生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)

關(guān)于生化制藥基本技術(shù)生化制藥技術(shù)第1頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第二章生物制藥基本技術(shù)生物制藥是把生物體內(nèi)的具有生物活性的基本物質(zhì)，保持原來的結(jié)構(gòu)和功能，又能在含有多種物質(zhì)的液相或固相中較高純度的分離出來。它是一項(xiàng)嚴(yán)格、細(xì)致、復(fù)雜的工藝過程，涉及物理、化學(xué)、生物學(xué)、工程等方面的知識和操作技術(shù)。對于一個新研制的生物藥物，從查閱文獻(xiàn)開始，到探索實(shí)驗(yàn)、條件考察（記錄客觀）、總結(jié)制定工藝規(guī)程、制定分析鑒定方法，再進(jìn)行中試放大，全面考察工藝是否成熟，是否穩(wěn)定等。問題：1、標(biāo)準(zhǔn)化方法？2、如何發(fā)現(xiàn)或研制新藥？第2頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月基本制造方法1、提取法(Extraction)2、發(fā)酵法（Zymotechnics）3、化學(xué)合成（Chemicalsynthesize）4、組織培養(yǎng)法（Tissueculture）5、現(xiàn)代生物技術(shù)(ModernBiotechnics):Geneengineering,Enzymeengineering,Cellengineering,proteinEngineering,Fermentationengineering第3頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月生化制藥的六個階段1.原料的選擇和預(yù)處理

2.固液分離

3.提?。簭脑现薪?jīng)溶劑分離有效成分，制成粗品的工藝過程。

4.精制/純化：粗制品經(jīng)鹽析、有機(jī)溶劑沉淀、吸附、層析、透析、超離心、膜分離、結(jié)晶等步驟進(jìn)行精制的工藝過程。

5.成品加工/濃縮、干燥及保存、制劑：原料藥（精制品）經(jīng)精細(xì)加工制成片劑、針劑、凍干劑、粉劑等供臨床應(yīng)用的各種劑型。第4頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月一、原料選擇和預(yù)處理

（RawMaterialSelectingandPretreatment）

原料選擇的基本準(zhǔn)則：1、在大量的信息資料和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選擇目標(biāo)原料。2、選擇有效成分含量高的新鮮材料；3、來源豐富易得；4、制造工藝簡單易行；5、成本比較低；6、原料的采集不破壞生態(tài)環(huán)境,選擇對環(huán)境友好的原材料資源，防止生物入侵。第5頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月預(yù)處理方法：1、動物組織先要剔除結(jié)締組織、脂肪組織等非活性部分；植物種子去殼除脂；微生物要進(jìn)行菌體與發(fā)酵液分離等基本操作。便于貯存和運(yùn)輸。2、冷凍法預(yù)處理：有些材料要冷凍保存或低溫保存，以便抑制微生物和酶的作用。3、有機(jī)溶劑除去部分水分：用丙酮或乙醇進(jìn)行脫水和脫脂，有利于貯存。第6頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月原料的粉碎：在提取前先將大塊的原料粉碎或絞碎成適度的粒度，或?qū)⒓?xì)胞破碎，使胞內(nèi)活性物質(zhì)充分釋放到溶液中，有利于提取或吸附。動物臟器組織：常用絞肉機(jī)機(jī)械法粉碎；植物肉質(zhì)組織：常用磨碎法；微生物：常用自溶、冷熱交替、加砂研磨、超聲、加壓等處理方法。

第7頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月1.機(jī)械法：組織搗碎機(jī)、勻漿器、研缽、球磨機(jī)、萬能粉碎機(jī)、絞肉機(jī)、擊碎機(jī)、刨片機(jī)。動物組織多在冰凍狀態(tài)絞碎、溶漿。2.物理法

A、反復(fù)凍融法：把待破碎的樣品冷至-20℃-15℃，使之凝固，然后緩慢的溶解，如此反復(fù)操作，大部分動物性細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)的顆?？梢云扑?。

