動物實驗操作技術-小鼠、大鼠的實驗操作（實驗動物）

項目四動物實驗操作技術任務一大鼠、小鼠的實驗操作技術（采血）

*認識理解并善待實驗動物學習目標任務描述知識平臺3任務描述

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熟練掌握大鼠、小鼠采血操作，并培養(yǎng)團隊合作意思。5

知識平臺5/27/2023

血樣可幫助科學研究人員和技術人員確定動物的健康狀況、診斷疾病，并為研究人員提供非常重要的信息。無論使用何種方法從嚙齒類動物身上采集血樣，都應特別重視保持血樣的質(zhì)量。小鼠與大鼠的采血5/27/2023

1.最大抽血量

健康成年動物的平均血液量通常約相當于其體重的6-7%（g）。典型可承受最大抽血量（可以從一只動物中安全抽取的血液總量）最高約相當于一只動物循環(huán)血量的10%。5/27/2023

品種單個樣品最大抽血量放血量小鼠0.2–0.3ml1.6-3.2ml1.0–1.5ml大鼠2.0–3.0ml20.0–40.0ml8.0–12.0ml大鼠和小鼠中常用抽血量、最大量及放血量5/27/2023

2.眼窩采血

眼窩抽血是將采血毛細管直接置于嚙齒類動物眼窩的眼窩竇（或大鼠脈絡叢）中進行抽血的過程。這種類型的抽血過程可能需要采用安樂死。5/27/2023

1.頸背部保定小鼠，并將毛細管插入眼內(nèi)眥（沿著動物鼻子的45°角）2.當血液鍵入采血管，輕輕扭轉(zhuǎn)采血管，使其向前進入眼竇。5/27/2023

3.倒轉(zhuǎn)動物，利用重力幫助加速血液流入采血容器中。4.移除采血管，合上眼瞼，輕輕壓一下眼睛，以確保止血。5/27/2023

3．尾靜脈采血

尾靜脈采血在小鼠和大鼠中均可進行。側(cè)尾靜脈是快速有效采集量至中量動物血液的一個很好部位。

保定小鼠，露出尾巴2.握住尾根部，以加速血流。3.酒精擦拭尾部

4.斜面朝上插入針頭至側(cè)尾靜脈

5.從針頭接口處收集血液6.移去針頭，并輕壓止血5/27/2023

眼窩抽血、尾靜脈抽血和心臟穿刺采血是比較費力的，涉及到動物保定、安樂死、采血管準備、采血、基本血樣制備和儲存，需要盡量減輕動物的疼痛和不適5/27/2023?交流（1）由各組負責人示范小鼠大鼠的基本實驗操作，教師講解重點難點和注意事項；（2）各組在教師和該責任人的指導下完成小鼠大的基本實驗操作；（3）所有學生撰寫自己的工作記錄；（4）考核小鼠的基本實驗操作，再考核大鼠的基本實驗操作；（5）該項目負責人撰寫該實驗的工作小結；（6）教師總結。

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思考與練習?1.總結實驗動物給藥的方法。2.列表比較小鼠灌胃、皮下注射、肌肉注射和腹腔注射的操作要點的異同。5/27/2023

?3.某實驗項目研究的是某飼料添加劑對雌性大鼠的影響。實驗方案如下：共50只大鼠，分成五組，每組十只，各組動物用一個大籠盒飼養(yǎng)，共用5個大籠盒。第一組為對照組，第二、三、四、無組每日灌胃該飼料添加劑，濃度依次為1mg/kg、5mg/kg、30mg/kg、100mg/kg，連續(xù)灌胃30天，每日灌胃前對所有動物稱重，并記錄。第31日去動物小腸和血液檢測生理生化指標。就在實驗的第22天，由于飼養(yǎng)員疏忽，第三組的飲水瓶沒蓋緊，漏了一夜的水，致使第三組大鼠的體重和采食量明顯下降。第三組實驗數(shù)據(jù)的準確性受到很大的影響。于是，實驗人員決定重新實驗，他們?nèi)绾胃倪M實驗的方式方法，才能避免類似情況發(fā)生。

項目四動物實驗操作技術任務一大鼠、小鼠的實驗操作技術（麻醉）

*認識理解并善待實驗動物學習目標任務描述知識平臺21

學習目標

*1.能進行小鼠、大鼠的麻醉全身麻醉；2.加深對動物3R和動物福利的認識，并在實驗過程中予以貫徹，人道對待實驗動物。

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知識平臺5/27/2023知識平臺小鼠與大鼠的全身麻醉常用麻醉劑麻醉方法5/27/2023

進行動物實驗有時需要麻醉，安全、有效的麻醉方法和技術，可高質(zhì)量地保障動物實驗的順利進行，并體現(xiàn)動物福利的宗旨。麻醉過淺或過深會使實驗動物遭受過多痛苦，影響實驗進程和實驗結果，重者可導致實驗動物死亡。小鼠與大鼠的麻醉5/27/2023

1.常用的麻醉藥從物理性質(zhì)上可分為揮發(fā)性麻醉劑，如乙醚、氟烷、甲氧氟烷等；非揮發(fā)性麻醉劑，如巴比妥類、氯胺酮、水合氯醛、烏拉擔和一些新型的復合麻醉劑如速眠新、速麻安等。5/27/2023

（1）乙醚乙醚是最常用的揮發(fā)性麻醉藥物，各種動物都可應用。其麻醉量和致死量相差大,所以其安全度大。但由于乙醚局部刺激作用大,可刺激上呼吸道粘液分泌增加。5/27/2023

