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日期:2017.10.09217核酸---核酸的理化性質(zhì)0203DNA的變性與復(fù)性核酸分子雜交01核酸的紫外吸收性質(zhì)1.核酸的紫外吸收核酸分子中的堿基含有共軛雙鍵,具有紫外光吸收的性質(zhì)。其最大吸收峰在260nm附近??衫眠@一性質(zhì)對核酸進行定性和定量分析。260nm處吸光度變化
2.DNA的變性與復(fù)性DNA變性是指在某些理化因素的作用下,DNA分子互補堿基對之間的氫鍵斷裂,雙螺旋被解開,形成單鏈的過程。熱變性是實驗室常用的DNA變性方法。DNA變性
2.DNA的變性與復(fù)性變性后的DNA理化性質(zhì)發(fā)生一系列改變,如黏度降低,外線吸收值增加等。加熱時,DNA雙鏈發(fā)生解離,在260nm處吸光度增高,此現(xiàn)象稱為增色效應(yīng)。監(jiān)測DNA變性的常用指標(biāo)是在260nm處吸光度的變化。260nm處吸光度變化
Tm是DNA雙鏈解開50%時的環(huán)境溫度。Tm值主要與DNA分子中堿基的組成、分子長度、溶液離子強度等因素有關(guān)。G和C的量越高、分子越長、離子強度越大,Tm值越高。2.DNA的變性與復(fù)性復(fù)性是指當(dāng)變性條件去除后,解開的兩條鏈可重新締合恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu)的過程。DNA的變性是可逆的,例如熱變性的DNA經(jīng)緩慢冷卻后可以復(fù)性,這一過程也稱為退火。DNA變性
復(fù)性
3.核酸分子雜交核酸分子雜交是指將不同來源的DNA鏈或RNA鏈在一起復(fù)性,兩種單鏈之間存在一定的堿基互補序列,可形成雜化雙鏈的過程。雜化雙鏈可以在不同來源的DNA單鏈之間形成,也可以在RNA單鏈之間形成,甚至還可以在
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