水生生物調(diào)查技術規(guī)范

水生生物調(diào)查技術規(guī)范范圍本標準規(guī)定了水生生物調(diào)查的對象、方法、項目及數(shù)據(jù)統(tǒng)計方法等內(nèi)容。本標準適用于河流、湖泊、水庫等地表水域的水生生物調(diào)查。規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB3838-2002 地表水環(huán)境質(zhì)量標準HJ710-2014 生物多樣性觀測技術導則SL219 水環(huán)境監(jiān)測規(guī)范GB/T13195 水質(zhì)水溫的測定溫度計或顛倒溫度計測定法HJ506 水質(zhì)溶解氧的測定電化學探頭法GB/T6920 水質(zhì)pH值的測定玻璃電極法SL88 水質(zhì)葉綠素的測定分光光度法SL167 水庫漁業(yè)資源調(diào)查規(guī)范術語和定義下列術語和定義適用于本文件。浮游植物phytoplankton指懸浮于水中生活的微小藻類，亦稱浮游藻類。通常包括藍藻門、隱藻門、甲藻門、金藻門、黃藻門、硅藻門、裸藻門、綠藻門等，不包括細菌和其它植物。浮游動物zooplankton指懸浮于水中的微小動物，沒有游泳能力，或僅有微弱的游泳能力。通常包括原生動物、輪蟲、枝角類和橈足類等幾大類。底棲動物benthicinvertebrate指生活史全部或大部時間生活于水體底部體長大于0.5mm的水生無脊椎動物群落，肉眼可見。棲息的方式多為固著于巖石等堅硬物體的表面或埋沒于泥沙等較松軟的表層沉積物中，以及附著于植物或其它動物體表。淡水生底棲動物主要包括水生寡毛類、軟體動物和水生昆蟲幼蟲等。兩棲動物amphibians指脊椎動物進化史上由水生向陸生的過渡類型，成體可適應陸地生活，但繁殖和幼體發(fā)育還離不開水。主要的特征是：體溫不恒定；卵生，幼體在水中生活，經(jīng)變態(tài)后成體可適應陸地生活，用肺呼吸，皮膚裸露而濕潤，無鱗片、毛發(fā)等皮膚衍生物，粘液腺豐富，具有輔助呼吸功能。爬行動物reptile指屬于脊椎動物門、四足總綱的羊膜動物，是對蜥形綱及合弓綱除鳥類及哺乳類以外所有物種的通稱，包括了龜、蛇、蜥蜴、鱷及已絕滅的恐龍與似哺乳爬行動物等。大型水生植物macrophyte指生態(tài)學范疇上的類群，包括種子植物、蕨類植物、苔蘚植物中的水生類群以及藻類植物中可以假根著生的大型藻類，是不同分類群植物長期適應水環(huán)境而形成的趨同適應的表現(xiàn)型，通過大型水生植物的生長形態(tài)，一般可將其分為挺水植物、浮水植物、漂浮植物和沉水植物。著生藻類periphyton又稱周從藻類、附生藻、底棲藻類，指附著在長期浸沒于水中的各種基質(zhì)（植物、動物、石頭、人工基質(zhì)等）表面上的藻類群落，淡水中主要由硅藻、綠藻和藍藻組成。著生原生動物adherentProtozoa指附著在長期浸沒于水中的各種基質(zhì)（植物、動物、石頭、人工基質(zhì)等）表面上的原生動物群落，是身體由單個細胞構成最簡單、原始的動物。分為鞭毛綱，肉足綱，孢子綱，纖毛綱4類。水生生物調(diào)查程序水生生物調(diào)查程序浮游植物調(diào)查采樣點、采樣頻率、采樣深度采樣點采樣點應在對所調(diào)查水體進行現(xiàn)場考察的基礎上，根據(jù)水體的環(huán)境條件，水文特征和具體的工作需要選定。樣點一般應在水體的進水口、出水口、中心區(qū)域等位置布設采樣點。樣點的多少則視水體大小和具體情況而定，應能夠全面反映該水體的水環(huán)境狀況。采樣點盡可能結合現(xiàn)有的水質(zhì)監(jiān)測點布設。采樣頻率根據(jù)調(diào)查地的氣候特點，一般在春、夏、秋季各采集一次。采樣深度依采樣水體的水深和調(diào)查目的而定。水深＜3m，可只取表層（0.5m）；水深3～10m，至少取表層（0.5m）和底層（距水底0.5m）；水深＞10m，取表層、中層和底層。試劑和主要器具試劑甲醛（分子式：HCHO，化學純）、碘化鉀（分子式：KI，化學純）、冰乙酸（分子式：CH3COOH，化學純）、碘（分子式：I2，化學純）、X哥氏液（Lugol，配制）。