微生物課件（老師版） 第7章 腸桿菌科

第七章

腸桿菌科精氨酸水解酶尿酶β-半乳糖苷酶賴氨酸脫梭酶鳥氨酸脫羧酶色氨酸脫氨酶VP試驗(yàn)吲哚試驗(yàn)H2S試驗(yàn)枸櫞酸鹽利用1腸桿菌科腸桿菌科概述種類繁多，G-桿菌，有44個屬，170多個種。常寄居在人和動物的腸道內(nèi)，大多數(shù)是正常菌群。引起人類95％以上感染的菌種卻不到20個。腸桿菌科：埃希菌屬、志賀菌屬、沙門菌屬、克雷伯菌屬、變形桿菌屬、枸櫞酸桿菌屬、腸桿菌屬、沙雷菌屬等。2腸桿菌科

腸桿菌科的致病菌

①致病菌：如傷寒沙門菌、志賀菌、鼠疫耶爾森菌等；

②機(jī)會致病菌：一部分細(xì)菌屬于正常菌群，但當(dāng)宿主免疫力降低或細(xì)菌移位至腸道以外部位時，即可引起機(jī)會性感染，如大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇異變形桿菌等；

③正常菌群轉(zhuǎn)變?yōu)橹虏【喝缫鹞改c炎的大腸埃希菌，由于獲得位于質(zhì)粒、噬菌體或毒力島上的毒力因子基因后而成為致病菌。

3腸桿菌科腸桿菌科共同特性（1）形態(tài)與染色中等大小、兩端鈍圓的G-桿菌，無芽胞，多數(shù)有鞭毛大多有菌毛少數(shù)有莢膜。4腸桿菌科腸桿菌科共同特性（2）培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧菌普通培養(yǎng)基生長良好，中等大小的光滑型菌落有些菌在血瓊平板上出現(xiàn)β型溶血液體培養(yǎng)呈均勻混濁生長5腸桿菌科SS平板乳糖發(fā)酵試驗(yàn)在初步鑒別腸道致病菌和非致病菌時有重要意義。病原菌一般不分解乳糖。6腸桿菌科混合細(xì)菌在SS平板中性紅酸性-紅色堿性-黃色7腸桿菌科中國藍(lán)平板中國蘭酸性－蘭色堿性－紅色8腸桿菌科在麥康基培養(yǎng)基上培養(yǎng)的大腸埃希桿菌產(chǎn)生粉紅色乳糖發(fā)酵菌落。麥康基培養(yǎng)基是腸道細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基，含膽鹽、乳糖和pH指示劑中性紅。發(fā)酵乳糖菌落產(chǎn)生酸，將指示劑變紅。（麥康基瓊脂，18h，37℃）中性紅酸性-紅色堿性-黃色9腸桿菌科腸桿菌科共同特性

（3）生化反應(yīng)：活潑。

乳糖發(fā)酵試驗(yàn)在初步鑒別腸道致病和非致病菌時有重要意義。

精氨酸水解酶尿酶β-半乳糖苷酶賴氨酸脫梭酶鳥氨酸脫羧酶色氨酸脫氨酶VP試驗(yàn)吲哚試驗(yàn)H2S試驗(yàn)枸櫞酸鹽利用10腸桿菌科腸道桿菌生化反應(yīng)

乳糖葡萄糖動力硫化氫尿素酶大腸桿菌+--痢疾桿菌-+-

--傷寒桿菌-+++/--副傷寒桿菌-++-變形桿菌-+++11腸桿菌科api-10S低成本、簡單、易用12項(xiàng)生化反應(yīng)結(jié)果鑒定49種臨床常見G-桿菌12345678910111212腸桿菌科（4）抗原結(jié)構(gòu)Ｏ抗原（菌體）：位于LPS層，屬、種特異性，失去后產(chǎn)生Ｓ-Ｒ變異。刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM抗體。Ｈ抗原（鞭毛）：位于鞭毛蛋白，失去后運(yùn)動消失，Ｏ外露（Ｈ-Ｏ變異）。刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG抗體。Ｋ抗原（莢膜）：位于Ｏ抗原外圍，阻止Ｏ凝集。13腸桿菌科

抗原構(gòu)造復(fù)雜

鞭毛抗原（H）菌體抗原（O）K或Vi抗原14腸桿菌科腸桿菌科共同特性（5）抵抗力：不強(qiáng)，60℃，30min死亡。膽鹽、煌綠等對大腸桿菌等非致病菌有選擇性作用，可制備腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基以分離腸道致病菌。15腸桿菌科（6）變異：易變異。最常見的是耐藥性轉(zhuǎn)移、毒素產(chǎn)生和生化反應(yīng)等的改變。溶源性轉(zhuǎn)換生化反應(yīng)性變異通過引起耐藥性變異毒力性變異轉(zhuǎn)導(dǎo)接合16腸桿菌科腸桿菌科共同特性（7）傳播方式：糞-口途徑，污染的飲水及食物、經(jīng)消化道傳播。

17腸桿菌科第一節(jié)埃希菌屬

埃希菌屬（Escherichia）有6個種，只有大腸埃希菌（E.coli）是臨床最常見、最重要的一個菌種。18腸桿菌科大腸桿菌（E.coli）

①是腸道中重要的正常菌群；

②在宿主免疫力下降或細(xì)菌侵入腸外組織器官后即可成為機(jī)會致病菌，引起腸道外感染；

③一些血清型的大腸埃希菌具有致病性，能導(dǎo)致人類胃腸炎；

④在環(huán)境衛(wèi)生和食品衛(wèi)生學(xué)中常被用作糞便污染的衛(wèi)生學(xué)檢測指標(biāo)。⑤在分子生物學(xué)和基因工程實(shí)驗(yàn)中，也是重要的實(shí)驗(yàn)材料和研究對象19腸桿菌科一、生物學(xué)特性G-無芽胞桿菌多數(shù)有周鞭毛有菌毛有的有多糖類包膜（微莢膜）E.coli(0157:H7)⒈形態(tài)與染色：20腸桿菌科大腸桿菌（圖）21腸桿菌科大腸桿菌（圖）22腸桿菌科大腸桿菌（E.coli）23腸桿菌科2.培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)普通：灰白色、2～3mmS型菌落。鑒別或選擇（SS、EMB）：因分解乳糖產(chǎn)酸，形成有色菌落。大部分菌株發(fā)酵乳糖等多種糖類，產(chǎn)酸產(chǎn)氣。

