自身抗體的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和臨床意義

自身抗體的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和臨床意義第一頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二自身抗體的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

及臨床意義

北京友誼醫(yī)院風(fēng)濕科宋淑菊

第二頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二主要內(nèi)容自身抗體的概念自身抗體的分類自身抗體的命名自身抗體的檢測(cè)方法常見(jiàn)的自身抗體第三頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二自身抗體的概念各種原因造成的機(jī)體B細(xì)胞產(chǎn)生的針對(duì)自身組織成分的抗體，稱為自身抗體（autoantibodies）。自身抗體可以是生理性的，如針對(duì)衰老或死亡的自體細(xì)胞，機(jī)體產(chǎn)生少量的自身抗體，以便被脾、肝及單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)的巨噬細(xì)胞吞噬，維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的生理穩(wěn)定；自身抗體也可以是病理性的，引起自身免疫病。第四頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二自身抗體的分類按照自身抗原在體內(nèi)分布的不同可分為：器官/組織特異性自身抗體非器官/組織特異性自身抗體按照檢測(cè)自身抗體所用的基質(zhì)不同可分為：細(xì)胞抗體（以游離的細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)基質(zhì)）細(xì)胞非特異性自身抗體，如抗核抗體細(xì)胞特異性自身抗體，如ANCA、抗血小板抗體、抗紅細(xì)胞抗體組織抗體（以動(dòng)物組織切片為實(shí)驗(yàn)基質(zhì)）第五頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二自身抗體的命名以首先被檢測(cè)到該抗體的患者名字的縮寫命名：如抗Sm、抗Ro、抗La抗體以相關(guān)疾病的名字的縮寫命名：如抗Scl-70、抗SS-A、抗SS-B抗體以抗原的化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分類命名：如抗DNA、抗RNP抗體以抗原的部位進(jìn)行命名：如抗板層素抗體、抗核膜抗體。第六頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二自身抗體的檢測(cè)方法對(duì)流免疫電泳、免疫雙擴(kuò)散免疫熒光檢測(cè)法免疫印記法酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)法（ELISA）放射性核素法酶免疫斑點(diǎn)技術(shù)免疫沉淀法第七頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗核抗體(ANA)

抗dsDNA抗體抗dsDNA抗體抗Sm抗體抗RNP抗體抗SSA抗體抗SSB抗體間接免疫熒光方法金標(biāo)法免疫雙擴(kuò)散法ANA(anti-nuclearantibodies)第八頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗Sm抗體抗RNP抗體抗SSA抗體抗SSB抗體抗Scl-70抗體抗Jo-1抗體抗核糖體抗體免疫印記法ENA(extractablenuclearantigen)第九頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗核抗體(ANA)抗平滑肌抗體(SMA)抗線粒體抗體(AMA)間接免疫熒光法

