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結(jié)構(gòu)與功能化學(xué)組成結(jié)構(gòu)第一頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一第二章酶的結(jié)構(gòu)與功能第二頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一前言酶起催化作用必須有:1、完整的空間結(jié)構(gòu);2、活性中心;3、有些酶需輔助因子。第三頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一本章內(nèi)容第一節(jié)酶的化學(xué)組成(link)第二節(jié)酶的化學(xué)結(jié)構(gòu)(link)第三節(jié)酶的空間結(jié)構(gòu)第四節(jié)酶的活性中心第五節(jié)酶結(jié)構(gòu)與催化功能關(guān)系第六節(jié)酶分子修飾gotoend第四頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一第一節(jié)酶的化學(xué)組成P-酶主要由蛋白質(zhì)組成;絕大多數(shù)酶是蛋白質(zhì),證據(jù):(1)酸水解的產(chǎn)物是氨基酸,能被蛋白酶水解失活;(2)具有蛋白質(zhì)的一切共性,凡是能使蛋白質(zhì)變性的因素都能使酶變性;(具有蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng))一、蛋白類(lèi)酶的基本組成——氨基酸第五頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一蛋白質(zhì)由各種氨基酸通過(guò)肽鍵連接而成;肽健由一個(gè)氨基酸的羧基與另一個(gè)氨基酸的氨基脫水而成(視頻)。氨基酸是分子中含有氨基和羧基的有機(jī)化合物。氨基酸的名稱(chēng)記憶。第六頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一巧記氨基酸單字母表示法氨基酸的三字母表示法,隨著生物信息學(xué)的發(fā)展,看單字母的時(shí)候越來(lái)越多了,單字母和三字母的字頭不一致,采用聯(lián)想記憶法,只來(lái)記那些和三字母表示法不一致的這些:苯丙氨酸:Phe笨——Fool……F賴(lài)氨酸:Lys賴(lài)皮——砍(Kan)他……K精氨酸:Arg精子——人(Ren)……R色氨酸:Trp色狼——Wolf……W酪氨酸:Tyr奶酪——黃色(Yellow)……Y天冬氨酸:Asp天——地(Di)……D谷氨酸:Glu谷子里面有很多酶——Enzyme……E天冬酰胺:Apn……N谷氨酰胺:Gln,雖然也是n,無(wú)奈總排在“天冬”的后面,只好整個(gè)不一樣的Q第七頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一二、核酸類(lèi)酶的基本組成單位核糖核酸是由核苷酸通過(guò)磷酸二酯健連連接而成的高分子化合物。AMP:腺苷酸GMP:苷酸CMP:胞苷酸UMP:尿苷酸第八頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一三、酶的輔助因子根據(jù)酶的組成成分,酶可分為:?jiǎn)纬煞置福▎渭兠福?、多成分酶(?fù)合酶)第九頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一主要指金屬離子:常見(jiàn)酶含有的金屬離子有K+、Na+、Mg2+、Cu2+、(或Cu+)、Zn2+和Fe2+(或Fe3+)等。(一)無(wú)機(jī)輔助因子★酶蛋白決定酶專(zhuān)一性,輔助因子決定酶促反應(yīng)的類(lèi)型和反應(yīng)的性質(zhì)。第十頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一第十一頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一(二)有機(jī)輔助因子小分子有機(jī)化合物:即一些穩(wěn)定的小分子有機(jī)物質(zhì),其主要作用是在反應(yīng)中傳遞電子、質(zhì)子或一些基團(tuán)。