IMViC試驗(yàn)：“++--”。24腸桿菌科E.coli在中國藍(lán)平板24h菌落中國藍(lán)酸性－蘭色堿性－紅色大腸埃希菌（乳糖非分解）25腸桿菌科大腸埃希菌在麥康凱瓊脂平板上粘稠菌落的特征（18-24h）中性紅酸性-紅色堿性-黃色26腸桿菌科大腸桿菌O157菌落（SS平板）中性紅酸性-紅色堿性-黃色27腸桿菌科產(chǎn)氣桿菌大腸桿菌28腸桿菌科KIA雙糖管

（葡萄糖，乳糖，H2S–，動力+）酚紅6.8-8.7黃----紅29腸桿菌科腸桿菌科細(xì)菌在克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）酚紅6.8-8.7黃----紅30腸桿菌科3.抗原構(gòu)造--血清學(xué)分型基礎(chǔ)

（1）O抗原----特異多糖，大于170種（2）H抗原----鞭毛抗原，大于56種（3）K抗原----O抗原外層，多糖，大于100種（分L、A、B型）

血清型命名

:O111:K58(B4):H231腸桿菌科4.抵抗力較強(qiáng)，55℃，60min或60℃，15min仍有部分細(xì)菌存活。水中可存活數(shù)周至數(shù)月，在糞便中存活更久。膽鹽、煌綠等對大腸桿菌有抑制作用。32腸桿菌科二、致病性（一）致病物質(zhì)（1）侵襲力：1.黏附素：使細(xì)菌黏著在泌尿道和腸道細(xì)胞上，有高特異性定植因子抗原Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ（CFA/Ⅰ，CFA/Ⅱ，CFA/Ⅲ）2.菌毛：Ⅰ型、P、束形成菌毛等33腸桿菌科致病物質(zhì)（2）毒素：內(nèi)毒素外毒素：不耐熱腸毒素Ⅰ和Ⅱ（LT-Ⅰ，LT-Ⅱ）耐熱腸毒素a，b（Sta，STb）志賀毒素Ⅰ和Ⅱ（Stx-Ⅰ,Stx-Ⅱ）腸集聚耐熱毒素溶血素A（HlyA）34腸桿菌科腸毒素（ＬＴ、ＳＴ）ＬＴ（不耐熱）

：Ｂ亞單位與GM1神經(jīng)節(jié)苷脂受體結(jié)合Ａ亞單位穿膜作用于AC（腺苷酸環(huán)化酶）

ATP轉(zhuǎn)化成cAMP，cAMP

水、電解質(zhì)過度分泌，腹瀉ＬＴ與霍亂腸毒素氨基酸同源性達(dá)７５％ＳＴ（耐熱）的中間產(chǎn)物為cGMP1個A亞單位和5個B亞單位35腸桿菌科耐熱腸毒素

（Heatstableenterotoxin,ST）耐熱，100℃，20min仍不被破壞分子量小，免疫原性弱。ST可激活小腸上皮細(xì)胞的鳥苷酸環(huán)化酶，使胞內(nèi)cGMP增加，在空腸部分改變液體的運(yùn)轉(zhuǎn)，使腸腔積液而引起腹瀉。ST與霍亂毒素?zé)o共同的抗原關(guān)系。36腸桿菌科（二）所致疾病1.腸道外感染（機(jī)會感染，內(nèi)源性）多數(shù)大腸埃希菌在腸道內(nèi)不致病，但如移位至腸道外引起腸外感染。（1）泌尿道感染（2）化膿性感染（3）敗血癥（4）新生兒腦膜炎37腸桿菌科2．腸道內(nèi)感染（外源性，某些血清型）①腸產(chǎn)毒素型大腸埃希菌(enterotoxingenicE.coli,ETEC)②腸侵襲型大腸埃希菌(enteroinvasiveE.coli,EIEC)③腸致病型大腸埃希菌（enteropathogenicE.coli,EPEC）④腸出血型大腸埃希菌（enterohemorrhagicE.coli,EHEC）⑤腸集聚型大腸桿菌

（enteroaggregativeE.coli,EAggEC）38腸桿菌科①腸產(chǎn)毒素型大腸埃希菌(enterotoxingenicE.coli,ETEC)致病物質(zhì)定植因子：使細(xì)菌黏附到小腸上皮細(xì)胞上腸毒素：LT、ST質(zhì)粒介導(dǎo)編碼LT-Ⅰ和STa。LT-Ⅰ作用機(jī)制：（與霍亂腸毒素作用相似）所致疾病：5歲以下嬰幼兒和旅游者腹瀉39腸桿菌科②腸侵襲型大腸埃希菌(enteroinvasiveE.coli,EIEC)不產(chǎn)腸毒素，質(zhì)粒介導(dǎo)侵襲和破壞，侵襲結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞，與志賀菌相似。細(xì)菌侵入結(jié)腸上皮細(xì)胞生長繁殖，進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)增殖殺死感染細(xì)胞導(dǎo)致組織破壞和炎癥發(fā)生所致疾病：侵犯較大兒童，成人，癥狀類似菌痢40腸桿菌科③腸致病型大腸埃希菌（enteropathogenicE.coli,EPEC）病菌在十二指腸，空腸和回腸上段黏膜表面大量繁殖，破壞微絨毛，造成一系列損傷所致疾?。簨胗變焊篂a，嚴(yán)重可致死致病原因：無腸毒素及其他外毒素，無侵襲力質(zhì)粒介導(dǎo)粘附和破壞