自身抗體第十頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二病人血清(一抗)玻片二抗熒光抗體熒光顯微鏡下閱片ANA－－Hep-2細(xì)胞dsDAN抗體－－短膜蟲SMA－－大鼠胃組織AMA－－大鼠腎組織間接免疫熒光法底物第十一頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二病人血清金標(biāo)記的抗體dsDNA抗原陰性陽(yáng)性金標(biāo)法第十二頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗原1:41:161:321:64病人血清標(biāo)準(zhǔn)抗體免疫雙擴(kuò)散瓊脂板第十三頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二不同分子量的抗原病人血清酶標(biāo)抗體顯色劑判斷結(jié)果免疫印記法第十四頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗Sm抗體13.5,28,29KD抗RNP抗體22,32,70KD抗SSA抗體52KD抗SSB抗體45,47KD抗Scl-70抗體68-70KD抗Jo-1抗體55KD抗核糖體抗體15,16.5,38KD第十五頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二間接免疫熒光法細(xì)胞核陽(yáng)性核仁陽(yáng)性細(xì)胞漿陽(yáng)性分裂期細(xì)胞陽(yáng)性第十六頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二細(xì)胞核陽(yáng)性細(xì)胞核均質(zhì)型（Homogeneous）：抗dsDNA、組蛋白抗體、核小體抗體細(xì)胞核周邊型（Membranous）：板層素抗體細(xì)胞核顆粒型（Speckled）：粗顆粒：抗Sm、RNP抗體細(xì)顆粒：抗SSA、SSB抗體第十七頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗dsDNA抗體熒光模式：綠蠅短膜蟲：動(dòng)基體均質(zhì)的或邊緣亮度增強(qiáng)的熒光。Hep-2細(xì)胞：細(xì)胞核的均質(zhì)型熒光。第十八頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗dsDNA抗體自身抗原：位于DNA脫氧核糖磷酸框架上。臨床意義：對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）特異性高?？贵w滴度與疾病活動(dòng)性存在相關(guān)性，因此抗體滴度的檢測(cè)可為監(jiān)控治療提供有用的依據(jù)。第十九頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗RNP/Sm抗體熒光模式：Hep-2片：細(xì)胞核粗顆粒，核仁陰性。肝組織切片：同上。熒光法不能區(qū)分抗RNP和抗體Sm。第二十頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗RNP/Sm抗體自身抗原：抗原RNP和Sm屬于一組小核糖核蛋白（snRNP），由低分子量的RNA和多種蛋白質(zhì)組成，RNA中尿苷（U-RNA）含量較高。臨床意義：高滴度的抗RNP抗體為混合結(jié)締組織?。∕CTD）的特征，發(fā)生率為95~100%。也可出現(xiàn)于SLE，但總是與抗Sm抗體同時(shí)出現(xiàn)。抗Sm抗體對(duì)SLE具有高度特異性，發(fā)生率為20~40%。第二十一頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗SSA／SSB抗體熒光模式Hep-2片：細(xì)胞核呈細(xì)顆粒熒光，核仁不發(fā)光。肝組織片：細(xì)顆粒熒光。第二十二頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗SSA／SSB抗體自身抗原：SSA抗原是一個(gè)小核糖核蛋白，由一個(gè)RNA分子和兩種不同的蛋白質(zhì)組成。蛋白質(zhì)的分子量為52KD和60KD?？贵w直接針對(duì)蛋白質(zhì)的抗原決定簇。SSB抗原是分子量為48kD的磷酸化蛋白。臨床意義；最常見(jiàn)于干燥綜合征（SS）,也見(jiàn)于SLE、原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC），偶見(jiàn)于慢活肝?？筍SA抗體在新生兒紅斑狼瘡的發(fā)生率幾乎為100%。第二十三頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二核仁陽(yáng)性(Nucleolar)核仁熒光增強(qiáng)，核漿均質(zhì)型---Scl-70抗體。核仁均質(zhì)型---PM-Scl及其他抗原抗體。核仁細(xì)顆粒型---原纖維蛋白抗體。核仁粗顆粒型---RNA多聚酶-1抗體。第二十四頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗Scl-70抗體熒光模式：Hep-2片：細(xì)胞核幾乎均質(zhì)的熒光，核仁熒光加強(qiáng)而且也為均質(zhì)型，胞漿無(wú)熒光。肝組織片；細(xì)胞核顆粒或均質(zhì)型熒光，常見(jiàn)到細(xì)胞核熒光。第二十五頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗Scl-70抗體自身抗原：為DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶1，分子量為100KD。在DNA雙鏈的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄中起作用。臨床意義：25~70%的系統(tǒng)性硬化癥（PSS）彌漫型患者陽(yáng)性，局限型硬皮病患者陰性。第二十六頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二細(xì)胞漿陽(yáng)性胞漿均質(zhì)型---抗核糖體抗體細(xì)顆粒---抗Jo-1抗體

