2021上海生命科學(xué)一模綜合題匯編生物工程綜合題-

（五2021楊浦一模）生物工程（13分）蘋果切開或咬開后不久顏色便會(huì)加深，這種現(xiàn)象稱為“褐變”。褐變是由位于細(xì)胞器中的多酚氧化酶（PPO）催化位于液泡中的多酚類物質(zhì)（如綠原酸等）生成棕色色素所致。據(jù)此，科研人員培育出了褐變能力顯著降低的轉(zhuǎn)基因蘋果，其工作流程如圖13所示。KmrpCLY14愈傷組織目的基因pBI121KmrKmrpCLY14愈傷組織目的基因pBI121Kmr④①④①③③⑤⑤②②蘋果嫩葉蘋果嫩葉轉(zhuǎn)基因蘋果樹苗轉(zhuǎn)基因蘋果樹苗KmrKmr為卡那霉素抗性基因圖1341.（2分）根據(jù)題干信息判斷，要想構(gòu)建褐變能力顯著降低的轉(zhuǎn)基因蘋果，目的基因應(yīng)選。（多選）A.卡那霉素抗性基因 B.綠原酸合成基因C.棕色色素降解基因 D.提高液泡滲透壓的基因E.抑制PPO表達(dá)的基因42.（2分）實(shí)施圖13中步驟①所需要的酶是。43.（2分）在步驟③進(jìn)行之前，需要用氯化汞或次氯酸鈣溶液對(duì)蘋果嫩葉碎片（外植體）進(jìn)行處理，目的是。A.消毒B.滅菌C.清洗D.誘導(dǎo)分化44.（2分）步驟④是植物組織培養(yǎng)的重要階段，這個(gè)階段稱為。該階段使用的MS培養(yǎng)基中除了含有必要的植物激素外，從基因工程流程的角度考慮，還需要添加。45.（2分）一般而言，在經(jīng)歷步驟⑤后培育出來的轉(zhuǎn)基因植株中，目的基因插在一條染色體上。要想培育轉(zhuǎn)基因純合子的蘋果植株，較為合理可行的方案是。46.（3分）為了評(píng)估目的基因?qū)σ种铺O果褐變的效果，需要選擇無目的基因的對(duì)照植株，如野生株（同樣進(jìn)行步驟②、④、⑤操作）或含質(zhì)粒pBI121的植株，兩者中最佳的是，理由是。41.（2分）CE（多選）（錯(cuò)選0分，全選2分，漏選1個(gè)得1分）42.（2分）限制酶和DNA連接酶43.（2分）A44.（2分）脫分化卡那霉素45.（2分）讓轉(zhuǎn)基因植株雜交46.（3分）含質(zhì)粒pBI121的植株（1分）相比野生株，含質(zhì)粒pBI121的植株作為對(duì)照，（1分）可以排除質(zhì)粒pBI121中的基因?qū)?shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾（1分）（四2021徐匯一模）疫苗與生物工程（14分）新型冠狀病毒肆虐全球，給人們的日常生產(chǎn)、生活等帶來很大的影響，因此研發(fā)新型冠狀病毒疫苗受到廣泛關(guān)注。圖12中A～C表示結(jié)構(gòu)或物質(zhì)，虛線箭頭表示NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ的酶切位點(diǎn)（四種酶的識(shí)別序列詳見下表），圖13是疫苗的研發(fā)的幾種途徑和方法，①～=8\*GB3⑧表示過程。圖12圖1240．圖12中結(jié)構(gòu)A表示______，過程①需要______酶。圖1341．根據(jù)C分子可確定需要用限制酶______切割質(zhì)粒B。圖1342．圖13中表示篩選的過程是______（填編號(hào)），篩選所用的培養(yǎng)基是（固體/液體）培養(yǎng)基，其所用的接種方法是__________，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是。43．圖13中有一條是DNA疫苗的制備過程，按順序?qū)懗鲈撝苽溥^程（寫編號(hào)）。44．研發(fā)出的疫苗需進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物注射疫苗后，在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)檢測(cè)到了針對(duì)S抗原蛋白的特異性抗體。據(jù)此判斷下列說法正確的是______（多選）。A．S蛋白作為抗原，引發(fā)了特異性免疫B．抗體大多是蛋白質(zhì)，少數(shù)是糖類、脂質(zhì)C．B淋巴細(xì)胞一定參與了上述免疫過程D．T淋巴細(xì)胞可能參與了上述免疫過程45．