41腸桿菌科④腸出血型大腸埃希菌（enterohemorrhagicE.coli,EHEC）致病原因：溶源性噬菌體編碼毒素，產(chǎn)志賀毒素Stx-Ⅰ，Stx-Ⅱ，破壞腸絨毛結(jié)構(gòu)（干擾蛋白質(zhì)合成）所致疾?。撼鲅越Y(jié)腸炎，溶血性尿毒綜合癥HUS（5歲以下兒童易感）

主要血清型O157：H742腸桿菌科43腸桿菌科美國“毒菠菜風(fēng)波”與O157：H7在美國人的心目中，菠菜的重要程度不亞于大白菜在中國北方的地位，人們一年四季都會吃菠菜。而8月下旬以來，一場大規(guī)模大腸桿菌感染正在威脅美國人的安全，由25個州發(fā)生了因食用被污染的新鮮菠菜而導(dǎo)致食物中毒病例,毒菠菜折騰了半個美國。經(jīng)病例調(diào)查發(fā)現(xiàn)，他們中幾乎每個人在病前都曾食用過加利福尼亞“自然食品公司”等生產(chǎn)的袋裝新鮮菠菜。造成200人食物中毒的罪魁禍?zhǔn)资荗157：H7大腸桿菌，導(dǎo)致其中102人住院，31人發(fā)生溶血性尿毒癥綜合癥(HUS),3人不幸死亡。44腸桿菌科O157讓“衛(wèi)生大國”蒙羞日本歷來自稱“衛(wèi)生大國”，一種自豪感溢于言表。然而，有一種名不見經(jīng)傳的“尤物”----O157，卻屢屢肆虐日本列島，讓這個“衛(wèi)生大國”蒙羞。1990年，日本浦和市白鷺幼兒園就曾因園內(nèi)的井水被污染，造成了O157感染，導(dǎo)致319人患病，2名幼兒死亡。199l～1994年，日本每年約發(fā)現(xiàn)100例O157感染者。其中，13歲以下的兒童占83％：除幼兒園、學(xué)校出現(xiàn)集體發(fā)病外，還發(fā)現(xiàn)有家庭的零星發(fā)病。45腸桿菌科O157讓“衛(wèi)生大國”蒙羞1996年5月下旬，日本又被O157攪得“天翻地覆”。土界市的一些學(xué)校中，因食用受O157污染的蘿卜幼苗而相繼發(fā)生6起集體食物中毒事件，中毒人數(shù)多達(dá)1600人，導(dǎo)致3名兒童死亡，80多人入院治療。同時，日本仙臺市和鹿兒島縣也發(fā)現(xiàn)了集體食物中毒事件，中毒兒童增加到3791人，住院兒童達(dá)202人。到7月底，中毒人數(shù)超過1萬人，死亡11人，波及44個都府縣。這就是曾引起全世界極大關(guān)注的“O157中毒事件”，并被世界衛(wèi)生組織(WHO)稱之為“創(chuàng)紀(jì)錄的發(fā)病數(shù)”。調(diào)查研究人員發(fā)現(xiàn)，蘿卜幼苗食用部分受到O157的嚴(yán)重污染，是這次0157中毒事件的根本原因。46腸桿菌科O157讓“衛(wèi)生大國”蒙羞2001年4月初，日本再度發(fā)生O157，集體感染事件，東京、千葉、琦玉、神奈川、茨木、群馬等地已有125人受到感染。其實(shí)，這次集體感染于3月12日首先在千葉縣柏市被發(fā)現(xiàn)。經(jīng)調(diào)查表明，患者是由于食用了一些工廠生產(chǎn)的不潔凈食品而被感染的。2002年8月，在距離日本首都東京約100千米的宇都宮市，報德會宇都宮醫(yī)院及其老人保健中心相繼發(fā)生了集體食物中毒事件。據(jù)當(dāng)?shù)毓賳T說，7月29日，該醫(yī)院及其老人保健中心有876人在午餐中食用了雞和菠菜沙拉，致使138人受到O157感染，7人死亡。其中，絕大多數(shù)是老人。這次食物中毒事件還是由O157引起的。47腸桿菌科2011年德國毒黃瓜事件毒黃瓜是指受到腸出血性大腸桿菌（EHEC）“污染”的黃瓜。食用這種帶有大腸桿菌的黃瓜可引發(fā)致命性的溶血性尿毒癥，可影響到血液、腎以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)等。從2011年5月中旬開始在德國蔓延，并且疫情繼續(xù)擴(kuò)散，截止到5月29日，已有10人死亡，另有數(shù)百人感染。此外，包括瑞典、丹麥、英國和荷蘭在內(nèi)的多個國家均已報告感染病例，歐洲一時陷入恐慌。48腸桿菌科毒黃瓜事件

德國：14人死亡，約千人被感染

瑞典：36人感染

法國：3人疑似感染

奧地利：兩名在奧地利旅行的德國游客EHEC呈陽性

丹麥：11人現(xiàn)疑似癥狀

英國：10余人現(xiàn)疑似癥狀這場源于德國的疫情已在歐洲致使2300多人受感染，死亡病例22例。49腸桿菌科O157：H7O157：H7亞型大腸桿菌是食源性疾病的重要病源菌之一。該病可引起腹瀉、出血性腸炎，繼發(fā)溶血性尿毒綜合癥(HUS)等，病情兇險，病死率高。在71℃水中,15秒內(nèi)可被殺死。發(fā)病有明顯的季節(jié)性，6～9月為發(fā)病高峰。男女均可發(fā)病，以兒童為主，其次是65歲以上的老年人。幼托機(jī)構(gòu)、敬老院、療養(yǎng)院、學(xué)校等集體單位是容易暴發(fā)的場所。50腸桿菌科O157：H7傳播途徑主要通過污染的食品如肉類、蔬菜、水果、飲料、水、調(diào)料等傳播。常因食用半生的牛肉、豬肉、雞肉、漢堡包，食用受污染的生豆芽或新鮮多葉蔬菜而感染,例如萵苣葉、菠菜、生菜等。家庭和幼兒園的人和人之間接觸也是一種重要的傳播途徑。此外,在不潔凈的水中游泳或飲用不潔凈水、生牛奶后,也可能發(fā)生感染。世界上絕大多數(shù)感染是由被污染的漢堡包引起的。51腸桿菌科⑤腸集聚型大腸桿菌

