第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)

第一章菌種與種子擴(kuò)大培養(yǎng)決定發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)水平三要素：生產(chǎn)菌種性能；發(fā)酵過(guò)程的工藝及設(shè)備；產(chǎn)物提取過(guò)程的工藝及設(shè)備菌種來(lái)源誘變育種：誘變是工業(yè)發(fā)酵穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的重要保證；從自然界分離：目前土壤中已分離的微生物約為自然界總數(shù)的1-5%，微生物的多樣性仍然是以后若干年的研究重點(diǎn)；

基因重組：基因定向改造技術(shù)大大加快了生物產(chǎn)品開(kāi)發(fā)的進(jìn)程。一、工業(yè)微生物分離思路新菌種的分離是要從混雜的各類(lèi)微生物中依照生產(chǎn)的要求、菌種的特性，采用各種篩選方法，快速、準(zhǔn)確地把所需要的菌種挑選出來(lái)。實(shí)驗(yàn)室或生產(chǎn)用菌種若不慎污染了雜菌，也必須重新進(jìn)行分離純化。從自然界中分離菌種的一般過(guò)程新種分離與篩選的步驟定方案：首先要查閱資料，了解所需菌種的生長(zhǎng)培養(yǎng)特性。采樣：有針對(duì)性地采集樣品。增殖：人為地通過(guò)控制養(yǎng)分或培養(yǎng)條件，使所需菌種增殖培養(yǎng)后，在數(shù)量上占優(yōu)勢(shì)。分離：利用分離技術(shù)得到純種。發(fā)酵性能測(cè)定：進(jìn)行生產(chǎn)性能測(cè)定。這些特性包括形態(tài)、培養(yǎng)特征、營(yíng)養(yǎng)要求、生理生化特性、發(fā)酵周期、產(chǎn)品品種和產(chǎn)量、耐受最高溫度、生長(zhǎng)和發(fā)酵最適溫度、最適pH值、提取工藝等。

采樣1、采樣對(duì)象以采集土壤為主。一般園田土和耕作過(guò)的沼澤土中，以細(xì)菌和放線(xiàn)菌為主；富含碳水化合物的土壤（如一些野果生長(zhǎng)區(qū)和果園內(nèi)）和沼澤地中，酵母和霉菌較多；采樣的對(duì)象也可以是植物或動(dòng)植物殘?bào)w，腐敗物品，霉菌較多；某些水域厭氧菌含量較多。2、采樣季節(jié)：以溫度適中，雨量不多的秋初為好。3、采土方式：在選好適當(dāng)?shù)攸c(diǎn)后，用小鏟子除去表土，取離地面5-15cm處的土約10g，盛入清潔的牛皮紙袋或塑料袋中，扎好，標(biāo)記，記錄采樣時(shí)間、地點(diǎn)、環(huán)境條件等，以備查考。采好的樣應(yīng)及時(shí)處理，暫不能處理的也應(yīng)貯存于4℃下，但貯存時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。增殖培養(yǎng)就是給混合菌群提供一些有利于所需菌株生長(zhǎng)或不利于其他菌型生長(zhǎng)的條件，以促使目標(biāo)菌株大量繁殖，從而有利于分離它們。例如碳源利用的控制，可選定糖，淀粉、纖維素，或者石油等，以其中的一種為唯一碳源，那么只有利用這一碳源的微生物才能大量正常生長(zhǎng)，而其它微生物就可能死亡或淘汰。這樣對(duì)下階段的純種分離就會(huì)順利得多。純種分離盡管通過(guò)增殖培養(yǎng)效果顯著，但還是處于微生物的混雜生長(zhǎng)狀態(tài)。因此還必須分離，純化。純種分離的方法有劃線(xiàn)分離法、稀釋分離法。性能測(cè)定這一步是采用與生產(chǎn)相近的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，通過(guò)三角瓶的容量進(jìn)行小型發(fā)酵試驗(yàn)，以求得適合于工業(yè)生產(chǎn)用菌種。這種直接從自然界分離得到的菌株稱(chēng)為野生型菌株，以區(qū)別于用人工育種方法得到的變異菌株。工業(yè)生產(chǎn)常用菌種細(xì)菌(Bacteria)放線(xiàn)菌(Actinomycetes)單細(xì)胞真菌----酵母(Yeast)多細(xì)胞真菌----霉菌(Molds)1細(xì)菌(Bacteria)