B、冷熱交替法：將材料投入沸水中，在90℃左右維持?jǐn)?shù)分鐘，立即置于冰浴中，使之迅速冷卻，絕大部分細(xì)胞被破壞。此法多用于細(xì)菌或病毒中提取蛋白和核酸。第8頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

C、超聲波處理法：多用于微生物材料，處理的效果與樣品濃度、使用頻率有關(guān)。用大腸桿菌制備各種酶時，常用50~100mg/L菌體濃度，在1~10KC頻率下處理10~15min。操作時注意避免溶液中氣泡的存在。

D、加壓破碎法：加氣壓或水壓，達(dá)0.59~34.32MPa(210~350kgf/cm2)的壓力時，可使90%以上細(xì)胞被壓碎。多用于微生物酶制劑的工業(yè)制備。第9頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月3.生化及化學(xué)法：

A.自溶法：將新鮮的生物材料存放在一定的pH和適當(dāng)溫度下，利用組織細(xì)胞中自身的酶系將細(xì)胞破壞，使細(xì)胞內(nèi)含物釋放出來的方法。自溶的溫度，動物材料在0-4℃，微生物在室溫下。自溶時，需加少量的防腐劑，甲苯、氯仿，以防止外界細(xì)菌的污染。*由于自溶時間較長，不易控制，故制造具有活性的核酸和蛋白質(zhì)時比較少用。第10頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月B.溶菌酶處理法：溶菌酶是專一地破壞細(xì)菌細(xì)胞壁的酶。多用于微生物，對蝸牛酶、纖維酶及植物細(xì)胞也適用。如用噬菌體感染大腸桿菌細(xì)胞制造DNA時，采用pH8.0的0.1mol/LTris-0.01mol/LEDTA制成2億/ml的細(xì)胞懸液，然后加入100μg~1mg的溶菌酶，在37°C保溫10min，細(xì)菌胞壁即被破壞。

C.表面活性劑處理法：表面活性劑的分子中，兼有親脂性和親水性基團(tuán)，能降低水的界面張力，具有乳化、分散、增溶作用。常用有：SDS、氯化十二烷基吡啶、去氧膽酸鈉。第11頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月提取：也稱抽提、萃取，就是利用一種溶劑對物質(zhì)的不同溶解度，從化合物中分離出一種或幾種組分的過程。分為固體處理（液—固萃?。┖鸵后w處理（液—液萃?。?。提取條件的選擇：

1、溶劑:常用水、稀鹽、稀酸、稀堿，有機(jī)溶劑如乙醇、丙酮、氯仿、四氯化碳、丁醇等。丁醇提取的pH、溫度范圍較廣（pH3-6,-2-40℃）。適用于動植物和微生物原料。

2、pH:與溶解度和穩(wěn)定性有很大關(guān)系，一般選擇在pI的兩側(cè)。

三、提取Extraction第12頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月3、溫度：一般在5℃以下，但對溫度耐受力較大的藥物，可適當(dāng)?shù)奶岣邷囟?，使雜蛋白變性分離，有利于提取和純化。如胃蛋白酶、酵母醇脫氫酶及多肽激素類，選擇37-50℃

提取，效果較好。影響提取的因素：

1、被提取物質(zhì)溶解度的大?。阂话銟O性對極性；非極性對非極性；高溫；遠(yuǎn)離等電點(diǎn)。

2、擴(kuò)散作用的影響：3、分配作用的影響：分配定律第13頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月四、分離純化SeparationandPurification1、鹽析法利用不同的蛋白質(zhì)在高濃度鹽溶液中，溶解度不同程度的降低來進(jìn)行分離純化。在低鹽濃度下，溶解度隨著鹽濃度升高而增加，稱鹽溶作用；當(dāng)鹽濃度不斷升高時，不同蛋白質(zhì)的溶解度又以不同程度下降并先后析出沉淀，稱鹽析作用。