（enteroaggregativeE.coli,EAggEC）質(zhì)粒介導(dǎo)，可產(chǎn)生毒素和粘附素（AAF/I、AAF/II）引起嬰兒持續(xù)性腹瀉，脫水，偶有血便。毒素：腸集聚耐熱毒素粘附素：凝聚性粘附菌毛

使菌體磚狀排列52腸桿菌科引起腹瀉的大腸埃希菌

菌株作用部位疾病與癥狀致病機(jī)制ETEC小腸旅行者腹瀉；嬰幼兒腹瀉；水樣便，惡心，嘔吐，腹痛，低熱質(zhì)粒介導(dǎo)LT和（或）ST腸毒素，大量分泌液體和電解質(zhì)EIEC大腸水樣便，繼以少量血便，腹痛，發(fā)熱質(zhì)粒介導(dǎo)侵襲和破壞結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞28ac、29、112ac、1244、152、164、167EPEC小腸嬰兒腹瀉；水樣便，惡心，嘔吐，發(fā)熱質(zhì)粒介導(dǎo)粘附和破壞上皮細(xì)胞2、55、86、111、114、119、125、126、127、128、142、158EHEC大腸水樣便，繼以大量出血，劇烈腹痛，低熱或無，可并發(fā)HUS、血小板減少性紫癜溶原性噬菌體編碼SLT-I或SLT-II，中斷蛋白質(zhì)合成157、26、111EAEC小腸嬰兒腹瀉；持續(xù)性水樣便，嘔吐，脫水，低熱質(zhì)粒介導(dǎo)集聚性粘附上皮細(xì)胞，阻止液體吸收并產(chǎn)生毒素>50血清型常見O血清型6、8、15、25、27、78、148、15953腸桿菌科三、微生物學(xué)檢查（一）臨床標(biāo)本的檢查1.標(biāo)本采集：中段尿、血、膿、腦脊液、糞便等2.分離培養(yǎng)與鑒定腸道外感染：涂片染色，分離培養(yǎng)鑒定：IMViC（++--），生化反應(yīng)尿路感染尚需計數(shù)菌落數(shù)，每ml≥10萬才有診斷價值。腸道內(nèi)感染：糞便接種鑒別培養(yǎng)基（SS）鑒定：ELISA，核酸雜交，PCR54腸桿菌科大腸埃希菌在飲水和食品衛(wèi)生學(xué)中，常用作被糞便污染的檢測指標(biāo)。

≤3個大腸菌群/1L飲水≤

100個細(xì)菌總數(shù)/1ml飲水(二)衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)意義大腸菌群指數(shù)每1000ml水中大腸菌群數(shù)我國飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌總數(shù)每1ml或1g樣品中細(xì)菌總數(shù)55腸桿菌科大腸菌群數(shù)

指在37℃、24h內(nèi)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的腸道桿菌，包括埃希菌屬、枸櫞酸桿菌屬、克雷伯菌屬及腸桿菌屬等。我國現(xiàn)行衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：

≤3個大腸菌群/1L飲水≤3個大腸菌群/每100ml瓶裝汽水、果汁56腸桿菌科57腸桿菌科四、防治原則1.耐藥性普遍，需做藥敏試驗(yàn)2.減少院內(nèi)交叉感染，尿道插管和膀胱鏡檢查應(yīng)嚴(yán)格無菌操作。3.水，食品嚴(yán)格消毒4.疫苗正在研制58腸桿菌科第二節(jié)志賀菌屬

志賀菌（Shigella）通稱痢疾桿菌(dysenterybacterium)，是引起人類細(xì)菌性痢疾的病原菌。59腸桿菌科衛(wèi)生部公布2005年全國法定報告?zhèn)魅静∫咔槿瓿齻魅拘苑堑湫头窝住⒓顾杌屹|(zhì)炎和白喉無發(fā)病、死亡外，其他病種均有報告。報告發(fā)病數(shù)居前五位的病種依次為：肺結(jié)核、乙型肝炎、痢疾、淋病、梅毒，占發(fā)病總數(shù)的85.66%。死亡數(shù)居前五位的病種依次為：肺結(jié)核、狂犬病、艾滋病、乙型肝炎、新生兒破傷風(fēng)，占死亡總數(shù)的89.40%。

60腸桿菌科衛(wèi)生部公布2006年全國法定傳染病疫情2006年全國共報告甲、乙類傳染病發(fā)病3488934例，死亡10623人。報告發(fā)病數(shù)居前五位的病種依次為：肺結(jié)核、乙肝、痢疾、梅毒、淋病，占報告發(fā)病總數(shù)的85.58%。報告死亡數(shù)居前五位的病種依次為：肺結(jié)核、狂犬病、艾滋病、乙肝、流行性乙型腦炎，占報告死亡總數(shù)的87.95%。61腸桿菌科衛(wèi)生部發(fā)布2010年傳染病疫情報告2010年，全國共報告甲類傳染病發(fā)病164例，死亡2人。乙類傳染病除傳染性非典型肺炎、脊髓灰質(zhì)炎和白喉無發(fā)病、死亡報告外，其他共報告發(fā)病3185932例，死亡14289人。報告發(fā)病數(shù)居前5位病種依次為病毒性肝炎、肺結(jié)核、梅毒、細(xì)菌性和阿米巴性痢疾、淋病，占甲、乙類傳染病報告發(fā)病總數(shù)的94.97%，報告死亡數(shù)居前5位病種依次為艾滋病、肺結(jié)核、狂犬病、病毒性肝炎和甲型H1N1流感，占甲、乙類傳染病報告死亡總數(shù)的96.49%。62腸桿菌科衛(wèi)生部發(fā)布2010年傳染病疫情報告丙類傳染病除絲蟲病無發(fā)病、死亡病例報告外,其他共報告發(fā)病3224030例，死亡968人。報告發(fā)病數(shù)居前5位的病種依次為手足口病、其他感染性腹瀉病、流行性腮腺炎、急性出血性結(jié)膜炎和流行性感冒，占報告發(fā)病總數(shù)的98.49%。報告死亡數(shù)居前3位的病種依次為手足口病、其他感染性腹瀉病和流行性感冒，占報告死亡總數(shù)的98.66%。63腸桿菌科一、生物學(xué)性狀⒈形態(tài)染色痢疾桿菌Shigella

