醫(yī)學專題-呼吸道病原體檢測_第1頁
醫(yī)學專題-呼吸道病原體檢測_第2頁
醫(yī)學專題-呼吸道病原體檢測_第3頁
醫(yī)學專題-呼吸道病原體檢測_第4頁
醫(yī)學專題-呼吸道病原體檢測_第5頁
已閱讀5頁,還剩56頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

呼吸道病原體檢測(jiǎncè)陸歡平

第一頁,共六十一頁。編輯ppt呼吸道感染(gǎnrǎn)呼吸道感染是指病原體感染人體的鼻腔、咽喉、氣管和支氣管等呼吸系統(tǒng)分為(fēnwéi)上呼吸道感染和下呼吸道感染第二頁,共六十一頁。編輯ppt上呼吸道(shànghūxīdào)感染常見(chánɡjiàn)急性上呼吸道感染,指鼻腔、咽或喉部急性炎癥的概稱,是呼吸道最常見(chánɡjiàn)的一種傳染病常見病因為病毒,少數(shù)由細菌引起?;颊卟环帜挲g、性別、職業(yè)和地區(qū)。不僅具有較強的傳染性,而且可引起嚴重并發(fā)癥第三頁,共六十一頁。編輯ppt下呼吸道感染(gǎnrǎn)包括急性氣管/支氣管炎、慢性支氣管炎、肺炎(fèiyán)、支氣管擴張等由病毒、細菌、支原體、衣原體、軍團菌等微生物引起,其防治應遵循預防為主、準確診斷、及時治療的原則,治療時必須明確引起感染的病原體以選擇有效的抗生素第四頁,共六十一頁。編輯ppt呼吸道病原體常見的呼吸道病原體主要有病毒(bìngdú)、細菌、支原體、衣原體和立克次體等據(jù)統(tǒng)計,90%以上急性呼吸道感染由病毒引起一種病原體可引起多種臨床癥狀,同一臨床表現(xiàn)可由多種病原體引起第五頁,共六十一頁。編輯ppt呼吸道病原體細菌:細菌引起呼吸道感染的機會比病毒少。一旦感染,癥狀(zhèngzhuàng)多較嚴重,定位比較明顯,如扁桃體炎、中耳炎、鼻竇炎等。由細菌引起的兒童肺炎往往是流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌或金黃色葡萄球菌第六頁,共六十一頁。編輯ppt呼吸道病原體病毒(bìngdú),包括鼻病毒(bìngdú)、冠病毒(bìngdú)、呼吸道合胞病毒(bìngdú)、流感病毒(bìngdú)、副流感病毒(bìngdú)、腺病毒(bìngdú)等第七頁,共六十一頁。編輯ppt呼吸道病原體支原體、衣原體感染(gǎnrǎn)導致的呼吸道感染(gǎnrǎn)與其它病原體感染(gǎnrǎn)的早期臨床表現(xiàn)類似??赡茉?-3天后咳嗽的癥狀會表現(xiàn)比較突出。在小于30歲的年輕人中,肺炎支原體是最重要的下呼吸道病原體第八頁,共六十一頁。編輯ppt非典型呼吸道病原體是指除肺炎(fèiyán)鏈球菌以外的病原體,包括嗜肺軍團菌(LP)、肺炎(fèiyán)支原體(MP)、肺炎(fèiyán)衣原體(CP)、Q熱立克次體(貝納柯克斯體)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、流感病毒(IFV)和副流感病毒(PIV)等第九頁,共六十一頁。編輯ppt非典型呼吸道病原體這些病原體變異快,傳播廣,由于不易形成長期(chángqī)免疫力而難以預防和控制流感病毒(bìngdú)副流感病毒(bìngdú)病毒(bìngdú)呼吸道合胞病毒腺病毒第十頁,共六十一頁。編輯ppt呼吸道病原體檢測(jiǎncè)現(xiàn)有的主要方法:病毒(bìngdú)分離培養(yǎng)抗原檢測抗體檢測分子生物學方法等第十一頁,共六十一頁。編輯ppt檢測(jiǎncè)方法的比較檢測方法優(yōu)點缺點病毒分離培養(yǎng)特異性高,金標準培養(yǎng)條件要求高、靈敏度低,標本中病原體量少時,易致假陰性??乖瓩z測直接免疫熒光法簡便、快速、靈敏度和特異性均較高且可用于疾病的早期診斷需要特異性抗體、熒光顯微鏡,易受采樣限制抗體檢測間接免疫熒光法靈敏度、特異性較高對疾病早期診斷沒有太大幫助酶聯(lián)免疫吸附法較快速,批量篩查特異性不高,假陽性多分子生物學方法靈敏度和特異性均很高操作繁瑣,價格昂貴第十二頁,共六十一頁。編輯ppt抗體、抗原(kàngyuán)檢測的比較抗體IgM檢測病原體抗原檢測檢測最佳時間一般在感染一周左右病毒感染出現(xiàn)癥狀后即可檢測出臨床意義回顧性診斷,適用于疾病中后期的診斷,可用于疾病早期診斷,對患者的治療有重要指導意義檢測靈敏度將包被有不同基質的生物薄片固定在一個反應區(qū)中,可同時檢測多種抗不同病原體的抗體檢測方法一般使用ELISA或者間接免疫熒光法,有非特異性熒光一般使用直接免疫熒光法,幾乎沒有非特異性反應,敏感性較差第十三頁,共六十一頁。編輯pptIgMIgG第十四頁,共六十一頁。編輯ppt機體產(chǎn)生IgM一般需要一周左右的時間,而有免疫缺陷或免疫系統(tǒng)不健全的個體(gètǐ)如兒童,特別是3歲以下的小孩,其產(chǎn)生抗體往往需要更久,且抗體產(chǎn)生的水平也較低若檢測的是IgG,則不能很好地區(qū)分既往感染和急性感染第十五頁,共六十一頁。編輯ppt因此,抗原檢測(jiǎncè)的方法對嬰幼兒和兒童的呼吸道感染的病因診斷、鑒別診斷和臨床用藥指導比抗體法更有優(yōu)勢檢測抗體IgM比IgG更有臨床意義第十六頁,共六十一頁。編輯ppt采樣(cǎiyànɡ)抗原檢測拭子伸入鼻部后向鼻咽部水平伸入,不是向鼻腔伸入。