疫苗=4\*ROMANIV、疫苗=5\*ROMANV接種到人體后，其表達(dá)產(chǎn)物均會(huì)刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。據(jù)圖13和所學(xué)知識(shí)，描述兩者在人體內(nèi)表達(dá)過程的差異。46．與疫苗=1\*ROMANI相比，疫苗=3\*ROMANIII安全性更高，其原因是______。40.衣殼（只回答蛋白質(zhì)不得分）逆轉(zhuǎn)錄 41. NcoⅠ、NheⅠ42.⑤ 固體培養(yǎng)基，接種方法是劃線法先調(diào)節(jié)pH后滅菌43.=1\*GB3①=2\*GB3②=3\*GB3③=4\*GB3④=5\*GB3⑤=8\*GB3⑧44．ACD45.DNA疫苗接種到人體后，經(jīng)歷轉(zhuǎn)錄和翻譯表達(dá)出病毒的抗原結(jié)構(gòu)，而RNA疫苗接種到人體后，直接翻譯出病毒的抗原結(jié)構(gòu)（二2021靜安一模）生物工程（12分）天然的玫瑰沒有藍(lán)色的花冠，主要是因?yàn)槿鄙俸铣伤{(lán)色色素的關(guān)鍵酶3,5-羥氧化酶。圖11是科研人員將矮牽?；ㄖ芯幋a3,5-羥氧化酶的基因（HE）引入玫瑰細(xì)胞內(nèi)，培育出藍(lán)色玫瑰花的操作過程。圖中數(shù)字編號(hào)表示過程，短線表示識(shí)別序列不同的5種限制酶的識(shí)別位點(diǎn)，Tcr、Apr、NPTⅡ分別表示四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因、氨基糖苷類-3-磷酸轉(zhuǎn)移酶基因。EcoEcoRⅠSalⅠBamHⅠPvuⅠPstⅠTcrAprNPTⅡ矮牽?；‥coRⅠBamHⅠBamHⅠPstⅠHESalⅠ大分子A玫瑰莖尖愈傷組織農(nóng)桿菌圖11②①②①③③④④⑤⑤26.（4分）圖11中的大分子A一般被稱為________，獲取大分子A需用限制酶________同時(shí)作用于含HE的DNA片段和質(zhì)粒，再用________酶連接。27.（3分）圖11中表示篩選過程的是________（填圖中數(shù)字），該過程需配制的培養(yǎng)基有________（多選）。A．含四環(huán)素的牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基B．含四環(huán)素的牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基C．含氨芐青霉素的牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基含氨芐青霉素的牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基28.（3分）圖11中④過程稱為________（填文字），隨后發(fā)生的⑤過程中________。A．全部基因復(fù)制，全部基因表達(dá)B．部分基因復(fù)制，部分基因表達(dá)C．全部基因復(fù)制，部分基因表達(dá)部分基因復(fù)制，全部基因表達(dá)29.（2分）實(shí)際操作中，用農(nóng)桿菌感染植物愈傷組織后也需要篩選，攜帶NPTⅡ基因的植物細(xì)胞對(duì)卡那霉素、G418等抗生素會(huì)產(chǎn)生抗性。文獻(xiàn)顯示80mg·L-1的G418是篩選轉(zhuǎn)基因水稻的合適濃度，因此有人推測(cè)最適合篩選轉(zhuǎn)基因玫瑰的抗生素也是80mg·L-1的G418，這種說法正確嗎？請(qǐng)判斷并說明理由：_____________________________。26．重組質(zhì)粒（重組DNA）SalⅠ、EcoRⅠ（2分；漏、錯(cuò)均不得分）DNA連接（酶）27．②AC（2分；寫出1個(gè)得1分，有錯(cuò)誤不得分）28．脫分化A（2分）29．不正確。因?yàn)閷?duì)于玫瑰，G418不一定是合適的抗生素，可能卡那霉素更合適（1分）；同時(shí)不同植物對(duì)G418的敏感度不同，對(duì)于玫瑰，80mg·L-1不一定是合適的濃度（1分）。（四2021黃浦一模）現(xiàn)代生物技術(shù)與生物工程（12分）dMAb技術(shù)是一種通過DNA編碼產(chǎn)生單克隆抗體的技術(shù)，比傳統(tǒng)的單克隆抗體制備方法有更多的發(fā)展?jié)摿?。