藥物的含量測定方法與驗證

藥物的含量測定方法與驗證

2021/10/101藥物的含量測定方法與驗證藥物的含量含量測定效價測定藥物含量測定方法容量分析法光譜分析法色譜分析法2021/10/102藥物的含量測定方法與驗證方法選擇中的供試品因素化學(xué)原料藥的含量測定首選容量分析法藥物制劑的含量測定首選色譜分析法藥物制劑的定量檢查首選光譜分析法含量測定方法須準(zhǔn)確、穩(wěn)定、耐用2021/10/103第一節(jié)定量分析方法的分類與特點2021/10/104一、容量分析法（滴定法）基本術(shù)語滴定：將滴定劑通過滴管滴入待測溶液中的過程滴定劑：濃度準(zhǔn)確已知的試樣溶液指示劑：滴定分析中能發(fā)生顏色改變而指示終點的試劑滴定終點：滴定分析中指示劑發(fā)生顏色改變的那一點（實際）化學(xué)計量點：滴定劑與待測溶液按化學(xué)計量關(guān)系反應(yīng)完全的那一點（理論）滴定誤差：滴定終點與化學(xué)計量點不一致產(chǎn)生的誤差2021/10/105一、容量分析法（滴定法）特點方法簡便易行方法耐用性高測定結(jié)果準(zhǔn)確方法專屬性差適用范圍：較多用于化學(xué)原料藥物的含量測定2021/10/106一、容量分析法（滴定法）有關(guān)計算滴定度：每1ml某摩爾濃度的滴定液所相當(dāng)?shù)谋粶y藥物的重量。中國藥典用mg表示。滴定度的計算2021/10/107一、容量分析法（滴定法）有關(guān)計算含量的計算直接滴定法所配制滴定液濃度與規(guī)定濃度不一致時：2021/10/108一、容量分析法（滴定法）有關(guān)計算含量的計算間接滴定法：生成物滴定法簡接滴定法：剩余量滴定法2021/10/109二、光譜分析法紫外-可見分光光度法（200～400～760nm）朗伯-比耳定律

A為吸收度，l為液層厚度，c為溶液濃度，E為吸收系數(shù)。E：單位液層厚度時的吸收度。有兩種表示法摩爾吸收系數(shù)：在一定波長下，溶液濃度為1mol/L，厚度為1cm時的吸收度。用ε表示。百分吸收系數(shù)：在一定波長下，溶液濃度為1%（W/V），厚度為1cm時的吸收度。用表示。2021/10/1010二、光譜分析法紫外-可見分光光度法特點與適用范圍簡便易行靈敏度高，可達(dá)10-4g/ml～10-7g/ml。準(zhǔn)確度較高，相對誤差為2%～5%。專屬性較差較少應(yīng)用于原料藥含量測定，多用于制劑的定量檢查。2021/10/1011二、光譜分析法紫外-可見分光光度法儀器校正與檢定波長：常用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線校正，或用鈥玻璃的尖銳吸收峰。吸光度的準(zhǔn)確度：與規(guī)定的吸收系數(shù)比較。雜散光的檢查對溶劑的要求：截止波長測定法：波長掃描與吸光度讀數(shù)2021/10/1012二、光譜分析法紫外-可見分光光度法含量測定方法對照品比較法吸收系數(shù)法計算分光光度法比色法D為稀釋倍數(shù)。2021/10/1013二、光譜分析法熒光分析法特點與適用范圍靈敏度高，可達(dá)10-10g/ml～10-12g/ml.濃度太大會有“自熄滅”作用，故適用于低濃度的溶液。干擾因素多，須做空白試驗。取樣少，方法快速。衍生化試劑提高了適用范圍2021/10/1014二、光譜分析法熒光分析法干擾的排除溶劑：進(jìn)一步純化溶劑，空白試驗溶液：適當(dāng)?shù)臐舛?，減少雜質(zhì)，降低溶氧，調(diào)節(jié)pH玻璃量器：高潔凈度溫度：穩(wěn)定的溫度2021/10/1015二、光譜分析法熒光分析法含量測定相對定量方法測定線性范圍較窄式中：Ci為供試品溶液的濃度，Cr為對照品溶液的濃度，Ri為供試品溶液的讀數(shù)，Rib為供試品溶液試劑空白的讀數(shù)，Rr為對照品溶液的讀數(shù)，Rrb為對照品溶液試劑空白的讀數(shù)。2021/10/1016三、色譜分析法特點與適用范圍高靈敏度高專屬性高效能與高速度適用于藥物制劑，尤其復(fù)方制劑的含量測定。分類依據(jù)分離原理：吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、分子排阻色潽等依據(jù)分離方式：紙色譜法，薄層色譜法，柱色譜法，氣相色譜法，高效液相色譜法等2021/10/1017三、色譜分析法高效液相色譜法藥品標(biāo)準(zhǔn)對HPLC方法改變的要求對儀器的一般要求色譜柱：填料，孔徑與粒徑，柱直徑，溫度，pH等檢測器：通用型檢測器與選擇性檢測器，對流動相的要求流動相：反相系統(tǒng)與正相系統(tǒng)2021/10/1018三、色譜分析法高效液相色譜法系統(tǒng)適用性試驗色譜柱的理論塔板數(shù)色譜峰的分離度色譜系統(tǒng)的重復(fù)性：RSD≤2.0%色譜峰的拖尾因子d1為極大峰至峰前沿之間的距離。T應(yīng)在0.95～1.05之間。2021/10/1019三、色譜分析法高效液相色譜法測定法外標(biāo)法：一點法；兩點法；工作曲線法內(nèi)標(biāo)法2021/10/1020三、色譜分析法氣相色譜法檢測器、固定液及特殊指定的色譜柱材料不能更換對儀器的一般要求載氣色譜柱填料，柱管材質(zhì)，固定液檢測器種類，使用溫度進(jìn)樣方式系統(tǒng)適用性試驗測定法：多采用內(nèi)標(biāo)法2021/10/1021第二節(jié)樣品分析的前處理方法2021/10/1022樣品分析的前處理方法在分析含金屬或鹵素、氮、硫、磷等元素的有機(jī)藥物前，需進(jìn)行適當(dāng)?shù)乃幤非疤幚怼７诸惒唤?jīng)有機(jī)破壞的前處理方法經(jīng)有機(jī)破壞的前處理方法2021/10/1023樣品分析的前處理方法不經(jīng)有機(jī)破壞的前處理方法直接測定法——含金屬或C-M不牢固的有機(jī)金屬藥物配位滴定法氧化還原滴定法經(jīng)水解后測定法——鹵素聯(lián)脂肪碳鏈（溶于適當(dāng)溶劑再水解）堿水解后測定法酸水解后測定法經(jīng)氧化還原后測定法——鹵素聯(lián)芳環(huán)牢固（一般用于測碘）2021/10/1024樣品分析的前處理方法經(jīng)有機(jī)破壞的前處理方法濕法破壞硫酸-硫酸鹽法——凱氏定氮法硝酸-高氯酸法硝酸-硫酸法其它濕法干法破壞高溫?zé)胱品?/p>