sonnei-rodprokaryote;causesshigellosis(bacterialdysentery)(x22,400)G-短桿菌

無鞭毛有菌毛64腸桿菌科志賀菌(dysenterybacterium)65腸桿菌科動力實(shí)驗(yàn)66腸桿菌科培養(yǎng)特性普通瓊脂平板：可生長EMB、SS：菌落無色透明。除宋內(nèi)志賀菌遲緩分解乳糖（3~4d）外，均不分解乳糖。67腸桿菌科在腸道鑒別培養(yǎng)基（S.S）上的菌落中性紅酸性-紅色堿性-黃色68腸桿菌科KIA雙糖管

（葡萄糖＋，乳糖－，H2S–，動力-）酚紅6.8-8.7黃----紅69腸桿菌科生化反應(yīng)（1）乳糖發(fā)酵：-EMB、SS平板：無色菌落（2）糖發(fā)酵試驗(yàn)葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露糖、蔗糖+----

70腸桿菌科抗原構(gòu)造與分類有O、K抗原，無H抗原。（1）O抗原：是志賀菌屬抗原分群、分型的標(biāo)志，可分為群特異性抗原和型特異性抗原（依據(jù)O抗原、生化反應(yīng)分為4群、44多個血清型。）（2）K抗原：在分類上無意義71腸桿菌科志賀菌屬的抗原分類菌種群型亞型甘露醇鳥氨酸脫梭酶志賀痢疾桿菌A1~108a、8b、8c--福氏痢疾桿菌B1~6、X、Y變種1a,1b,2a,2b,3a,3b,3c,4a,4b+-鮑氏痢疾桿菌C1~18+-宋內(nèi)痢疾桿菌D1++我國以B群志賀菌最常見，約占70%，其次為D群和A群。72腸桿菌科變異性與抵抗力

抗原構(gòu)造、生化反應(yīng)、毒力和對藥物的敏感性均易發(fā)生變異。多重耐藥性日趨嚴(yán)重。營養(yǎng)缺陷型變異：南斯拉夫Mel（1963年）首創(chuàng)的依賴鏈霉素的志賀氏菌株（依鏈株，Sd），作為口服菌苗。

抵抗力最弱，56℃，10min即被殺死，對酸、消毒劑敏感。73腸桿菌科二、致病性與免疫性（一）致病物質(zhì)1.侵襲力：①菌毛：粘附回腸末端和結(jié)腸粘膜的上皮細(xì)胞

，繼而穿入上皮細(xì)胞在粘膜固有層內(nèi)繁殖形成感染灶，引起炎癥反應(yīng)。由大質(zhì)粒攜帶的基因介導(dǎo)粘附、侵襲、細(xì)胞內(nèi)繁殖、細(xì)胞間擴(kuò)散等

74腸桿菌科致病物質(zhì)2、內(nèi)毒素

①內(nèi)毒素血癥—發(fā)熱、神志障礙②使腸粘膜通透性增高，破壞腸粘膜—炎癥、潰瘍、粘液膿血便

③作用于腸壁自主神經(jīng)系統(tǒng)，使腸功能紊亂癥狀：發(fā)熱，休克，炎癥，腹痛，里急后重75腸桿菌科“里急后重”醫(yī)學(xué)術(shù)語,形容拉肚子時的一種癥狀,一般患細(xì)菌性痢疾時都有“里急后重”的感覺?！袄锛薄笔侵付亲永锩娴膬?nèi)急,一陣一陣的腸痙攣既疼痛又想大便。“后重”是指大便刺激肛門時產(chǎn)生的便意，實(shí)際上根本沒有什么大便了,因?yàn)榛旧隙祭炅?，即使拉出來也只是水樣便或極少量的伴有膿血樣的大便。但是病人一直有“里急后重”的感覺，老覺得想拉，就一直在廁所不敢出來。76腸桿菌科致病物質(zhì)3、外毒素由A群志賀菌Ⅰ型和Ⅱ型產(chǎn)生志賀毒素（StxⅠ和StxⅡ），毒素基因位于染色體上具有腸毒素毒性、細(xì)胞毒性、神經(jīng)毒性作用：損傷上皮細(xì)胞77腸桿菌科⒉所致疾病傳染源：病人，帶菌者傳播途徑：糞-口感染局限于腸道，一般不侵入血液

我國以B群福氏志賀菌和宋內(nèi)志賀菌常見78腸桿菌科所致疾病：①急性細(xì)菌性痢疾：潛伏期1～3天，突然發(fā)病，常有發(fā)熱、腹痛、膿血黏液便，伴有里急后重等。②中毒性細(xì)菌性痢疾：兒童多見③慢性細(xì)菌性痢疾：病程＞2個月79腸桿菌科急性中毒性菌痢多見于兒童。其特點(diǎn)是在胃腸道癥狀未出現(xiàn)前，由于內(nèi)毒素從腸壁迅速吸收入血，所以首先表現(xiàn)出全身中毒癥狀，病情兇險，死亡率較高。80腸桿菌科致病機(jī)理痢疾桿菌菌毛粘附回腸末端和結(jié)腸粘膜粘膜固有層腸壁病變，炎癥、壞死、潰瘍膿血便急性菌痢慢性菌痢或帶菌者LPS、TNF-α、IL-1等內(nèi)毒素血癥中毒性菌痢Stx、LPS81腸桿菌科免疫性主要靠腸道的局部免疫SIgA的作用。病后免疫力不長久。與菌型多和各型間無交叉免疫有關(guān)。82腸桿菌科三、微生物學(xué)檢查

