大黃真?zhèn)纹返蔫b定及在中藥指紋圖譜方面的研究進(jìn)展

大黃真?zhèn)纹返蔫b定及在中藥指紋圖譜方面的研究進(jìn)展第一頁(yè)，共三十一頁(yè)。大黃RadixetRhizomaRhei兩千多年前，大黃就作為我國(guó)特產(chǎn)的藥材而聞名于中外，成為國(guó)際性生藥。據(jù)記載：我國(guó)在公元前2700年已有大黃應(yīng)用。公元前114年已經(jīng)陜西運(yùn)往歐洲。馬可波羅（1250~1323年）旅游東方時(shí)記載：“中國(guó)涼州（今甘肅）產(chǎn)大黃甚豐”。17世紀(jì)英國(guó)所用大黃為中國(guó)經(jīng)印度運(yùn)往英國(guó)。1687~1762年間，俄國(guó)政府以中國(guó)大黃為專賣品，鑒別甚嚴(yán)，并以本品為主制訂了“莫斯科標(biāo)準(zhǔn)”，凡不適于該標(biāo)準(zhǔn)的盡行剔去。由上可見(jiàn)，大黃在歷史上就在歐洲享有盛譽(yù)。第二頁(yè)，共三十一頁(yè)。正品大黃符合藥用的大黃為蓼科植物掌葉大黃、唐古特大黃及藥用大黃的干燥根莖和根。

正品大黃的主要產(chǎn)地掌葉大黃主產(chǎn)于甘、青、藏、川等地，多為栽培。唐古特大黃主產(chǎn)于青、甘、藏、川等地，野生或栽培。藥用大黃主產(chǎn)于川、貴、云、鄂、陜等省，栽培或野生。前2種習(xí)稱“北大黃”，后者習(xí)稱“南大黃”。商品中以掌葉大黃產(chǎn)量大，唐古特大黃次之，藥用大黃較少。第三頁(yè)，共三十一頁(yè)。為多年生高大草本，根狀莖及根部肥厚，黃褐色。直立，粗大，中空。葉片掌狀半裂，每裂片具粗齒。圓錐花序頂生，分枝帖于莖，花小，紫紅色或帶紫紅色。果枝聚攏，瘦果具三棱。第四頁(yè)，共三十一頁(yè)。三種大黃的不同點(diǎn)：主要是葉片和花的區(qū)別掌葉大黃——葉片掌狀半裂，每裂片具粗齒，圓錐花序頂生，分枝帖于莖，花小，紫紅色或帶紫紅色。唐古特大黃——極似掌葉大黃，但其葉片掌狀深裂，裂片再分裂，裂片通常窄長(zhǎng)，呈三角狀披針形或窄線形（呈雞爪狀，故名雞爪大黃）。藥用大黃——與掌葉大黃相近，但本種葉片淺裂，（一般僅達(dá)1/4）淺裂片大齒形或?qū)捜切?，花較大，黃白色。唐古特大黃藥用大黃第五頁(yè)，共三十一頁(yè)。采收加工

選擇生長(zhǎng)3年以上的植物，在秋季上凍之前或春季大黃未發(fā)芽前采挖，除去泥土，切去莖或細(xì)根，刮去粗皮，橫切成段或片，縱切成瓣，加工成卵圓形或圓柱形進(jìn)行干燥。

曬黃—曬后發(fā)汗，再曬，反復(fù)進(jìn)行至干。

炕黃—微火炕成5至6成干，發(fā)汗，涼干。

陰黃—切片后用繩子穿起，掛在屋檐下通風(fēng)處陰干。第六頁(yè)，共三十一頁(yè)。中藥指紋圖譜的發(fā)展3近年來(lái)指紋圖譜在大黃上的一些研究進(jìn)展4總結(jié)5大黃真?zhèn)纹返蔫b定方法2大黃的作用和主要化學(xué)成分1第七頁(yè)，共三十一頁(yè)。大黃的作用大黃屬植物約60多種,以瀉下、健胃而著稱于世。大黃具有瀉熱通腸,涼血解毒,逐瘀通經(jīng)之功效，用于實(shí)熱便秘,積滯腹痛,瀉痢不爽,濕熱黃疸,目赤,咽腫,跌打損傷,外治水火燙傷等。隨著大黃藥理作用、臨床應(yīng)用研究的深入,發(fā)現(xiàn)大黃還具有抗腫瘤、保肝利膽、改善腎功能、活血止血、降血脂等多方面的作用。

