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文檔簡介

化學發(fā)光免疫技術(shù)的類型免疫學檢驗技術(shù)—*—

化學發(fā)光免疫技術(shù)的類型化學發(fā)光免疫技術(shù)類型(1)化學發(fā)光免疫分析(2)化學發(fā)光酶免疫分析(3)電化學發(fā)光免疫分析(4)發(fā)光氧通道免疫分析化學發(fā)光免疫分析免疫學檢驗技術(shù)—*—

化學發(fā)光免疫分析化學發(fā)光免疫分析(CLIA)(以雙抗體夾心法檢測微量抗原為例)標本:血清(待測微量抗原)試劑:磁珠包被的已知抗體;AE標記抗體微課:化學發(fā)光免疫分析的基本過程—*—

化學發(fā)光免疫分析化學發(fā)光免疫分析(CLIA)(以雙抗體夾心法檢測微量抗原為例)過程:1)加血清、磁珠包被的已知抗體和AE標記抗體,反應;2)洗滌;3)加H2O2和NaOH,AE發(fā)光;4)集光器和光電倍增管接收、記錄,光信號轉(zhuǎn)為電信號,計算機處理,對抗原進行定量。自學視頻:化學發(fā)光免疫分析儀化學發(fā)光酶免疫分析免疫學檢驗技術(shù)—*—

化學發(fā)光酶免疫分析化學發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)(以雙抗體夾心法檢測微量抗原為例)標記酶:HRP標本:血清(待測微量抗原)試劑:磁珠包被的已知抗體;HRP標記抗體微課:化學發(fā)光酶免疫分析的基本過程—*—

化學發(fā)光酶免疫分析化學發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)(以雙抗體夾心法檢測微量抗原為例)思路:HRP標記抗體在魯米諾、H2O2和NaOH存在的條件下發(fā)光(光的強度與待測抗原成正比)→集光器和光電倍增管接收、記錄(光信號轉(zhuǎn)為電信號)→計算機處理可定量抗原自學視頻:化學發(fā)光酶免疫分析(半自動)—*—

化學發(fā)光酶免疫分析化學發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)(以雙抗體夾心法檢測微量抗原為例)標記酶:ALP標本:血清(待測微量抗原)試劑:磁珠包被的已知抗體;ALP標記抗體微課:化學發(fā)光酶免疫分析的基本過程—*—

化學發(fā)光酶免疫分析化學發(fā)光酶免疫分析(CLEIA)(以雙抗體夾心法檢測微量抗原為例)思路:ALP標記抗體在AMPPD存在的條件下發(fā)光(光的強度與待測抗原成正比)→集光器和光電倍增管接收、記錄(光信號轉(zhuǎn)為電信號)→計算機處理可定量抗原電化學發(fā)光免疫分析免疫學檢驗技術(shù)—*—

電化學發(fā)光免疫分析電化學發(fā)光免疫分析(ECLIA)(以雙抗體夾心法檢測微量抗原為例)標本:血清(待測微量抗原)試劑:磁珠包被的已知抗體;【Ru(bpy)3】2+標記抗體微課:電化學發(fā)光免疫分析的基本過程—*—

電化學發(fā)光免疫分析電化學發(fā)光免疫分析(ECLIA)(以雙抗體夾心法檢測微量抗原為例)思路:三聯(lián)吡啶釕持續(xù)發(fā)光(光強度與待測抗原成正比)→集光器和光電倍增管接收、記錄(光信號轉(zhuǎn)為電信號)→計算機處理可對待測抗原進行定量發(fā)光氧通道免疫分析免疫學檢驗技術(shù)—*—

發(fā)光氧通道免疫分析發(fā)光氧通道免疫分析(LOCI)1、概念:是以納米微粒為基礎(chǔ)的均相化學發(fā)光免疫技術(shù)。2、反應體系的成分主要包括:1)感光微粒(納米級):覆蓋有親和素和酞菁染料的乳膠聚苯乙烯顆粒,可吸收680nm的光,生成高能單線態(tài)氧。2)發(fā)光微粒(納米級):發(fā)光微粒含有烯烴染料和特異性抗體(抗原),可以與單線態(tài)氧反應,發(fā)出612nm的光信號,LOCI檢測器讀取。(感光與發(fā)光微粒形成二聚體才生成化學光信號)—*—

發(fā)光氧通道免疫分析發(fā)光氧通道免疫分析(LOCI)3)生物素化抗體(抗原):生物素化抗體(抗原)可與含有親和素的感光微粒結(jié)合。3、方法類型:夾心法和競爭法。4、檢測過程(以雙抗體夾心法為例):包被有特異性抗體的發(fā)光微粒、生物素(B)標記抗體、待測抗原、鏈霉親和素(SA)包被感光微粒反應,形成復合物,即發(fā)光微粒-Ab-Ag-Ab-B-SA-感光微粒,感光微粒與發(fā)光微粒之間的距離小于200nm。用波長—*—

發(fā)光氧通道免疫分析發(fā)光氧通道免疫分析(LOCI)為680nm的光照射反應體系,感光微粒使周圍環(huán)境中的氧轉(zhuǎn)化為高能單線態(tài)氧,后者被發(fā)光微粒捕獲,與化學微粒發(fā)生反應,發(fā)出612nm的光信號,被檢測器讀取,通過計算機計算將光子數(shù)換算成靶抗原濃度?!?—

發(fā)光氧通道免疫分析發(fā)光氧通道免疫分析(LOCI)5、評價與應用1)LOCI光的產(chǎn)生、傳遞、放大過程十分穩(wěn)定。2)反應時間短。3)反應無需分離標本和試劑,降低了系統(tǒng)誤差。4)信號傳遞過程具有放大效應,發(fā)光迅速,提高了靈敏度。5)LOCI檢測范圍廣。6)LOCI解決了檢測低親和力分子的問題?!?—

化學發(fā)光免疫技術(shù)化學發(fā)光免疫技術(shù)臨床應用1)甲狀腺激素:T3、T4、TSH等;2)生殖激素:β-HCG等;3)腎上腺/垂體激素:人生長激素等;4)貧血因子:葉酸等;—*—

化學發(fā)光免疫技術(shù)化學發(fā)光免疫技術(shù)臨床應用5)腫瘤標志物:AFP、CEA

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