優(yōu)點(diǎn)：設(shè)備和條件要求低，安全應(yīng)用范圍廣泛。在高鹽情況下，蛋白質(zhì)不易發(fā)生變化，一般在室溫下操作。

缺點(diǎn)：分級分離能力不高。

常用的中性鹽：硫酸銨、硫酸鎂、硫酸鈉、氯化鈉、磷酸鈉。

第14頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月鹽析時應(yīng)注意的幾個問題：（1）鹽飽和度：由于蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)不同，鹽析要求的飽和度也不同。要按工藝要求，正確計算飽和度。（2）pH值的選擇：蛋白質(zhì)在pI時的溶解度最小。因此，進(jìn)行鹽析時的pH，要選擇在被分離蛋白質(zhì)的pI附近。（3）蛋白質(zhì)濃度：在相同條件下，蛋白質(zhì)濃度越大越易沉淀，使用鹽的飽和度極限也愈低。蛋白質(zhì)濃度愈高，其他蛋白質(zhì)共沉作用也愈強(qiáng)，這是不希望的。選擇適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)濃度，可避免共沉的干擾。第15頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

（4）溫度：一般在室溫下進(jìn)行，濃鹽對蛋白質(zhì)有保護(hù)作用。但對溫度敏感的，要在低溫下進(jìn)行。

常在0-4℃范圍內(nèi)迅速操作。如尿激酶。（5）鹽析沉淀物的脫鹽：鹽析的沉淀分離后，經(jīng)脫鹽才能獲得純品。最常用的脫鹽方法是透析，時間一般較長，應(yīng)常換透析液，注意防止污染。2、有機(jī)溶劑沉淀法利用不同蛋白質(zhì)在不同濃度的有機(jī)溶劑中的溶解度差異而分離目的蛋白質(zhì)的方法。蛋白質(zhì)的沉淀與溶解，與溶劑的介電常數(shù)有關(guān)。降低溶液的介電常數(shù)，使其溶解度變小，同時，還破壞蛋白質(zhì)的水化膜而使蛋白質(zhì)沉淀析出。

第16頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月幾種溶劑的介電常數(shù)溶劑名稱20℃時的介電常數(shù)溶劑名稱20℃時的介電常數(shù)乙醚4.33甲醇33

丙酮21.4水80

乙醇242.5mol/L甘氨酸水溶液137經(jīng)驗(yàn)：如30-40%乙醇沉淀的物質(zhì)，改用丙酮時，其體積分?jǐn)?shù)可減少10%左右。即可用

20-30%的丙酮；而70-80%乙醇沉淀的物質(zhì)，可用50-60%的丙酮即可。注：水有較高的介電常數(shù)，具有很好的溶劑性能，是一種廣譜溶劑。有機(jī)溶劑法比鹽析法分辨力強(qiáng)，沉淀也好過濾，易干燥，但對有些生物活性物質(zhì)能引起失活和變性。應(yīng)用時還要注意揮發(fā)和火災(zāi)等。第17頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月有機(jī)沉淀法應(yīng)注意的問題

（1）控制工藝過程的溫度：整個操作過程應(yīng)在低溫下進(jìn)行，而且最好是同一溫度。（2）防止溶劑局部濃度過高：加入有機(jī)溶劑時攪拌要均勻，速度要適當(dāng)，避免局部濃度過高，引起沉淀物的破壞、變性或失活。（3）及時處理沉淀物：沉淀物經(jīng)過濾或離心后，要立即用水或緩沖液溶解，降低有機(jī)溶劑的濃度。（4）pH的選擇：在待沉淀蛋白質(zhì)的pI附近。（5）有機(jī)溶劑是酶和蛋白質(zhì)的變性因素，尤其是對敏感酶類。第18頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月3、等電點(diǎn)沉淀法利用蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時的溶解度最低，而各種蛋白質(zhì)又具有不同的等電點(diǎn)的特性進(jìn)行分離的工藝過程。由于各種蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時，仍有一定的溶解度而沉淀不完全，多數(shù)蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)又都十分接近，所以單獨(dú)使用效果不理想，分辨力差，多用于提取后除雜蛋白。實(shí)際生產(chǎn)中常與有機(jī)溶劑沉淀法、鹽析法聯(lián)合使用。第19頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月4、膜分離法膜分離技術(shù)包括：超濾、反滲透析、電滲析、微孔過濾、氣體滲析和超精密過濾。（1）超濾：根據(jù)溶質(zhì)分子和懸浮粒子是否通過多孔膜來進(jìn)行篩分。在液壓的驅(qū)動下，能通過超濾膜的分離粒子的范圍，一般在0.001—0.01μm。即利用一種特制的膜對溶液中的各種溶質(zhì)分子進(jìn)行選擇性過濾。優(yōu)點(diǎn)：成本低、操作方便、條件溫和、能較好地保持藥物活性、回收率高。適用于酶和蛋白質(zhì)藥物的分離、濃縮、脫鹽、提純、除菌、除病毒和熱原。第20頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）反滲透：以高分子透過性薄膜為分離介質(zhì)，在超過溶液滲透壓力的情況下，使溶液中的溶劑透過薄膜，同時使溶質(zhì)和不溶物阻截在膜前。這一過程類似于滲透,但方向相反，即溶劑從高濃度一側(cè)傳遞到濃度低的一側(cè)，故稱反滲透。