氧瓶燃燒分解后測定法2021/10/1025經(jīng)有機(jī)破壞的前處理方法硫酸-硫酸鹽法——凱氏定氮法將含氮藥物與硫酸在凱氏定氮燒瓶中共熱，藥物分子中有機(jī)結(jié)構(gòu)被氧化分解（亦稱“消解”或“消化”）成二氧化碳和水，有機(jī)結(jié)合的氮則轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)氮，并與過量的硫酸結(jié)合為硫酸氫銨及硫酸銨，經(jīng)氫氧化鈉堿化后釋放出氮氣，并隨水蒸氣餾出，用硼酸溶液或定量的酸滴定液吸收后，再用酸或堿滴定液滴定。高溫?zé)胱品▽⒑郎y元素的有機(jī)藥物經(jīng)高溫灼燒灰化，使有機(jī)結(jié)構(gòu)分解而待測元素轉(zhuǎn)化為無機(jī)元素或可溶性無機(jī)鹽，以供分析。根據(jù)分析對象與目的不同，常加無水碳酸鈣、硝酸鎂、氫氧化鈣、氧化鋅等輔助灰化。氧瓶燃燒法2021/10/1026第三節(jié)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證2021/10/1027藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證方法驗證的目的需驗證的分析項目：鑒別試驗；雜質(zhì)定量或限度檢查；含量測定等驗證內(nèi)容：準(zhǔn)確度；精密度；專屬性；檢測限/定量限；線性及范圍；耐用性等2021/10/1028一、準(zhǔn)確度含量測定方法的準(zhǔn)確度原料藥的含量測定制劑的含量測定雜質(zhì)定量測定方法的準(zhǔn)確度使用雜質(zhì)對照品缺少雜質(zhì)對照品數(shù)據(jù)要求2021/10/1029二、精密度標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）與相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）驗證內(nèi)容重復(fù)性中間精密度重現(xiàn)性數(shù)據(jù)要求2021/10/1030三、專屬性鑒別反應(yīng)含量測定和雜質(zhì)測定陰性對照陽性對照純度測試2021/10/1031四、檢測限/定量限檢測限常用方法目視法：非儀器法信噪比法：色譜法標(biāo)準(zhǔn)偏差法：光譜法定量限：信噪比要求不同數(shù)據(jù)要求2021/10/1032五、線性及范圍線性回歸方程相關(guān)系數(shù)范圍原料藥和制劑含量測定制劑含量均勻度檢查溶出度或釋放度中的溶出量測定特殊元素含量測定雜質(zhì)測定2021/10/1033六、耐用性耐用性典型的變動因素被測溶液環(huán)境因素液相色譜法中典型因素氣相色譜法中典型因素2021/10/1034七、驗證內(nèi)容的選擇非定量分析方法定量分析方法微量定量分析方法2021/10/1035七、驗證內(nèi)容的選擇項目內(nèi)容鑒別元素或雜質(zhì)檢查含量測定及溶出量測定定量限度準(zhǔn)確度＋＋精密度＋

＋重復(fù)性＋＋中間精密度

＋①

＋①

專屬性②＋＋＋＋檢測限＋

－③＋－定量限＋－線性＋＋范