酶的特異性實驗報告酶的特異性實驗報告八篇

酶的特異性實驗報告酶的特異性實驗報告精選八篇

篇一：實驗報告-不同因素對酶的影響實驗報告課程名稱：生物化學實驗（甲）指導老師：成績：實驗名稱：酶的基本性質(zhì)實驗——底物專一性劑、激活劑和抑制、最適溫度實驗類型：分離鑒定實驗同組學生姓名：一、實驗目的和要求（必填）三、主要儀器設備（必填）五、實驗數(shù)據(jù)記錄和處理七、討論、心得二、實驗內(nèi)容和原理（必填）四、操作方法和實驗步驟六、實驗結(jié)果與分析（必填）Ⅰ.酶的基本性質(zhì)——底物專一性一、實驗目的和要求1.了解酶的專一性。2.掌握驗證酶的專一性的基本原理及方法。3.學會排除干擾因素，設計酶學實驗。二、實驗基本原理酶是一種具有催化功能的蛋白質(zhì)。酶蛋白結(jié)構決定了酶的功能——酶的高效性，酶催化的反應（酶促反應）要比相應的沒有催化劑的反應快103-1017倍。酶催化作用的一個重要特點是具有高度的底物專一性，即一種酶只能對某一種底物或一類底物起催化作用，對其他底物無催化反應。根據(jù)各種酶對底物的選擇程度不同，它們的專一性可以分為下列幾種：1.相對專一性一種酶能夠催化一類具有相同化學鍵或基團的物質(zhì)進行某種類型的反應。2.絕對專一性：有些酶對底物的要求非常嚴格只作用于一種底物，而不作用于任何其他物質(zhì)。如脲酶只能催化尿素進行水解而生成二氧化碳和氨。如麥芽糖酶只作用于麥芽糖而不作用其它雙糖，淀粉酶只作用于淀粉，而不作用于纖維素。3.立體異構專一性有些酶只有作用于底物的立體異構物中的一種，而對另一種則全無作用。如酵母中的糖酶類只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。本實驗以唾液淀粉酶、蔗糖酶對淀粉、蔗糖水解反應的催化作用來觀察酶的專一性。采用Benedict試劑檢測反應產(chǎn)物。Benedict試劑是堿性硫酸銅溶液，具有一定的氧化能力，能與還原性糖的半縮醛羥基發(fā)生氧化還原反應，生成磚紅色氧化亞銅沉淀。Na2CO3+2H2O2NaOH+H2CO3CuSO4+…………篇二：實驗四酶的特性實驗說明：本實驗由四個小實驗組成，其中第一個實驗（酶的專一性）必做，其他三個小實驗選做（至少做一個）寫實驗報告時，可以只寫需要做的實驗內(nèi)容！實驗四酶的特性實驗一、實驗目的酶是生物催化劑，生物體內(nèi)化學反應基本上都是在酶的催化下進行的。通過本實驗了解酶催化的特異性、溫度對酶活力的影響、PH對酶活力的影響、激活劑和抑制劑對酶活力的影響，對于進一步掌握代謝反應及其調(diào)控機理具有十分重要的意義。二、實驗內(nèi)容本實驗由酶的專一性實驗、溫度對酶活力的影響、PH對酶活力的影響、激活劑和抑制劑對酶活力的影響4個小實驗組成。（一）酶的專一性1、實驗原理本實驗以唾液淀粉酶對淀粉和蔗糖的作用為例，來說明酶的專一性。淀粉和蔗糖無還原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成有還原性二糖的麥芽糖，但不能催化蔗糖的水解。用班氏試劑檢查糖的還原性。班氏試劑為堿性硫酸銅，能氧化具還原性的糖，生成磚紅色沉淀氧化亞銅。2、材料、儀器與試劑(1)材料：新鮮配制的唾液及其稀釋液(2)儀器：恒溫水浴；沸水?。辉嚬芗霸嚬芗?；(3)試劑：2%蔗糖溶液；溶于0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液；班氏試劑。3、實驗操作（1）稀釋唾液的制備①唾液的獲取用一次性杯取一定量的飲用水，漱口以清潔口腔，然后在嘴中含10-20ml飲用水，輕漱2min左右時間，即可獲得唾液的原液，內(nèi)含唾液淀粉酶。