特點(diǎn)：能耗少，體積小，適應(yīng)大規(guī)模生產(chǎn)。（3）微孔濾膜：由高分子材料制成的薄膜過濾介質(zhì)，可以過濾一般介質(zhì)不能截留的細(xì)菌和微粒。膜的孔徑在0.2-10μm。（4）超精密過濾：以聚乙烯醇為主體的中空多孔濾膜，分級性能在超濾膜與微孔濾膜之間。為0.01~0.2μm。用于水的精制、循環(huán)水的凈化、除懸浮固體粒子以及糖液、酶液的精制。第21頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

5、離子交換層析采用不溶性高分子化合物作為離子交換劑，分離純化各種生化物質(zhì)?；驹恚弘x子交換樹脂在水中能溶脹，溶脹后，其分子中的極性基團(tuán)（活性基團(tuán)），具有可擴(kuò)散的離子，能與溶液中的離子起交換作用；非極性基團(tuán)作為樹脂的骨架，使樹脂不溶于水并具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，為離子交換的進(jìn)行及溶液和樹脂的分離創(chuàng)造了條件。離子交換層析包括吸附、吸收、穿透、擴(kuò)散、離子交換、離子親和力等物理化學(xué)過程。第22頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月樹脂種類和理化性能：

（1）強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂：功能團(tuán)為磺酸基，pH一般沒有限制。（2）弱酸性陽離子交換樹脂：功能團(tuán)為羧基、酚基。在酸性溶液中不發(fā)生交換，pH愈大交換能力愈強(qiáng)。（3）強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂：功能團(tuán)為三甲基季胺基團(tuán)。pH沒有限制。（4）弱酸性陰離子交換樹脂：功能團(tuán)為伯胺基、仲胺基、叔胺基。pH愈低交換能力愈大。第23頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

影響交換速度的因素：（1）樹脂顆粒的大小：顆粒小，表面積大，能促進(jìn)內(nèi)部和外部擴(kuò)散。（2）攪拌和流速：加快攪拌速度或加大液體流速，都能減少樹脂外液膜的厚度，從而使液相擴(kuò)散速度增加。（3）離子濃度：交換速度隨離子濃度的上升而增加，達(dá)到一定濃度后交換速度不在升高。（4）離子的水化半徑：水化半徑小的易被吸附。（5）樹脂酸堿性的強(qiáng)弱和溶液的pH：

第24頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月（6）交聯(lián)度大?。航宦?lián)度愈小，樹脂愈易膨脹，交換速度愈快。但交聯(lián)度小的樹脂選擇性較差。（7）有機(jī)溶劑的影響：當(dāng)有有機(jī)溶劑存在時，會降低樹脂對有機(jī)離子的選擇性，而容易吸附無機(jī)離子。6、凝膠層析指化合物隨流動相流經(jīng)裝有凝膠的固定相的層析柱時，因其各種物質(zhì)分子大小不同而被分離的技術(shù)。又稱凝膠過濾、凝膠滲透過濾、分子篩過濾、阻滯擴(kuò)散層析、排阻層析。優(yōu)點(diǎn)：設(shè)備簡單，操作方便，分離效果好，回收率高，分離條件緩和，不使活性物質(zhì)失活變性，凝膠可重復(fù)使用，無需再生處理。第25頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