第八頁(yè)，共三十一頁(yè)。蒽醌衍生物游離型：為抗菌成分。

大黃酸(rhein)、大黃素(emodin)、大黃酚(chrysophanol)、蘆薈大黃素、大黃素甲醚等。結(jié)合型：為主要瀉下成分。雙蒽酮甙：番瀉甙(sennoside)A、B、C、D。瀉下作用最強(qiáng)。游離蒽醌類的葡萄糖甙。具一定的瀉下作用。鞣質(zhì)類有沒(méi)食子酰葡萄糖、沒(méi)食子酸、d-兒茶素等。為收斂成分，具收斂止血的作用。尚含四種大黃酸甙(rheinosides)A、B、C、D。亦為瀉下成分。大黃主要化學(xué)成分第九頁(yè)，共三十一頁(yè)。2大黃真?zhèn)纹返蔫b定方法？

2.4.1橫切面▲2.4.2粉末▲2.1大黃來(lái)源的鑒定▲

2.2大黃性狀的鑒定▲2.3大黃理化鑒定▲2.4大黃顯微鑒定第十頁(yè)，共三十一頁(yè)。2.1大黃來(lái)源的鑒定2.1.1正品大黃，來(lái)源于蓼科植物屬于掌葉組的掌葉大黃、唐古特大黃或藥用大黃的干燥根及根莖。主產(chǎn)地在四川、青海、甘肅。大黃以個(gè)大，色黃而得名。2.1.2偽品大黃，主要來(lái)源于蓼科植物波葉組的河套大黃、華北大黃、藏邊大黃、天山大黃的干燥根及根莖。主產(chǎn)地在華北、新疆、西藏、青海。波葉組的偽品大黃產(chǎn)量最大，流散最廣，市面最常見(jiàn)。第十一頁(yè)，共三十一頁(yè)。藏邊大黃河套大黃華北大黃天山大黃▲第十二頁(yè)，共三十一頁(yè)。圓柱形、圓錐形、馬蹄形或不規(guī)則塊片狀

。表面黃棕色至紅棕色，除去外皮者可見(jiàn)類白色網(wǎng)狀紋理，俗稱“錦紋”。

斷面黃棕色；根莖髓部有星點(diǎn)（異型維管束），根形成層環(huán)明顯，木質(zhì)部發(fā)達(dá)，有放射狀紋理，無(wú)星點(diǎn)。氣清香，味苦澀，嚼之粘牙，有砂粒感，唾液染成黃色。

以質(zhì)堅(jiān)實(shí)、氣清香、味苦而微澀者為佳。性狀鑒定第十三頁(yè)，共三十一頁(yè)。皮部掌葉大黃橫向切斷面星點(diǎn)名詞術(shù)語(yǔ)：錦紋：指藥材表面或橫切面上類白色薄壁組織與紅棕色射線及星點(diǎn)交互排列形成的織錦狀紋理，習(xí)稱錦紋，如大黃。星點(diǎn)：指大黃根莖橫切面上髓部的異形維管束呈暗紅色的星芒狀小點(diǎn)，習(xí)稱星點(diǎn)?！谑捻?yè)，共三十一頁(yè)。理化鑒定熒光鑒別：藥材新鮮斷面，置日光下顯棕紅色棕黃色,紫外光燈（365nm）下觀察顯濃棕色熒光。粉末的稀乙醇（40%）浸出液，滴于濾紙上，再滴加稀乙醇擴(kuò)散后，呈黃色至淡棕色環(huán)，置紫外光燈下觀察，顯棕色至棕紅色熒光，微量升華：本品粉末少量，進(jìn)行微量升華，可見(jiàn)菱狀針晶或羽狀結(jié)晶，加堿顯紅色。（蒽醌類成分）▲第十五頁(yè)，共三十一頁(yè)。顯微鑒定根莖及橫切面：根木栓層及皮層大多已除去,偶有殘留韌皮部篩管群明顯,形成層環(huán)明顯,維管束外韌型,木質(zhì)部導(dǎo)管排列稀疏

根莖髓部寬廣,其中常見(jiàn)大形粘液腔,內(nèi)含紅棕色物質(zhì)異型維管束內(nèi)方為韌皮部,外方為木質(zhì)部,形成層環(huán)狀,射線呈星狀射出