形狀和大?。?jiǎn)渭?xì)胞微生物；有球型、桿型和螺旋型；典型直徑0.5～1微米，長(zhǎng)度～10微米；繁殖方式：裂殖，倍增時(shí)間25～45分鐘。工業(yè)上重要的細(xì)菌：G+：枯草芽孢桿菌、乳酸桿菌、北京棒桿菌等。G-：醋酸桿菌、大腸桿菌。產(chǎn)品：淀粉酶制劑，乳酸，乙酸，氨基酸等2放線(xiàn)菌(Actinomycetes)形狀和大?。杭?xì)胞呈長(zhǎng)絲狀，菌落呈放線(xiàn)狀，介于細(xì)菌和真菌之間，菌絲直徑0.2～1.2微米，與桿菌接近；生長(zhǎng)和繁殖：低等的(如諾卡氏菌)通過(guò)菌絲斷裂繁殖；高等的(如鏈霉菌)在孢子絲成熟后分化成許多孢子，孢子在適宜的環(huán)境中吸收水分，膨脹、萌發(fā)，成為新的放線(xiàn)菌。2放線(xiàn)菌(Actinomycetes)工業(yè)上重要的放線(xiàn)菌龜裂鏈霉菌（土霉素）金黃色鏈霉菌（金霉素）灰色鏈霉素（鏈霉素）紅鏈霉菌（紅霉素）紅小單胞菌（慶大霉素）委內(nèi)瑞拉鏈霉菌（氯霉素）卡那鏈霉菌（卡那霉素）

3單細(xì)胞真菌----酵母(Yeast)形狀和大?。?jiǎn)渭?xì)胞，卵圓形，圓形或圓柱形；比細(xì)菌大，直徑約1～5微米，長(zhǎng)約5～30微米。生長(zhǎng)與繁殖：酵母分有性和無(wú)性繁殖，以無(wú)性繁殖為主。無(wú)性繁殖分為芽殖和裂殖，以芽殖為主。工業(yè)上重要的酵母菌啤酒酵母(酒精、啤酒等)

假絲酵母(單細(xì)胞蛋白、檸檬酸、脂肪酸、石油脫蠟)。4多細(xì)胞真菌----霉菌(Molds)形狀和大?。悍种?，菌絲體盤(pán)結(jié)交錯(cuò)，形成濃密菌落，使發(fā)酵液粘稠。比放線(xiàn)菌大，直徑3～10μm生長(zhǎng)與繁殖：片段菌絲可以生長(zhǎng)成新的菌絲體；有性和無(wú)性方式，產(chǎn)生孢子進(jìn)行繁殖；無(wú)性繁殖是主要方式，生長(zhǎng)中，菌絲伸長(zhǎng)和分支，從菌絲體頂端形成新的孢子，繼而形成細(xì)胞。新細(xì)胞具有菌齡，典型的倍增時(shí)間為4～8小時(shí)；4多細(xì)衡胞真公菌--掌--霉菌(M蚊ol斑ds袋)工業(yè)區(qū)上重賣(mài)要的吼霉菌曲霉訪(fǎng)屬:黑曲環(huán)霉—淀粉礦酶、笨蛋白甩酶、喬檸檬敘酸和葡頑萄糖治酸米曲屢霉—醬油青霉汽屬:產(chǎn)黃賺青霉—青霉責(zé)素展開(kāi)殺青霉—灰黃養(yǎng)霉素根霉圍屬:米根引霉—制曲觸、乳鉛酸一些碌常用爪工業(yè)佩微生窯物抗生朋素生格產(chǎn)有輔關(guān)的拔微生溜物放線(xiàn)澆菌（夠鏈霉永素四賴(lài)環(huán)素板；紅倡霉素保等）真菌作（青沖霉素麥、頭溝孢等怖）一些級(jí)產(chǎn)芽收孢的鞏細(xì)菌植物登或動(dòng)勒物來(lái)臣源氨基返酸生涂產(chǎn)菌絕的要犧求：代謝擔(dān)途徑哀比較始清楚巨，代謝枕途徑勝比較招簡(jiǎn)單谷氨犯酸發(fā)漿酵的塞菌種?。浩渌匕被鶔嵘岙a(chǎn)菌瓜：棒桿彈菌屬?lài)?guó)，短懼桿菌埋屬、押節(jié)桿獄菌屬綱或小桿菌耍屬的縱棒型宰細(xì)菌常規(guī)刮菌種鏈一般誤也是盟以谷貼氨酸理生產(chǎn)姐菌選冰育而械成；棉工程天菌，希大腸更桿菌感，枯巾草芽藝孢桿腫菌氨基停酸生護(hù)產(chǎn)有株關(guān)的凈微生跌物食品必工業(yè)瓣微生倒物包括間：釀謝造業(yè)椅，酶制考劑等食品臟用的矩微生朝物需率經(jīng)過(guò)牛嚴(yán)格漸的毒悅理試忌驗(yàn)，止目前牽已同刮意使廳用的疫僅僅席少數(shù)盤(pán)微生燃物能補(bǔ)用于河生產(chǎn)膏食品極用酶演。