衛(wèi)健委臨檢中心 臨床生化檢驗結果準確性有關問題

臨床生化檢驗結果準確性相關問題陳文祥衛(wèi)生部臨床檢驗中心衛(wèi)生部北京醫(yī)院老年醫(yī)學研究所2009.2.27如何使檢驗結果準確？?使用好的檢驗方法?做好質量控制CNASCL-002(ISO15189)5.5檢驗程序—使用經(jīng)確認的程序，性能適合其預期用途(5.5.2)(確認)—用于檢驗之前予以評估，證實可給出滿意結果(5.5.2)(驗證)5.6檢驗程序的質量保證―運行內部質量控制體系(5.6.1)(室內質控)―適用且可能時，評定檢驗結果的不確定度(5.6.2)(不確定度)―實施校準和正確度驗證計劃，保證結果溯源性。如果無法實現(xiàn)或不適用，采用其他方式保證結果的可信度(5.6.3)(溯源)―參加如外部質量評價計劃(5.6.4)(室間質評)CNASCL-002(ISO15189)5.5檢驗程序—使用經(jīng)確認的程序，性能適合其預期用途(5.5.2)

(確認)—用于檢驗之前予以評估，證實可給出滿意結果(5.5.2)(驗證)5.6檢驗程序的質量保證―運行內部質量控制體系(5.6.1)(室內質控)―適用且可能時，評定檢驗結果的不確定度(5.6.2)(不確定度)―實施校準和正確度驗證計劃，保證結果溯源性。如果無法實現(xiàn)或不適用，采用其他方式保證結果的可信度(5.6.3)(溯源)―參加如外部質量評價計劃(5.6.4)(室間質評)關于“確認”(Validation)?方法學研究或方法產(chǎn)品性能研究?由方法建立者或產(chǎn)品生產(chǎn)者完成?給出主要方法性能：―準確度(accuracy)―精密度(precision)―特異性(specificity)―檢測限和定量限(LODandLOQ,"靈敏度")―線性(linearity)―耐變性(robustness)......血清尿素，酶法

vs.ID-GC/MS：Correlation趙海艦等.中華檢驗醫(yī)學雜志

2008;31(3):270-275血清尿素，酶法

vs.ID-GC/MS：%Bias趙海艦等.中華檢驗醫(yī)學雜志

2008;31(3):270-275血清TG，酶法

vs.ID-LC/MS/MS：Correlation周偉燕等.中華檢驗醫(yī)學雜志

2008;31(5):568-573血清TG，酶法

vs.ID-LC/MS/MS：%Bias周偉燕等.中華檢驗醫(yī)學雜志

2008;31(5):568-573血清肌酐：苦味酸法

or酶法

vs.HPLC，特異性ThienpontLM,etal.ClinChem1995;41:995血清肌酐：苦味酸法

or酶法

vs.HPLC，特異性ThienpontLM,etal.ClinChem1995;41:995血清肌酐：苦味酸法

vs.酶法，特異性PeakeM,WhitingM.ClinBiochemRev2006;27:173血清肌酐：苦味酸法

vs.酶法，特異性與溯源溯源不能糾正非特異性問題PanteghiniM.ClinChemLabMed2008;46常規(guī)方法評價,HDLC相關常規(guī)方法評價,HDLC偏差,

與根據(jù)生物學變異計算的允許偏差及總誤差比較常規(guī)方法評價,LDLC相關常規(guī)方法評價,LDLC偏差,

與根據(jù)生物學變異計算的允許偏差及總誤差比較什么是好的檢驗方法？?足夠特異、靈敏、精密?校準可溯源?有實驗證據(jù)?有些檢驗項目還難以實現(xiàn)CNASCL-002(ISO15189)5.5檢驗程序—使用經(jīng)確認的程序，性能適合其預期用途(5.5.2)(確認)—用于檢驗之前予以評估，證實可給出滿意結果(5.5.2)

(驗證)5.6檢驗程序的質量保證―運行內部質量控制體系(5.6.1)(室內質控)―適用且可能時，評定檢驗結果的不確定度(5.6.2)(不確定度)―實施校準和正確度驗證計劃，保證結果溯源性。如果無法實現(xiàn)或不適用，采用其他方式保證結果的可信度(5.6.3)(溯源)―參加如外部質量評價計劃(5.6.4)(室間質評)關于驗證

(Verification)?對主要方法性能的證實?在引入新方法時進行?對配套系統(tǒng)，一般驗證下列指標：―準確度(accuracy)―精密度(precision)―可報范圍(reportablerange)―參考區(qū)間(referenceinterval)?對非配套系統(tǒng)，驗證更為廣泛，除上述指標外：―分析特異性―分析靈敏度―任何其他必要指標[TheU.S.CLIA]TheU.S.CLIARulesSec.493.1253

Standard:Establishmentandverificationofperformancespecifications(a)

Applicability.