1.標(biāo)本：糞便膿血，黏液，肛拭2.分離培養(yǎng)與鑒定37℃鑒別/選擇培養(yǎng)基可疑菌落生化、血清學(xué)實(shí)驗(yàn)18-24hr3.毒力實(shí)驗(yàn)侵襲力：Sereny實(shí)驗(yàn)（接種于動物眼結(jié)膜）Stx實(shí)驗(yàn)：HeLa/Vero細(xì)胞，PCR技術(shù)83腸桿菌科Sereny實(shí)驗(yàn)84腸桿菌科三、微生物學(xué)檢查4.快速診斷法免疫染色法免疫熒光球菌法協(xié)同凝集實(shí)驗(yàn)乳膠凝集實(shí)驗(yàn)分子生物學(xué)方法：PCR技術(shù)，基因探針85腸桿菌科四、防治原則隔離患者、徹底治療切斷傳播途徑

試用的口服菌苗：鏈霉素依賴株重組活菌苗。雙價疫苗，具有廣譜保護(hù)作用?；前匪?、氯霉素、青霉素、痢特靈等均有效，亦可選用環(huán)丙沙星、菌必治等Handwashing

afterdefecationisthebestwaytopreventthespreadofshigellosis.86腸桿菌科第三節(jié)沙門菌屬(Salmonella)一大群寄生人類和動物腸道內(nèi)的G-桿菌。1885年Salmon首次分離，并以其命名。有2500個血清型，我國有200多個血清型。87腸桿菌科

沙門菌屬（Salmonella）分兩個種，即腸道沙門菌（S.

enterica）和邦戈沙門菌(S.

bongori)。

沙門菌血清型的正確命名方法：腸道沙門菌腸道亞種傷寒血清型（Salmonella,enterica

subspecies,entericaserotype,Typhi）,可縮寫為傷寒血清型沙門菌（SalmonellaTyphi）。

88腸桿菌科沙門菌屬中少數(shù)血清型是人的病原菌，引起腸熱癥。絕大多數(shù)血清型宿主范圍廣泛，家畜、家禽、野生脊椎動物及冷血動物、軟體動物、環(huán)形動物、節(jié)肢動物（包括蒼蠅）等均可帶菌，其中部分沙門菌是人畜共患病的病原菌，可引起人類食物中毒或敗血癥。89腸桿菌科廣西靈川160名中學(xué)生因甲型副傷寒集體發(fā)燒

新桂網(wǎng)-南國早報訊2004年12月2日，靈川縣一所初級中學(xué)的一位學(xué)生家長致電本報桂林新聞熱線，稱其兒子兩天前在學(xué)校莫名發(fā)燒，出現(xiàn)類似情況的還有其他很多學(xué)生。記者趕往該校了解到，靈川縣衛(wèi)生局組織的一支20多人的醫(yī)療隊(duì)伍正在實(shí)施救助。據(jù)桂林市疾控中心最新檢測認(rèn)定，發(fā)病學(xué)生所患的是甲型副傷寒。目前，160多名發(fā)燒學(xué)生都得到有效救治。90腸桿菌科廣西靈川160名中學(xué)生因甲型副傷寒集體發(fā)燒

圖書室成“臨時醫(yī)院”

12月2日上午，記者趕到這所中學(xué)。剛到大門口，就看見眾多家長簇?fù)碓谛ｉT口議論著，個個都一臉焦急。幾輛救護(hù)車快速駛進(jìn)校門，車上坐滿身著白大褂的醫(yī)護(hù)人員。在該校圖書室內(nèi)，記者看到80多名學(xué)生正在接受靜脈注射，10多名醫(yī)護(hù)人員進(jìn)進(jìn)出出忙個不停，門角的一個紙箱內(nèi)，已堆了滿滿一箱空的輸液瓶。在現(xiàn)場負(fù)責(zé)的主管護(hù)師唐漓濱告訴記者，從12月1日來，他們已為學(xué)生輸液500多人次。91腸桿菌科廣西靈川160名中學(xué)生因甲型副傷寒集體發(fā)燒【認(rèn)定】甲型副傷寒作祟12月2日下午，市、縣疾控部門的領(lǐng)導(dǎo)和專家在學(xué)校召開緊急會議，制定有關(guān)救治計劃?？h衛(wèi)生局伍副局長告訴記者，全校共有160多個學(xué)生出現(xiàn)不同程度的發(fā)燒癥狀，有幾名患者已經(jīng)燒到了40℃，患者的臨床癥狀除發(fā)燒外，還有頭暈和肚子疼。初一劉姓同學(xué)說，11月30日他出現(xiàn)發(fā)燒，次日經(jīng)過輸液后好轉(zhuǎn)，但12月2日又復(fù)發(fā)了。記者問及學(xué)生有無集體吃過“問題”食物，全都給予了否認(rèn)。據(jù)了解，該校共有學(xué)生1100多人，95%以上的學(xué)生吃住都在學(xué)校。桂林市疾控中心已到該校檢測。據(jù)該中心傳染病防治科科長袁榮枝稱，發(fā)生在該校的疫情為甲型副傷寒。甲型副傷寒主要是通過飲水或飲食不潔引起的，但目前尚未查明污染源。為了防止該病的進(jìn)一步傳染，他們將要求學(xué)校加強(qiáng)水源、飲食的衛(wèi)生管理，并做好消毒。92腸桿菌科廣西河池羅城暴發(fā)副傷寒疫情廣西河池市羅城仫佬族自治縣近日暴發(fā)甲型副傷寒疫情。該縣衛(wèi)生局局長潘立長稱，疫情主要發(fā)生在當(dāng)?shù)馗咧?、初中學(xué)生人群中。目前，自治區(qū)衛(wèi)生廳已派出疾控衛(wèi)生醫(yī)療專家組趕赴羅城指導(dǎo)治療工作。疫情主要發(fā)生在當(dāng)?shù)馗咧?、初中學(xué)生人群中。93腸桿菌科廣西河池羅城暴發(fā)副傷寒疫情據(jù)潘立長介紹，截至2010年10月29日17時，該縣累計報告甲型副傷寒病例107例（其中在校學(xué)生84例），住院治療80例（其中在校學(xué)生77例）。學(xué)生病例主要集中在羅城高中、羅城中學(xué)、羅城民族中學(xué)這三所位于縣城城區(qū)的中學(xué)。據(jù)當(dāng)?shù)匾幻咧猩榻B，他們一個班就有17名學(xué)生患上傷寒、副傷寒，連續(xù)幾天出現(xiàn)發(fā)熱、頭疼、腹瀉等癥狀。羅城曾于2004年集中暴發(fā)過甲型副傷寒疫情,當(dāng)年全縣400多人感染,歷時3個多月才徹底控制住疫情。94腸桿菌科一、生物學(xué)性狀