圖16是dMAb技術(shù)在埃博拉病毒感染疾病的臨床研究中的操作流程。圖圖1636．（2分）要保證所制備的抗體能精準(zhǔn)識(shí)別埃博拉病毒抗原，在人工合成目的基因時(shí)，所需獲取的信息是。A． 抗體的核苷酸序列 B．埃博拉病毒的核苷酸序列C． 抗體的氨基酸序列 D．埃博拉病毒衣殼的氨基酸序列37．（2分）圖16中重組質(zhì)粒的構(gòu)建所需的工具酶有、。38．（2分）dMAb也涉及轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用，下列過程描述與圖16中序號(hào)相符的是。（多選）A．①—獲取目的基因 B．②—目的基因與運(yùn)載體重組C．③—重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞 D．④—篩選含有目的基因的受體細(xì)胞39．（2分）傳統(tǒng)的利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的過程需要運(yùn)用生物工程中的技術(shù)有。（多選）A．細(xì)胞核移植技術(shù) B．組織培養(yǎng)C．細(xì)胞融合 D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)40．（2分）單克隆抗體的制備所基于的免疫學(xué)基本原理是。（多選）A．骨髓瘤細(xì)胞生長(zhǎng)分裂旺盛B．每個(gè)雜交瘤細(xì)胞只具備產(chǎn)一種抗體的能力C．B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后只剩下產(chǎn)一種抗體的能力D．單一抗原分子能刺激B淋巴細(xì)胞形成產(chǎn)單一抗體的能力41．（2分）與傳統(tǒng)利用雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生單克隆抗體的技術(shù)相比，dMAb技術(shù)在抗體的制備上有何優(yōu)勢(shì)？。（請(qǐng)列舉兩點(diǎn)）36．C（2分）37．限制酶（1分）、DNA連接酶（1分）（兩空順序可顛倒）38．BC(2分，漏選得1分，錯(cuò)選不得分)39．CD（2分，漏選得1分，錯(cuò)選不得分）40．BD（2分，漏選得1分，錯(cuò)選不得分）41.抗體的產(chǎn)生在生物體內(nèi)進(jìn)行，不需要進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng)；產(chǎn)生抗體的細(xì)胞種類不局限于免疫細(xì)胞（漿細(xì)胞）；可制備成DNA“疫苗”，便于存儲(chǔ)和運(yùn)輸；抗體直接由DNA編碼產(chǎn)生，省去抗原刺激免疫細(xì)胞再細(xì)胞融合和篩選的步驟……（共2分，列舉兩點(diǎn)，每點(diǎn)1分，表述合理即得分）（四2021青浦一模）生物工程（11分）內(nèi)皮素與黑色素細(xì)胞膜上的某受體結(jié)合后，會(huì)刺激黑色素細(xì)胞的增殖、分化并激活酪氨酸酶的活性，從而使黑色素增加。研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)皮素的另一種主要受體ETA具有美容功能?？蒲腥藛T通過構(gòu)建表達(dá)載體，實(shí)現(xiàn)了ETA基因在細(xì)胞中高效表達(dá)。其過程如圖13（圖中SNAP基因是一種熒光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的識(shí)別序列為C↓CCGGG，限制酶XhoI的識(shí)別序列為C↓TCGAG），據(jù)圖回答下列問題：熒光檢測(cè)熒光檢測(cè)圖圖1337.（2分）圖13中過程①和②獲取目的基因的方法是____________________；該過程所需的原料是________________。38.（3分）⑤表示基因工程步驟中的______，該過程中用兩種限制酶切割的主要目的是_________________________________________________________________________________。39.（2分）關(guān)于SNAP基因和ETA基因及兩者的表達(dá)過程中，不同的是（）（多選）A.