紫外可見分光光度計(jì)的應(yīng)用

無(wú)機(jī)與分析技術(shù)紫外可見-可見分光光度法紫外-可見分光光度計(jì)的應(yīng)用一、

定性分析二、

定量分析三、

純度檢查紫外-可見分光光度計(jì)的應(yīng)用一、

定性分析（一）定性鑒別

化合物紫外-可見吸收光譜的形狀、吸收峰數(shù)目、強(qiáng)度、位置等，是定性分析的主要依據(jù)，而最大吸收波長(zhǎng)λmax及相應(yīng)的εmax是定性分析的最主要參數(shù)。

紫外-可見分光光度計(jì)的應(yīng)用（一）定性鑒別采用比較法

將測(cè)定的未知試樣的紫外吸收光譜圖同標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的光譜圖進(jìn)行比較，當(dāng)濃度和溶劑等條件相同時(shí)，若兩者圖譜相同（包括吸收曲線形狀、吸收峰數(shù)目、λmax及εmax等），則兩者可能是同一化合物。例如：合成維生素A2的鑒定天然維生素A2和合成維生素A2

維生素A2紫外吸收光譜紫外-可見分光光度計(jì)的應(yīng)用（一）定性鑒別采用比較法若無(wú)標(biāo)準(zhǔn)物，可將未知試樣的紫外吸收光譜圖同標(biāo)準(zhǔn)試樣的光譜圖或有關(guān)電子光譜數(shù)據(jù)資料進(jìn)行對(duì)照，若兩者吸收光譜的形狀、吸收峰數(shù)目、λmax及εmax等相同，則可初步確定在它們的分子結(jié)構(gòu)中，存在相同的生色團(tuán)（如羰基、苯環(huán)和共軛雙鍵體系等）。紫外-可見分光光度計(jì)的應(yīng)用（二）結(jié)構(gòu)分析1.有機(jī)官能團(tuán)的推斷2.有機(jī)異構(gòu)體的推斷

紫外-可見分光光度計(jì)的應(yīng)用二、

定量分析單組份定量分析標(biāo)準(zhǔn)曲線法標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法吸光系數(shù)法紫外-可見分光光度計(jì)的應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)曲線法（A-c）先配制一系列濃度不同的標(biāo)準(zhǔn)溶液（5～10個(gè)）在相同條件下（合適波長(zhǎng)）分別測(cè)定每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度以吸光度A為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度c為橫坐標(biāo)，繪制A-c標(biāo)準(zhǔn)曲線在相同條件下測(cè)定試樣溶液的吸光度根據(jù)試樣溶液所測(cè)得的吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出對(duì)應(yīng)的試樣溶液濃度或含量計(jì)算原樣品的含量百分比或標(biāo)示量含量百分比。紫外-可見分光光度計(jì)的應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照法在相同實(shí)驗(yàn)條件下，配制試樣溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液，在選定波長(zhǎng)處，分別測(cè)量吸光度。V為第一次稀釋樣品的容量瓶的容積D第一次稀釋溶液后的溶液的稀釋倍數(shù)S樣品為樣品的質(zhì)量。紫外-可見分光光度計(jì)的應(yīng)用吸光系數(shù)法根據(jù)朗伯-比耳定律A＝KcL，已知吸收池厚度L和吸光系數(shù)ε或E

，根據(jù)測(cè)得的吸光度A算出溶液的濃度或含量。

c原樣

=cs×稀釋倍數(shù)紫外-可見分光光度計(jì)的應(yīng)用三、

純度檢查1．雜質(zhì)檢查若某一化合物在紫外-可見光區(qū)沒有明顯吸收峰，而其中的雜質(zhì)有較強(qiáng)的吸收峰，可通過(guò)試樣的紫外-可見吸收光譜圖，檢出該化合物中是否含有雜質(zhì)。例如，檢測(cè)甲醇中是否含有雜質(zhì)苯，可根據(jù)苯在λmax=256nm處有B吸收帶，而甲醇在此波長(zhǎng)處無(wú)吸收來(lái)確定。紫外-可見分光光度計(jì)的應(yīng)用2．雜質(zhì)限量檢查藥物中的雜質(zhì)常需制定一個(gè)允許其存在的限度。（1）利用雜質(zhì)與藥物在紫外-可見光區(qū)的吸收差異，選用適當(dāng)波長(zhǎng)可以進(jìn)行待測(cè)物的純度檢查。如檢查腎上腺素中存在的腎上腺酮腎上腺素（虛線）與腎上腺酮的吸收光譜紫外-可見分光光度計(jì)的應(yīng)用2．雜質(zhì)限量檢查（2）利用不同波長(zhǎng)處吸收度的比值來(lái)控制雜質(zhì)含量（3）藥物在紫外-可見光區(qū)有