X哥氏液配制方法：在洗凈的燒杯中（容積1500mL）加入蒸餾水500mL，稱取碘化鉀20g，倒入燒杯中，攪拌；加入冰乙酸20mL，繼續(xù)攪拌；待碘化鉀完全溶解后加入碘10g，攪拌至碘化鉀完全溶解；用量筒將配制的溶液定容至1000mL；裝入密閉的棕色細口瓶，保存于冰箱（4℃）或陰涼的環(huán)境中。主要器具采水器（容積5L），25#浮游生物網(wǎng)（網(wǎng)孔徑0.064mm），定量水樣瓶或分液漏斗（容積1000～1100mL），透明度盤（黑白盤），水樣濃縮樣品瓶（容積50～60mL），光學顯微鏡（10×40），物鏡測微尺，目鏡測微尺，計數(shù)框（容積0.1mL），移液槍（100μL）等。定性樣品的采集和鑒定樣品采集定性樣品用25#浮游生物網(wǎng)，將網(wǎng)系于竹竿或繩索上，網(wǎng)口向前，在各采樣點水面下繞“8”字3～5分鐘進行拖動。而后從水中緩慢提出浮游生物網(wǎng)，使水樣集中到網(wǎng)底收集管內(nèi)，打開收集管活塞，將樣品注入定性標本瓶中，加入約占水樣量0.5%（v/v）的甲醛固定。所有樣品都及時加貼標簽，寫明時間、地點等內(nèi)容。樣品帶回實驗室，在冰箱（4℃）內(nèi)保存。樣品鑒定借助顯微鏡和淡水藻類分類工具書，一個月內(nèi)完成種類鑒定，鑒定到種（Species）。浮游植物優(yōu)勢種群的確定，須在定量測定完成后進行，采用優(yōu)勢度（y）表示。（5.3.2）式中：y——優(yōu)勢度；fi——為第i種浮游植物在樣品中出現(xiàn)的頻率；Pi——為第i中浮游植物數(shù)量占總量的比率；當某種浮游植物的y值大于0.02時，即為優(yōu)勢種群。定量樣品的采集、處理和測定樣品采集浮游植物定量樣品（表層），根據(jù)水深用采水器在目標水樣層采水，定量樣品采集應在定性樣品采集之前進行。每個水樣采水1200mL，立即加入約占水樣量1～1.5%的X哥氏液固定。定量樣品應采集平行樣品。平行樣品數(shù)量應為采集樣品總數(shù)的10%-20%，每批次不得少于1個。樣品處理將所取水樣帶回實驗室，充分搖勻后，用量筒量取1000mL，倒入分液漏斗或沉淀瓶內(nèi)，置于穩(wěn)定的實驗臺上，靜置24～36h。而后用細虹吸管（乳膠管，內(nèi)徑0.3mm）緩慢吸去上層清液，保留瓶底部的沉淀濃縮液50ml左右，倒入50～60ml容積的小塑料瓶中（對每個小瓶標記好30ml刻度），用少量蒸餾水沖洗沉淀瓶的內(nèi)壁和底部2～3次，將這幾次的沖洗液均倒入小塑料瓶中，再將小瓶繼續(xù)靜止沉淀24小時以上，最后虹吸、定容到30mL。樣品測定采用視野計數(shù)法進行計數(shù)。用0.1mL計數(shù)框，計數(shù)面積20mm×20mm，單位：個/L。在顯微鏡視野下進行浮游藻類的鑒定和計數(shù)。按公式（5.4.3）計算浮游植物密度（豐度）。每個樣品計數(shù)兩片，每片計數(shù)的視野數(shù)根據(jù)浮游植物的密度大小而定，見表1。注意視野（均勻分布），取2片的平均值作為有效值（誤差需要控制在±15%）。浮游植物密度計數(shù)視野表計數(shù)視野（個）浮游植物密度（個/平均視野）200～300或全片1～21003～570～806～9501020～30>10浮游植物細胞（個體）密度計算：（5.4.3）式中：N——1L水樣中浮游植物細胞（或個體）密度，單位：104Cells/L；Cs——計數(shù)框面積，單位：mm2；Fs——視野面積，單位：mm2；Fn——計數(shù)過的視野數(shù)；V——1升水樣經(jīng)沉淀濃縮后的樣品體積，單位：mL；U——計數(shù)框體積，單位：mL：Pn——每片計數(shù)出的浮游植物細胞（或個體）數(shù)，單位：個。視野面積的計算：用物鏡測微尺（臺微尺）測定一定倍數(shù)下的視野直徑（通常為×400或×600），按圓面積公式πr2計算。生物量測算常用單位體積中浮游植物的生物量（濕重）作為定量單位。由于浮游植物體積太小，無法直接稱重，但大多數(shù)種類的細胞較為規(guī)則，且細胞密度接近于水的密度?？稍陲@微鏡下測定所需數(shù)據(jù)，按公式計算體積，用定量測定得出的水樣中某種浮游植物的細胞數(shù)乘以比重，得到生物量（濕重）。