缺點(diǎn)：分離速度慢。廣泛用于分離氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、酶及多糖等藥物。幾種常用的凝膠：（1）葡聚糖凝膠：基本骨架是1-6糖苷鍵。由葡聚糖和甘油以醚橋形式交聯(lián)而成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。最著名的商品為Sephadex葡聚糖凝膠，珠狀顆粒物，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，不溶于水、弱酸、堿和鹽溶液。低溫時，在0.1mol/L鹽酸中保持1-2h不改變性質(zhì)；室溫時，在0.01mol/L鹽酸中放置半年也不改變；在0.25mol/L的氫氧化鈉中，60℃

兩個月沒有發(fā)改變?？稍?20℃

加熱30min滅菌而不破壞，但高于120℃

即變黃。濕狀貯存易發(fā)霉，若長期不用，需加防腐劑。第26頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）聚丙烯酰胺凝膠：由碳-碳骨架構(gòu)成。完全為惰性。穩(wěn)定性比葡聚糖凝膠好，洗脫時不會有凝膠物質(zhì)下來。缺點(diǎn)：不耐酸。遇酸時酰胺鍵會水解為羧基，使凝膠帶有一定的離子交換基團(tuán)。（3）瓊脂糖凝膠：天然凝膠，不是共價交聯(lián)，是以氫鍵交聯(lián)?？障抖纫云跫?zhí)堑臐舛葋砀淖?，化學(xué)穩(wěn)定性不如葡聚糖凝膠。沒有干凝膠，必須在溶脹狀態(tài)保存，遇脫水劑、冷凍和一些有機(jī)溶劑即破壞，丙酮和乙醇對它無影響。在pH4.5-9,溫度0-40℃穩(wěn)定。對硼酸有吸附，不能用硼酸緩沖液。他能分離及萬到幾千萬相對分子質(zhì)量的物質(zhì)，彌補(bǔ)了葡聚糖和聚丙烯酰胺凝膠的不足。瑞典商品名Sepharose，美國稱生物凝膠—A（Bio-Gel-A）,英國稱Sagavac.第27頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

(4)疏水性凝膠：常用的為聚甲基丙烯酸酯（Polymethacrylate）凝膠、聚苯乙烯凝膠（如Styrogel,Bio-Beads-S）7、親和層析生物活性物質(zhì)都有親和作用，如酶與底物、激素與受體、核酸的互補(bǔ)鏈間，多糖與蛋白質(zhì)復(fù)合體。親和層析是利用生物大分子的特異親和力而設(shè)計的層析技術(shù)。可逆結(jié)合的特異性物質(zhì)稱為配基，與配基結(jié)合的層析介質(zhì)稱為載體。親和層析能從粗提液中，通過一次簡便處理，便可得到高純度的活性物質(zhì)，既可分離一些生物材料中含量極微的物質(zhì)，又能分離一些性質(zhì)十分相似的物質(zhì)。