⒈形態(tài)與染色

無芽胞G-桿菌。除雞沙門菌外，絕大多數(shù)有周鞭毛。一般無莢膜，多數(shù)有菌毛。

95腸桿菌科傷寒桿菌鞭毛96腸桿菌科傷寒桿菌Salmonella-rodprokaryote;notetheflagella.Causessalmonellosis(foodpoisoning).(x20,800)

97腸桿菌科沙門菌

G-桿菌，多數(shù)有周鞭毛，無芽胞，一般無莢膜。98腸桿菌科⒉培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)腸道鑒別培養(yǎng)基（SS）：菌落無色。生化反應(yīng)的鑒定具有重要參考價值。99腸桿菌科SS鑒別培養(yǎng)基，因不分解乳糖，菌落呈無色，易與大腸埃希菌菌落區(qū)別。中性紅酸性-紅色堿性-黃色100腸桿菌科SS培養(yǎng)基沙門菌在酸性條件下產(chǎn)生H2S，形成黑色菌落中性紅酸性-紅色堿性-黃色101腸桿菌科KIA雙糖管

（葡萄糖＋，乳糖－，H2S+，動力+）酚紅6.8-8.7黃----紅102腸桿菌科KIA雙糖管酚紅6.8-8.7黃----紅103腸桿菌科主要致病沙門菌的生化反應(yīng)

菌名葡萄糖乳糖吲哚甲基紅VP枸櫞酸鹽

H2S賴氨酸脫梭酶鳥氨酸脫梭酶甲型副傷寒沙門菌

-

-+

-

-+\-

-+肖氏沙門菌

-

-+

-+\-+++++希氏沙門菌

-

-+

-

++++鼠傷寒沙門菌

-

-+

-

++++++豬霍亂沙門菌

-

-+

-

++\-++傷寒沙門菌+

-

-+

-

-+\-+-腸炎沙門菌

-

-+

-

-+++++104腸桿菌科⒊抗原構(gòu)造O抗原：用于沙門菌分組，有42個組。H抗原：分為Ⅰ、Ⅱ兩相，用于沙門菌分血清型。Vi抗原：存在于菌表面，與細(xì)菌毒力有關(guān)。105腸桿菌科O抗原為LPS，耐熱，性質(zhì)穩(wěn)定。O抗原有58種，按O抗原將沙門菌屬分成42個組。引起人類疾病的沙門菌，多屬于A～E組。刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM型抗體。106腸桿菌科H抗原為蛋白質(zhì)，不耐熱，不穩(wěn)定。由第1相和第2相組成。第1相為特異抗原，用a、b、c……表示；第2相為非特異相即共同抗原，用1、2、3……表示。同一組沙門菌根據(jù)H抗原不同可將群內(nèi)細(xì)菌分為不同的型。刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG型抗體。107腸桿菌科常見沙門菌的抗原成分組菌型O抗原H抗原第1相H抗原第2相A甲型副傷寒沙門菌1、2、12a-B肖氏沙門菌（乙型）1、4、5、12b1、2鼠傷寒沙門菌1、4、5、12i1、2C希氏沙門菌（丙型）6、7、Vic1、5豬霍亂沙門菌6、7c1、5D傷寒沙門菌9、12、Vid-腸炎沙門菌1、9、12g、m-108腸桿菌科Vi抗原表面抗原：一種不耐熱的酸性多糖復(fù)合物，加熱60℃或石炭酸處理易被破壞，人工傳代培養(yǎng)可消失。存在于菌體表面，可阻止O抗原與相應(yīng)抗體的凝集反應(yīng)?？乖匀酰碳C(jī)體產(chǎn)生的抗體效價低。當(dāng)細(xì)菌清除后，Vi抗體隨之消失測定Vi抗體：診斷傷寒、副傷寒帶菌者。109腸桿菌科抵抗力不強(qiáng)，65℃，15min在水存活2～3W，糞便中1～2月，可在凍土中過冬。對氯霉素極敏感。對膽鹽，煌綠等抵抗力強(qiáng)。110腸桿菌科二、致病性與免疫性

（一）致病物質(zhì)1.侵襲力①菌毛：與M細(xì)胞結(jié)合②耐酸應(yīng)答基因③Vi抗原：有微莢膜功能，抗吞噬，阻擋抗體補(bǔ)體作用2.內(nèi)毒素：發(fā)熱，中毒癥狀3.腸毒素：個別沙門菌產(chǎn)生，類似ETEC產(chǎn)的腸毒素111腸桿菌科（二）所致疾病

1.腸熱癥：即傷寒與副傷寒。傷寒：傷寒沙門菌引起。副傷寒：甲型副傷寒沙門菌、肖氏沙門菌（乙型）、希氏沙門菌（丙型）引起。112腸桿菌科即傷寒與副傷寒傳染源：病人或帶菌者。傳播途徑：糞-口，通過水、食物、日常生活接觸、蒼蠅等途徑傳播傷寒病程一般較長，癥狀較重，約為3～4周；副傷寒病病程較短，癥狀較輕，約為1～3周即愈。致病機(jī)制和臨床癥狀基本相似。胞內(nèi)寄生菌。113腸桿菌科膽囊-----腸道-------糞排菌皮膚----血栓出血--玫瑰疹腎-----尿肝脾-----腫大骨髓------受抑制傷寒和副傷寒的致病過程傷寒和副傷寒桿菌小腸上部粘膜腸系膜淋巴結(jié)固有層淋巴結(jié)進(jìn)入血液再次進(jìn)入血液第一次菌血癥第二次菌血癥（

