疑難血型鑒定及配性

疑難血型鑒定及配性第一頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日

在ABO血型系統(tǒng)內(nèi)，幾乎所有缺乏抗原的人體，在其血清內(nèi)必具有所缺乏抗原的抗體，若在紅細(xì)胞上具有抗原時(shí)，則其血清內(nèi)必缺乏對應(yīng)的抗體，但這種規(guī)則偶然也有例外，血清中的抗體和細(xì)胞上的抗原不互補(bǔ)，正反定型相互不支持，出現(xiàn)血型難以確定。另外會遇到即使ABO和RH血型相同，但由于患者血清中存在意外抗體或紅細(xì)胞上致敏有意外抗體及其它原因造成交叉配血不能相合。第二頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日

在ABO分型實(shí)驗(yàn)中，技術(shù)上的錯(cuò)誤與各種臨床情況或疾病，都能造成正反定型之間的矛盾，當(dāng)預(yù)期的正反定型不能產(chǎn)生ABO抗原與抗體的互補(bǔ)結(jié)果時(shí)，首先需要排除在技術(shù)上可能發(fā)生的錯(cuò)誤，如果細(xì)心而反復(fù)的實(shí)行對照試驗(yàn)產(chǎn)生相同形式的凝集反應(yīng)，則需要考慮到細(xì)胞和血清的變異情況：

第三頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日

（一）、實(shí)驗(yàn)者技術(shù)問題

有時(shí)造成正反定型不符，并不是紅細(xì)胞或血清本身的問題，而是由于操作不當(dāng)造成。主要原因有：

1.標(biāo)本或試劑搞錯(cuò)

2.紅細(xì)胞懸液過濃或過

3.標(biāo)本混亂

4.未加試劑第四頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日5.試劑受到污染6.溫度在離心過程中增高7.忽略觀察溶血現(xiàn)象8.細(xì)胞與血清間比例不適當(dāng)，未發(fā)現(xiàn)弱凝集9.如果使用血清來懸浮細(xì)胞，血清中的高濃度血型物質(zhì)中和了抗體試劑，使其不能再與紅細(xì)胞抗原發(fā)生反應(yīng)，出現(xiàn)了假的陰性反應(yīng)10.在反定型試驗(yàn)時(shí)沒有加血清，誤認(rèn)為是陰性結(jié)果；11結(jié)果判斷錯(cuò)誤第五頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日（二）如何解決技術(shù)原因造成的正反定型不符

為解決ABO血型不一致而開始做深入試驗(yàn)之前，首先要排除技術(shù)上可能發(fā)生的錯(cuò)誤，首先要重復(fù)作正反定性試驗(yàn)．使用質(zhì)量合格的試劑，嚴(yán)格地執(zhí)行正規(guī)的操作，再者則重新抽取標(biāo)本。如果先前試驗(yàn)中紅細(xì)胞懸浮在血清或血漿中，改為用鹽水洗滌紅細(xì)胞后配成懸液，以及細(xì)心觀察和解釋試驗(yàn)結(jié)果就可解決許多明顯的問題．如果細(xì)心而反復(fù)的實(shí)行對照實(shí)驗(yàn)還是與先前一樣的結(jié)果。就要根據(jù)情況從細(xì)胞和血清中尋找原因。

第六頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日ABO血型定型中由于細(xì)胞和血清

本身的原因造成正反定型不一致

一、減弱或缺少的抗原反應(yīng)二、未知的抗原反應(yīng)三、減弱或缺少的抗體反應(yīng)四、未知的抗體反應(yīng)第七頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日

絕大多數(shù)A和B型人紅細(xì)胞用合格的抗-A和抗-B試劑檢測都呈3十和4+的凝集強(qiáng)度，血清用合格的試劑紅細(xì)胞檢測絕大部分呈2+至4+的凝集強(qiáng)度。在A和B型紅細(xì)胞凝集強(qiáng)度低于2+和1+的人中，有一部分是變異基因所致的亞型紅細(xì)胞或者是疾病相關(guān)的抗原減弱。血清中的抗A或抗B凝集強(qiáng)度低于2+和1+的人中，是抗體減弱或缺乏。

