動(dòng)物疫病防控與食品安全講義

王紅寧四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院動(dòng)物疫病防控與食品安全四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物疫病防控與食品安全目前一頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)主要內(nèi)容一、動(dòng)物疫病防控與食品安全研究背景二、我們的重要研究進(jìn)展為食品安全提供技術(shù)支持目前二頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)一、動(dòng)物疫病防控與食品安全研究背景2010年我國(guó)肉類、蛋類和奶類產(chǎn)量將分別達(dá)到8,600萬(wàn)噸、3,000萬(wàn)噸和4,200萬(wàn)噸,飼料產(chǎn)量13,100萬(wàn)噸,產(chǎn)值3000億元人民幣，豬約900億元(出欄6億頭),家禽約500億元（100億只）。四川豬總產(chǎn)量占全國(guó)10%,居全國(guó)第一位,家禽居全國(guó)第六位，我國(guó)畜牧業(yè)總產(chǎn)值占農(nóng)業(yè)總產(chǎn)值的40%,四川已超過(guò)50%。動(dòng)物疫病引起的經(jīng)濟(jì)損失約占總產(chǎn)值的20%，300億元以上。目前三頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)重大食品安全事件1988年上海，貝類，甲肝。短短一個(gè)月里，有30多萬(wàn)人感染，其中11人死亡。1996年歐洲，牛肉，瘋牛病。90人死于該病，歐盟在1996年財(cái)政年度向各成員國(guó)總共提供高達(dá)17.796億美元的巨額補(bǔ)貼。宰殺了63.2萬(wàn)頭牛。

1999年中國(guó)香港，禽流感，殺雞11萬(wàn)只，共發(fā)現(xiàn)23例人類禽流感患者,其中20例為H5N1型高致病禽流感，3例為H9N2型。有7例死亡,均為H5N1型。1999年，比利時(shí)、荷蘭、法國(guó)、德國(guó)，二惡英污染導(dǎo)致畜禽類產(chǎn)品及乳制品含高濃度惡英的事件，事件造成的直接損失達(dá)3.55億歐元，如果加上與此關(guān)聯(lián)的食品工業(yè)，損失超過(guò)10億歐元。2000年英國(guó)、法國(guó)，口蹄疫，造成630萬(wàn)頭動(dòng)物被殺。造成直接經(jīng)濟(jì)損失4億美元，間接損失超過(guò)36.5億美元。2004年中國(guó)，SARS暴發(fā)流行，嚴(yán)重威脅人民的生命，北京市消耗費(fèi)用達(dá)20多億元人民幣，據(jù)估計(jì)全世界損失達(dá)300多億美元。2005年四川豬鏈球菌病，累計(jì)報(bào)告人感染豬鏈球菌病例204例，其中死亡38人目前四頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)2005年上海肯德雞蘇丹紅2006年大閘蟹呋喃藥物殘留2006年北京鴨蛋檢出蘇丹紅2006年多寶魚呋喃藥物殘留、孔雀石綠2007年思念湯圓金黃色葡萄球菌超標(biāo)2008年中國(guó)，三鹿奶粉“三聚氰胺”事件，導(dǎo)致數(shù)以萬(wàn)計(jì)的“腎結(jié)石寶寶”，引起整個(gè)乳制品行業(yè)的混亂，嚴(yán)重影響了國(guó)家的聲譽(yù)。2008年中國(guó)香港，禽流感再襲，撲殺疫區(qū)內(nèi)兩個(gè)雞場(chǎng)及長(zhǎng)沙灣家禽批發(fā)市場(chǎng)共約九萬(wàn)只活雞。2009年1月5日北京確診一例人感染高致病性禽流感，這是2009年中國(guó)首例病例。2010美國(guó)沙門氏菌雞蛋，2000人感染發(fā)病2011年5月份德國(guó)爆發(fā)了大規(guī)模的大腸桿菌疫情，并蔓延至歐洲以及北美地區(qū)。葫蘆巴種子、銷毀。2012“毒膠囊”地溝油................................................目前五頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)食品安全？？？？動(dòng)物疫病60%微生物、寄生蟲、生物毒素等生物污染違禁藥物5%藥物殘留20%農(nóng)藥與獸藥殘留