伸入距離為從耳垂部到鼻尖長度的一半,一般針對兩周歲以下兒童,伸入距離約為拭子絨毛頭的長度兩倍拭子伸入后要輕輕捻動拭子轉3圈。

取樣后在一小時之內(nèi)洗脫(xǐtuō)到生理鹽水中,12小時內(nèi)送檢第十七頁,共六十一頁。編輯ppt抗原(kàngyuán)檢測采樣第十八頁,共六十一頁。編輯ppt采樣(cǎiyànɡ)抗體(kàngtǐ)檢測第十九頁,共六十一頁。編輯ppt采樣對結果影響較大(jiàodà)非典型感染多為干咳,無痰/少痰陽性率低(標本問題,病毒顆粒?。┛乖隗w內(nèi)存在時間短抗原(kàngyuán)檢測的劣勢第二十頁,共六十一頁。編輯ppt九項呼吸道感染(gǎnrǎn)病原體IgM抗體檢測第二十一頁,共六十一頁。編輯ppt檢測(jiǎncè)原理間接免疫熒光法(IFA)是基于待測樣本中的抗體與吸附在載玻片上的抗原(kàngyuán)發(fā)生的反應。樣本中存在的特異性抗體和抗原(kàngyuán)反應,未與抗原(kàngyuán)結合的免疫球蛋白在洗滌步驟中除去。在下一步驟中,抗原(kàngyuán)-抗體復合物與熒光素標記的抗人球蛋白反應,用免疫熒光顯微鏡觀察結果第二十二頁,共六十一頁。編輯ppt試劑盒組成(zǔchénɡ)組分成分和用途載玻片檢測的物理載體,覆有聚四氟乙烯并包被有針對檢測物的特異性抗原,質控品吸附劑羊抗人IgG用來吸附人IgG避免干擾IgM檢測FITC結合物熒光素標記的抗人免疫球蛋白結合物,和抗原抗體復合物反應,并顯色封閉介質甘油緩沖液,便于觀察磷酸鹽緩沖液(PBS)用于洗滌步驟,從反應介質中除去未結合的免疫球蛋白和結合物第二十三頁,共六十一頁。編輯ppt實驗(shíyàn)步驟1樣本的稀釋:血清標本(biāoběn)與PBS按1:1比例稀釋稀釋后的血清加入吸附劑中,徹底混勻。處理后的血清要離心10-15分鐘除去沉淀,以防干擾檢測第二十四頁,共六十一頁。編輯ppt實驗(shíyàn)步驟2第二十五頁,共六十一頁。編輯ppt結果(jiēguǒ)判斷第二十六頁,共六十一頁。編輯ppt陰性(yīnxìng)結果熒光圖譜軍團菌、肺炎(fèiyán)衣原體和立克次體無熒光;支原體、腺病毒、甲型和乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒和副流感病毒的細胞呈現(xiàn)紅色第二十七頁,共六十一頁。編輯ppt陽性(yángxìng)結果熒光圖譜腺病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒或副流感病毒對陽性血清的1-15%細胞(xìbāo)的細胞(xìbāo)核、胞漿或胞膜出現(xiàn)蘋果綠色熒光;軍團菌、衣原體或立克次體中所有的細菌呈現(xiàn)出蘋果綠色熒光;支原體對陽性血清在細胞(xìbāo)外圍呈現(xiàn)蘋果綠色熒光第二十八頁,共六十一頁。編輯ppt病原體形態(tài)或熒光模式嗜肺軍團菌桿狀肺炎支原體細胞外圍熒光模式立克次體球桿狀肺炎衣原體球狀腺病毒混合熒光模式(細胞核和胞漿或胞膜)呼吸道合胞病毒混合熒光模式(細胞核和胞漿或胞膜)甲型流感病毒混合熒光模式(細胞核和胞漿或胞膜)乙型流感病毒混合熒光模式(細胞核和胞漿或胞膜)副流感病毒混合熒光模式(細胞核和胞漿或胞膜)第二十九頁,共六十一頁。編輯ppt嗜肺軍團菌陰性(yīnxìng):熒光弱、少、不規(guī)則第三十頁,共六十一頁。編輯ppt嗜肺軍團菌陽性:熒光密集(mìjí),且亮度較好,桿狀形態(tài)第三十一頁,共六十一頁。