②不同稀釋度唾液的制備（用大試管）本實驗需制備1：1、1：5、1：20、1：50、1：200等五個不同濃度的稀釋唾液。舉例說明：1:5指的是稀釋了5倍的唾液，制備方法為1份原液+4份蒸餾水。1：20指的是稀釋了20倍的唾液，制備方法為1份1：5的稀釋液+3分蒸餾水。（2）唾液淀粉酶最佳稀釋度的確定（嚴格按表1添加順序做實驗，用小試管做實驗）表1唾液淀粉酶稀釋度的確定（2）淀粉酶的專一性…………篇三：質(zhì)粒的提取酶切實驗報告實驗一質(zhì)粒的提取酶切實驗目的掌握質(zhì)粒小量快速提取法。用瓊脂糖凝膠電泳法鑒定其純度。實驗原理質(zhì)粒是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子。大小在1~200kb之間，具有雙鏈閉合環(huán)狀結(jié)構的DNA分子。主要發(fā)現(xiàn)于細菌、放線菌和真菌細胞中。質(zhì)粒具有自主復制和轉(zhuǎn)錄能力，能使子代細胞保持它們恒定的拷貝數(shù)，可表達它攜帶的遺傳信息。他可獨立游離在細胞質(zhì)內(nèi)，也可整合到細菌染色體中，它離開宿主的細胞就不能存活，而它控制的許多生物學功能卻賦予宿主細胞的某些表型。采用溶菌酶可破壞菌體細胞壁，十二烷基磺酸鈉（SDS）可使細胞壁裂解，經(jīng)溶菌酶和陰離子去污劑（SDS）處理后，細菌DNA纏繞附著在細胞壁碎片上，離心時易被沉淀出來，而質(zhì)粒DNA則留在上清液中。用酒精沉淀洗滌，可得到質(zhì)粒DNA。在細胞內(nèi)，共價閉環(huán)DNA（cccDNA）常以超螺旋形式存在。若兩條鏈中有一條鏈發(fā)生一處或多處斷裂，分子就能旋轉(zhuǎn)而消除鏈的張力，這種松弛型的分子叫作開環(huán)DNA（ocDNA）。在電泳時，同一質(zhì)粒如以cccDNA形式存在，它比其開環(huán)和線狀DNA的泳動速度都快，因此在本實驗中，質(zhì)粒DNA在電泳凝膠中呈現(xiàn)3條區(qū)帶。限制性內(nèi)切酶是一種工具酶，這類酶的特點是具有能夠識別雙鏈DNA分子上的特異核苷酸順序的能力，能在這個特異性核苷酸序列內(nèi)，切斷DNA的雙鏈，形成一定長度和順序DNA片段。EcoRI和BglII的識別序列和切口是：EcoRI：G↓AATTCBglII:A↓GATCTG，A等核苷酸表示酶的識別序列，箭頭表示酶切口。限制性內(nèi)切酶對環(huán)狀質(zhì)粒DNA有多少切口，就能產(chǎn)生多少酶切片段，因此鑒定酶切后的片段在電泳凝膠的區(qū)帶數(shù)，就可以推斷酶切口的數(shù)目，從片段的遷移率可以大致判斷酶切片段大小的差別。用已知分子量的線狀DNA為對照，通過電泳遷移率的比較，就可以粗略推測分子形狀相同的未知DNA的分子量。實驗步驟…………篇四：實驗名稱堿性磷酸酶的分離純化實驗報告實驗名稱堿性磷酸酶的分離純化、比活性測定與動力學分析實驗日期20xx年10月25號實驗地點生化實驗室合作者指導老師總分教師簽名批改日期堿性磷酸酶（AKP或ALP）是一種底物特異性較低，在堿性條件下能水解多重磷酸單脂化合物的酶，需要鎂和錳離子為激活劑。AKP具有磷酸基團轉(zhuǎn)移活性，能將底物中的磷酸基團轉(zhuǎn)移到另一個含有羥基的接受體上，如磷酸基團的接受體是水，則其作用就是水解。AKP最適ＰＨ范圍為８.６－１０，動物中AKP主要存在于小腸粘膜、腎、骨骼、肝臟和胎盤等組織的細胞膜上。血清AKP主要來自肝，小部分來自骨骼。