批內(nèi)重復(fù)性試驗(yàn)

摘要目的：掌握重復(fù)性試驗(yàn)的原理、方法和操作，并熟悉和掌握分光光度計(jì)的使用方法，并測定、計(jì)算雙縮脲法的SD和CV。方法：重復(fù)性方法。標(biāo)準(zhǔn)管法測物質(zhì)含量的方法。結(jié)果：學(xué)會了重復(fù)性試驗(yàn)的操作，標(biāo)準(zhǔn)蛋白管的均值是0.070，測定的雙縮脲法的SD的值是1.74，CV的值是4.43。結(jié)論：能夠按照正確的方法操作重復(fù)性實(shí)驗(yàn)，并測定出雙縮脲法血清總蛋白量的SD和CV。英文翻譯AbstractMastertheprinciple,operation,andcalculationofwithinbatchrepeatability，andFamiliarwithandmastertheuseoftheSpectrophotometer,Determineandcalculatethestandarddeviation(SD)andcoefficientofvariation(CV)ofbiuretmethodMethodsRepetitivemethod,Standardtubemethodtomeasurethematerialcontent.ResultLearntheknowledgeofthetestofwithinbatchrepeatability，andcalculatethestandarddeviation(SD)is,1.74,andcoefficientofvariation(CV)is4.43.ConclusionWecanusethecorrectwaytomastertherepeatabilityoftestoperation,andwedeterminedandcalculatethestandarddeviation(SD)andcoefficientofvariation(CV).關(guān)鍵詞：重復(fù)性變異系數(shù)樣本標(biāo)準(zhǔn)差前言批內(nèi)重復(fù)性試驗(yàn)是指相同條件下，用同樣方法、同一試劑和標(biāo)準(zhǔn)品、同一儀器、同一實(shí)驗(yàn)室由同一人，在盡可能短的時間對同一份樣品做20次以上重復(fù)測定，以獲得批內(nèi)精密度的試驗(yàn)方法，其結(jié)果能夠反映各次測定結(jié)果相互接近的程度，可用于客觀評估某種分析方法隨機(jī)誤差的大小.材料和方法1.1材料60g/L蛋白標(biāo)準(zhǔn)液、待測樣品、雙縮脲試劑、可見光分光光度計(jì)、試管、燒杯、比色杯、吸耳球、移液管1.2方法(操作過程)1.2.1取出雙縮脲試劑放置于桌上，取出24支試管，分別標(biāo)記空白管1支，標(biāo)準(zhǔn)管3支，重復(fù)測定管20支，需要24管共72ml的雙縮脲試劑。加入物（ml）試劑空白管標(biāo)準(zhǔn)管X3測定管X20蒸餾水0.0660g/L蛋白標(biāo)準(zhǔn)液0.06待測樣品0.06雙縮脲試劑3331.2.2渦旋混勻后，37^保溫10分鐘，波長540nm比色，蒸餾水調(diào)零，測定各管吸光度。1.2.3計(jì)算待測樣品蛋白含量，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)差S和變異系數(shù)CV值。2、結(jié)果用公式SD=(￡Si2)%,Si2=￡(Xi-x)2/n-1,和CV%=(SD：x)X100標(biāo)準(zhǔn)管樣品樣品吸光值樣本蛋吸光值吸光值均值白含量標(biāo)準(zhǔn)管0.0720.0940.09240.09均值SD均數(shù)CV0.0690.08536.26 0.070 1.7439.354.430.0700.08837.540.10243.51標(biāo)準(zhǔn)管SD0.09339.670.00150.09640.950.09239.24標(biāo)準(zhǔn)管CV0.09540.522.170.08636.680.08937.960.09540.520.09339.670.08937.960.09339.670.09138.820.09640.950.08737.110.09640.950.09239.240.09339.673、討論3.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論3.1.1結(jié)果有點(diǎn)偏高，可能是試劑問題，和加樣槍的槍頭已經(jīng)老化，導(dǎo)致封密性不強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)誤差大.3.1.2.因?yàn)椴糠滞瑢W(xué)為省時間都沒有潤洗比色杯，造成所測得的波長值偏大。3.2實(shí)驗(yàn)心得:做重復(fù)實(shí)驗(yàn)檢測的樣品一定要穩(wěn)定性強(qiáng)，它的基體組成成分應(yīng)盡可能相似于實(shí)際檢測的病人標(biāo)本。假如采用冰凍保存的樣品一定要注意內(nèi)含分析物的穩(wěn)定，要嚴(yán)格控制凍融、混勻的操作。要嚴(yán)格控制每次取溶凍干品時使用的溶液的質(zhì)量、開瓶的小心謹(jǐn)慎、加液的準(zhǔn)確性、使凍干塊浸潤并復(fù)溶的時間、以及混勻的操作手法等等。以后在實(shí)際工作中，實(shí)驗(yàn)時按照廠商操作規(guī)程要求做好儀器校準(zhǔn)，并且一定要和實(shí)驗(yàn)樣品一起做質(zhì)量控制，進(jìn)行質(zhì)量控制說明操作運(yùn)行是否正常，是實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可否用來評估檢測系統(tǒng)不精密度的依據(jù)，質(zhì)量控制結(jié)果不好，實(shí)驗(yàn)必須重做。收集實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)后，要計(jì)算均值和標(biāo)準(zhǔn)差，變異系數(shù)，并且從允許誤差表中查閱評價(jià)的該項(xiàng)目允許誤差范圍。4、 方法學(xué)評價(jià)重復(fù)性實(shí)驗(yàn)冊是要求同一操作人員，在同一實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，使用同一儀器，并在短期內(nèi)，對相同試樣所作多個單次測試結(jié)果，在95%概率水平兩個獨(dú)立測試結(jié)果的最大差值。它必須滿足相同的測量環(huán)境、相同的測量儀器及在相同的條件下使用、相同的位置和在短時間內(nèi)的重復(fù)，要求的嚴(yán)格，且實(shí)驗(yàn)中容易受到技術(shù)人員的素質(zhì)、儀器的性能以及對各種影響量的監(jiān)控，在臨床上運(yùn)用還是比較廣泛的。5、 臨床意義重復(fù)性實(shí)驗(yàn)可以用于方法學(xué)評價(jià)、方法間的比較、儀器性能評估、試劑質(zhì)量驗(yàn)證和檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性。參考文獻(xiàn)劉新光，臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].第一版.高等教育出版社，2006；111-113.鄢盛愷，莊俊華，劉福成