15%環(huán)境污染：無(wú)機(jī)污染物如汞、鎘、鉛等，有機(jī)污染物中的二惡英、多環(huán)芳烴、多氯聯(lián)苯等

目前六頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)人畜共患病禽流感，豬鏈球菌病、口蹄疫、乙型腦炎、包蟲病對(duì)畜牧業(yè)生產(chǎn)和人類生活影響巨大。受到了國(guó)家的極大關(guān)注，目前七頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)H1NIA型流感病毒，包含有禽流感、豬流感和人流感三種流感病毒的基因片斷，同時(shí)擁有亞洲豬流感和非洲豬流感病毒特征。H1N1流感病毒是禽流感和人類流感經(jīng)過(guò)“洗牌效應(yīng)”產(chǎn)生的新病毒。

禽流感全世界各種家禽和野生禽類中，已分離出上千株禽流感病毒。97年出現(xiàn)在香港的致人感染發(fā)病甚至死亡的H5N1毒株,

目前八頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)

——1992年，新疆托里縣某連官兵，食用了一頭自養(yǎng)的病仔豬肉及內(nèi)臟后，導(dǎo)致了以胃腸道癥狀為主的集體食物中毒，經(jīng)證實(shí)為鏈球菌所致?！?995年，首例鑒定證實(shí)Ⅱ型豬鏈球菌在我國(guó)存在?！?998年7-8月，江蘇省海安、泰興、通州等地25人感染人豬鏈球菌病，14人死亡。8萬(wàn)多生豬發(fā)病死亡?！?000年4月，岐山縣種豬繁育場(chǎng)仔豬流行關(guān)節(jié)炎及敗血癥，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室分離鑒定證實(shí)為Ⅱ型豬鏈球菌?！髞?lái)，上海、浙江、湖南、湖北、北京、廣東及東北均有報(bào)道?！?005年四川資陽(yáng)發(fā)生豬鏈球菌疫情，死亡生豬近千頭，205人感染、37人死亡。豬鏈球菌病目前九頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)防治措施1、不屠宰、不加工、不經(jīng)營(yíng)、不售購(gòu)、不食用，病死豬肉。2、根據(jù)當(dāng)?shù)刎i病流行的主要菌株，選擇針對(duì)性的菌苗，豬鏈球菌Ⅱ型滅活苗。半月內(nèi)注兩次，保護(hù)期4個(gè)月。3、抗生素青霉素、金霉素、紅霉素、先鋒霉素等有效,可以根據(jù)藥敏實(shí)驗(yàn)選擇敏感藥物。4、用5～10％石灰乳，1～2％燒堿，1%有效氯，0.5%過(guò)氧乙酸等進(jìn)行噴灑或擦拭消毒。目前十頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)口蹄疫病毒粒子空氣、污染物空氣污染物口蹄疫病毒傳播目前十一頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)乙型腦炎傳播目前十二頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)包蟲病傳播目前十三頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)2010年5月開始，美國(guó)2000多人感染沙門氏菌，藥物治療效果不好，F(xiàn)DA最終確定是因?yàn)槭秤昧烁腥旧抽T氏菌的雞蛋引起的，美國(guó)召回5.5億枚問(wèn)題雞蛋，造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，和不良社會(huì)影響。沙門氏菌的感染和耐藥性問(wèn)題受到關(guān)注！目前十四頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)食品安全保障措施1、建立統(tǒng)一、高效的食品安全管理機(jī)構(gòu)。進(jìn)一步調(diào)整食品安全監(jiān)管體制，理順和明晰各部門監(jiān)管職能。在目前食品安全分段監(jiān)管的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步壓縮監(jiān)管部門數(shù)量，合并監(jiān)管職能。按照“從田野到餐桌”的食物鏈再造食品安全管理流程，組建相對(duì)獨(dú)立的食品安全機(jī)構(gòu)，實(shí)行項(xiàng)目制與全流程管理模式。對(duì)從原材料、生產(chǎn)、包裝、標(biāo)識(shí)到流通、銷售的每一個(gè)節(jié)點(diǎn)進(jìn)行控制，建立食品安全每個(gè)環(huán)節(jié)的記錄、追蹤體系，確保產(chǎn)品質(zhì)量可控性及責(zé)任的可追溯性。目前十五頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)2、《食品安全法》、多部法律、法規(guī)相互補(bǔ)充來(lái)對(duì)食品安全的不同方面進(jìn)行規(guī)范管理。