第八頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日

正定型反定型病人的紅細(xì)胞+試劑抗血清病人的血清+試劑紅細(xì)胞抗A抗B抗AB

AC

BC

OC自身C

-

-

1+

-

3+

-

-一個(gè)人減弱或缺少抗原的反應(yīng)范例

一、減弱或缺少的抗原反應(yīng)促成紅細(xì)胞抗原表面減弱或減少的情況包括下列3種情況：A或B抗原的亞型疾病狀態(tài)（如白血病）血型特異性可溶性物質(zhì)第九頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日（1）這位病人的紅細(xì)胞分型法與正常的強(qiáng)凝集反應(yīng)相比，證明是減弱的反應(yīng)，依據(jù)反定型法，應(yīng)預(yù)期病人具有A抗原的活性。紅細(xì)胞與抗AB的減弱凝集反應(yīng)及抗A試劑缺乏凝集反應(yīng)，都暗示為A型的亞型。（2）補(bǔ)充的實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)：吸收和放散試驗(yàn)證明紅細(xì)胞附著有抗A。病人唾液含有A與H物質(zhì)。（3）討論：A亞型的問題要比B亞型者多而常見，因?yàn)锳2或A2B型的人體血清中可能有抗A1抗體。比A2型為弱的A亞型不多見。若一位弱亞型病人錯(cuò)誤地分型為O型而輸予O型血液時(shí)，預(yù)期應(yīng)無嚴(yán)重的后果。但若將一位弱亞型病人錯(cuò)誤地分型而輸給一位O型的病人時(shí)，則能引發(fā)嚴(yán)重的輸血反應(yīng)問題。第十頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日1.

A或B抗原的亞型當(dāng)A、B及AB型紅細(xì)胞與試劑抗血清作實(shí)驗(yàn)時(shí)，預(yù)期發(fā)生的反應(yīng)皆為4+的強(qiáng)反應(yīng)。正定型減弱的凝集反應(yīng)，可暗示這可能是A、B亞型。當(dāng)減弱的反應(yīng)在健康供血者檢查時(shí)，亞型是最可能的解釋?？笰B分型血清能檢出某些不與抗A抗B試劑發(fā)生反應(yīng)的A及B型。

第十一頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日

2、疾病狀態(tài)：減弱的A抗原表現(xiàn)也可病人后天的特性，如：A型急性白血病患者在疾病活動期改變?yōu)锳2型或A3亞型，在疾病緩解期又恢復(fù)到原來A型反應(yīng)?？乖詮?qiáng)度的減弱，也能發(fā)生于B抗原與H抗原以及其他血型系統(tǒng)的抗原。

3、過量血型特異性可溶性物質(zhì)：在患卵巢囊腫，胃癌或胰腺炎、腸道阻塞的稀有情況，能查見多量的血型特異性可溶性物質(zhì)。病人血清中的ABH物質(zhì)濃度極高，以抑制抗A或抗B試劑的作用，在正定型中，這種情形能產(chǎn)生假陰性，這種情況并非是病人的紅細(xì)胞抗原發(fā)生改變，而是其血清含有過量的病人血清時(shí)，則能進(jìn)行正確的ABO分型試驗(yàn)。

第十二頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日二、未知的抗原反應(yīng)未知的抗原反應(yīng)在正定型中產(chǎn)生的情況范例，能有以下七種情況所引起：