α—淀粉擦酶：掃黑曲頂霉、鬼米曲返霉、玩米根畫(huà)酶、屆枯草芽孢桿薪菌和地適衣芽孢桿接菌誘變棗育種以微則生物體的自當(dāng)然變漂異作宴為基轉(zhuǎn)礎(chǔ)的港生產(chǎn)掉選種忌的機(jī)屈率并咐不很視高，貓一個(gè)芳基因挪的自法然突翼變頻挖率僅10-6~1俱0-1運(yùn)0左右禍。誘變踏育種閘：利用避各種物理紡因素丟和化膀?qū)W試芬劑處理蕉微生吉物細(xì)航胞，提高杜基因碌突變押頻率，再賭通過(guò)覽適當(dāng)紀(jì)的篩勻選方洗法獲主得所攻需要蹲的高輔產(chǎn)優(yōu)凈質(zhì)菌濟(jì)種的例育種咱方法想。誘發(fā)直突變蓋的育斥種，副是迄欣今為貨止國(guó)暈內(nèi)外梅提高貸菌種滋產(chǎn)量拖、性況能的膛主要倒手段肥。誘變雪劑物理育誘變坦劑：哥射線(xiàn)俱如紫矮外線(xiàn)宅、X-射線(xiàn)棵、γ-射線(xiàn)垃，快儉中子靠；生物頂誘變寺劑：腹噬菌躁體、蚊轉(zhuǎn)座揪子化學(xué)稍誘變播劑：愛(ài)化學(xué)巡壽因子猾如堿擋基類(lèi)非似物牌、5-氟尿南嘧啶習(xí)、烷殿化劑漫等。誘變賽育種旺步驟出發(fā)敘菌株照的選勿擇菌懸諸液的拿制備前培粗養(yǎng)誘變騎處理變異驕菌株島的分葬離和妨篩選紫外袖線(xiàn)的灰誘變?cè)镉N紫外寒線(xiàn)誘德變一踩般采容用15延W紫外蝕線(xiàn)殺懼菌燈，波礦長(zhǎng)為25略37顯A．燈與福處理炎物的距離健為15～30怠cm，照射滿(mǎn)時(shí)間咐依菌挪種而崗異，鮮一般柳為幾慌秒至沾幾十早分鐘雀。一遞般我姑們常槍以細(xì)甘胞的咽死亡脫率表疲示，票希望春照射性的劑狀量死亡如率控材制在70～80反%為宜。例被照肚射的菌懸戒液細(xì)點(diǎn)胞數(shù)，細(xì)紡菌為106個(gè)／ml左右戚，霉盯菌孢欣子和憐酵母嘩細(xì)胞沫為106～107個(gè)／ml。由于雪紫外禿線(xiàn)穿透袖力不強(qiáng)諸，要餓求照雜射液帶不要峽太深電，約0.歸5～1.師0c厲m厚，越同時(shí)候要用扇電磁既攪拌協(xié)器或禁手工栗進(jìn)行攪拌，使扣照射便均勻既。由于唯紫外符線(xiàn)照累射后頌有光老復(fù)活萬(wàn)效應(yīng)晴，所姥以照榆射時(shí)瓦和照薦射后洽的處盯理應(yīng)鞏在紅燈甲下進(jìn)非行。操作郊步驟1．將細(xì)菌友培養(yǎng)隔液以30辮00粒r／mi渣n離心5m殃in，傾去廳上清踩液，修將菌蓬體打伍散加對(duì)入無(wú)匹菌生蚊理鹽矮水再丹離心詳洗滌校。2．將惠菌懸宜液放調(diào)入一配巳滅準(zhǔn)菌的哲，裝向有玻括璃珠考的三似角瓶呀內(nèi)用曲手搖樹(shù)動(dòng)，激以打暖散菌儀體。碑將菌沒(méi)液倒監(jiān)入有押定性牧濾紙董的漏伙斗內(nèi)撤過(guò)濾油，單取細(xì)胞帶濾液救裝入絲式試管恒內(nèi)，枯一般鉛處于犁渾濁殖態(tài)的兵細(xì)胞被液含族細(xì)胞沫數(shù)可楊達(dá)107-1單08個(gè)／ml左右浮，作熔為待嬸處理菌懸訓(xùn)液。3．取2～4m柿1制備鄭的菌撓液加訪(fǎng)到直武徑9c涉m培養(yǎng)傲皿內(nèi)傷，放攻入一貢無(wú)菌傳磁力爬攪拌所子，制然后見(jiàn)置磁宴力攪汪拌器澤上、15撿W紫外卻線(xiàn)下30鄭cm處。據(jù)在正初式照戒射前騙，應(yīng)透先開(kāi)拋?zhàn)贤忏U線(xiàn)10墻mi南n，讓王紫外悅燈預(yù)丑熱，燙然后飛開(kāi)啟陳皿蓋舅正式耽在攪各拌下照射10～50褲s。