采樣記錄水生生物調(diào)查采樣現(xiàn)場記錄調(diào)查時間：年月日天氣：風力等級：氣溫:序號水體名稱采樣斷面/站點經(jīng)緯度水深（m）水溫（℃）透明度（m）pHDO（mg/L）水體感官狀況經(jīng)度（E）緯度（N）12…調(diào)查成果表浮游植物調(diào)查統(tǒng)計表調(diào)查水體：密度單位：104Cells/L ；生物量單位：mg/L浮游植物類別采樣點名稱：采樣點名稱：平均所屬門#月#日#月#日#月#日#月#日藍藻門Cyanophyta密度生物量密度生物量密度生物量密度生物量密度生物量種屬名稱1種屬名稱2…合計綠藻門Chlorophyta種屬名稱1種屬名稱2…合計硅藻門Bacillariophyta種屬名稱1種屬名稱2…合計金藻門CHrysophyta種屬名稱1種屬名稱2…合計…浮游動物調(diào)查采樣點、采樣頻率、采樣深度同浮游植物調(diào)查，詳見5.1。試劑和主要器具試劑甲醛（分子式：HCHO，化學純）、碘化鉀（分子式：KI，化學純）、冰乙酸（分子式：CH3COOH，化學純）、碘（分子式：I2，化學純）、X哥氏液（見5.2.1）。主要器具13#浮游生物網(wǎng)（孔徑0.112mm），25#浮游生物網(wǎng)，樣品瓶（容積50mL），金屬分樣篩，計數(shù)框（容積0.1mL，1.0mL，5.0mL），光學顯微鏡（40、100、400倍）。定性樣品的采集和鑒定樣品采集原生動物、輪蟲和無節(jié)幼體的定性樣品用25#浮游生物網(wǎng)在水面下繞“8”字3～5分鐘拖動。而后從水中緩慢提出浮游生物網(wǎng)，使水樣集中到網(wǎng)底收集管內(nèi)，打開收集管活塞，將樣品注入定性標本瓶中，立即加入約占水樣量1～1.5%（v/v）的X哥氏液固定，另取一樣品，不加固定液，用于活體觀察。枝角類、橈足類定性樣品有13#浮游生物網(wǎng)在水面下繞“8”字3～5分鐘拖取，將收集管內(nèi)的水樣注入定性樣品瓶，加入約占水樣量5%（v/v）的甲醛溶液固定。所有樣品都要及時加貼標簽，寫明時間、地點等內(nèi)容。樣品帶回實驗室，在冰箱（4℃）內(nèi)保存。樣品鑒定借助顯微鏡和浮游動物分類工具書，一個月內(nèi)完成種類鑒定，鑒定到種（Species）。定量樣品的采集、處理和測定樣品采集原生動物、輪蟲和無節(jié)幼體定量樣品用浮游植物定量樣品采集方法，見5.4.1。枝角類、橈足類的定量樣品，用采水器采水10L，用13#浮游生物網(wǎng)過濾濃縮，然后加入約占水樣量1%的甲醛溶液固定。樣品帶回實驗室，在冰箱（4℃）內(nèi)保存，一個月內(nèi)完成定量測定。定量樣品應采集平行樣品。平行樣品數(shù)量應為采集樣品總數(shù)的10%-20%，每批次不得少于1個。樣品處理和測定原生動物密度測定用浮游植物的定量樣品（1000mL沉淀濃縮至30mL）。將水樣搖勻，迅速取0.1mL樣品置于0.1mL計數(shù)框內(nèi)，蓋好蓋玻片，在100或400倍顯微鏡下全片計數(shù)。測定輪蟲和無節(jié)幼體密度，將浮游植物的定量樣品搖均，迅速吸取1mL，放入1mL計數(shù)框內(nèi)，在40或100倍顯微鏡下全片計數(shù)。每個樣品計數(shù)2片（誤差不超過±15%），求出平均值，按公式（6.4.2）計算水樣中原生動物、輪蟲、無節(jié)幼體的密度。枝角類、橈足類計數(shù)時，將10L過濾的濃縮樣品搖均，迅速吸取5mL置于5mL計數(shù)框內(nèi)，在40倍顯微鏡下全片計數(shù)。每個樣品計數(shù)2片（誤差不超過±15%），求出平均值，按公式（6.4.2）計算水樣中枝角類、橈足類的密度。水體浮游動物密度等于各類群浮游動物密度之和。浮游動物密度（Ni）計算公式：（6.4.2）式中：Ni——每升水樣中i類浮游動物的個體數(shù)，單位：ind./L；C——計數(shù)所得的個體數(shù)，單位：個；V1——濃縮樣品體積，單位：mL；V2——計算體積，單位：mL；V3——采樣量，單位：L。生物量測算體積法根據(jù)浮游動物近似形狀，在顯微鏡下測得該種浮游動物計算體積所需數(shù)據(jù)，按求體積公式計算體積。浮游動物的密度接近于水的密度，體積與密度相乘，得到該種浮游動物的體重（濕重），無節(jié)幼體1個可按0.003mg濕重計算。