薄壁組織中含淀粉粒及草酸鈣簇晶第十六頁(yè)，共三十一頁(yè)。第十七頁(yè)，共三十一頁(yè)?！谑隧?yè)，共三十一頁(yè)。粉末特征：粉末呈黃棕色，草酸鈣簇晶20一160μm，棱角多短鈍。具有緣紋孔、環(huán)紋、螺紋及網(wǎng)紋導(dǎo)管

淀粉粒眾多，單粒圓球形、長(zhǎng)圓形，臍點(diǎn)大多星狀。第十九頁(yè)，共三十一頁(yè)。附注正品大黃偽品大黃來(lái)源掌葉大黃、唐古特大黃、藥用大黃藏邊大黃、河套大黃、華北大黃、天山大黃等植物形態(tài)葉緣平坦不皺，葉片掌狀淺裂至深裂葉緣具不同程度的皺波，葉片完整不裂藥材性狀直徑可達(dá)10cm或更大，根莖橫切面髓部有星點(diǎn)，氣清香直徑一般不超過(guò)5cm，根莖橫切面髓部無(wú)星點(diǎn)，無(wú)大黃清香氣。商品中根的比例很大主要成分主含結(jié)合性蒽醌衍生物，不含土大黃苷主含土大黃苷，僅含痕量的結(jié)合性蒽醌衍生物熒光棕色至棕紅色熒光，不顯亮紫色熒光顯持久的亮紫色熒光功效有瀉下作用無(wú)瀉下作用第二十頁(yè)，共三十一頁(yè)。1.ONE2.TWO3.THREE

中藥指紋圖譜的起源中藥指紋圖譜的特點(diǎn)中藥指紋圖譜的常用研究方法3中藥指紋圖譜的發(fā)展第二十一頁(yè)，共三十一頁(yè)。3.1中藥指紋圖譜的起源現(xiàn)代“指紋”鑒定始于19世紀(jì)末20世紀(jì)初的犯罪學(xué)和法醫(yī)學(xué)。每人手指上都有指紋,但人與人之間的指紋都是不同的。這種“惟一”的指紋就形成了可以據(jù)以鑒別每個(gè)人的特征。同樣,每一味中藥的特性也千差萬(wàn)別。借助計(jì)算機(jī)和現(xiàn)代分析技術(shù),將每一味中藥的特性采用圖譜的形式描繪出來(lái),使每味中藥都擁有如人的指紋一樣的標(biāo)準(zhǔn)圖譜,這就是中藥指紋圖譜。第二十二頁(yè)，共三十一頁(yè)。3.2中藥指紋圖譜的特點(diǎn)中藥指紋圖譜有兩個(gè)特點(diǎn):一是通過(guò)指紋圖譜的特征性,能有效鑒別樣品的真?zhèn)位虍a(chǎn)地二是通過(guò)指紋圖譜主要特征峰的面積或比例的制定,能有效控制產(chǎn)品的質(zhì)量,確保產(chǎn)品質(zhì)量的相對(duì)一致。

第二十三頁(yè)，共三十一頁(yè)。3.3中藥指紋圖譜的常用研究方法常用的研究方法有：①色譜法:包括傳統(tǒng)的薄層色譜法、液相色譜法、氣相色譜法、高效毛細(xì)管電泳法等②光譜法:包括紫外光譜法、紅外光譜法、近紅外光譜法③其它方法:如X射線衍射法、核磁共振法等等第二十四頁(yè)，共三十一頁(yè)。4近年來(lái)指紋圖譜在大黃上的一些研究進(jìn)展2002年，秦晨，段玉萍，薛海晨等采用高效液相色譜-指紋圖譜法分析并比較了7種大黃的化學(xué)成分間的差異，繪制了條形圖和檢索表。2003年，楊美華，張大明，劉建全等用RAPD方法對(duì)正品和偽品大黃進(jìn)行指紋圖譜的研究,為正品和偽品大黃的基原鑒定提供分子依據(jù)，分別得到了2個(gè)具有正品大黃的特征性條帶的引物。陳斌，蔡寶昌，潘揚(yáng)等應(yīng)用RP-HPLC(DAD)對(duì)不同產(chǎn)地掌葉大黃藥材進(jìn)行指紋圖譜比較，建立了HPLC指紋圖譜共有模式,并對(duì)其他產(chǎn)地藥材進(jìn)行了相似度比較，對(duì)大黃藥材中各成分均得到很好分離,可作為大黃藥材的具有專屬性的指紋圖譜。第二十五頁(yè)，共三十一頁(yè)。2004年，拉本，謝錕，胡成西采用粉末X-射線衍射Fourier譜分析方法，首次對(duì)青藏高原名貴中藥大黃進(jìn)行分析，獲得了大黃的標(biāo)準(zhǔn)X-射線衍射Fourier譜及特征標(biāo)準(zhǔn)峰值。2005年，湯彥豐,張卓勇,范國(guó)強(qiáng)利用紅外光譜與高木-關(guān)野模糊系統(tǒng)相結(jié)合,鑒別52種大黃樣品,其中包括25個(gè)正品大黃和27個(gè)非正品大黃的樣品。利用紅外光譜與高木-關(guān)野模糊邏輯系統(tǒng)相結(jié)合進(jìn)行中藥大黃的鑒別,紅外光譜可以無(wú)損大黃樣品,在優(yōu)化的條件下用該方法對(duì)大黃樣品的鑒別正確率達(dá)到98%。這種方法可被用于含大黃中藥生產(chǎn)的質(zhì)量控制。