正定型反定型病人的紅細(xì)胞+試劑抗血清病人的血清+試劑紅細(xì)胞抗A抗B抗AB

AC

BC

OC自身C

4+

2+

4+

-

4+

-

-第十三頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日1、獲得性B抗原

獲得性B抗原的特性，獲得性B只表現(xiàn)在A型紅細(xì)胞上，使紅細(xì)胞的反應(yīng)像AB型，而血清中只有抗B抗體，正定型中反應(yīng)的強(qiáng)度，A抗原大于B抗原，自身對照實(shí)驗(yàn)為陰性反應(yīng)且分泌型人體內(nèi)有A物質(zhì)，但B物質(zhì)則缺乏。第十四頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日

當(dāng)紅細(xì)胞血型似乎是ＡＢ型而血清中含有抗Ｂ時(shí)，應(yīng)該考慮是獲得性Ｂ抗原．只有Ａ型的紅細(xì)胞能獲得Ｂ活性，因此稱為獲得性Ｂ抗原，鑒別獲得性Ｂ抗原的方法如下：１.觀察細(xì)胞與抗Ａ及抗Ｂ的凝集強(qiáng)度，與抗Ａ的反應(yīng)要比與抗Ｂ的反應(yīng)強(qiáng)；２.用自身的紅細(xì)胞檢查本人的血清．其血清中的抗Ｂ不能凝集自身紅細(xì)胞中的類Ｂ抗原；３.檢查唾液是否存在Ａ、Ｂ物質(zhì)，如果病人是分泌型，那么有Ａ物質(zhì)而無Ｂ物質(zhì)；

第十五頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日4.獲得性Ｂ抗原在正常PH介質(zhì)中，紅細(xì)胞與抗-B血清發(fā)生凝集，但在等于和低于PH6的酸性條件下，凝集消失，這是獲得性Ｂ抗原最主要的血清學(xué)特征。5.核對病人的診斷。獲得性Ｂ抗原的形成與結(jié)腸癌、直腸癌，革蘭氏陰性細(xì)菌變形桿菌的感染有關(guān)。結(jié)論：病人為A型，具有獲得性B抗原第十六頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日類B抗原具有下例特點(diǎn)1.

類B與抗B的反應(yīng)一般無溶血現(xiàn)象。類B是獲得性的，不符合遺傳規(guī)律，病情好轉(zhuǎn)，類B就消失，真正B抗原符合遺傳規(guī)律終生不變。2.

類B與抗B結(jié)合疏松，用類B紅細(xì)胞作吸收放散試驗(yàn)，可放散出大量抗B抗體，類B病人的唾液中不含B血型物質(zhì)。第十七頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日3.

因類B抗原而錯(cuò)定血型，其血清中天然抗體不合規(guī)律，如是AB型血清中應(yīng)該不含天然抗B抗體。但A型類B表現(xiàn)似AB型，血清中卻含有抗B抗體，此抗體并不凝集患者本人的紅細(xì)胞，只要按正規(guī)操作，在血型鑒定中很容易發(fā)現(xiàn)被檢者紅細(xì)胞所含抗原與血清中所含抗體的矛盾。在AB型的交叉配血時(shí)，如發(fā)現(xiàn)主側(cè)凝集，應(yīng)考慮類B存在，重新鑒定血型并檢查唾液中的血型物質(zhì)，測出被檢者真正的血型，最后選擇同型人輸血。4.

類B與全凝集或多凝集紅細(xì)胞不同，前者只與抗B反應(yīng)，在AB型血清中不凝集。第十八頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日（二）改變的抗原

紅細(xì)胞表面遺傳產(chǎn)生的多凝集反應(yīng)可分為先天性的或?yàn)楂@得性的。紅細(xì)胞被大多數(shù)正常人類血清所凝集的反應(yīng)稱為多凝集反應(yīng)。三種形式的多凝集反應(yīng)包括：T抗原活化，Tn抗原活化多凝集性。

