優(yōu)選文檔創(chuàng)新方案生物人教選修專題課題微生物的實驗室培養(yǎng)PPT

創(chuàng)新方案生物人教選修課件專題課題微生物的實驗室培養(yǎng)了解培養(yǎng)基的種類、營養(yǎng)要素、配制原則理解微生物培養(yǎng)過程中的無菌操作、接種操作要求無菌技術(shù)的操作

某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進行了實驗，實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù)。(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于________中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃。A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥(2)無菌操作技術(shù)，區(qū)別消毒和滅菌，以及各自常用的方法和優(yōu)點。2．純化大腸桿菌(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了________和________。(2)在配制培養(yǎng)基時，各組分溶化后是否立即進行滅菌？為什么？(5)培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物的生長，稱為選擇培養(yǎng)基，可以培養(yǎng)、分離出特定微生物。接種環(huán)可用灼燒滅菌達(dá)到迅速徹底的滅菌效果；(4)不同的菌落具有各自的菌落特征(如硬度、顏色、透明度、光滑度等)。四、菌種保存(2)無菌操作技術(shù)，區(qū)別消毒和滅菌，以及各自常用的方法和優(yōu)點。[答案](1)氮源(碳源不作要求)碳源無機鹽水(2)高壓蒸汽滅菌(3)恒溫培養(yǎng)箱無菌水2．讀教材P15[無菌技術(shù)]的相關(guān)內(nèi)容，歸納并回答下列問題：(4)培養(yǎng)20小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有____________種細(xì)菌。(4)多高(5)鹽(或NaCl)選擇培養(yǎng)基附近進行。1．概念人們按照微生物對

的不同需求，配制出供其生長繁殖的

。

2．種類(按照培養(yǎng)基的物理性質(zhì)劃分)(1)液體培養(yǎng)基：配制成的

狀態(tài)的基質(zhì)。

(2)固體培養(yǎng)基：配制成的

狀態(tài)的基質(zhì)，是實驗室中最常用的培養(yǎng)基之一，微生物在其上面生長，可形成肉眼可見的

。營養(yǎng)物質(zhì)營養(yǎng)基質(zhì)液體固體菌落3．營養(yǎng)要素各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有

、

、

、

，此外培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、

以及

的需求。水碳源氮源無機鹽特殊營養(yǎng)物質(zhì)氧氣二、無菌技術(shù)

1．避免雜菌污染的措施

(1)對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行

和

。

(2)將用于微生物培養(yǎng)的

、

和

等器具進行滅菌。

(3)為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在

附近進行。

(4)實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與

相接觸。清潔消毒器皿接種用具培養(yǎng)基酒精燈火焰周圍的物品2．消毒和滅菌

(1)消毒：①概念：使用

的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體

(不包括芽孢和孢子)。②常用方法：

消毒法、

消毒法、

消毒法。

(2)滅菌：①概念：使用

的理化因素殺死

的微生物(包括芽孢和孢子)。②常用方法：

滅菌、

滅菌、

滅菌。較為溫和有害的微生物煮沸巴氏化學(xué)藥品強烈物體內(nèi)外所有灼燒干熱高壓蒸汽三、分離純化大腸桿菌的實驗操作

1．制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。

2．純化大腸桿菌微生物接種的最常用方法是

和

。

(1)平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面

的操作，將聚集的菌種逐步

到培養(yǎng)基的表面。

(2)稀釋涂布平板法：將菌液進行一系列的

，然后將不同稀釋度的菌液分別

到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。平板劃線法稀釋涂布平板法連續(xù)劃線稀釋分散梯度稀釋涂布3．結(jié)果分析

(1)如果接種了大腸桿菌的培養(yǎng)基上生長的菌落顏色、形狀、大小基本一致，說明

操作符合要求。

(2)若培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中被

。

(3)未接種大腸桿菌的空白對照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中若

，則說明滅菌不徹底，實驗失敗。接種雜菌污染長出菌落四、菌種保存

1．臨時保藏法適用于

使用的菌種。

(1)過程：①將菌種接種到試管的

培養(yǎng)基上，合適溫度下培養(yǎng)。②保藏：菌落長成后，放于

冰箱中。③轉(zhuǎn)移：每隔3～6個月，將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到

的培養(yǎng)基上。

(2)缺點：菌種容易被

或產(chǎn)生

。

2．菌種的長期保存對于需要長期保存的菌種，可采用

的方法。固體斜面頻繁4℃新鮮污染變異甘油管藏1．讀教材P14[基礎(chǔ)知識]培養(yǎng)基，歸納并回答下列問題。

(1)微生物營養(yǎng)要素有哪些？碳源的主要來源有哪些？提示：①各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽和生長因子。②主要來源：無機化合物有CO2、Na2CO3等；有機化合物有糖類、脂肪酸、花生餅、石油等。(2)結(jié)合微生物物質(zhì)組成分析碳源、氮源、生長因子在微生物體內(nèi)有哪些作用？(完成下表)2．讀教材P15[無菌技術(shù)]的相關(guān)內(nèi)容，歸納并回答下列問題：(1)實驗室常用的消毒、滅菌方法有哪些？提示：消毒滅菌具體方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥物消毒法灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌(2)試從消毒、滅菌的條件和結(jié)果方面進行比較分析二者的區(qū)別并填寫下表。3．讀教材P16[實驗操作]制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基相關(guān)內(nèi)容，思考并討論下列問題：