來源的物種 B.核苷酸的種類C.核苷酸的排列順序D.轉(zhuǎn)錄的mRNA序列 E.翻譯時(shí)對(duì)應(yīng)的密碼子表40.（2分）根據(jù)上述信息和圖分析，下列說法正確的是（）（多選）A.步驟⑥導(dǎo)入的方法為顯微注射法 B.大腸桿菌篩選需添加氨芐青霉素C.步驟⑧實(shí)現(xiàn)的是細(xì)胞水平的檢測(cè) D.該過程屬于微生物基因工程41.（2分）請(qǐng)根據(jù)資料分析注射ETA達(dá)到美白祛斑的原因___________________________________________________________________________________________________________________。37.化學(xué)方法人工合成（1分）4種脫氧核苷酸（1分）38.目的基因與運(yùn)載體重組（1分）獲得不同的黏性末端，避免目的基因及質(zhì)粒的任意連接（避免目的基因/質(zhì)粒的自身環(huán)化）（答對(duì)1點(diǎn)得1分，共2分）39.ACD（2分）40.BD（2分）41.注射進(jìn)入的ETA能與內(nèi)皮素結(jié)合，減少了內(nèi)皮素與黑色素細(xì)胞膜上內(nèi)皮素受體的結(jié)合，從而抑制了黑色素細(xì)胞的增殖和黑色素的形成。（2分）（二（2021松江區(qū)一模））生物工程與糖尿病的防治（11分）圖17某種1型糖尿病是因免疫系統(tǒng)將自身胰島素作為抗原識(shí)別而引起的自身免疫病。小腸黏膜長(zhǎng)期少量吸收胰島素抗原，能誘導(dǎo)免疫系統(tǒng)識(shí)別該抗原后應(yīng)答減弱，從而緩解癥狀。科研人員利用1型糖尿病模型小鼠進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，使乳酸桿菌在小鼠腸道內(nèi)持續(xù)產(chǎn)生人胰島素抗原，為此構(gòu)建了重組表達(dá)載體，技術(shù)路線如圖17所示。圖17注：信號(hào)肽是引導(dǎo)新合成的蛋白質(zhì)向分泌通路轉(zhuǎn)移的短肽鏈（長(zhǎng)度5-30個(gè)氨基酸）27.（2分）為使人胰島素在乳酸菌中高效表達(dá)，需改造其編碼序列。圖18是改造前后人胰島素B鏈編碼序列的起始30個(gè)核苷酸序列。據(jù)圖分析，轉(zhuǎn)錄形成的mRNA中，該段序列所對(duì)應(yīng)的片段內(nèi)存在堿基替換的密碼子數(shù)有________個(gè)。第一個(gè)核苷酸|圖18改造前單鏈TTTGTGAACCAACACCTGTGCGGCTCA圖18改造后單鏈TTTGTCAACCAACATTTATGTGGATCACAT28.（2分）在重組表達(dá)載體中，SacⅠ和XbaⅠ限制酶僅有圖17的酶切位點(diǎn)。用這兩種酶充分酶切重組表達(dá)載體，可形成________種DNA片段。29.（2分）檢測(cè)轉(zhuǎn)化的乳酸桿菌發(fā)現(xiàn)，信號(hào)肽-重組人胰島素分布在細(xì)胞壁上。由此推測(cè)，信號(hào)肽的合成和運(yùn)輸所經(jīng)歷的細(xì)胞結(jié)構(gòu)依次是_________。A．核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、細(xì)胞膜B．核糖體、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、細(xì)胞膜、細(xì)胞壁C．內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、線粒體、細(xì)胞膜D．核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、細(xì)胞膜、細(xì)胞壁30.（2分）用轉(zhuǎn)化的乳酸桿菌飼喂1型糖尿病模型小鼠一段時(shí)間后，小鼠體內(nèi)出現(xiàn)人胰島素抗原，能夠識(shí)別它的免疫細(xì)胞有。（多選）A．B淋巴細(xì)胞 B．抗體 C．巨噬細(xì)胞 D．漿細(xì)胞31.（3分）1型糖尿病還有可能是因人的第六號(hào)染色體短臂上的HLA-D基因損傷引起。該損傷基因的表達(dá)使胰島B細(xì)胞表面出現(xiàn)異常的HLA-D抗原，T淋巴細(xì)胞被其刺激并激活，攻擊胰島B細(xì)胞使其裂解死亡。