操鈴作均這應(yīng)在袍紅燈腎下進(jìn)懇行，搏或用頭黑紙政包住行，避恒免白全熾光踢。4．取卷未照磁射的吼制備冶菌液即和照眨射菌定液各0.特1m此l進(jìn)行券稀釋腳分離攪，計(jì)誼數(shù)活毀菌細(xì)殊胞數(shù)固。5．取兩照射診菌液2m搏l于液間體培眠養(yǎng)基燙中(3講00擁ml三角桶瓶?jī)?nèi)謊裝30撓ml培養(yǎng)晝液)，12驚0r／mi篩n振蕩捐培養(yǎng)4～6h。6．取中雙間培差養(yǎng)液冶稀釋廁分離租、培錢(qián)養(yǎng)。7．挑丟取菌紗落進(jìn)圣行檢麥測(cè)?；驊{的直綢接進(jìn)袖化育伐種突變基因帶突變房誠(chéng)庫(kù)的魔建立篩選基因舍突變橫庫(kù)的只篩選基因帆復(fù)制銀與遺聽(tīng)傳步驟研：在分捉子水輛平上盈，對(duì)濃目標(biāo)怨基因芝直接部處理插，然攻后通德過(guò)高筍通量夏的篩宋選方塘法，榮提高賓目標(biāo)超蛋白西的性遵能。能夠給利用泉廉價(jià)鋪的原扭料，簡(jiǎn)辱單的擁培養(yǎng)允基，爪大量拌高效芳地合恥成產(chǎn)物有關(guān)合成民產(chǎn)物趕的途盯徑盡可營(yíng)能地垃簡(jiǎn)單兵，或務(wù)者說(shuō)標(biāo)菌種奇改造炕的可操政作性貸要強(qiáng)遺傳森性能要相狗對(duì)穩(wěn)牌定不易技感染棟它種炮微生液物或噬菌那體不是淺病原寧菌，產(chǎn)文生菌塵及其衰產(chǎn)物春的毒逝性必我須考蛇慮（什在分宋類(lèi)學(xué)噸上最且好與柏致病午菌無(wú)擾關(guān)）生產(chǎn)剛特性徑要符糖合工宋藝要黎求，培休養(yǎng)條誦件易垃于控李制，護(hù)生長(zhǎng)餐迅速攜、發(fā)投酵周鑄期短工業(yè)必微生鎮(zhèn)物的綠要求防止壯菌種婦衰退衰退丟的表惕現(xiàn)：所需貞產(chǎn)物荷的生郊產(chǎn)能峰力下脊降，速營(yíng)養(yǎng)婦物質(zhì)拉代謝鎮(zhèn)和生珠長(zhǎng)繁關(guān)殖能訓(xùn)力下就降，慮發(fā)酵淡周期象延長(zhǎng)橫，抗著不良椒環(huán)境懲條件粱的性抬能減仇弱等衰退稅的原惱因：內(nèi)因?。夯┮蛲蛔镒儯巫儺惪删觑L(fēng)性狀錫分離外因背：菌漏種保船藏不絡(luò)妥；或菌種指的生北長(zhǎng)條奸件要像求沒(méi)脾有得膠到滿(mǎn)筆足；追或遇燒到不騎利的妥條件摔，或勇失去喜某些吸需要雷的條遙件等崖；菌蟻種的連續(xù)鳥(niǎo)傳代是菌火種退餡化的叮主要濕原因防止唉衰退菜的方含法：合理蒼培養(yǎng)灣條件防，減主少傳愉代次貍數(shù)復(fù)壯衛(wèi)：分離碎單細(xì)惜胞，甚抗性吳篩選面，苛臣刻條餓件純菌嚇?lè)N自發(fā)燥突變不純脈菌種突變?cè)顐€(gè)體傳代魯增殖原始卸個(gè)體工業(yè)割微生典物菌義種保怎藏技己術(shù)(1貫)低溫請(qǐng)冷凍塊保藏扒；(2津)轉(zhuǎn)接怒培養(yǎng)劫或斜腸面?zhèn)髂蟠兀?3距)礦物寶油保姥藏；(4掌)土壤激或陶看瓷珠毛等載擺體干抱燥?；畈?。保藏術(shù)原則蒸：選擇耳優(yōu)良貨純種沙、創(chuàng)假造休請(qǐng)眠環(huán)賺境保藏嘉要求頌：保彼持菌抓種優(yōu)賴(lài)良特礙性，掏經(jīng)濟(jì)盛方便保藏杯后需罷再次鑄檢測(cè)五和確扁定保新藏菌鴿種的杏形態(tài)變學(xué)和驚生化譯特征(如代瞇謝產(chǎn)尤物的灑產(chǎn)生住、酶置活力娘、遺歸傳特煎征及逮生化遺指標(biāo))。冷凍欺保藏酬：-2耗0℃以下活冷凍伯，使補(bǔ)微生接物代撤謝活洋動(dòng)?；I止分類(lèi)博：普饞通冷體凍保暮藏(-收20食℃)超低乒溫冷含凍保永藏(-吸60一-8臥0℃梯)液氮醋冷凍俯保藏(-宵15僵6℃慈)特點(diǎn)丸：簡(jiǎn)拋單有輩效培養(yǎng)紋物運(yùn)籍輸較痰困難在超估低溫爐冷藏幼柜中葵保藏簽菌種鈴的一基般方輕法是茫：1．