四頁，共一百頁。分析方法的驗證

（5）專屬性專屬性系指在其他成分（如：雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、相似物等）存在下，分析方法能準(zhǔn)確測出被測物的特性。評價空白溶劑、分析系統(tǒng)、棉簽本身是否有干擾。通常采用的驗證方法為：進(jìn)針空白溶劑評價溶劑干擾、進(jìn)樣量為0評價系統(tǒng)干擾、進(jìn)針棉簽浸泡的溶劑評價棉簽干擾。（6）樣品溶液穩(wěn)定性通常樣品室溫或5℃冰箱冷藏放置24-72小時，測定結(jié)果應(yīng)不低于原值的90%。第八十五頁，共一百頁。分析方法的驗證

（7）系統(tǒng)適用性定量檢查測定時，應(yīng)制備2份對照品，對照品一致性檢查應(yīng)為不超過5%；對照品的RSD不應(yīng)超過10%。（8）限度檢查時溶液的進(jìn)樣順序限度檢查測定時測定順序依次為空白溶劑、樣品、對照品。下面是限度檢查和定量檢查時所需驗證的參數(shù)：第八十六頁，共一百頁。限度檢查和定量檢查時所需驗證的參數(shù)

限度檢查法定量檢查法專屬性√√精密度×√線性/范圍×√回收率√√檢測限和定量限檢測限驗證定量限驗證樣品溶液的穩(wěn)定性√√系統(tǒng)適應(yīng)性√（1份標(biāo)準(zhǔn)品）√（2份標(biāo)準(zhǔn)品）檢查方法參數(shù)第八十七頁，共一百頁。88

計劃及執(zhí)行一般來說，以下部門參與清潔驗證：

Production生產(chǎn)部

Engineering工程部

Research&Development研發(fā)人員

Validation驗證人員

QualityControl質(zhì)量控制

QualityAssurance質(zhì)量保證第八十八頁，共一百頁。89

計劃及執(zhí)行應(yīng)編寫一個綜合的清潔驗證主計劃，其至少包括以下內(nèi)容：

Purpose目的

Overviewofsite/facility/area廠房/設(shè)施/區(qū)域的概括描述

Overviewofmanufacturingprocesses

生產(chǎn)工藝概括描述

Overviewofcleaning

methods

清潔方法的概括描述

Responsibilitiesofvariousdepartments

各部門的職責(zé)

Cleaningvalidationpolicy

清潔驗證的策略第八十九頁，共一百頁。90

計劃及執(zhí)行清潔驗證主計劃應(yīng)至少包括以下內(nèi)容（續(xù)）：

Listofequipmentsand

products

設(shè)備和產(chǎn)品明顯表

Productandequipmentgroup,ifapplicable

產(chǎn)品和設(shè)備組（如適用）

Worst-caseproductandequipment,ifapplicable最壞條件產(chǎn)品和設(shè)備（如適用）

Calculationofcontaminationlimit污染限度計算

Executionplanning執(zhí)行計劃第九十頁，共一百頁。91

計劃及執(zhí)行應(yīng)對需要驗證的每個設(shè)備編寫一個清潔驗證方案，主要內(nèi)容如下：

Purposeandscope目的和范圍

Responsibility

責(zé)任

Equipment

description設(shè)備描述

Cleaning

procedure清潔程序。1、生產(chǎn)結(jié)束至開始清潔的最長時間（也稱待清潔設(shè)備保留時間）；

2、已清潔設(shè)備用于下次生產(chǎn)前的最長存放時間（也稱潔凈保留時間）；

3、連續(xù)生產(chǎn)最長時間第九十一頁，共一百頁。92

計劃及執(zhí)行清潔驗證方案的主要內(nèi)容如下（續(xù)）：

Samplingprocedureandlocationdiagram取樣程序和取樣位置示意圖

Analyticaltestprocedureandmethodvalidation分析測試方法和方法驗證

Acceptance

cleaning

limit

接受的清潔限度

Acceptance

criteriaforvalidation接受的驗證標(biāo)準(zhǔn)第九十二頁，共一百頁。編寫一份清潔驗證總結(jié)報告。該報告詳細(xì)描述了清潔驗證的背景以及對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行評估。如需要，報告也會聲明再驗證的要求，如間隔時間/變更控制等。93計劃及執(zhí)行第九十三頁，共一百頁。94

監(jiān)測和驗證狀態(tài)維持對于全自動、設(shè)計優(yōu)良并經(jīng)過正確驗證的在線清洗系統(tǒng)而言，不需進(jìn)行監(jiān)測。清潔程序的重現(xiàn)性可通過系統(tǒng)的正確運行和每次操作后對運行參數(shù)的確