章病毒感染的檢查方法與防治原則詳解演示文稿

章病毒感染的檢查方法與防治原則詳解演示文稿當前第1頁\共有39頁\編于星期四\10點（優(yōu)選）章病毒感染的檢查方法與防治原則當前第2頁\共有39頁\編于星期四\10點標本的采集與送檢

1.標本中常加入抗生素。2.低溫保存，盡快送檢。3.血清學(xué)標本：兩份當前第3頁\共有39頁\編于星期四\10點二、病毒的分離與鑒定標本分離培養(yǎng)動物接種雞胚培養(yǎng)細胞培養(yǎng)病毒形態(tài)觀察光鏡電鏡包涵體病毒體CPETCID50,PFU當前第4頁\共有39頁\編于星期四\10點（一）病毒的分離培養(yǎng)

1.動物接種

應(yīng)用：尚無敏感細胞的病毒培養(yǎng)動物：兔、鼠、黑猩猩、猴等優(yōu)點：結(jié)果易觀察，可建立動物模型缺點：有飼養(yǎng)條件要求，費用高，動物體內(nèi)常帶有潛伏病毒當前第5頁\共有39頁\編于星期四\10點動物接種當前第6頁\共有39頁\編于星期四\10點2.雞胚培養(yǎng)

采用孵化9-14天的雞胚

絨毛尿囊膜（allantocherion）痘苗病毒、人類皰疹病毒

尿囊腔（allantoiccavity）接種部位流感病毒、腮腺炎病毒

羊膜腔（amnioticcavity）流感病毒的初次分離

卵黃囊（yolksac）嗜神經(jīng)病毒當前第7頁\共有39頁\編于星期四\10點當前第8頁\共有39頁\編于星期四\10點優(yōu)點：易管理，不帶微生物，成本較低缺點：操作程序復(fù)雜當前第9頁\共有39頁\編于星期四\10點當前第10頁\共有39頁\編于星期四\10點3.細胞培養(yǎng)

單層細胞培養(yǎng)（monolayercellculture）懸浮細胞培養(yǎng)（suspendedcellculture）

原代細胞（primarycell）細胞種類二倍體細胞（diploidcell）傳代細胞系（continuouscellline）當前第11頁\共有39頁\編于星期四\10點病毒的細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)瓶單層細胞當前第12頁\共有39頁\編于星期四\10點

病毒增殖的指征

1.細胞病變效應(yīng)(cytopathiceffect,CPE)

①細胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等（多數(shù)病毒）；②形成多核巨細胞或稱融合細胞（麻疹病毒、巨細胞病毒、呼吸道合胞病毒等）；③在培養(yǎng)細胞中形成包涵體（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。當前第13頁\共有39頁\編于星期四\10點當前第14頁\共有39頁\編于星期四\10點麻疹病毒感染細胞呼吸道合胞病毒感染細胞形成多核巨細胞或稱融合細胞當前第15頁\共有39頁\編于星期四\10點形成包涵體(inclusionbody)當前第16頁\共有39頁\編于星期四\10點腮腺炎病毒感染細胞2.紅細胞吸附（hemadsorption）病毒囊膜表面血凝素(HA)＋紅細胞表面HA受體當前第17頁\共有39頁\編于星期四\10點3.干擾現(xiàn)象（interference）4.細胞代謝改變

細胞代謝變慢pH變化減慢當前第18頁\共有39頁\編于星期四\10點

（二）病毒的鑒定

病毒形態(tài)學(xué)鑒定病毒血清學(xué)鑒定

病毒分子生物學(xué)鑒定當前第19頁\共有39頁\編于星期四\10點（三）病毒數(shù)量與感染性測定1.血凝試驗：病毒總量（活病毒＋死病毒）2.空斑形成試驗（plaqueformationtest）3.50％組織細胞感染量（50％tissuecultureinfectiousdose,TCID50）感染性病毒量當前第20頁\共有39頁\編于星期四\10點空斑試驗當前第21頁\共有39頁\編于星期四\10點三、病毒感染的血清學(xué)診斷應(yīng)用：①采取標本分離病毒為時已晚②目前尚無分離此病毒的方法或難以分離的病毒③為證實所分離的病毒的臨床意義④進行血清流行病學(xué)調(diào)查等當前第22頁\共有39頁\編于星期四\10點1.中和試驗（neutralizingtest）病毒＋中和抗體病毒失去感染性

特點：特異性高，抗體維持時間長應(yīng)用：人群免疫情況的調(diào)查臨床診斷少用當前第23頁\共有39頁\編于星期四\10點

2.血凝抑制試驗（hemagglutinationinhibitiontest）—正粘病毒型與亞型鑒定

病毒＋雞紅細胞＝凝集（血凝試驗）

病毒＋特異性抗體＋雞紅細胞＝不凝集（血凝抑制試驗）

當前第24頁\共有39頁\編于星期四\10點3.補體結(jié)合試驗

（complementfixationtest）

用已知病毒可溶性補體抗原檢測病人血清中相應(yīng)的補體抗體

特點：特異性低，抗體出現(xiàn)早，消失快應(yīng)用：近期感染指標。當前第25頁\共有39頁\編于星期四\10點四、病毒感染的快速診斷數(shù)小時內(nèi)出結(jié)果病毒顆粒病毒成分（抗原或核酸）早期抗體檢測（IgM）當前第26頁\共有39頁\編于星期四\10點（一）形態(tài)學(xué)檢查電鏡和免疫電鏡檢查普通光學(xué)顯微鏡檢查包涵體當前第27頁\共有39頁\編于星期四\10點（二）病毒成分檢測1.病毒蛋白抗原檢測

免疫標記技術(shù)2.病毒核酸檢測

核酸擴增技術(shù)核酸雜交技術(shù)基因芯片技術(shù)基因測序當前第28頁\共有39頁\編于星期四\10點（三）早期抗體檢測

可診斷急性感染特異性IgM抗體：孕婦感染風(fēng)疹病毒EBV早期抗原抗體

當前第29頁\共有39頁\編于星期四\10點第二節(jié)病毒感染的特異性預(yù)防當前第30頁\共有39頁\編于星期四\10點人工主動免疫(artificialactiveimmunization):將疫苗(vaccine)或類毒素(toxoid)接種于人體，使機體主動產(chǎn)生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施。主要用于預(yù)防當前第31頁\共有39頁\編于星期四\10點疫苗

第一代疫苗第二代疫苗第三代疫苗死疫苗活疫苗亞單位疫苗基因工程疫苗重組載體疫苗合成肽疫苗DNA疫苗轉(zhuǎn)基因植物疫苗當前第32頁\共有39頁\編于星期四\10點當前第33頁\共有39頁\編于星期四\10點*載體疫苗