離赴心收拿獲對(duì)府?dāng)?shù)生轟長(zhǎng)中嚇期至友后期杏的微滾生物臭細(xì)胞2．用脅新鮮伏培養(yǎng)獲基重召新懸紫浮所夏收獲牢的細(xì)畜胞；3．加距入等樹(shù)體積屑的20％甘飯油或10％二橋甲亞擋砜；4．混預(yù)勻后強(qiáng)分裝丹入冷略?xún)鲋概f管或桂安瓿態(tài)中，謝于-7暖0℃超低供溫冰福箱中承保藏逃。超低陶溫冰喇箱的古冷凍盯速度妥一般巷控制套在1-簽2℃／mi圓n。一頭些細(xì)棟菌和尊真菌杏菌種尚可保兔藏5年而敗活力撿不受巴影響淺。凍干逐保藏：是擾通過(guò)誤在減龍壓條適件下哲使凍糖結(jié)的漿細(xì)胞士懸液疤中的鉤水分瓜升華私，使名培養(yǎng)撞物干卵燥。此法趕是微地生物驕菌種煤長(zhǎng)期嘴保藏漸的最康為有覽效的鑼方法守之一景。特點(diǎn)偽：凍干賽狀態(tài)刊下一執(zhí)般可至保藏10年不直喪失矮活力凍干歌后的愈菌株墨可常落溫保隆存，薦便于嶄運(yùn)輸必須華使用孕冷凍純保護(hù)鐘劑，斤常用鼻脫脂溝乳、局蔗糖周等傳代婚保藏仁：斜授面培化養(yǎng)基企，平竄行傳單代，喊普通襪冰箱繭，三箱個(gè)月調(diào)以下余保存聲，供肥試驗(yàn)裹用礦物叫油保券藏：斥將瓊挨脂斜袍面或直液體黨培養(yǎng)銹物浸鏡入礦購(gòu)物油陣中于培室溫脈下保矛藏，慰簡(jiǎn)便隱有效金，可披用于訓(xùn)絲狀根真菌司、酵祖母、載細(xì)菌窩和放銀線(xiàn)菌宴的保咬藏。檢特別亞用于蘆難以恨冷凍考干燥祝的絲店?duì)钫娴示头y以宇在固彩體培公養(yǎng)基夠上形浸成孢炭子的凍擔(dān)子餡菌載體煉保藏群：麥構(gòu)殼，居砂土膚滅菌便后可嘴用作膊載體幾種獸常用款菌種不保藏皺方法悲的比殲較方法名稱(chēng)主要措施適宜菌種保藏期評(píng)價(jià)冰箱保藏法（斜面）冰箱保藏法（半固體）石蠟油封藏法*沙土保藏法冷凍干燥法低溫低溫低溫、缺氧干燥、無(wú)營(yíng)養(yǎng)干燥、無(wú)氧、低溫、有保護(hù)劑各大類(lèi)細(xì)菌、酵母菌各大類(lèi)**產(chǎn)孢子微生物各大類(lèi)3~6月6~12月1~2年1~10年5~15年以上簡(jiǎn)便簡(jiǎn)便簡(jiǎn)便簡(jiǎn)便簡(jiǎn)便、有效種子嘴：將保燥存在渠砂土掠管、焰冷凍禮干燥泳管中站處休猜眠狀播態(tài)的詞生產(chǎn)照菌種肚接入鄭試管紡斜面捐活化炸后，幻玉再經(jīng)領(lǐng)過(guò)扁繳瓶或未搖瓶鏟及種緊子罐幟逐級(jí)賊擴(kuò)大闊培養(yǎng),最終牛獲得一定慚數(shù)量共和質(zhì)重量的映純種過(guò)程章。這介些純乖種培專(zhuān)養(yǎng)物僵稱(chēng)為擴(kuò)種子雖。種子殿液質(zhì)而量的濃優(yōu)劣濤對(duì)發(fā)信酵生戒產(chǎn)起凡著關(guān)丸鍵性襯的作渣用。二、叔種刑子擴(kuò)加大培漏養(yǎng)種子快擴(kuò)培屠的目學(xué)的接種爬量的販需要菌種彩的馴晝化縮短迫發(fā)酵劈燕時(shí)間些、保禿證生彈產(chǎn)水刻平種子溉的要者求：總量提及濃決度能菠滿(mǎn)足鮮要求生理抹狀況息穩(wěn)定劣，保嘉持穩(wěn)惱定的煙生產(chǎn)敢能力活力探強(qiáng)，勁移種堅(jiān)至發(fā)守酵后牢，能廁夠迅獸速生寸長(zhǎng)無(wú)雜綢菌污咱染二，殘種子席制備余的過(guò)舒程：實(shí)驗(yàn)蒸室種紙子制斃備階帥段：不用港種子博罐，言所用幕的設(shè)悶備為趴培養(yǎng)盞箱、叢搖床叔等實(shí)葉驗(yàn)室臭常見(jiàn)屬設(shè)備何，在黃工廠(chǎng)榜這些熔培養(yǎng)攪過(guò)程瞞一般蒼都在授菌種剩室完者成，掌因此甲將其圍稱(chēng)為披實(shí)驗(yàn)士室階呼段的造種子尤培養(yǎng)飽。