第十九頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日

所有正常人的血清含有抗T抗體，所以T活化的紅細(xì)胞都是多凝集的。T活化的紅細(xì)胞與血清的反應(yīng)，是一種混合視野的凝集反應(yīng)，T活化的紅細(xì)胞不為臍帶血清所凝集，因?yàn)槟殠а逯腥狈筎抗體，預(yù)備T活化的紅細(xì)胞，使其吸附血清中的抗T抗體，就能正確定出ABO分型法。第二十頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日（三）抗體附著的紅細(xì)胞：

有抗體稠密的附著的紅細(xì)胞，顯示直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽性?？稍谡ㄐ椭挟a(chǎn)生混合視野或減弱的凝集反應(yīng)。引起這種現(xiàn)象的原因包括：

自身免疫溶血性貧血癥產(chǎn)生藥物抗體輸血反應(yīng)新生兒溶血病

第二十一頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日

患新生兒溶血病(HDN)嬰兒，其紅細(xì)胞嚴(yán)重地包被IgG抗體分子，時(shí)常是與抗D試劑和抗-A、抗-B試劑發(fā)生這種自發(fā)凝集，在45C進(jìn)行放散試驗(yàn)，可以從紅細(xì)胞上解禽掉這些抗體，此后，即可用抗-A、抗-B很容易地檢測這些紅細(xì)胞血型。含冷抗體IgM自身凝集素的紅細(xì)胞標(biāo)本在鹽水中也發(fā)生凝集，這類冷抗體可能由37℃孵育和37C洗滌被清除掉，也可由DTT等巰基化合物消除掉。（還存在遮蔽現(xiàn)象）第二十二頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日

自身免疫性溶血性貧血病人血清中可有溫性自身抗體。能凝集自身和其它各型紅細(xì)胞，病人的細(xì)胞上吸附了這種抗體，在自身或他人血清中，均可出現(xiàn)凝集，因此，其紅細(xì)胞常被誤定為AB，將其血清定型又被誤定O型。由這種抗體造成的血型檢查上的困難，可以用遞增溫度（由22度—37度—45度）的鹽水許多紅細(xì)胞后，在通過檢查血型來解決，如此類抗體在配血中只影響影響病人紅細(xì)胞，而血清內(nèi)無游離抗體，也可用遞增溫度鹽水洗滌紅細(xì)胞后再進(jìn)行配型，如果血清中有游離的抗體存在，表示病情嚴(yán)重，配血就較困難，不得已可選用凝集較弱的血，密切觀察，一旦出現(xiàn)反應(yīng)立即停輸。第二十三頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日（四）紅細(xì)胞的混合性族群：在ABO分型法中的混合視野型視野反應(yīng)，通常是指示輸了一種不同血型的血液，如輸O型血至A型人或A型血或O型血人。因?yàn)檩敽筒∪俗约貉筒煌珹BO血型的嚴(yán)重性，故在輸血前解釋混合視野型凝集反應(yīng)的原因至為重要。假設(shè)一位病人為A型時(shí)，而在他（她）的循環(huán)內(nèi)，有些紅細(xì)胞為B型或，故能招致不幸的結(jié)果。調(diào)查此病的病史，可有助于證實(shí)混合視野型凝集反應(yīng)的原因。若新近輸血或母兒出血或骨髓移植的受髓者能予確定排除，應(yīng)考慮的其他原因?yàn)椋篈3亞型，Tn多凝集反應(yīng)。第二十四頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日三、減弱的或缺少的抗體反應(yīng)：

抗體的減弱或缺少，是由降低或缺少抗體的產(chǎn)生所致。在反定型中缺少抗體反應(yīng)，可有下列四種情況引起：

年齡丙球蛋白過低血癥丙球蛋白缺乏血癥嵌合現(xiàn)象。第二十五頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日

一個(gè)缺少抗體的反應(yīng)范例

正定型反定型病人的紅細(xì)胞+試劑抗血清病人的血清+試劑紅細(xì)胞抗A抗B抗AB

AC

BC

OC自身C

4+

-

4+

-

-

-

-（1）正定型抗A4+，暗示為A型，但反定型提示為AB型（2）補(bǔ)充試驗(yàn)：將正反定型試管放4度10～30分鐘，證明反定型的BC管能夠出現(xiàn)凝集，自身對照試驗(yàn)仍保持陰性；加大血清量。（3）結(jié)論：病人為A型，抗B減弱。第二十六頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日（一）年齡：