Laboratories

are

not

required

to

verify

or

establish

performance

specifications

for

any

test

systemusedbythelaboratorybeforeApril24,2003.(b)--(1)

Verification

of

performance

specifications.

Each

laboratory

that

introduces

an

unmodified,

FDA-cleared

orapprovedtestsystemmustdothefollowingbeforereportingpatienttestresults:(i)

Demonstrate

that

it

can

obtain

performance

specifications

comparable

to

those

established

by

the

manufacturer

forthefollowingperformancecharacteristics:(A)Accuracy(B)Precision(C)Reportablerangeoftestresultsforthetestsystem(ii)

Verify

that

the

manufacturer's

reference

intervals

(normal

values)

are

appropriate

for

the

laboratory's

patientpopulation.(2)

Establishment

of

performance

specifications.

Each

laboratory

that

modifies

an

FDA-cleared

or

approved

testsystem,

or

introduces

a

test

system

not

subject

to

FDA

clearance

or

approval

(including

methods

developed

in-house

and

standardized

methods

such

as

text

book

procedures,

Gram

stain,

or

potassium

hydroxide

preparations),

oruses

a

test

system

in

which

performance

specifications

are

not

provided

by

the

manufacturer

must,

beforereporting

patient

test

results,

establish

for

each

test

system

the

performance

specifications

for

the

followingperformancecharacteristics,as

applicable:(i)Accuracy.a)修改FDA批準方法b)未經(jīng)FDA批準方法(ii)Precision.(iii)Analyticalsensitivity.c)經(jīng)批準，但廠家未提供性能指標(iv)Analyticalspecificitytoincludeinterferingsubstances.(v)Reportablerangeoftestresultsforthetestsystem.(vi)Referenceintervals(normalvalues).(vii)Anyotherperformancecharacteristicrequiredfortestperformance.校準物互通性（基質效應）甘油三酯，7種校準物方法A方法B校準物互通性（基質效應）重量法配制膽固醇標準溶液（水溶液，50-400mg/dL）用于校準某種酶法，測定膽固醇標準物質（GBW）（新鮮冰凍血清）certifiedvaluemeasuredbiasaverageA0.11930.22990.45670.68560.9169sd0.00060.00200.00030.00100.0017cv0.470.870.060.140.18slope

intercept0.0021

0.0125

0.99996correlw5051.32w100w200w300w400103.04208.02316.65428.30GBW1GBW2GBW3GBW40.41540.39150.32100.26100.00150.00190.00220.00150.360.490.690.58197.6184.1152.4122.1190.18178.90145.62117.28-3.75-2.82-4.45-3.95CDCApproachtoTraceabilityHumanSerumSamplesReferenceMethodFieldMethodAssayPatientSpecimensSameResults?yesnoAdjustCalibration驗證有關問題?何種情況下需進行驗證?―在引進新方法時：驗證必要的方法性能―使用中的方法：提供證據(jù)(室內質控、室間質評結果等)?非配套系統(tǒng)的不同情況?―校準物改變：以準確性驗證為主―方法改變(樣品-試劑比、空白方式、試劑加入、速率vs.終點等)：較廣泛的驗證準確度驗證方式?分析參考(標準)物質?與參考方法對比?與能給出臨床有效結果的方法進行分割樣品對比[AppendixCof

theStateOperationManual]AppendixCoftheStateOperationManual(SOM)SurveyProceduresandInterpretiveGuidelinesforLaboratoriesandLaboratoryServicesD5421準確度驗證有關問題?關于不同驗證方式―理想方式：與參考方法對比(CDCCRMLN實驗室認證計劃)―方便、有效的方式：分析可互換的參考(標準)物質―目前可行的方式：常規(guī)方法對比?關于常規(guī)方法對比―與誰比？

主要是自己實驗室比―與何種方法比？可以是自己實驗室正在使用的方法―出明顯現(xiàn)差異怎么辦？盡量發(fā)現(xiàn)哪種方法更準準確度判定標準?準確≠“零”誤差?區(qū)分總誤差(TE)、系統(tǒng)誤差(SE)和隨機誤差(RE)?準確性指標種類―室間評計劃規(guī)定(TE；衍生的SE和RE，如1/4TE)―根據(jù)生物學變異(TE、SE和RE)―專業(yè)組織建議(TE、SE和RE)―政府規(guī)定(TE、SE和RE)?指標適用性―與參考方法或標準物質比較―與其它常規(guī)方法比較?CNASCL-002(ISO15189)5.5檢驗程序—使用經(jīng)確認的程序，性能適合其預期用途(5.5.2)(確認)—用于檢驗之前予以評估，證實可給出滿意結果(5.5.2)(驗證)5.6檢驗程序的質量保證―運行內部質量控制體系(5.6.1)(室內質控)―適用且可能時，評定檢驗結果的不確定度(5.6.2)(不確定度)―實施校準和正確度驗證計劃，保證結果溯源性。如果無法實現(xiàn)或不適用，采用其他方式保證結果的可信度(5.6.3)