生產(chǎn)疲車(chē)間尋種子賞制備啟階段：種子厲培養(yǎng)拳在種忌子罐基里面鋪進(jìn)行武，一介般在默工廠(chǎng)超歸發(fā)幸酵車(chē)巾間管強(qiáng)理，趁因此產(chǎn)稱(chēng)這賠些培查養(yǎng)過(guò)駐程為拖生產(chǎn)問(wèn)車(chē)間溜階段濾。實(shí)驗(yàn)蛾室種豪子的陸制備對(duì)于產(chǎn)孢華子能陰力強(qiáng)的及墊孢子躍發(fā)芽猜、生虹長(zhǎng)繁滾殖快贊的菌總種可起以采袖用固體摔培養(yǎng)皇基培抱養(yǎng)孢子磁，孢膝子可鮮直接旋作為蝦種子斬罐的答種子門(mén)，這筋樣操亮作簡(jiǎn)夸便，陪不易待污染撈雜菌將。對(duì)于產(chǎn)孢蔥子能猾力不奧強(qiáng)或皮孢子貞發(fā)芽吩慢的菌翠種，播可以但用液體摔培養(yǎng)目法。試闖管→猛三角筋瓶→缺搖床胃→種謝子罐生產(chǎn)亂車(chē)間隸種子哭制備實(shí)驗(yàn)誓室制燦備的蘭孢子農(nóng)斜面朱或搖使瓶種橡子移桶接到船種子鍋罐進(jìn)福行擴(kuò)誰(shuí)大培城養(yǎng)種子局罐培朱養(yǎng)一蘇方面草使菌菌種獲貢得足夠匯的數(shù)多量，另壓一方污面種照子罐忘中的先培養(yǎng)債基更污接近朽發(fā)酵睡罐培揉養(yǎng)的申醪液維成分塌和培令養(yǎng)條牲件，翼譬如認(rèn)通無(wú)偵菌空扔氣，搜攪拌餐形式鼓等等載，以凳使菌鉆體適應(yīng)言發(fā)酵筍環(huán)境（1）表慨面培添養(yǎng)表面曠培養(yǎng)匯是一筍種好氧餅靜置走培養(yǎng)智方法。針綱對(duì)容塞器內(nèi)戲培養(yǎng)循基物縮慧態(tài)又遠(yuǎn)分為晨液態(tài)男表面青培養(yǎng)儉和固陜態(tài)表嫂面培跪養(yǎng)。相對(duì)崖于容霧器內(nèi)蓄培養(yǎng)刑基體途積而耳言，朽表面槍積越腔大，仙越易販促進(jìn)氧氣嗎由氣示液/氣固禍界面耽向培紀(jì)養(yǎng)基撞內(nèi)傳策遞。這種磨培養(yǎng)島方法改菌的桿生長(zhǎng)士速度絡(luò)與培揀養(yǎng)基助深度忠有關(guān)逝，單甲位體叢積的績(jī)表面豪積越威大，嗽生長(zhǎng)輛速度繪也越念快。氧的尾供給糾常成沃為發(fā)低酵的暫限速洲因素，所超以發(fā)情酵周編期長(zhǎng)埋，占捐地面雕積大瓶。優(yōu)點(diǎn)是不悟需要爭(zhēng)深層羨培養(yǎng)板時(shí)的從攪拌以和通色氣，節(jié)省機(jī)動(dòng)力。如焰醋酸宿、檸瞞檬酸舉發(fā)酵欲和曲僚盤(pán)制劫曲。種子昏培養(yǎng)心的方邁法固體北培養(yǎng)遇又分截為淺盤(pán)敵固體奸培養(yǎng)和深層被固體闖培養(yǎng)，統(tǒng)衡稱(chēng)曲責(zé)法培鵝養(yǎng)。生它起皺源于包我國(guó)灶釀造吐生產(chǎn)專(zhuān)特有版的傳顆統(tǒng)制灰曲技紅術(shù)。飼其最攪大特寫(xiě)點(diǎn)是乳固體秒曲的敘酶活訴力高磨。（2）固李體培銀養(yǎng)固體之培養(yǎng)疼具有賺以下涉優(yōu)點(diǎn)準(zhǔn)：①原料：以容谷物批和農(nóng)昌業(yè)廢起物為毯主要拌原料衡，只耗需外掃加適蓄量水徑分、鬼無(wú)機(jī)聯(lián)鹽等研。培寬養(yǎng)基擠組成羞簡(jiǎn)單廳。②防止銅污染：利呀用霉按菌能夜在水詠分較德低的鞋基質(zhì)童表面預(yù)進(jìn)行勞增殖互的特證性，賢在這焦種條攀件下直，細(xì)脊菌生技長(zhǎng)不賊好，系因此衡不易成引起鐮細(xì)菌忠污染酷。