該方法適用于原生動物和輪蟲。直接稱重法枝角類和橈足類樣品通過不同孔徑的金屬分樣篩篩選出不同規(guī)格，在解剖鏡下挑選出體型正常規(guī)格接近的個體測量其體長，枝角類測量從頭部頂端（不含頭盔）至殼刺基部；橈足類測量從頭部頂端到尾叉末端，將體長一致的個體放置已烘干至恒重的載玻片上，稱量一般選取30-50個，體型較小的稱重100個以上。用濾紙吸收多余的水分，迅速電子天平測量濕重；后在70℃恒溫干燥箱中烘干至恒重，將樣品放在天平上稱其干重，并應用統(tǒng)計方法獲得體長-體重回歸方程式，由體長求得體重。采樣記錄采樣現(xiàn)場記錄表同浮游植物調(diào)查，見5.6節(jié)。調(diào)查成果表浮游動物調(diào)查統(tǒng)計表調(diào)查水體：密度單位：ind/L ；生物量單位：mg/L浮游植物類別采樣點名稱：采樣點名稱：平均#月#日#月#日#月#日#月#日原生動物種類密度生物量密度生物量密度生物量密度生物量密度生物量1…合計輪蟲種類1…合計枝角類種類1…合計橈足類種類1…合計底棲動物調(diào)查采樣點、采樣頻率采樣點底棲動物采樣點的設置要盡可能與理化分析的采樣點一致，便于數(shù)據(jù)的分析比較，同時還要考慮底棲動物的分布特點，使所采樣品具有代表性。湖泊（水庫）一般在（河流）入口區(qū)、出口區(qū)、中心區(qū)、最深水區(qū)、沿岸帶、污染區(qū)、相對清潔區(qū)設采樣點。河流在不同河段設置采樣點。采樣頻次底棲動物采樣可每季進行一次，至少在每年的枯水期和豐水期各進行一次。試劑和主要器具試劑75%乙醇（配制：無水乙醇：蒸餾水比例為3:1）。主要器具采泥器（改良式彼得森采泥器或其它型號采泥器），索伯網(wǎng)（40目、采樣框尺寸0.3m×0.3m或0.5m×0.5m），帶網(wǎng)夾泥器，塑料盆，金屬分樣篩（40目，孔徑0.425mm），鐘表鑷子，放大鏡（×5），樣品瓶（容量50mL），透射顯微鏡，實體顯微鏡，電子天平（1/1000g）。樣品的采集和鑒定樣品采集XX河流和湖泊、水庫用改良式彼得森采泥器（開口面積為1/16m2或1/40m2）采集底泥。主要用于采集水生昆蟲、水生寡毛類及小型軟體動物。每點采集2次（平行樣）。采到的底泥倒入盆內(nèi)，經(jīng)40目金屬篩過濾，去除泥沙和雜物，將篩網(wǎng)上肉眼可見的底棲動物用鑷子輕輕挑起，立即放入盛有75%酒精的樣品瓶內(nèi)固定，帶回實驗室。帶網(wǎng)夾泥器，開口面積1/6m2，適用于采集以淤泥和細沙為主的軟底質(zhì)生境中螺、蚌等較大型的底棲動物，但僅限于河流下游較緩或河面開闊的樣點。采得樣品后將網(wǎng)口緊閉，在水中蕩滌，除去網(wǎng)中泥沙，提出水面，檢出樣品并固定。山區(qū)河流在采樣點，將索伯網(wǎng)采樣框的底部緊貼河道底質(zhì)，將采樣框內(nèi)較大的石塊在索伯網(wǎng)的網(wǎng)兜內(nèi)仔細清洗，石塊上附著的大型底棲動物全部洗入網(wǎng)兜內(nèi)。然后用小型鐵鏟或鐵棍攪動采樣框的底質(zhì)，所有底質(zhì)與底棲動物均應采入采樣網(wǎng)兜內(nèi)，攪動深度一般為15-30cm。每點采集2次（平行樣）。在岸邊將網(wǎng)兜內(nèi)的所有底質(zhì)和大型底棲動物倒入盆內(nèi)，加入一定量的水便于攪動。仔細清理盆中枯枝落葉等雜物，確保檢出的雜物中無底棲動物附著，然后輕柔地攪動盆內(nèi)所有底質(zhì)，由于底棲動物的質(zhì)量相對較輕，會隨著攪動漂浮于水中，立即用40目篩網(wǎng)過慮，重復數(shù)次，直至所有底棲動物都收集為止。挑揀出底棲動物并固定。樣品鑒定比較大型的底棲動物標本可直接用放大鏡和實體顯微鏡觀察并參考有關資料進行種類鑒定，寡毛類和水生昆蟲幼蟲要制成玻片標本后，在顯微鏡下參考有關資料進行種類鑒定，鑒定到種并記錄數(shù)量。計數(shù)與稱重把每個點采到的底棲動物，按不同種類，準確統(tǒng)計每個樣品的個體數(shù)，并用1/1000天平稱其濕重，最后算出每個采樣點內(nèi)底棲動物的密度（ind/m2）和生物量（g/m2），測XX果記入表5。采樣記錄采樣現(xiàn)場記錄表同浮游植物調(diào)查，見5.6節(jié)。