3、切實(shí)強(qiáng)化企業(yè)的主體責(zé)任，國(guó)家應(yīng)盡快制定全國(guó)統(tǒng)一的食品衛(wèi)生、產(chǎn)品質(zhì)量和安全標(biāo)準(zhǔn)及全國(guó)統(tǒng)一檢驗(yàn)方法的標(biāo)準(zhǔn)。4、加強(qiáng)食品生產(chǎn)全過(guò)程的安全控制技術(shù)研究與示范推廣目前十六頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)四川大學(xué)動(dòng)物疫病防控與食品安全四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室一、病毒基因工程疫苗研究二、動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性研究進(jìn)展三、不同品種豬腸道微生物多樣性研究進(jìn)展四、動(dòng)物病原流行病學(xué)調(diào)查研究五、抗病的地方特有品種資源研究六、食品生產(chǎn)過(guò)程安全控制技術(shù)研究目前十七頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)國(guó)家“863”高科技發(fā)展計(jì)劃重大課題項(xiàng)目“家禽重要病毒病基因工程疫苗研究和創(chuàng)制”

國(guó)家自然科學(xué)基金：禽冠狀病毒（IBV）H120，M41、SAIBK株反向遺傳操作和毒力相關(guān)基因研究一、病毒基因工程疫苗研究目前十八頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)國(guó)家科學(xué)技術(shù)進(jìn)步獎(jiǎng)申報(bào)材料主要完成人：主要完成單位：

王紅寧等四川大學(xué)、重慶大學(xué)、天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司、洛陽(yáng)惠中獸藥有限公司、中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)豬雞病原細(xì)菌耐藥性研究及其在安全高效新獸藥研制中的應(yīng)用二、動(dòng)物源細(xì)菌耐藥性研究進(jìn)展目前十九頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)通過(guò)對(duì)豬雞病原細(xì)菌耐藥基因研究發(fā)現(xiàn)了6種新耐藥基因（注冊(cè)48條）創(chuàng)新基因芯片等5種分子檢測(cè)方法研制耐藥快速多重PCR檢測(cè)試劑盒5個(gè)建立了14萬(wàn)條耐藥數(shù)據(jù)庫(kù)

實(shí)現(xiàn)檢測(cè)的準(zhǔn)確、快速和傳播評(píng)價(jià)創(chuàng)新點(diǎn)1目前二十頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)揭示了我國(guó)規(guī)?；i雞養(yǎng)殖場(chǎng)病原菌感染及耐藥性變化基本規(guī)律制定了“豬雞安全用藥規(guī)范”等地方標(biāo)準(zhǔn)3個(gè)

為新獸藥研制和使用提供了科學(xué)依據(jù)創(chuàng)新點(diǎn)2目前二十一頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)創(chuàng)新點(diǎn)3基于耐藥性檢測(cè)方法和變化規(guī)律開發(fā)了系列產(chǎn)品動(dòng)物專用抗生素原料藥3個(gè)抗生素新制劑4個(gè)非抗生素免疫增強(qiáng)劑4種新型消毒劑1種解決抗生素人畜共用、產(chǎn)品工藝落后、生物利用率低和產(chǎn)品藥物殘留等問(wèn)題目前二十二頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)

腸道微生物特點(diǎn)種類繁多，數(shù)量龐大：約有30個(gè)屬500多種，近1014個(gè)活細(xì)菌功能復(fù)雜：促進(jìn)新陳代謝、免疫激活、生長(zhǎng)發(fā)育等80%以上為厭氧菌，多數(shù)不可培養(yǎng)三、不同品種豬腸道微生物多樣性研究進(jìn)展目前二十三頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)Eckburg等(2005)，Gill等(2006)，Ley等(2008)，Neish等(2009)等相繼在《Science》上發(fā)表了有關(guān)于人腸道微生物多樣性及功能研究的成果。