（2）氨基甲酸乙酯

此藥是比較溫和的麻醉藥，安全度大。多數(shù)實驗動物都可使用,更適合于小動物。一般用作基礎麻醉，如使用全部過程都用此麻醉時，動物保溫尤為重要。5/27/2023

（3）戊巴比妥鈉

此藥麻醉時間不很長,一次給藥的有效時間可延續(xù)3-5小時,所以十分適合一般使用要求。給藥后對動物循環(huán)和呼吸系統(tǒng)無顯著抑制作用，藥品價格也很便宜。5/27/2023

（4）硫噴妥鈉

為黃色粉末，有硫臭，易吸水。其水溶液不穩(wěn)定，故必須現(xiàn)用現(xiàn)配，常用濃度為1～5％。此藥作靜脈注射時，由于藥液迅速進入腦組織，故誘導快，動物很快被麻醉。5/27/2023

2.麻醉藥物的選擇（1）根據(jù)不同實驗動物選擇麻醉藥物不同實驗動物對同一麻醉藥物的敏感性存在差異。5/27/2023

（2）根據(jù)不同動物實驗選擇麻醉藥物（3）根據(jù)不同麻醉途徑選擇麻醉藥物5/27/2023

（4）復合麻醉的藥物選擇復合麻醉可以減少每種藥物的劑量和副作用，避免單純使用一種麻醉藥物時麻醉過深或長時、大量使用對機體可能帶來的不利因素，在保護實驗動物的同時，更好地達到實驗預期目的。5/27/2023

3.常用全身麻醉方法（1）吸入麻醉法吸入法對多數(shù)動物有良好的麻醉效果，其優(yōu)點是易于調(diào)節(jié)麻醉的深度和較快的終止麻醉，缺點是中、小型動物較適用，對大型動物如狗的吸入麻醉操作復雜，通常不用。5/27/2023

2）注射麻醉法大、小鼠和豚鼠常采用腹腔注射法進行全身麻醉。狗、兔等動物既可腹腔注射給藥，也可靜脈注射給藥。在麻醉興奮期出現(xiàn)時，動物掙扎不安，為防止注射針滑脫，常用吸入麻醉法進行誘導，待動物安靜后再行腹腔或靜脈穿刺給藥麻醉。5/27/2023

（4）復合麻醉的藥物選擇復合麻醉可以減少每種藥物的劑量和副作用，避免單純使用一種麻醉藥物時麻醉過深或長時、大量使用對機體可能帶來的不利因素，在保護實驗動物的同時，更好地達到實驗預期目的。5/27/2023

（4）復合麻醉的藥物選擇復合麻醉可以減少每種藥物的劑量和副作用，避免單純使用一種麻醉藥物時麻醉過深或長時、大量使用對機體可能帶來的不利因素，在保護實驗動物的同時，更好地達到實驗預期目的。5/27/2023

4.麻醉深度要根據(jù)動物體重、藥物濃度，仔細計算好所需的麻醉藥物劑量。5/27/2023

5.麻醉后的動物監(jiān)護防止麻醉后的動物因呼吸道阻塞而窒息死亡。在需要動物長時間處于麻醉狀態(tài)的實驗中，追加麻醉藥物要嚴格控制劑量(一般不超過麻醉劑量的1/3).5/27/2023常用麻醉劑的用法及劑量

麻醉藥名適用動物給藥途徑給藥劑量

（mg/kg）常配濃度（%）給藥量(ml/kg）維持時間乙醚各種動物吸入———實驗過程中一直藥吸入麻藥，時間隨實驗而掌握氯仿各種動物吸入

同乙醚，毒性大戊巴比妥鈉狗、貓、兔豚鼠大、小鼠鳥類靜脈腹腔、皮下腹腔腹腔肌肉3040~5040~504550~100332221.01.4~1.72.0~2.52.32.5~5.02~4小時.中途加1/5量,可多維持1小時以上氨基甲酸乙酯(烏拉坦)狗、貓兔豚鼠大、小鼠腹腔，靜脈直腸肌肉肌肉252520203~46.07.06.32~4小時,安全,毒性小,主要適用于小動物,有時可降低血壓硫噴妥鈉狗、貓兔、大鼠靜脈、腹腔靜脈、腹腔25~5050~100211.3~2.55.0~10.015~30分鐘,效力強,宜慢性注異戊巴比妥鈉狗、貓兔鼠類靜脈腹腔、肌肉直腸、腹腔40~5080~100100100510101051010104~6小時

項目四常見實驗動物的基本操作任務1小鼠、大鼠的實驗操作

*任務描述知識平臺任務實施學習目標43學習目的5/27/2023學習目的：1.了解手術縫合常見方法；2.熟練掌握連續(xù)縫合技術、結節(jié)縫合技術；

45任務描述5/27/2023

通過本任務的學習，能夠了解手術縫合常見方法；熟練掌握連續(xù)縫合技術、結節(jié)縫合技術；獨立完成小鼠、大鼠皮膚和肌肉的縫合。5/27/2023

常見縫合方法：結節(jié)縫合連續(xù)縫合結節(jié)縫合三棱針皮膚表面5/27/2023連續(xù)縫合肌肉或內(nèi)臟圓形針5/27/20235/27/2023任務實施

?5/27/2023?分組練習，完成老師要求的考核

?1.各學習小組制定工作計劃、分配工作任務，確定小鼠抓取保定和性別判定操作的主要負責人；2.各學習小組利