以下關(guān)于該1型糖尿病的說法錯(cuò)誤的是。（多選）A．上述過程屬于體液免疫 B．上述過程不產(chǎn)生記憶細(xì)胞C．該病可能是由基因突變引起的 D．該病是免疫功能缺失而導(dǎo)致的27.（2分）628.（2分）329.（2分）B30.（2分）AC（評(píng)分說明：完全正確得2分,其他情況均得0分）31.（3分）ABD（評(píng)分說明：完全正確得3分，漏選1項(xiàng)得2分，其他情況均得0分）（二（2021寶山一模））有關(guān)生物工程問題(12分)枯草芽孢桿菌可分泌纖維素酶。研究者篩選到一株降解纖維能力較強(qiáng)的枯草芽孢桿菌菌株（B菌）。高效表達(dá)載體HT質(zhì)粒上有Smal和BamHI兩個(gè)酶切點(diǎn)。Ⅰ.從B菌中提取一種纖維素酶（C1酶）基因并進(jìn)行克隆，在克隆C1酶基因時(shí)，需在其兩端添加相關(guān)酶切位點(diǎn)Ⅱ.將獲得的C1酶基因與HT質(zhì)粒連接構(gòu)成重組DNA（如圖14）。Ⅲ.將連接形成的重組DNA再導(dǎo)入B菌，獲得降解纖維素能力更強(qiáng)的工程菌。26.（2分）對(duì)克隆的C1酶進(jìn)行基因測(cè)序，與數(shù)據(jù)庫中的C1酶基因編碼序列相比，有兩個(gè)堿基對(duì)不同，但兩者編碼蛋白質(zhì)的氨基酸序列相同，這是因?yàn)椤．基因選擇性表達(dá) B．基因中含有四種脫氧核苷酸C．一種密碼子決定一種氨基酸 D．編碼同一種氨基酸的密碼子可以有多個(gè)27.（2分）從階段Ⅰ~Ⅲ，需要DNA連接酶的階段是。28.（2分）關(guān)于圖14中重組DNA的兩個(gè)酶切點(diǎn)，有可能的是（多選）A．都能被Smal酶識(shí)別 B．都能被BamHI酶識(shí)別C．都不能被Smal酶和BamHI酶識(shí)別 D．分別能被Smal酶和BamHI酶識(shí)別對(duì)照組對(duì)照組1對(duì)照組2工程菌048101620纖維素含量（%）C1酶基因HT質(zhì)粒SmalBamHI重組DNA酶切點(diǎn)酶切點(diǎn)圖14酶切點(diǎn)酶切點(diǎn)圖圖1529.（2分）以纖維素含量為20%的培養(yǎng)基分為三組，一組接種工程菌，對(duì)照組1不進(jìn)行處理，對(duì)照組2進(jìn)行相應(yīng)處理。在相同條件下培養(yǎng)96小時(shí)，檢測(cè)培養(yǎng)基中纖維素的含量。結(jié)果如圖15，說明工程菌降解纖維素的能力最強(qiáng)。對(duì)照組2的處理應(yīng)為。樣品樣品懸液涂布劃線接種圖1630．(2分樣品樣品懸液涂布劃線接種圖16A．圖16中篩選培養(yǎng)基中是牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基B．在涂布平板上長(zhǎng)出的菌落，再通過劃線進(jìn)一步純化菌種C．玻離儀器等工具在操作前需要高壓滅菌殺死細(xì)菌及其芽孢D．斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物，可在常溫長(zhǎng)期保存菌株31.（2分）預(yù)期該工程菌在處理廢棄物以保護(hù)環(huán)境方面可能的應(yīng)用（舉一例）。26.D（2分）27.Ⅱ（2分）28.ABCD（2分，對(duì)2個(gè)或3給1分）29.接種等量B菌（2分）30.BC（2分，對(duì)1個(gè)給1分）31.處理綠化廢棄物/處理農(nóng)作物秸稈/處理植物類濕垃圾（2分。合理給分）（四（2021崇明一模））回答下列有關(guān)生物工程以及遺傳信息表達(dá)的問題（12分）EPA和DHA是人體自身不能直接從頭合成而又不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)，獲取EPA/DHA產(chǎn)品的主要途徑是從海洋漁業(yè)資源中提?。ɡ玺~油）。研究者將pfaB基因引入裂殖壺菌，使其EPA合成量提高了5倍。圖13為裂殖壺菌基因改造以及工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)EPA/DHA的過程示意圖。pfaBpfaB基因2A基因質(zhì)粒zeoR基因（z