新生兒與幼兒及老年人可顯示種屬抗體的減弱或缺少。對新生兒血清常規(guī)不做血清分型法，是因他們尚未開始產(chǎn)生抗體所致。在新生兒或幼兒能檢的抗體，都是在母體子宮內(nèi)被動獲得者。第二十七頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日（二）丙球蛋白過低血癥：

血漿蛋白的丙球蛋白部分減少（丙球蛋白低血癥）能導(dǎo)致抗體的減弱或減少。證明的丙球蛋白過低血癥的情況包括：免疫抑制藥物的應(yīng)用，白血病，免疫缺乏性疾患及骨髓移植后。

第二十八頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日（三）丙球蛋白缺乏血癥：

丙球蛋白缺乏血癥（血漿丙球蛋白減少）可為先天性的或?yàn)楹筇煨缘?。如丙球蛋白缺乏血癥、免疫缺乏性疾患、以及物理性（如放散線的暴露）與細(xì)胞毒殺劑的作用，都有促成丙球蛋白缺乏血癥狀態(tài)之發(fā)生。第二十九頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日溶血反應(yīng)：溶血反應(yīng)和凝集反應(yīng)在血型檢定和交叉配血上的意義相同。在血型鑒定中因有相對應(yīng)的抗原抗體而出現(xiàn)溶血反應(yīng)時(shí)，應(yīng)按血型不合處理，

處理：滅活補(bǔ)體或用EDYA處理

正定型反定型病人的紅細(xì)胞+試劑抗血清病人的血清+試劑紅細(xì)胞抗A抗B抗AB

AC

BC

OC自身C

-

-

-

4+

溶血

-

-第三十頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日四、未知的抗體反應(yīng)：

反定型中所產(chǎn)生的未知的抗體反應(yīng)是有四種情況引起：緡錢狀形成冷型自身抗體未知的ABO種屬凝集素未知的同種抗體。第三十一頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日（一）緡錢狀形成：如紅細(xì)胞被懸浮在自己的血漿中，紅細(xì)胞的緡錢狀形成或聚合現(xiàn)象可疑似凝集反應(yīng)。能產(chǎn)生緡錢狀形成的種種情況包括：血清蛋白濃度異常，球蛋白濃度在疾病中升高（如多發(fā)性骨髓瘤），原發(fā)性巨球蛋白血癥，纖維蛋白原濃度增高，任何A/G倒置的病人，有血漿擴(kuò)張劑存在。新生兒臍帶內(nèi)血內(nèi)的華通氏膠亦能引起緡錢狀形成。

第三十二頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日（二）

冷型自體抗體：血清內(nèi)可能有未知的自體抗體，與反定型中所用的A或B型紅細(xì)胞抗原起反應(yīng)?？笽是血清分型法最常見碰到的自體抗體?？笽通常凝集所有給血者的紅細(xì)胞，包括病人自己的及反定型中所用的紅細(xì)胞。一般由抗I所引起的凝集反應(yīng)常比抗A及抗-B所引起者為弱。臍帶血球顯示的I抗原量較少，通常不被凝集?？梗桑瓤贵w。第三十三頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日（三）