AKP可從組織中分離純化，也可以采用基因工程表達的方式獲得：將堿性磷酸酶基因克隆到重組載體，轉(zhuǎn)入宿主菌中進行重組表達，并從表達菌提取，并進行酶動力學分析。一實驗原理1、堿性磷酸酶的分離純化AKP分離純化的方法與一般蛋白質(zhì)的分離純化方法相似，常用中性鹽鹽析法、電泳法、色譜法、有機溶劑沉淀法等方法分離純化。有時需要多種方法配合使用，才能得到高純度的酶蛋白。本實驗采用有機溶劑沉淀法從兔肝勻漿液中提取分離AKP。正丁醇能使部分雜蛋白變性，過濾除去雜蛋白即為含有AKP的濾液，AKP能溶于終濃度為33%的丙酮或30%的乙醇中，而不溶于終濃度為50%的丙酮或60%的乙醇中，通過離心即可得到初步純化的AKP。2、堿性磷酸酶的比活性測定根據(jù)國際酶學委員會規(guī)定，酶的比活性用每毫克蛋白質(zhì)具有的酶活性來表示，單位（U/mg?pr）來表示。因此，測定樣品的比活性必須測定：a每毫升樣品中的蛋白質(zhì)毫克數(shù)；b每毫升樣品中的酶活性單位數(shù)。酶的純濃度越高酶的比活性也就越高。本實驗以磷酸苯二鈉為底物，由堿性磷酸酶催化水解，生成游離酚和磷酸鹽。酚在堿性條件下與4-氨基安替比作用，經(jīng)鐵氰化鉀氧化，生成紅色的醌衍生物，顏色深淺和酚的含量成正比。于510nm處比色，即可求出反應過程中產(chǎn)生的酚含量，而堿性磷酸酶的活性單位可定義為：在37攝氏度保溫15min每產(chǎn)生1mg的酚為一個酶活性單位。樣品蛋白質(zhì)含量測定用Folin-酚法測定。…………篇五：酶的特異性(專一性)及影響酶活性的因素酶的特異性（專一性）及影響酶活性的因素實驗目的1.掌握檢查酶特異性的方法和原理。2.了解溫度對酶活性的影響。3.了解激活劑、抑制劑對酶活力的影響。實驗原理1.酶的專一性酶是生物體中一種具有催化功能的特殊蛋白質(zhì)（傳統(tǒng)酶的概念），也常稱為生物催化劑。它與一般催化劑的最主要區(qū)別就是具有高度的特異性，即專一性。根據(jù)各種酶對底物的選擇程度不同，可分為絕對專一性、相對專一性、立體異構專一性，。例如唾液淀粉酶屬于相對專一性酶，它只能隨機作用于淀粉鏈內(nèi)部的a——1，4糖苷鍵，使其分子迅速斷裂成較短的鏈，稱為糊精，糊精分子量遞減，淀粉——大分子糊精——中分子糊精——小分子糊精——簡單分子糊精——麥芽糖和a——糊精（含a——1，6糖苷鍵的短鏈聚糖，平均分子量為8個殘基）。由于淀粉酶催化所形成的產(chǎn)物都是還原糖，故可用靈敏度較高的Benedict試劑檢測和觀察。2.溫度對酶促反應速度的影響酶的催化作用受溫度的影響很大，與一般化學反應一樣，提高溫度可以增加酶促反應的速度，通常溫度每升高10℃，反應速度加快一倍左右。另一方面酶是一種蛋白質(zhì)，溫度過高可引起蛋白質(zhì)變性，導致酶的失活。因此，反應速度達到最大值以后，隨著溫度的升高，反應速度反而逐漸下降，以至完全停止反應。反應速度達到最大值時的溫度稱為酶作用的最適溫度。大多數(shù)動物酶的最適溫度為37—40℃，植物酶的最適溫度為50—60℃。但一種酶的最適溫度不是完全固定的，它與作用的時間稱短有關，反應時間增長時，最適溫度向數(shù)值較低的方向移動。最適溫度不是酶的特征性物理常數(shù)。酶對溫度的穩(wěn)定性與其存在形式有關。大多數(shù)酶在干燥的固體狀態(tài)與比較穩(wěn)定，能在室溫下保存數(shù)月至一年，溶液中的酶，易被微生物污染，常難長期保存，在高溫的情況與，如100℃即可失活。低溫降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。3.