目前二十四頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)1、豬腸道微生物DNA提取方法研究2、DGGE、16SrDNA克隆文庫(kù)及DNA指紋圖譜分析對(duì)相同條件下榮昌豬（純系，B系，CB系）、長(zhǎng)白、杜洛克豬腸道微生物多樣性研究3、DGGE、16SrDNA克隆文庫(kù)及DNA指紋圖譜分析對(duì)相同飼養(yǎng)條件下8個(gè)不同品種豬腸道微生物DNA指紋圖譜及多樣性分析4、DGGE、16SrDNA克隆文庫(kù)及DNA指紋圖譜分析對(duì)不同海拔藏豬腸道菌多樣性研究研究?jī)?nèi)容目前二十五頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)大部分榮昌豬腸道細(xì)菌為不可培養(yǎng)的細(xì)菌種類，且約50%的克隆序列與GenBank中已有序列的相似性小于97%，表明這些序列相對(duì)應(yīng)于一個(gè)新的或未識(shí)別的菌種或?qū)?。梭菌?Clostridia)是榮昌豬腸道的絕對(duì)優(yōu)勢(shì)菌，其次是Bacilli和Lactobacillales；這些細(xì)菌都為腸道益生菌，對(duì)腸道中潛在有害菌具有控制作用。在同一生存環(huán)境和相同飼料條件下，榮昌豬不同品系（純系，B系，CB系）腸道微生物具有明顯的差異，豬腸道微生物區(qū)系具有明顯的品種特異性。小結(jié)目前二十六頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)1.在同一生存環(huán)境和相同飼料條件下，8個(gè)不同品種豬（成華豬、大約克、杜洛克、長(zhǎng)白、PIC、托佩克、內(nèi)江豬和藏豬）糞樣菌群結(jié)構(gòu)和多樣性具有明顯的差異，豬腸道微生物區(qū)系具有明顯的品種特異性。2.部分DGGE圖譜條帶的序列比對(duì)和系統(tǒng)發(fā)育分析表明，8個(gè)不同品種和不同海拔豬的腸道菌群主要由厚壁菌門（Firmieutes)、擬桿菌門（Baeteroidetes)、變形菌門（Proteobaeteria）和螺旋體門（Spirochaetes）組成；其中，不可培養(yǎng)菌是豬腸道的主要微生物。小結(jié)目前二十七頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)小結(jié)生活在理塘（4100m）、稻城（3700m）、甘孜（3400m）、爐霍（3200m）、鄉(xiāng)城（2900m）、康定（2600m）、得榮（2400m）和成都（400m）不同海拔藏豬腸道微生物組成和豐度存在明顯的差異，說(shuō)明藏豬腸道微生物的結(jié)構(gòu)及豐度受高原環(huán)境的影響。飼養(yǎng)條件、海拔等對(duì)腸道微生物的結(jié)構(gòu)組成起到次要作用，但會(huì)引起腸道優(yōu)勢(shì)微生物物種的變化。同一品種在不同飼養(yǎng)條件下條帶差異較小。豬腸道微生物組成主要由豬的遺傳因素即豬的品種決定；不同品種之間組成差異明顯。目前二十八頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)技術(shù)路線實(shí)驗(yàn)豬分組抗生素的投用樣品采集細(xì)菌計(jì)數(shù)耐藥性動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)材料方法規(guī)模化豬場(chǎng)健康豬群藥物組（頭孢噻呋鈉、丁胺卡那霉素，乳酸環(huán)丙沙星），對(duì)照組新鮮豬糞便樣品，采樣時(shí)間表平板計(jì)數(shù)瓊脂（PCA），Pfrier腸球菌選擇培養(yǎng)基，伊紅美蘭瓊脂可培養(yǎng)指標(biāo)菌的純化與PCR鑒定樣品預(yù)處理抗生素的MICs測(cè)定投藥與停藥周期抗生素使用后豬腸道菌變化研究目前二十九頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)1.通過(guò)對(duì)可培養(yǎng)指標(biāo)菌計(jì)數(shù),分析了3種抗生素（頭孢噻呋鈉、丁胺卡那霉素和乳酸環(huán)丙沙星）使用對(duì)細(xì)菌菌數(shù)量的影響，其中頭孢噻呋鈉使用后豬腸球菌數(shù)量顯著增高。2.耐藥性研究表明規(guī)?；i場(chǎng)使用頭孢噻呋鈉、丁胺卡那霉素和乳酸環(huán)丙沙星進(jìn)行治療和預(yù)防時(shí)，連續(xù)用藥最好應(yīng)控制在3天以內(nèi)，超過(guò)3天就能引起高水平耐藥產(chǎn)生。另外，耐藥性的恢復(fù)逆轉(zhuǎn)很慢，豬場(chǎng)在投藥后需經(jīng)過(guò)一個(gè)月時(shí)間才能再次使用同種藥物進(jìn)行治療，否則很可能繼續(xù)加重該種藥物耐藥性，降低治療效果。小結(jié)目前三十頁(yè)\總數(shù)三十五頁(yè)\編于十二點(diǎn)四、動(dòng)物病原流行病學(xué)調(diào)查研究

目前三