③通氣：無(wú)削論淺逼盤(pán)或殘深層畜固體伸通風(fēng)絞制曲狗，可退以在杠曲房寧周?chē)撌褂梅h(huán)尖的冷漠卻增路濕的她無(wú)菌潛空氣殿來(lái)控壺制溫波濕度李，并鐮且能震根據(jù)葛菌種跡在不潛同生耳理時(shí)掉期的妄需要蹈，靈檔活加顆以調(diào)拋節(jié)。珠在固預(yù)體培兄養(yǎng)中慕，氧曲氣是隨由基叮質(zhì)粒膽子間源空隙耳的空嗎氣直厚接供蛋給微割生物習(xí)，比抱液體倉(cāng)培養(yǎng)蕉時(shí)的刻用通求氣攪?yán)Π韫旖o氧虹氣節(jié)港能。（3）液體佳深層碧培養(yǎng)用液沿體深筒層發(fā)援酵罐霞從罐啄底部頂通氣載，送錦入的耗空氣附由攪射拌槳粥葉分答散成碗微小即氣泡馬以促瘋進(jìn)氧榆的溶訴解?？贿@種書(shū)由罐歇底部降通氣終攪拌拐的培防養(yǎng)方竹法，貨相對(duì)室于由浮氣液追界面紡靠自愈然擴(kuò)銳散使白氧溶勿解的恢表面裕培養(yǎng)宰法來(lái)配講，販稱(chēng)為深層大培養(yǎng)揚(yáng)法。特點(diǎn)是容可易按掉照生跨產(chǎn)菌船種對(duì)旺于代暑謝的猾營(yíng)養(yǎng)令要求汗以及麻不同爬生理飄時(shí)期錫的通投氣、夏攪拌燦、溫侮度、倉(cāng)與培燦養(yǎng)基雷中氫余離子蝴濃度雁等條鋤件，差選擇最佳奶培養(yǎng)觸條件。（4）載纏體培崖養(yǎng)法載體懇培養(yǎng)晨脫胎計(jì)于曲陡法培耕養(yǎng)，唯同時(shí)熄又吸獵收了榮液體悲培養(yǎng)眨的優(yōu)泛點(diǎn)，惱是近嚇年來(lái)余新發(fā)緩展的趨一種深培養(yǎng)上方法郵。特征轉(zhuǎn)是以帖天然蘆或人柴工合升成的聚多孔斗材料住代替雪麩皮飛之類(lèi)魂的固模態(tài)基何質(zhì)作免為微丑生物灰的載奏體，艘營(yíng)養(yǎng)爺成分隆可以寸嚴(yán)格坡控制睡，發(fā)卷酵結(jié)萬(wàn)束，測(cè)只需汁將菌遙體和蘆培養(yǎng)草液擠竟壓出魔來(lái)進(jìn)接行抽欣提，加載體少又可艱以重赴新使悶用。載體枕的取旦材必斥須耐語(yǔ)蒸汽哨加熱登或藥聯(lián)物滅競(jìng)菌，兆多孔毅結(jié)構(gòu)埋既有桌足夠的表漏面積矮，又龜能允憑許空放氣流腹通。影響般種子視質(zhì)量葵的因哲素及烏控制1，種核子質(zhì)印量的涉判斷種子止質(zhì)量槽的最脂終指沖標(biāo)是五考察禮其在猛發(fā)酵輸罐中襯所表盆現(xiàn)出旬來(lái)的生產(chǎn)惕能力。在培重養(yǎng)過(guò)迅程中設(shè)定期熊取樣暈測(cè)定顧一些市參數(shù)塞以觀(guān)符察基信質(zhì)的盾代謝映變化忽及菌肺絲形百態(tài)是夕否正全常。1）pH；2）培喚養(yǎng)基網(wǎng)滅菌雙后磷覆、糖嫂、氨象基氮末的含限量；3）菌捷絲形澇態(tài)、澆菌絲抓濃度夠和培崇養(yǎng)液快外觀(guān)葉（色支素、貼顆粒怕等）渣；4）其嗎他參棟數(shù)，府如接釘前抗燈生素剃含量暮、某蠻種酶蘿活力羊等5）無(wú)任易何雜墨菌污密染2，影臘響種稀子質(zhì)腫量的眠主要堆因素（1）培養(yǎng)遇基主要儉是碳漆源、將氮源嫂、無(wú)雙機(jī)鹽味、生酬長(zhǎng)素武和水蒙等。（2）培養(yǎng)店條件①溫獄度：悼溫度玩直接仆影響久生長(zhǎng)澇和酶含的合俱成；②pH值：罵對(duì)微育生物進(jìn)有明迅顯的獸影響亞。③通狡氣攪筑拌：躍（溶洽解氧竿的作椒用：至參與演菌體測(cè)呼吸游作用拜）④泡作沫(危害舉：影刑響微糊生物陰對(duì)氧喘的吸橡收；背妨礙CO2的排今除；系減少鋒設(shè)備遺利用屯率)（3）染菌的控洞制染菌豎原因姑：設(shè)做備、東管道嘗、閥禮門(mén)漏午損、頓發(fā)酵泡罐結(jié)抽構(gòu)“澤死角喇”、妹滅菌籠不徹椅底、邪空氣饅凈化滿(mǎn)不好結(jié)、無(wú)叨菌操勺作不每嚴(yán)、夸菌種暢不純店；（4）種齡以及接籠種量種齡違：是邁指種駕子罐兔中培訴養(yǎng)的宣菌絲撿體開(kāi)荷始移澡入下劃一級(jí)驕種子寶罐或鋤發(fā)酵搏罐時(shí)河的培養(yǎng)私時(shí)間。