激活劑和抑制劑對酶活力的影響…………篇六：生物化學實驗報告生物化學實驗報告供檢驗護理專業(yè)使用班級姓名鄭州大學護理學院實驗一血清蛋白質(zhì)醋酸纖維薄膜電泳[目的][原理][儀器組成][操作與結(jié)果][結(jié)果粘貼]實驗二酶的特異性[目的][原理][操作與結(jié)果]將以上1、2、3號試管置于37℃水浴箱保溫10分鐘。然后向各管中加班氏試劑20滴，沸水中煮沸10分鐘，取出勿振搖試管，觀察結(jié)果并記錄。[分析]三管結(jié)果及原因。實驗三溫度、pH、激活劑、抑制劑對酶反應的影響[目的][原理][操作與結(jié)果]（一）溫度對酶反應的影響[分析各管的顏色變化原因]（二）pH對酶反應的影響[分析各管的顏色變化原因]（三）激活劑、抑制劑對酶反應的影響[分析各管的顏色變化原因]實驗四721型分光光度計的使用[目的][原理][構造][使用]實驗五血清葡萄糖的測定[目的][原理][操作]將上述各管混勻，置于37℃水浴箱中保溫15分鐘，取出分別倒入0.5cm的比色杯中，選擇波長λ=505nm，用空白管調(diào)節(jié)“0”及“100”，分別讀取標準管及測定管的吸光度A標、A測。[計算][臨床意義]實驗六琥珀酸脫氫酶的作用及抑制[目的][原理][操作]取三支試管按下表操作[思考]1、液體石蠟起什么作用？2、各管顏色變化的原因？實驗七肝臟中酮體的生成作用[目的][原理][操作][分析各管顏色變化的原因]實驗八血漿CO2CP測定[目的][原理][操作][計算][意義]實驗九血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶測定[目的][原理][操作]將空白管、測定管分別混勻，置入37℃水浴箱保溫30分鐘，取出加入2.4二硝基笨肼的鹽酸溶液各0.5ml混勻后再置入37℃水浴保溫20分鐘。取出加入0.4M的NaOH5ml，混勻。選擇波長λ=505nm，用空白管調(diào)節(jié)“0”及“100”，讀取測定管的吸光度A測。查標準曲線。…………篇七：酶的特異性1《生物化學實驗》授課教案授課時間2010.11.2第6次課…………篇八：Ex16酶的特異性和影響酶反應速度的因素實驗16酶的特異性和影響酶反應速度的因素一、目的1、了解酶的特異性。2、了解溫度、pH值、激活劑和抑制劑等因素對酶反應速度的影響。3、掌握檢查酶的特異性，酶的激活劑和抑制劑影響酶反應速度的方法及原理。4、學習測定酶最適pH值的方法。二、原理酶是生物體中具有催化功能的蛋白質(zhì)，因此也叫生物催生劑。生物體內(nèi)存在多種多樣的酶，從而使生物體在溫和的條件下能迅速完成復雜的生物化學反應。酶具高度的特異性。所謂特異性是指一種酶能對一種化合物或一類化合物起催化作用，而不能對別的物質(zhì)發(fā)生催化反應。淀粉和蔗糖無還原性。唾液淀粉酶水解溶粉生成有還原性的麥芽糖，但不能催化蔗糖水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解產(chǎn)生還原性的葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉水解，用Benedict試劑檢查糖的還原性。溫度和pH對酶的活性有顯著的影響，使反應速度達最大反應值時的溫度稱為某種酶作用的最適溫度。大多數(shù)動物酶的最適溫度為37℃~40℃，植物酶的最適溫度為50℃~60℃，能使酶表現(xiàn)其活性最高時的pH值稱為該酶的最適pH值，不同酶的最適pH值不同。酶的活性常受某些物質(zhì)的影響，能使酶活性增加的物質(zhì)稱為酶的激活劑，能使酶的活性降低的物質(zhì)