第28頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月優(yōu)點(diǎn)：設(shè)備要求不高，操作簡便，適用范圍廣，特異性強(qiáng)，分離速度快，效果好，條件溫和。缺點(diǎn)：通用性較差，洗脫條件要求苛刻。幾種常用的載體：（1）纖維素：自然界中數(shù)量最大的大分子生物材料，取材十分方便。但由于其結(jié)構(gòu)緊密、均一性差，不利于大分子的滲入?；罨蟪в须姾?，非特異性吸附較強(qiáng)，加上空間位阻等原因，其應(yīng)用不如凝膠載體廣泛。目前主要用于分離與核酸有關(guān)的物質(zhì)。如用寡聚脫氧胸腺核苷酸纖維素作固定相分離細(xì)胞提取液中的mRNA.市售商品有：無定型微纖維、微晶纖維素、珠狀纖維素。第29頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）瓊脂糖凝膠：用于親和層析的主要為交聯(lián)珠狀凝膠。其瓊脂糖的質(zhì)量濃度為20g/L(2%)、40g/L(4%)、60g/L(6%)幾種，相應(yīng)的商品稱為Sepharose2B、4B、6B(Pharmacia)和UltrogelsA-2,A-4,A-6)。這類載體能使吸附物質(zhì)保持活性，能迅速活化并接上各種功能基團(tuán)，結(jié)構(gòu)疏松孔徑大，流速快。（3）葡聚糖凝膠：與瓊脂糖凝膠相比孔徑太小，特別是經(jīng)配基偶聯(lián)后，凝膠膨脹度會進(jìn)一步邊小，所以應(yīng)用受到限制。（4）聚丙烯酰胺凝膠：碳-碳骨架，有丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺聚合而成，具有網(wǎng)狀三維空間結(jié)構(gòu)。商品名為BiogelP。

注意避免接觸強(qiáng)氧化劑，配基偶聯(lián)后會使它的網(wǎng)格縮小，在一定程度上限制了它的應(yīng)用。

第30頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月（5）多孔玻璃珠：化學(xué)和物理穩(wěn)定性好，機(jī)械強(qiáng)度高，不但能抵御酶及微生物的作用，還能耐受高溫滅菌和較劇烈的反應(yīng)條件。

缺點(diǎn)：親水性不強(qiáng)，對蛋白質(zhì)尤其是堿性蛋白質(zhì)有非特異性吸附，而且可供連接的化學(xué)活性基團(tuán)也少。

改良方法：為了克服其缺點(diǎn)，市售Bio-Glass的商品都已事先連接了氨烷基（烷基胺）。用葡聚糖包被玻璃珠，則可改善其親水性，并增加化學(xué)活性基團(tuán)。用抗原涂布的玻璃珠已成功地分離了免疫淋巴細(xì)胞，在DNA連接的玻璃珠上純化了大腸桿菌的DNA和RNA聚合酶。

第31頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月（6）其他載體：

由聚丙烯酰胺和瓊脂糖混合組成的載體，商品名為UltrogelsACA。它的特點(diǎn)是載體上既有羥基又有酰胺基，并且都能與配基單獨(dú)作用。但不能接觸強(qiáng)堿，以免酰胺水解，使用溫度不超過40°C。在丙烯酰胺和瓊脂糖的混合膠中加入7%的四氧化三鐵，則可制得一種稱為磁性膠（MagnogelsACA44）的載體。當(dāng)懸浮液中含有不均勻粒子時，依靠磁性能將載體與其他粒子分離。磁性膠載體常用于酶的免疫測定、熒光免疫測定、放射免疫測定、免疫吸收劑和細(xì)胞分離等的微量測定和制備。

第32頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月影響吸附親和力的幾個因素：

（1）配基濃度；（2）空間障礙；（3）配基與載體的結(jié)合位點(diǎn)；（4）載體的孔徑；（5）微環(huán)境（化學(xué)因素）。第33頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月Concentration濃縮濃縮：低濃度溶液通過除去熔劑邊為高濃度溶液的過程。常在提取后和結(jié)晶前進(jìn)行，有時也貫穿與整個制藥過程。蒸發(fā)裝置的設(shè)計原理：加熱、擴(kuò)大液體表面積、低壓。薄膜蒸發(fā)濃縮Filmevaporationconcentration臥式噴淋降膜蒸發(fā)器、Rose蒸發(fā)器、板式蒸發(fā)器減壓蒸發(fā)濃縮Decompressionevaporationconcentration減壓抽真空（真空濃縮），適用不耐熱的藥物和制品。第34頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

吸收濃縮Absorbingconcentration

通過吸收劑直接吸收除去溶液中的溶劑分子使溶液濃縮的方法。吸收劑與溶液不起化學(xué)反應(yīng)，對生化藥物不起吸附作用，易與溶液分開。吸附劑除去溶劑后可重復(fù)使用。