調(diào)查成果表底棲動物調(diào)查統(tǒng)計表調(diào)查水體：密度單位：ind/m2 ；生物量單位：mg/m2底棲動物類別采樣點名稱：采樣點名稱：平均#月#日#月#日#月#日#月#日種類密度生物量密度生物量密度生物量密度生物量密度生物量12…合計大型水生植物調(diào)查采樣點、采樣頻率、采樣深度同浮游植物調(diào)查，詳見5.1。主要器具數(shù)碼相機（像素＞1000萬，有變焦），鋼卷尺，標本袋，標本夾，紗布，水草定量夾（規(guī)格：完全開口時網(wǎng)的各邊長50cm，面積共計為0.25m2，尼龍網(wǎng)長90cm左右，網(wǎng)孔大小為3.3cm×3.3cm），采樣框（正方形，邊長1m或0.5m），耙子（用于采集水中植物）鐮刀等，根據(jù)調(diào)查地點水文條件不同，還應配備膠鞋、雨靴、皮衩及救生圈或橡皮筏等，臺式天平（稱重范圍：1g~1000g）或電子稱，實體顯微鏡，鼓風干燥箱。定性樣品的采集和鑒定根據(jù)調(diào)查水體（河流、湖泊）的形態(tài)、水文情況和植物的分布等選擇有代表性的采樣樣方（水生植物的密集區(qū)、一般區(qū)、稀疏區(qū)應都有代表性樣方），拍攝群落全貌照片，并盡量拍樣方垂直投影照片。定性樣品主要采集水深在6m以內(nèi)生長的大型水生植物種類，帶回實驗室進行分類鑒定，鑒定到種或亞種。生長在水中的禾本科、香蒲科、莎草科、蓼科等挺水植物可直接用手采集；浮葉植物可用耙子連根拔起。漂浮植物可直接用帶柄的手網(wǎng)采集。沉水植物可用耙子或拖鉤采集。盡量選擇帶有莖、葉、花和果實的植物體作為標本，將新采到的不同種類標本，經(jīng)鑒定后保存。每采集一種植物必須立即作好采集記錄，貼上采集標簽，測XX果記入表6。定量樣品的采集和測定水體調(diào)查斷面可設置1-3個帶狀調(diào)查區(qū)，河流型調(diào)查區(qū)垂直于河流流向，包含河流兩岸和水體；湖庫型水體沿岸帶調(diào)查區(qū)應垂直于湖（庫）岸線，湖庫敞水帶可先選定調(diào)查點，以調(diào)查點為中心點布置十字交叉形調(diào)查區(qū)。調(diào)查區(qū)寬度5-10m，每個調(diào)查區(qū)布置3-6個樣方，樣方面積0.25-3m2，考慮到植被群落結構變異性，長方形樣方更為有效，樣方形狀根據(jù)調(diào)查情況確定。將選取的樣方用樣方框圍好，把樣方（0.25-3m2）面積的全部植物從基部割斷，分種類稱重。挺水植物可用1m2采樣方框采集，從植物基部割取，沉水植物、浮葉植物、漂浮植物的定量用水草定量夾（0.25m2）采集。將采集植物洗凈，裝入已編號的樣品袋內(nèi)，帶回實驗室。在室內(nèi)取出袋內(nèi)植物，去除根、枯枝、敗葉和其它雜質(zhì)，去除植物體多余的水分，鑒定種類，分種稱重（G1，單位：g），最后換算出每平方米內(nèi)各種大型水生植物的鮮重（濕重）。干重測定：取某種植物的部分新鮮樣品（不得少于該種樣品總量的10%），用天平準確稱重，為子樣品鮮重（G2）。將子樣品在80℃鼓風干燥箱內(nèi)烘干，直至恒重，即為子樣品的干重（G3）。按公式（8.4）計算樣品干重，：（8.4）式中：G——樣品干重，單位：g；G1——樣品鮮重，單位：g；G2——子樣品干重，單位：g；G3——子樣品鮮重，單位：g；根據(jù)樣方內(nèi)各類植物的生物量（鮮重或干重）和它們的分布面積，估算出該水體大型水生植物的總生物量和各類植物所占比例。測XX果記入表7。植被覆蓋度現(xiàn)場調(diào)查采樣時要注意觀察、測量、記錄水體的水面面積、各類大型水生植物的分布面積，可按公式（8.5）計算： 覆蓋度（%）=（A+B+C+D）/水面面積×100%（8.5）式中：A——沉水植物面積，單位：m2；B——浮水植物面積，單位：m2；C——漂浮植物面積，單位：m2； D——挺水植物面積，單位：m2；采樣記錄采樣現(xiàn)場記錄表同浮游植物調(diào)查，見5.6節(jié)。調(diào)查成果表大型水生植物種類統(tǒng)計表調(diào)查時間：調(diào)查水域：采樣點：編號中名拉丁學名科屬生境蕨類植物12…合計裸子植物12…合計被子植物12…合計大型水生植物群落樣方生物量統(tǒng)計表采樣時間：調(diào)查水體：采樣點：單位：g/m2種類樣品鮮重子樣品干重子樣品鮮重樣品生物量（干重）總生物量12…合計著生藻類調(diào)查采樣點、采樣頻率、采樣深度采樣點河流：根據(jù)河流的大小、長度、形態(tài)和環(huán)境等因素劃分河段，每個河段設2～3個采樣點。