(1)分析配制培養(yǎng)基之前，對所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)要計算稱量的原因。提示：保證培養(yǎng)基中的各種營養(yǎng)物質(zhì)比例協(xié)調(diào)，有利于微生物的生長。

(2)在配制培養(yǎng)基時，各組分溶化后是否立即進行滅菌？為什么？提示：配制的培養(yǎng)基除滿足微生物的營養(yǎng)物質(zhì)需求外，還需滿足微生物對pH、氧氣等的要求，所以培養(yǎng)基各組分溶化后需調(diào)pH后再進行滅菌。________________________。提示：配制的培養(yǎng)基除滿足微生物的營養(yǎng)物質(zhì)需求外，還需滿足微生物對pH、氧氣等的要求，所以培養(yǎng)基各組分溶化后需調(diào)pH后再進行滅菌。①將菌種接種到試管的培養(yǎng)基上，合適溫度下培養(yǎng)。2．消毒和滅菌除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是________和________。(1)消毒：(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了________和________。(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于________中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃。(2)試從消毒、滅菌的條件和結(jié)果方面進行比較分析二者的區(qū)別并填寫下表。(2)滅菌：1．避免雜菌污染的措施①將菌種接種到試管的培養(yǎng)基上，合適溫度下培養(yǎng)。(1)消毒：培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌、消毒方法依次是()1．概念實驗操作者的雙手可用化學(xué)藥劑進行消毒，如用酒精擦拭雙手；(1)如果接種了大腸桿菌的培養(yǎng)基上生長的菌落顏色、形狀、大小基本一致，說明操作符合要求。某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進行了實驗，實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù)。(3)倒平板時，應(yīng)注意哪些問題？提示：①培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至50℃左右時才能倒平板；②整個操作在酒精燈火焰旁進行；③倒平板時，培養(yǎng)基若濺到培養(yǎng)皿蓋和皿底之間的部位，該平板應(yīng)丟棄；④平板冷凝后要倒置。(4)平板劃線操作時，需要對接種環(huán)灼燒滅菌，填表比較下列灼燒滅菌的目的。4．讀教材P20[結(jié)果分析與評價]內(nèi)容，根據(jù)你自己的實驗操作，分析交流下列問題：

(1)如何判斷培養(yǎng)基的制作是否合格？提示：將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2d，無菌落生長，說明培養(yǎng)基制備成功。

(2)如何判斷接種操作是否符合無菌要求？提示：根據(jù)培養(yǎng)基上生長出的菌落的顏色、形狀、大小等特征判斷，若菌落特征符合大腸桿菌的特點，則說明接種操作符合要求，若培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中，無菌操作未達(dá)到要求。某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌的污染情況而進行了實驗，實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù)。請回答與此實驗相關(guān)的問題。

(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了________和________。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是________和________。

(2)對培養(yǎng)基進行滅菌，應(yīng)該采用的方法是___________________________________。(3)為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水樣品的平板置于________中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃。要使該實驗所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時在另一平板上接種________作為對照實驗。

(4)培養(yǎng)20小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的菌落，這說明湖水樣品中有____________種細(xì)菌。一般說來，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細(xì)菌污染的程度越________。

(5)如果提高培養(yǎng)基中NaCl的濃度，可以用于篩選耐______________細(xì)菌，這種培養(yǎng)基被稱為________________。[解析]

(1)蛋白胨可提供碳源、氮源、維生素，而淀粉可提供碳源，除此之外，微生物的生長還需無機鹽和水。

(2)對培養(yǎng)基的滅菌，在實驗室內(nèi)常用高壓蒸汽滅菌法。

(3)在實驗的過程中，除實驗變量以外其他各變量均應(yīng)適宜且相同，以利于更好的實現(xiàn)實驗?zāi)康摹?/p>

(4)不同的菌落具有各自的菌落特征(如硬度、顏色、透明度、光滑度等)。

(5)培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物的生長，稱為選擇培養(yǎng)基，可以培養(yǎng)、分離出特定微生物。[答案]

(1)氮源(碳源不作要求)碳源無機鹽水(2)高壓蒸汽滅菌(3)