(溯源)―參加如外部質量評價計劃(5.6.4)(室間質評)CNASCL-002:5.6.3

應設計并實施測量系統(tǒng)的校準和正確度驗證計劃，以確保結果可溯源至SI

單位，或可參比至自然常數(shù)或其他規(guī)定的參考值。如果上述無法實現(xiàn)或不適用應用其他方式提供對結果的可信度，包括但不限于以下方法：a)

參加適當?shù)膶嶒炇议g比對計劃b)

使用有證書說明其材料特性的適當參考物質c)

用其他程序進行檢驗或校準d)

比率或倒易型測量e)

使用各方承認的協(xié)議標準或方法f)

供應商或制造商提供的溯源性信息關于“溯源”(5.6.3)?與方法確認(或選擇)有關(5.5)?針對測量系統(tǒng)，目的是保證結果的可信度?制定校準計劃―用何校準物―何時校準(校準頻率)?制定正確度驗證計劃―分析可互換的參考標準物質―與參考方法對比?保證結果可信度的其他方式(不適用或無法實現(xiàn)時)―室間質評或實驗室檢比對―與其它常規(guī)方法比較CNASCL-002(ISO15189)5.5檢驗程序—使用經(jīng)確認的程序，性能適合其預期用途(5.5.2)(確認)—用于檢驗之前予以評估，證實可給出滿意結果(5.5.2)(驗證)5.6檢驗程序的質量保證―運行內部質量控制體系(5.6.1)(室內質控)―適用且可能時，評定檢驗結果的不確定度(5.6.2)(不確定度)―實施校準和正確度驗證計劃，保證結果溯源性。如果無法實現(xiàn)或不適用，采用其他方式保證結果的可信度(5.6.3)(溯源)―參加如外部質量評價計劃(5.6.4)(室間質評)關于測量不確定度?對測量結果的懷疑程度?代表測量結果的質量?測量結果是被測量的估計值，真值不可知?估計有好有壞，僅給出估計值，不給其質量，結果不完整，不能有效利用結果，不能比較?任何測量結果都有不確定性?不確定度不代表結果不好，相反增加結果的有用性?不確定度評定也是質量改進的手段測量不確定度及其評定?測量不確定度：與測量結果相關的參數(shù)，表征可合理地賦予被測量的值的分散性?不確定度評定的規(guī)則與方法

(GUM)(化學,QUAM)―規(guī)定或定義被測量―努力鑒定系統(tǒng)“誤差”(效應)并進行修正―測量模型化(鑒別不確定度來源;確定合成方式)―不確定度分量評定(用標準差表示，A、B類評定)―不確定度合成不確定度與誤差?誤差―隨機誤差是測量結果與無限次測量的結果的均值之差―系統(tǒng)誤差是無限次測量的結果的均值與真值之差―誤差是隨機誤差與系統(tǒng)誤差之和，是一個測量結果相對于真值的差值―已知誤差可用于結果修正―誤差不可知，因真值不可得，無限次測量也無法實現(xiàn)―標準差及偏倚不是隨機誤差和系統(tǒng)誤差，是由隨機效應和修正系統(tǒng)效應不完善引起的測量結果的變異性或不確定性?不確定度―修正已知系統(tǒng)效應―分析綜合各種變異―是結果的不確定性，不能用于結果的修正E=RE+SE不確定度與總誤差?總誤差―主要見于常規(guī)臨床檢驗領域―常規(guī)臨床檢驗“真值”已知(約定真值，參考方法定值或室間質評計劃統(tǒng)計值)―是“系統(tǒng)誤差”和一定概率下最大“隨機誤差”的線性合成，相對“真值”而言―總誤差實際意義和作用與不確定度相似―總誤差可能僅限于常規(guī)臨床檢驗?不確定度―測量結果本身的分散性―以方差的形式合成，―不確定度適用于所有測量領域TE=Bias+1.65SDCNAS-CL02:5.6.2

適用且可能時，實驗室應確定檢驗結果的不確定度。應考慮所有重要的不確定度分量。不確定度來源可包括采樣、樣品制備、樣品部分的選擇、校準品、參考物質、輸入量、所用設備、環(huán)境條件、樣品情況和操作人員的變更臨床檢驗中的不確定度評定?主要采用B類評定?主要不確定度