編輯ppt肺炎(fèiyán)支原體陰性:紅色細胞周圍無或少量(shǎoliàng)熒光,亮度弱第三十二頁,共六十一頁。編輯ppt肺炎(fèiyán)支原體陽性:熒光占視野50%以上,亮度好,形態(tài)(xíngtài)為明顯的細胞膜或胞漿第三十三頁,共六十一頁。編輯pptQ熱立克次體(lìkècìtǐ)陰性(yīnxìng):熒光弱、少、不規(guī)則第三十四頁,共六十一頁。編輯pptQ熱立克次體(lìkècìtǐ)陽性:熒光(yíngguāng)亮度強且數(shù)量多,形態(tài)典型第三十五頁,共六十一頁。編輯ppt肺炎(fèiyán)衣原體陰性(yīnxìng):熒光弱、少第三十六頁,共六十一頁。編輯ppt肺炎(fèiyán)衣原體陽性:熒光(yíngguāng)密集,且亮度較好第三十七頁,共六十一頁。編輯ppt腺病毒陰性(yīnxìng):熒光弱、少第三十八頁,共六十一頁。編輯ppt腺病毒陽性:熒光亮度強且數(shù)量(shùliàng)多,平均每個視野的陽性細胞>3-5個第三十九頁,共六十一頁。編輯ppt呼吸道合胞病毒(bìngdú)陰性(yīnxìng):熒光弱、少第四十頁,共六十一頁。編輯ppt呼吸道合胞病毒(bìngdú)陽性:熒光亮度(liàngdù)強且數(shù)量多,平均每個視野的陽性細胞>3-5個第四十一頁,共六十一頁。編輯ppt甲型流感病毒陰性(yīnxìng):熒光弱、少第四十二頁,共六十一頁。編輯ppt甲型流感病毒陽性:熒光(yíngguāng)亮度強且數(shù)量多,平均每個視野的陽性細胞>3-5個第四十三頁,共六十一頁。編輯ppt乙型流感病毒陰性(yīnxìng):熒光弱、少第四十四頁,共六十一頁。編輯ppt乙型流感病毒陽性:熒光(yíngguāng)亮度強且數(shù)量多,平均每個視野的陽性細胞>3-5個第四十五頁,共六十一頁。編輯ppt副流感病毒陰性(yīnxìng):熒光弱、少第四十六頁,共六十一頁。編輯ppt副流感病毒陽性:熒光(yíngguāng)亮度強且數(shù)量多,平均每個視野的陽性細胞>3-5個第四十七頁,共六十一頁。編輯ppt方法(fāngfǎ)的局限性抗體水平無顯著上升時不能排除感染的可能性單一樣本抗體檢測結果不能幫助作出近期感染的診斷。應采集雙份樣本(急性期和康復(kāngfù)期)同時檢測來觀察血清轉化或抗體水平的明顯升高第四十八頁,共六十一頁。編輯ppt方法(fāngfǎ)的局限性對患有自身免疫性疾病病人的血清,用IFA檢測時,支原體、腺病毒、流感病毒、呼吸道合胞病毒和副流感病毒,會在細胞上發(fā)生(fāshēng)非特異性反應,這些血清不能用此方法評價質控孔用于檢測這種現(xiàn)象第四十九頁,共六十一頁。編輯ppt方法(fāngfǎ)的局限性在嗜肺軍團菌和Q熱立克次體中,有時血清會含有與卵抗原反應的抗體(kàngtǐ),所以使用卵黃囊固定抗原會出現(xiàn)非特異性熒光。當出現(xiàn)這種情況時,該血清就不能用IFA進行分析了第五十頁,共六十一頁。編輯ppt臨床(línchuánɡ)實際效果圖第五十一頁,共六十一頁。編輯ppt第五十二頁,共六十一頁。編輯ppt九聯(lián)檢第五十三頁,共六十一頁。編輯ppt第五十四頁,共六十一頁。編輯ppt第五十五頁,共六十一頁。編輯ppt第五十六頁,共六十一頁。編輯ppt第五十七頁,共六十一頁。編輯ppt第五十八頁,共六十一頁。編輯ppt思考題質控孔的作用(zuòyòng)是什么?第五十九頁,共六十一頁。編輯ppt謝謝(

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論