通常掀種齡案是以仍處于磨生命菜力極箱旺盛換的對(duì)數(shù)榜生長(zhǎng)歉期，標(biāo)菌體次量還走未達(dá)裹到最持大值時(shí)的皮培養(yǎng)啟時(shí)間術(shù)較為閉合適之。時(shí)間同太長(zhǎng)，菌凱種趨差于老接化，豎生產(chǎn)群能力混下降扮，菌蹄體自伐溶；種齡輸太短，造壯成發(fā)侮酵前焦期生鵲長(zhǎng)緩膊慢。接種滔齡與廈接種仗量接種卷量：抗是指冷移入業(yè)的種鍛子液局體積你和接糧種后瘋培養(yǎng)惹液體積廉的比急例。接種姓量的恢大小決定勝于生惹產(chǎn)菌司種在現(xiàn)發(fā)酵穩(wěn)罐中斑生長(zhǎng)膀繁殖屯的速?gòu)N度，采殲用較亮大的概接種鏡量可丹以縮卡短發(fā)糕酵罐罵中菌撕絲繁趣殖達(dá)歸到高告峰的偶時(shí)間維，使免產(chǎn)物訓(xùn)的形擁成提描前到攻來(lái)，壇并可丑減少努雜菌跟的生月長(zhǎng)機(jī)測(cè)會(huì)。贈(zèng)但接界種量秘過(guò)大透或者真過(guò)小拉，均城會(huì)影遺響發(fā)博酵。過(guò)大伯會(huì)引炕起溶暴氧不襪足，而影響混產(chǎn)物朝合成逝；而煎且會(huì)遵過(guò)多邪移入托代謝薦廢物摟，也陸不經(jīng)奧濟(jì)；漂過(guò)小件會(huì)延曠長(zhǎng)培壟養(yǎng)時(shí)銷(xiāo)間，典降低政發(fā)酵醫(yī)罐的狀生產(chǎn)圾率。通?？冉臃N場(chǎng)量，扶細(xì)菌1~涂5%，酵日母菌5~臟10粒%，霉次菌7~段15察%，接種業(yè)齡與茶接種牢量移種回：防止還染菌孢子調(diào)懸浮翠液種黨子、胖搖瓶腦菌絲賴(lài)體種慣子采峽用火罐癢法或壓差吸法接入近。種子癢罐之銅間或椅發(fā)酵露罐間腐的移雹種方肺式，積主要支采用虧差壓役法。技由種援子接薄種管述道進(jìn)變行移裹種，患移種劉過(guò)程瞧中要防止頸接受籮罐表格壓降濫至零，否橡則會(huì)濾引起具染菌沸。從實(shí)里驗(yàn)室消搖瓶蕩或孢差子懸沃浮液讓容器鮮接種從種子狠罐接終種種子構(gòu)罐級(jí)旺數(shù)的誕確定孢子恩或搖糖瓶菌畜絲一級(jí)恥種子炸罐二級(jí)疑發(fā)酵發(fā)酵褲罐二級(jí)勸種子踐罐三級(jí)屢發(fā)酵發(fā)酵蝦罐四級(jí)油發(fā)酵發(fā)酵夾罐三級(jí)杜種子袍罐種子烤罐級(jí)侄數(shù)：奮是指同制備遍種子初需逐思級(jí)擴(kuò)貝大培嶺養(yǎng)的對(duì)次數(shù)刻：1、接賞種量2、孢幻玉子發(fā)稍芽能浴力、掏菌體泄生長(zhǎng)愈特性3、發(fā)有酵規(guī)防模級(jí)數(shù)粱大，釀難控熊制、火易染敬菌、最易變節(jié)異，夠難管姐理，啦一般2-劣4級(jí)種子控進(jìn)入睜發(fā)酵選罐：猶能迅毫速生剛長(zhǎng)，垮達(dá)到臥一定號(hào)的量鋤，利紛于產(chǎn)兔物合為成。3、種坊子異反常分纏析A、菌誘種生增長(zhǎng)發(fā)攀育緩鑰慢或低過(guò)快他：通入門(mén)的空案氣溫張度低芹、滅尚菌質(zhì)勢(shì)量差B、菌券絲結(jié)親團(tuán)：接種趨量、檔攪拌抬不好廣。C、菌竟絲粘葛壁：攪拌頓不好毫、泡尿沫多璃、裝耕料少掩。種子謙制備屋過(guò)程智舉例一、單谷氨襲酸生綁產(chǎn)的強(qiáng)種子在制備制備惜過(guò)程斜面娘菌種→一級(jí)平種子膏培養(yǎng)→二調(diào)級(jí)種子潤(rùn)培養(yǎng)→發(fā)酵1、斜猶面(A猜S1戶(hù).2懶99猶)培養(yǎng)巖基：版蛋白徑胨1%，牛滴肉膏1%，氯頓化鈉0.繞