病程特點(diǎn)：二次菌血癥，超敏反應(yīng)）114腸桿菌科傷寒傷寒表現(xiàn)：持續(xù)高熱傷寒病容玫瑰疹肝脾腫大相對緩脈Thomson’stheoriesontyphoid,amajorkiller,werederided.115腸桿菌科玫瑰疹116腸桿菌科2.急性胃腸炎（食物中毒）

最常見的沙門菌感染，大量食入大量（>108）豬霍亂沙門菌、鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌等引起。多見于老人、嬰兒和體弱者。致病機(jī)制：細(xì)菌侵襲腸粘膜，釋放內(nèi)毒素癥狀：發(fā)熱，嘔吐，腹瀉

117腸桿菌科美國沙門菌食物中毒事件1973年9月，在美國中西部的一個城市的一家飯館中，當(dāng)天有173人在此吃了飯。結(jié)果23小時后，至少有125人發(fā)了病，發(fā)生腹瀉、腹部劇烈疼痛等癥狀。調(diào)查的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，這一起嚴(yán)重的事件是由于飯館的盤子不干凈引起的。該飯館用放過生雞塊的盤子去裝土豆沙拉和調(diào)味品，而這些盤子已受到沙門氏菌的污染。這些沙門氏菌是從哪里來的呢？來自生雞塊，而雞上的沙門氏菌又來自飼料。118腸桿菌科3.慢性腸炎沙門菌老人、兒童臨床表現(xiàn)：發(fā)熱、黏液便，類似菌痢119腸桿菌科4.敗血癥由豬霍亂沙門菌、希氏沙門菌、鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌等引起。多見于兒童或免疫功能低下的成人。病菌入血可隨血流導(dǎo)致腦膜炎、骨髓炎、膽囊炎等發(fā)生。120腸桿菌科無癥狀帶菌者約1％～5％傷寒或副傷寒患者，在癥狀消失后一年仍可在其糞便中檢出沙門菌，轉(zhuǎn)變?yōu)闊o癥狀（健康）帶菌者。病菌滯留于膽囊或尿道中。女性是男性的2倍。是重要的傳染源。121腸桿菌科“傷寒瑪麗”歷史上傷寒感染影響最大的是傷寒瑪麗，是一位美國廚師?！皞旣悺保ㄕ婷篗aryMallon）：一個健康帶菌者，被證實(shí)在美國有7個地區(qū)多達(dá)1500個傷寒患者都是她傳染的。

當(dāng)時美國《紐約美國人報》報道“傷寒瑪麗”的插圖122腸桿菌科

MaryMallon“傷寒瑪麗”本名叫瑪麗·梅倫，1869年生于愛爾蘭，15歲時移民美國。起初她給人當(dāng)女傭。后來，她發(fā)現(xiàn)自己很有烹調(diào)才能，于是轉(zhuǎn)行當(dāng)廚師，拿到比做女傭高出很多的薪水?，旣悓ψ约旱奶幘撤浅M意。

1906年夏天，紐約的銀行家華倫帶著全家去長島消夏，雇瑪麗做廚師。8月底，華倫的一個女兒最先感染了傷寒。接著，華倫夫人、兩個女傭、園丁和另一個女兒相繼感染。他們消夏的房子住了11個人，有6個人患病。房主深為焦慮，他想方設(shè)法找到了有處理傷寒疫情經(jīng)驗(yàn)的專家索柏。索柏將目標(biāo)鎖定在瑪麗身上。他詳細(xì)調(diào)查了瑪麗此前7年的工作經(jīng)歷，發(fā)現(xiàn)7年中瑪麗換過7個工作地點(diǎn)，而每個工作地點(diǎn)都暴發(fā)過傷寒病，累計共有22個病例，其中1例死亡。123腸桿菌科“傷寒瑪麗”索柏設(shè)法得到瑪麗的血液、糞便樣本，以驗(yàn)證自己的推斷。但這非常棘手，索柏對此有過精彩的描述：他找到瑪麗，“盡量使用外交語言，但瑪麗很快就作出了反應(yīng)。她抓起一把大杈子，朝我直戳過來。我飛快地跑過又長又窄的大廳，從鐵門里逃了出去”?，旣惍?dāng)時反應(yīng)激烈，因?yàn)樵谒莻€年代，“健康帶菌者”還是一個聞所未聞的概念，她自己身體棒棒的，說她把傷寒傳染給了別人，簡直就是對她的侮辱。后來，索柏試圖通過地方衛(wèi)生官員說服瑪麗，沒想到，這更惹惱了這個倔脾氣的愛爾蘭裔女人，她將他們罵出門外，宣布他們是“不受歡迎的人”。最后，當(dāng)?shù)氐男l(wèi)生官員帶著一輛救護(hù)車和5名警察找上門。這一次，瑪麗又動用了大杈子。在眾人躲閃之際，瑪麗突然跑了。警察后來在壁櫥里找到了她，5名警察把她抬進(jìn)救護(hù)車送往醫(yī)院。一路上的情景就像“籠子里關(guān)了頭憤怒的獅子”。124腸桿菌科“傷寒瑪麗”醫(yī)院檢驗(yàn)結(jié)果證實(shí)了索柏的懷疑?，旣惐凰腿爰~約附近一個名為“北邊兄弟”的小島上的傳染病房。但瑪麗始終不相信醫(yī)院的結(jié)論。兩年后她向衛(wèi)生部門提起訴狀。1909年6月，《紐約美國人報》刊出一篇有關(guān)瑪麗的長篇報道，文章十分煽情，引起公眾一片唏噓，衛(wèi)生部門被指控侵犯人權(quán)。1910年2月，當(dāng)?shù)匦l(wèi)生部門與瑪麗達(dá)成和解，解除對她的隔離，條件是瑪麗同意不再做廚師。這一段公案就此了結(jié)。1915年，瑪麗已經(jīng)被解除隔離5年，大家差不多都把她忘了