第二十六頁(yè)，共三十一頁(yè)。2007年，逯海龍，吳媛媛，韓義欣等對(duì)藥典正品大黃與河套大黃進(jìn)行乙醇提取物的紫外光譜與薄層色譜鑒定，結(jié)果藥典正品大黃與河套大黃的紫外光譜與薄層色譜均有一定差異，說(shuō)明了利用紫外光譜法與薄層色譜鑒別均可將藥典品大黃與河套大黃區(qū)別開(kāi)來(lái)。2008年，陳大霞,李隆云,鐘國(guó)躍等以12個(gè)不同來(lái)源地的大黃為材料,通過(guò)SRAP分析,利用TREECONW軟件分析遺傳相似系數(shù),UPGMA方法聚類,構(gòu)建親緣關(guān)系系統(tǒng)圖。

第二十七頁(yè)，共三十一頁(yè)。1近年來(lái)由于藥量增加，野生大黃逐漸減少，種植栽培的大黃不能滿足需求，市面上陸續(xù)出現(xiàn)過(guò)多的華北大黃、河套大黃、藏邊大黃、天山大黃的根，偽充大黃的情況。偽品藏邊大黃藏醫(yī)用于治療胃腸炎癥，無(wú)瀉下作用;河套大黃瀉下作用很差，并有致腹痛作用。所以很好的掌握大黃真?zhèn)纹返蔫b定技術(shù)是十分重要的。

5總結(jié)第二十八頁(yè)，共三十一頁(yè)。2隨著科技的不斷進(jìn)步，中藥指紋圖譜的研究充分吸取了色譜學(xué)、波譜學(xué)、基因芯片技術(shù)、現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)、化學(xué)、數(shù)學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)等領(lǐng)域內(nèi)的研究成果和成就。同時(shí)計(jì)算機(jī)信息處理技術(shù)及儀器分析技術(shù)的迅速發(fā)展,各種技術(shù)的科學(xué)性、準(zhǔn)確性和靈敏度的提高,使現(xiàn)代分析技術(shù)在中藥指紋圖譜研究中的應(yīng)用更加廣泛,這些特點(diǎn)，我們可以從上面近年來(lái)大黃指紋圖譜的的研究進(jìn)展中看出。第二十九頁(yè)，共三十一頁(yè)。3建立中藥指紋圖譜,目前在技術(shù)上是完全可行的,但是在實(shí)際應(yīng)用中,還面臨許多問(wèn)題,如:中藥來(lái)源的混亂、無(wú)序,產(chǎn)地、采制、加工方法的差異,基礎(chǔ)研究的片面化、低水平重復(fù)等，這些不足對(duì)于綜合評(píng)價(jià)植物藥及其制劑的內(nèi)在質(zhì)量均具有一定的局限性，也為我們今后的研究提供了一定得發(fā)展空間。第三十頁(yè)，共三十一頁(yè)。內(nèi)容總結(jié)大黃真?zhèn)纹返蔫b定及在中藥指紋圖譜方面的研究進(jìn)展。大黃真?zhèn)纹返蔫b定及在中藥指紋圖譜方面的研究進(jìn)展。馬可波羅（1250~1323年）旅游東方時(shí)記