未知的種屬凝集素：血清內(nèi)未知的種屬凝集素，可在室溫與試劑紅細(xì)胞上的對應(yīng)抗原起反應(yīng)。此種范例包括A2型及A2B型人體能產(chǎn)生“天然發(fā)生的”抗-A１抗體，在A2或A2B型人體血清內(nèi)的抗-A１抗體可與A１型紅細(xì)胞發(fā)生強(qiáng)的凝集反應(yīng)第三十四頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日（四）未知的同種抗體：在一個(gè)人的血清內(nèi)，除了ABO種屬凝集素以外，未知的種屬抗體可引起反定型的矛盾。在血清內(nèi)存在的其他未知抗體，可能與試劑紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)。如在這種情況下普檢同種抗體的試驗(yàn)與O型紅細(xì)胞的反應(yīng)為陰性，則反定型應(yīng)反復(fù)的與其他A1及B型紅血球作試驗(yàn)。如此抗體與極罕見的抗原起反應(yīng)，則隨機(jī)選擇的A1及B型紅細(xì)胞，亦可預(yù)想到缺少該抗原。第三十五頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日一個(gè)典型未知的抗體的反應(yīng)范例（1）（1）正定型與抗A及抗AB發(fā)生（３+）凝集及反定型與BC發(fā)生（4+）凝集，代表一個(gè)典型的A型反應(yīng)。但與AC細(xì)胞有1+反應(yīng)，暗示有額外減弱的反應(yīng)抗體。（2）補(bǔ)充試驗(yàn)：血清各與三個(gè)的A1，A2及O型紅細(xì)胞作試驗(yàn)。所有A1型紅細(xì)胞都有凝集反應(yīng)，但A2或O型紅細(xì)胞反應(yīng)為陰性。

正定型反定型病人的紅細(xì)胞+試劑抗血清病人的血清+試劑紅細(xì)胞抗A抗B抗AB

AC

BC

OC自身C

３+

-３+

1+

4+

-

-

A1ＣA2Ｃ

OC自身C病人血清

1+

-

-

-（3）結(jié)論：病人為A2表現(xiàn)型，血清中有抗A1抗體。

A2病人C抗A1

-

-第三十六頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日一個(gè)典型未知的抗體的反應(yīng)范例（2）

正定型反定型病人的紅細(xì)胞+試劑抗血清病人的血清+試劑紅細(xì)胞抗A抗B抗AB

AC

BC

OC自身C

4+

-4+

-

4+

3+

-（1）依據(jù)（4+）的凝集反應(yīng)，暗示為A型；但與O型紅細(xì)胞發(fā)生反應(yīng)，預(yù)示有額外的抗體存在。（2）補(bǔ)充的試驗(yàn)：病人紅細(xì)胞與抗A反應(yīng)。病人血清與額外的O、A2、A1型紅細(xì)胞及O型臍帶紅細(xì)胞作試驗(yàn)。證明所有O型與A2型紅細(xì)胞有凝集反應(yīng)。額外的A1型紅細(xì)胞為陰性反應(yīng)（3）結(jié)論：病人為A型表現(xiàn)型，具有抗-IH抗體。

A1

A2成人OC臍帶OC自身C-1+2+--第三十七頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日

正定型反定型病人的紅細(xì)胞+試劑抗血清病人的血清+試劑紅細(xì)胞抗A抗B抗AB

AC

BC

OC自身C4+4+

4+

2+

2+

2+

2+一個(gè)典型未知抗體的反應(yīng)范例（3）（1）自身對照試驗(yàn)（病人的血清+病人的紅細(xì)胞）為陽性反應(yīng)，示初步認(rèn)為血清有問題。（2）補(bǔ)體的實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)：實(shí)行冷自身抗體吸收法，用吸收的血清與抗A，B及O型紅細(xì)胞作試驗(yàn)，吸收的血清與這些試劑紅細(xì)胞未察見凝集反應(yīng)。（3）結(jié)論：病人為AB型表現(xiàn)型，具有自身抗I抗體。第三十八頁，共四十三頁，編輯于2023年，星期日在每逢ABO分型問題發(fā)生時(shí)，有八個(gè)重要的

自我答問方式，有助于矛盾問題的解決：第一，受檢的紅細(xì)胞是洗滌后懸浮于生理鹽水的嗎第二，所用的檢驗(yàn)技術(shù)為最敏