湖（庫）：根據(jù)湖（庫）的大小、形態(tài)、深度和環(huán)境等因素劃分水域，每個水域設2～3個采樣點。采樣頻率、采樣深度同浮游植物調(diào)查，詳見5.1節(jié)。試劑和主要器具試劑75%乙醇（配制：無水乙醇（化學純）：蒸餾水比例為3:1），甲醛。主要器具刮刀、硬刷，鋼卷尺，計數(shù)框（0.1mL），樣品瓶（容量50ml），光學顯微鏡，實體顯微鏡。樣品采集人工基質(zhì)法一般用載玻片作為人工基質(zhì)，將載玻片固定在固定架上。深水湖（庫），可在適當長度繩索的下端系牢一重物（大石塊等），繩索的上端系牢一浮子，將載玻片固定架拴在設定位置，垂直放入采樣點水中。水深較淺的湖（庫），可將棍棒插入采樣點水中，把載玻片固定架拴在設定位置。自湖（庫）底起，每隔40cm設一層，每層用2片或4片。放置2周后取樣。取樣時將基質(zhì)上一定面積（現(xiàn)場測量）的著生生物用刀片或硬刷刮（刷）到盛有蒸餾水的樣品瓶中，再將基質(zhì)沖洗干凈，立即加入甲醛固定（樣品水量的1%），貼好標簽。天然基質(zhì)法無機基質(zhì)：可分為無機的（如巖石、磚塊、泥沙等），有機的（如水生高等植物等）。取樣時選擇的天然基質(zhì)要有代表性。將已知面積的面積框放在基質(zhì)（如石頭）上，先用刷子把面積框四周的生物等雜物清理干凈，然后移去面積框，用刀片或刷子將面積框內(nèi)的藻類等全部刷入標本瓶中（標本瓶中事先倒入幾十毫升蒸餾水或純凈水），反復幾次，務必刷刮干凈。立即加入甲醛固定（樣品水量的1%），貼好標簽，帶回實驗室。每個樣點最好刮取2個面積基質(zhì)上的著生藻類。有機基質(zhì)：水生高等植物上的著生藻類，可剪取一定面積葉片（用卷尺測量），放入標本瓶中，加適量水震蕩，使著生藻類脫落。也可以直接刮取。取樣后立即加入甲醛固定（樣品水量的1%），貼好標簽。每個樣點最好刮取2個面積基質(zhì)上的著生藻類。將所取樣品帶回實驗室，靜止沉淀24h，吸去上清液，定容到30mL（如樣品量＜30mL，則補充蒸餾水至30mL），用于定性、定量測定。定性鑒定吸取適量沉淀濃縮樣品，制成水封顯微裝片，置于顯微鏡下進行種類鑒定（借助參考文獻、工具書）。鑒定到種。鑒定完成后載玻片上的樣品要放回原樣品瓶，并用原水沖洗干凈。定量測定將水樣搖勻，迅速吸取0.1mL，放入0.1mL計數(shù)框內(nèi)，置于顯微鏡下觀察、計數(shù)。一般計算5行、10行、20行或全片。每個樣品計數(shù)2片（誤差不超過±15%），求出平均值。將定量計數(shù)的各種藻類的細胞數(shù)進行計算，并換算為1cm2基質(zhì)上著生藻類的細胞數(shù)量（密度），可按公式（9.5）計算：（9.5）式中：Ni——單位面積i種藻類的細胞數(shù)，單位：cells/cm2；C1——標本定容水量，單位：mL；L——藻類計數(shù)框每邊的長度，單位：μm；h——視野中平行線的間距，單位：μm；R——計數(shù)的行數(shù)；ni——實際計數(shù)所得i種藻類細胞數(shù)，單位：個；S——刮（或刷）取基質(zhì)的總面積，單位：cm2；C2——實際計數(shù)的標本水量，單位：mL。生物量測算著生藻類生物量測算方法，與浮游植物調(diào)查中生物量測算方法相同，計算單位面積（1cm2）基質(zhì)上著生藻類生物量，見5.5節(jié)。采樣記錄采樣現(xiàn)場記錄表同浮游植物調(diào)查，見5.6節(jié)。調(diào)查成果表著生藻類調(diào)查統(tǒng)計表調(diào)查水體：密度單位：Cells/cm2 ；生物量單位：mg/cm2 浮游植物類別采樣點名稱：采樣點名稱：平均所屬門#月#日#月#日#月#日#月#日藍藻門Cyanophyta密度生物量密度生物量密度生物量密度生物量密度生物量種屬名稱1種屬名稱2…合計綠藻門Chlorophyta種屬名稱1種屬名稱2…合計硅藻門Bacillariophyta種屬名稱1種屬名稱2…合計金藻門CHrysophyta種屬名稱1種屬名稱2…合計…著生原生動物調(diào)查采樣點、采樣頻率、采樣深度同著生藻類調(diào)查，詳見9.1節(jié)。