常用的吸收劑：聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、凝膠。凝膠可直接投入待濃縮的溶液中，溶劑和小分子被吸收到凝膠內(nèi)，大分子留在溶液中，然后離心過濾。使用聚乙二醇時，先將溶液裝入半透膜的袋內(nèi)，扎緊袋口，外加聚乙二醇覆蓋，袋內(nèi)溶劑滲出即被聚乙二醇吸去。第35頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

Crystallization結(jié)晶結(jié)晶：利用某些藥物具有形成晶體的性質(zhì)是目標(biāo)藥物（溶質(zhì)）呈晶態(tài)從溶液中析出的過程。結(jié)晶的條件：（1）純度purity：各種物質(zhì)在溶液中均需達(dá)到一定的純度才能析出結(jié)晶。蛋白質(zhì)和酶，純度不低于50%。總趨勢是越純越易結(jié)晶，但已結(jié)晶的制品不表示達(dá)到了絕對的純化，只能說到了相當(dāng)純的程度。有時純度不高，但加入有機(jī)溶劑和制成鹽，也能達(dá)到結(jié)晶。第36頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）濃度consideration：結(jié)晶液的濃度要較高，以利于分子間的碰撞聚合。但濃度過高，相應(yīng)雜質(zhì)和溶液黏度增大，反而不利于結(jié)晶，或生成純度較差的粉末結(jié)晶。（3）pH：選擇pH在pI附近，有利于晶體析出。（4）溫度

temperature：通常在低溫條件進(jìn)行，活性物質(zhì)不易變性，又可避免細(xì)菌繁殖。（5）時間Time：結(jié)晶的生成和生長需要時間。但生物藥物要求在幾小時內(nèi)完成，時間不宜過長。（6）晶種

Crystalseed：不易結(jié)晶的藥物常加晶種。第37頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月干燥Desiccation干燥：是從濕的固體生物藥物中，除去水分或溶劑而獲得相對或絕對干燥制品的工藝過程。它也是一種蒸發(fā)，但不同于濃縮。通常包括原料藥的干燥和制成的臨床制劑的干燥。（1）常壓干燥Normalpressdesiccation：通風(fēng)與加熱結(jié)合。成本低干燥量大。但時間長，易污染。（2）減壓干燥Decompressiondesiccation：利用專用設(shè)備減壓加速，使溶劑迅速蒸發(fā)。時間短，溫度低。制藥常用方法。

第38頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）噴霧干燥Spraydesiccation：將液體通過噴射裝置噴成霧滴后，在一定流速的熱氣流中，迅速蒸發(fā)干燥的方法。從理論推算：每升液體，如果噴成10μm直徑的霧滴，約有1.91*1012多個，表面積有600m2。實(shí)驗(yàn)表明：把含水量為80%的1L溶液，噴成直徑約10-60μm霧滴，當(dāng)與熱空氣接觸時，僅3-5s可使霧滴水分氣化而得到干燥產(chǎn)品。

優(yōu)點(diǎn)：快速高效，可在無菌條件下操作，應(yīng)用廣泛。缺點(diǎn)：熱利用率不高，設(shè)備費(fèi)用投資大。第39頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

（4）冷凍干燥Freezingdesiccation：在低溫（-60-10℃）及高真空6.67-40Pa（0.05-0.3mmHg）下，將物料與溶液中的水分直接升華的干燥方法。適用于高度熱敏的生物藥物。制劑應(yīng)具有多孔性、疏松、易溶的特點(diǎn)，一般含水量在1%-3%。設(shè)備投資及維護(hù)費(fèi)用高，生產(chǎn)能力不大。改進(jìn)的干燥設(shè)備環(huán)型噴射干燥器振動流動干燥器渦流干燥器第40頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月Sterilization滅菌滅菌：指殺滅或除去一切微生物的操作技術(shù)。干熱空氣滅菌：通常在烘箱里利用熱空氣殺滅微生物，在100℃，1h可殺死繁殖的細(xì)菌。但某些細(xì)菌在一定情況下可以變成芽孢，有較強(qiáng)的耐熱力，一般需160-170℃

滅菌