第十二頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一1、煙酰胺核苷酸(NAD+\NADP+)煙酰胺核苷酸是B維生素一員。是許多脫氫酶的輔助因子。輔酶I,NAD+;輔酶II,NADP+;參與傳遞氫的作用。NAD+,NADP+屬于氧化型;NADH,NADPH屬于還原型。第十三頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一RHCONH2RHCONH2H+2H-2H+H+NAD+,NADP++2H-2HNADH,NADPH氧化型還原型第十四頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一2、黃素核苷酸(FMN\FAD)維生素B2(核黃素)的衍生物;黃素酶的輔因子;FMN:黃素單核苷酸FAD:黃素腺嘌呤二核苷酸;作用:遞氫第十五頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一OOH3CH3CNHRNNNOOH3CH3CNHRNNNHH+2H-2H氧化型FMN/FAD還原型FMN·H2/FAD·H2視頻第十六頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一3、鐵卟啉氧化酶輔因子,能過(guò)共價(jià)鍵與酶蛋白結(jié)合4、硫辛酸6,8-二硫辛酸,通過(guò)氧化型與還原型互相轉(zhuǎn)變起遞氫作用,也起酰基傳遞作用。第十七頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一5、核苷三磷酸ATPGTPCTPUTP6、鳥(niǎo)苷鳥(niǎo)嘌呤核苷,含I型IVS的自我剪接酶(R-酶)的輔因子;第十八頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一7、輔酶Q是一系列苯醌衍生物,是氧化還原酶的輔助因子。輔酶Q,是一類(lèi)與維生素K有共同特征的脂溶性醌類(lèi)化合物,故被稱(chēng)為泛醌。它們都是2,3-二甲氧基-1,4-苯醌的衍生物,在第六位上有一條很長(zhǎng)的側(cè)鏈,由類(lèi)戊二烯基單位構(gòu)成。不同來(lái)源的輔酶Q的差異就在于側(cè)鏈類(lèi)戊二烯基單位的數(shù)目不同(即n值不同)。輔酶Q主要存在五種同系物CoQn(n=6,7,8,9,10);輔酶Q10
(Ubiquinone-10,CoenzymeQ10,簡(jiǎn)稱(chēng)CoQ10),又名癸烯醌,泛醌,化學(xué)名為2,3-二甲氧基-5-甲基-6-(3-甲基丁烯基-2)-苯醌(2,3-dimethoxy-5-methy1-6-decapreny1benzoquinone),英文名Ubidecarenone。第十九頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一輔酶Q具有醌的性質(zhì),在氧化條件下以醌的形式存在,在無(wú)氧條件下,可還原為對(duì)苯二酚,即具有可逆的氧化還原特性。輔酶Q10為黃色或淡橙黃色結(jié)晶體粉末,無(wú)臭無(wú)味,脂溶性。易溶于氯仿、苯、四氯化碳;溶于丙酮、乙醚、石油醚;微溶于乙醇,實(shí)際上不溶于水和甲醇。在光照下易分解成微紅色物質(zhì).對(duì)溫度和濕度較穩(wěn)定。熔點(diǎn)48℃~52℃??赏ㄟ^(guò)差式分光光度法(掃描紫外分光光度儀)測(cè)其含量。輔酶Q10是人體細(xì)胞中重要的生化輔酶之一,1978年P(guān)eter用化學(xué)滲透理論解釋了生物能轉(zhuǎn)移包括在能運(yùn)轉(zhuǎn)換系統(tǒng)中,輔酶Q10起到重要的質(zhì)子轉(zhuǎn)移作用等,并獲得了諾貝爾獎(jiǎng)。第二十頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)輔酶Q10具有清除自由基、維持細(xì)胞膜的通透性、提高免疫功能等多種藥理作用。輔酶Q10的功能作用主要來(lái)自于醌基的氧化還原特性和側(cè)鏈的物理特性。還原態(tài)的輔酶Q10和異戊二烯單體全為反式結(jié)構(gòu)的輔酶Q10比氧化態(tài)輔酶Q10和異戊二烯單體全為順式結(jié)構(gòu)的輔酶Q10具有更高的活性和藥理作用。