試劑和主要器具同著生藻類調(diào)查，詳見9.2節(jié)。樣品采集人工基質(zhì)法同著生藻類調(diào)查，詳見9.3.1節(jié)。天然基質(zhì)法一般與著生藻類取樣同步進行，選擇有代表性的自然基質(zhì)（無機基質(zhì)或有機基質(zhì)）取樣（方法同著生藻類）每個樣點最好刮取2個面積基質(zhì)上的著生藻類。將樣品裝入盛有蒸餾水的標本瓶內(nèi)，加入1%的甲醛固定，貼上標簽，帶回實驗室。靜止沉淀24h，吸去上清液，定容到30mL（如樣品量＜30ml，則補充蒸餾水至30m），用于定性、定量測定。從自然基質(zhì)上刮取（或刷?。悠泛?，要用卷尺測量、記錄并計算被刮取的基質(zhì)面積，或取樣前用測量好面積的標志物（如瓶蓋）標定取樣面積。定性鑒定吸取適量沉淀濃縮樣品，制成水封顯微裝片，置于顯微鏡下（×100，×400）進行種類鑒定（借助參考文獻、工具書），鑒定到種。鑒定完成后載玻片上的樣品要放回原樣品瓶，并用原水沖洗干凈。定量測定將定量水樣搖勻，迅速吸取0.1mL，放入0.1mL計數(shù)框內(nèi)，置于顯微鏡下觀察鑒定，全片計數(shù)。每個樣品計數(shù)2片（誤差不超過±15%），求出平均值。將定量計數(shù)的各種著生原生動物的個數(shù)進行計算，換算為1cm2基質(zhì)上著生原生動物的個密度，可按公式（10.5）計算密度（ind./cm2）。（10.5）式中：Ni——單位面積內(nèi)i種著生原生動物的個密度，單位：ind/cm2；n——實際計數(shù)得到的某種原生動物的個體數(shù)，單位：個；E——樣品定容的體積，單位：mL；S——取樣面積，單位：cm2。生物量測算著生原生動物生物量測算方法，與浮游動物調(diào)查中原生動物生物量測算方法相同，計算單位面積（1cm2）基質(zhì)上著生原生動物生物量，見6.5節(jié)。采樣記錄采樣現(xiàn)場記錄表同浮游植物調(diào)查，見5.6節(jié)。調(diào)查成果表著生原生動物密度統(tǒng)計表調(diào)查水體：密度單位：ind/cm2 ；生物量單位：mg/cm2原生動物種類采樣點名稱：采樣點名稱：平均#月#日#月#日#月#日#月#日種類密度生物量密度生物量密度生物量密度生物量密度生物量12…合計濕地鳥類調(diào)查采樣點、采樣時間采樣點與其他生物指標調(diào)查選取同一站點。采樣時間在年周期中，濕地鳥類調(diào)查可分為繁殖季（一般為5～7月），越冬季（一般為12月～來年2月）和遷徙季（春季、秋季）。既調(diào)查種類，也記錄數(shù)量。主要器具雙筒望遠鏡，單筒望遠鏡，手持GPS，數(shù)碼相機（像素＞1000萬，有變焦），計數(shù)器。調(diào)查方法一般采用定位觀察與線路調(diào)查相結合的方法。選擇典型生境作定位觀察；確定合理的路線，作線路調(diào)查。通過直接計數(shù)法，記錄在調(diào)查水域內(nèi)觀察到的鳥類的種類與數(shù)量。在不能進行全年系統(tǒng)的調(diào)查時，可隨水生物取樣，采用固定半徑樣點法作觀察、記錄。水域一般視野較開闊，障礙物、隱蔽物較少，選擇適宜樣點，以樣點為中心的觀察半徑以50m為宜。借助望遠鏡觀察、記錄某一特定樣點周邊一定半徑內(nèi)的所有鳥類（包括看到的和聽到的）的種類和數(shù)量。一個水域，根據(jù)實際情況可選擇1～3個樣點（注意樣點間的距離，避免重復）。然后用多點統(tǒng)計數(shù)據(jù)和樣點面積，可按公式（11.3）計算該水域鳥的密度。（11.3）式中：D——鳥類的密度，單位：只/Km2；N——每個樣點觀察到的鳥的個體數(shù)，單位：π——圓周率；r——樣點圓面積的半徑，單位：km；還應注意查閱相關文獻，訪問當?shù)叵嚓P部門（林業(yè)、漁業(yè)、水務、公園管理部門及協(xié)會）及當?shù)赜嘘P人士（攝影愛好者、鳥類愛好者、當?shù)鼐用瘢?。記錄鳥類的種類、數(shù)量和季節(jié)變化。調(diào)查成果表由于氣候變化、干旱、環(huán)境污染等因素的綜合、持續(xù)作用，濕地面積減少，濕地鳥類的種類和數(shù)量也隨之下降。