第二十一頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一8、谷胱甘肽(G-SH)L-谷氨酸-L-半胱氨酸-甘氨酸的簡(jiǎn)稱(chēng);是氧化還原酶如乙二醛酶的輔助因子。它于1921年被發(fā)現(xiàn),1930年確定化學(xué)結(jié)構(gòu)。美國(guó)著名營(yíng)養(yǎng)保健專(zhuān)家艾爾·敏德?tīng)柌┦糠Q(chēng)谷胱甘肽為三倍效能的抗衰老氨基酸。
谷胱甘肽的主要生理功能是抗自由基,抗衰老,抗氧化。
9、輔酶A各種酰基化酶的輔酶;由腺苷二磷酸、泛酸和巰基乙胺組成。第二十二頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一10、維生素系列生物素:維生素B的一種,維生素H,羧化酶的輔助因子,起CO2摻入作用;硫胺素焦磷酸TPP:B1,酮酸脫羧酶的輔助因子;磷酸吡哆醛/胺:B6轉(zhuǎn)氨酶輔助因子,起氨基轉(zhuǎn)移作用。第二十三頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一back第二十四頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一第二節(jié)酶的化學(xué)結(jié)構(gòu)蛋白酶是由氨基酸通過(guò)肽鍵聯(lián)結(jié);RNA酶由核苷酸通過(guò)磷酸二酯鍵聯(lián)結(jié)而成第二十五頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一一、酶蛋白的化學(xué)結(jié)構(gòu)又稱(chēng)酶的一級(jí)結(jié)構(gòu);包括:氨基酸種類(lèi)、數(shù)目、次序、二硫鍵、肽鏈數(shù)目等;從氨基(—NH2)末端開(kāi)始,一百至幾千個(gè);第二十六頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一1、肽健與肽鏈一個(gè)氨基酸的α-羧基與另一個(gè)氨基酸的α-氨基反應(yīng)脫去一分子水即成肽鍵;肽鍵介于二鍵與單鍵間;肽單位有六個(gè)原子被酰胺鍵固定在平面上,即酰胺平面;排列:2個(gè)有2種,3個(gè)有6種,n!第二十七頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一肽鏈:若干個(gè)氨基酸通過(guò)肽鍵連接而成;二硫鍵:由蛋白質(zhì)中兩個(gè)半胱氨酸的巰基脫氫聯(lián)結(jié)而成;連接肽鏈,組成多肽鏈蛋白質(zhì);也可在同一條肽鏈中。-NH-CH-CO—CH2S-NH-CH-CO—CH2S第二十八頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一2、酶蛋白化學(xué)結(jié)構(gòu)測(cè)定方法(1)酶蛋白分離純化;(2)氨基酸種類(lèi)和數(shù)目確定;水解—層析—鑒定;氨基酸自動(dòng)分析儀;(3)肽鏈數(shù)目確定:末端分析法;(4)氨基酸順序測(cè)定:水解生成小肽,末端分析,綜合分析go第二十九頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一氨基酸自動(dòng)分析儀原理氨基酸自動(dòng)分析儀是應(yīng)用離子交換層析的原理進(jìn)行氨基酸分析。所用樹(shù)脂一般為Na-型陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。各種氨基酸的酸堿性、極性和分子大小等性質(zhì)不同,對(duì)樹(shù)脂的親合力也不一樣,當(dāng)用不同pH和離子濃度的緩沖液洗脫時(shí),各種氨基酸被洗脫順序不同,先是酸性氨基酸和極性較大的氨基酸,其次是非極性的和芳族氨基酸,最后是堿性氨基酸被洗脫,分子量小的比分子量大的先被洗脫,從而達(dá)到分離的目的。被洗脫的氨基酸與茚三酮溶液產(chǎn)生顏色反應(yīng),可通過(guò)分光光度計(jì)比色測(cè)定各個(gè)氨基酸含量。一份水解液可同時(shí)測(cè)定天冬、蘇、絲、谷、脯、甘、丙、纈、蛋、異亮、亮、酪、苯丙、組、賴(lài)、精氨酸等16種氨基酸。
第三十頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一氨基酸自動(dòng)分析儀back第三十一頁(yè),共三十三頁(yè),編輯于2023年,星期一末端分析法1二硝基氟苯法(
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