在現(xiàn)場調(diào)查時一般只作觀測、記錄，不提倡采集標本。濕地鳥類統(tǒng)計表調(diào)查時間：調(diào)查水域：采樣點：編號中名拉丁學名數(shù)量（只）生境12…合計魚類調(diào)查采樣點與其他生物指標調(diào)查選取同一站點。試劑和主要器具試劑甲醛溶液（5%～10%）。主要器具手持GPS、不同規(guī)格的網(wǎng)具、標本瓶、數(shù)碼相機（像素＞1000萬，有變焦）、實體顯微鏡、放大鏡、卷尺（30m）等。調(diào)查方法魚類調(diào)查，除結冰期外，全年均可進行，特別是夏末和初秋。魚類為游泳速度很快的脊椎動物，既有分散性，又有群居性，很難獲得，需用科學的方法，持續(xù)幾年進行系統(tǒng)調(diào)查。可在與其它水生物一起調(diào)查過程中，觀察、采樣，鑒定、記錄其種類組成和生長狀況，并結合查閱文獻、訪問相關部門及人士（當?shù)貪O業(yè)部門、水產(chǎn)協(xié)會、水務部門、當?shù)貪O民），積累該水域魚類的基礎資料，以利探討魚類種群、數(shù)量的變化與水質(zhì)、水環(huán)境的關系。樣本的采集、固定和保存主要用網(wǎng)具適量（夠用即可，盡量少捕）采集調(diào)查水體自然生長的各種魚類標本。將采集到的標本放入體積適宜的標本瓶（箱），立即用5%福爾馬林水溶液固定、保存。如魚體較大，還需往腹腔內(nèi)均勻注射10%福爾馬林水溶液，而后固定、保存。容易掉鱗的魚、稀有種類和小規(guī)格種類要用紗布包起來在放入固定液中。標本瓶上貼好標簽，注XX體名稱、采集時間。帶回實驗室，置于冰箱（4℃）內(nèi)或陰涼處暫存，2周內(nèi)完成鑒定，測量。魚類標本的鑒定與測量所采標本應鑒定到種或亞種，記錄填入表中表11，魚類生物學測定成果填入表12。對測定數(shù)據(jù)作統(tǒng)計學分析，求出各種形狀的大小比例和變動范圍。魚類調(diào)查統(tǒng)計表調(diào)查時間：調(diào)查水域：采樣點：編號中名拉丁學名數(shù)量（尾數(shù)）生境123…合計魚類生物學測定記錄表調(diào)查時間：調(diào)查水域：采樣點：標本號全長（mm）體長（mm）體高（mm）頭長（mm）魚體重（g）性別攝食強度（級）肥滿系數(shù)12……合計魚類攝食強度：表示魚類胃內(nèi)或腸道內(nèi)食物充滿的程度。分級：分為五級0級：空胃；1級：胃內(nèi)食物不足胃腔的1/2；2級：胃內(nèi)食物占胃腔的1/2；3級：胃內(nèi)充滿食物，但胃壁不膨脹；4級：胃內(nèi)充滿食物，胃壁膨脹變薄。肥滿系數(shù)：公式 QUOTE式中：K——肥滿系數(shù)；W——去內(nèi)臟體重，單位：g；L——體長，單位：cm。魚類標本年齡（魚齡）鑒定采集鑒定魚齡材料鑒定魚齡的材料有鱗片、鰭條、耳石、脊椎骨、鰓蓋骨等。有鱗魚類以鱗片為主，其它魚齡材料作對照。無鱗或鱗片細小魚類以鰭條為魚齡材料。魚齡從背鰭下方、側(cè)線上方的部位取。魚體左右兩側(cè)各取5～10片。取下的鱗片裝入鱗片袋內(nèi)，在鱗片袋上記錄被取鱗魚的體長、體重、性別、取樣日期、地點。魚齡材料的處理從袋中取出鱗片，放入溫水中浸泡，用刷子把鱗片表面的粘液、皮膚、色素等刷掉、洗凈，吸干水分，夾入載玻片中間備用。鰭條等骨質(zhì)魚齡材料，用水煮10min左右，洗凈后經(jīng)肥皂水浸泡，以脫去脂肪，再漂洗干凈并晾干。測定魚齡時把鰭條作成0.3mm厚的骨磨片，在骨磨片上滴少量二甲苯以增加磨片的透明度，隨后用普氏膠將骨磨片粘在載玻片上觀察。魚齡組的劃分齡魚組（0+—1）經(jīng)歷了一個生長季，在鱗片（或骨質(zhì)組織）上面還沒有形成年輪（0+）或第一個年輪正在形成中（2）的個體，歸入1齡魚組。齡魚組（1+—2）經(jīng)歷了二個生長季，在鱗片（或骨質(zhì)組織）上面已形成1個年輪（1+）或第二個年輪正在形成中（2）的個體，歸入2齡魚組。3齡魚組（2+—3）經(jīng)歷了三個生長季，在鱗片（或骨質(zhì)組織）上面已形成2個年輪（2+）或第三個年輪正在形成中（3）的個體，歸入3齡魚組。其它魚齡組，按上述依此類推。鑒XX果填入表13。魚類年齡鑒定