胞漿顆粒型粗顆粒---AMA抗體滴狀點(diǎn)狀---溶酶體抗體核周顆粒--高爾基體抗體胞漿纖維型細(xì)纖維---波形蛋白抗體環(huán)狀纖維---原肌球蛋白抗體針狀纖維---肌動(dòng)蛋白抗體第二十七頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗核糖體抗體熒光模式：Hep-2：胞漿細(xì)顆粒到均質(zhì)狀、非常致密的熒光。肝組織片：島狀熒光。臨床意義：SLE的特異性抗體，與精神癥狀有關(guān)。第二十八頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗Jo-1抗體熒光模式：Hep-2：胞漿顆粒到細(xì)塊狀熒光。肝組織片：胞漿中弱熒光。自身抗原：組氨酰tRNA合成酶。臨床意義：見(jiàn)于PM，發(fā)生率25~35%。第二十九頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗線粒體抗體熒光模式：Hep-2：胞漿內(nèi)粗的顆粒型熒光。大鼠腎組織切片：腎小管明顯熒光，腎小球熒光較弱。第三十頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗線粒體抗體自身抗原：位于真核細(xì)胞線粒體膜的內(nèi)面。線粒體自身抗原為2-氧酸脫氫酶復(fù)合體的亞單位，為一組自身抗原，其中與PBC有關(guān)的包括：（1）丙酮酸脫氫酶復(fù)合體（PDC）（2）支鏈2-氧酸脫氫酶復(fù)合體（BCOADC）（3）a-酮戊二酸脫氫酶復(fù)合體（OGDC）第三十一頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗線粒體抗體臨床意義：AMA-M2對(duì)PBC具有診斷意義。AMA亞型與疾病的相關(guān)性：AMA-1：梅毒、干燥綜合征AMA-2：PBCAMA-3：藥物性紅斑狼瘡AMA-4：PBC與AIH重疊AMA-5：SLE、自身免疫性溶血性貧血AMA-6：異煙肼引起的藥物性肝炎AMA-7：AIHAMA-8：AIH、閉塞性血栓性血管炎AMA-9：藥物性肝炎AMA-10：SLE第三十二頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二分裂期細(xì)胞陽(yáng)性染色體陽(yáng)性---染色體相關(guān)抗體，相關(guān)疾病？紡錘體纖維陽(yáng)性---紡錘體纖維抗體，如燕麥細(xì)胞型支氣管肺癌中間體陽(yáng)性---中間體抗體，相關(guān)疾病？細(xì)胞兩極陽(yáng)性---中心粒抗體，相關(guān)疾?。恐z點(diǎn)陽(yáng)性---抗著絲點(diǎn)抗體第三十三頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗著絲點(diǎn)抗體(ACA)熒光模式：Hep-2：細(xì)胞核細(xì)的、相同大小的顆粒熒光，分裂期顆粒熒光帶狀位于細(xì)胞中間。肝組織片：分布于細(xì)胞核的10~20個(gè)顆粒，熒光弱，易被忽略。第三十四頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗著絲點(diǎn)抗體自身抗原：著絲粒中的三種不同的蛋白質(zhì)：著絲點(diǎn)蛋白A、B、C，主要抗原為著絲點(diǎn)蛋白B。臨床意義：對(duì)進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥亞型（CREST綜合征）有診斷意義。陽(yáng)性率80~95%。還可見(jiàn)于PBC、SS等。第三十五頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二器官/組織特異性自身抗體抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）抗平滑肌抗體抗角蛋白抗體抗肝腎微粒體抗體抗肝細(xì)胞膜抗原抗體抗可溶性肝抗原抗體抗肝特異性蛋白抗體第三十六頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（胞漿型）cANCA熒光模式：猴肝：肝血竇區(qū)粒細(xì)胞強(qiáng)熒光，而肝細(xì)胞陰性。甲醛固定的中性粒細(xì)胞：胞漿內(nèi)粗大到細(xì)的熒光顆粒。第三十七頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（胞漿型）自身抗原：為絲氨酸蛋白酶-蛋白酶3（PR3）。該靶抗原為可溶性蛋白，存在于正常中性粒細(xì)胞的嗜苯胺藍(lán)顆粒中。臨床意義：cANCA可見(jiàn)于多種系統(tǒng)性血管炎。主要見(jiàn)于Wengener’s肉芽腫，約占ANCA陽(yáng)性率的80~95%。cANCA被認(rèn)為是活動(dòng)性Wengener’s肉芽腫和微多動(dòng)脈炎的特異和敏感的標(biāo)志性抗體。還見(jiàn)于Churg-Strauss綜合征。第三十八頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（核周型）pANCA熒光模式：乙醇固定的中性粒細(xì)胞：細(xì)胞核周圍平滑的帶狀熒光，細(xì)胞核陰性。猴肝：肝血竇區(qū)粒細(xì)胞強(qiáng)熒光，而肝細(xì)胞陰性。第三十九頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（核周型）自身抗原：主要抗原為髓過(guò)氧化物酶（MPO），其他抗原還有白細(xì)胞彈性蛋白酶，組織蛋白酶G、溶菌酶及乳鐵蛋白等。臨床意義：見(jiàn)于多種系統(tǒng)性血管炎?？梢?jiàn)于Wengener’s肉芽腫、微多動(dòng)脈炎、Churg-Strauss綜合征、炎性腸病、自免肝、系統(tǒng)性風(fēng)濕?。≧A、SLE、SS、PM/DM）。第四十頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗平滑肌抗體（SMA）熒光模式：大鼠胃組織，呈現(xiàn)肌膜、黏膜肌層和肌膜腺體間收縮纖維的明顯細(xì)胞漿熒光。大鼠腎組織，腎小管細(xì)胞內(nèi)原纖維、腎小球膜細(xì)胞及血管肌層的熒光。第四十一頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗平滑肌抗體（SMA）自身抗原：主要的靶抗原為肌動(dòng)蛋白，肌動(dòng)蛋白可以單體（G-肌動(dòng)蛋白）或聚合體（F-肌動(dòng)蛋白）形式存在于微絲中，F(xiàn)-肌動(dòng)蛋白自身抗原與自免肝關(guān)系密切，而G-肌動(dòng)蛋白自身抗原則與酒精性肝硬化有關(guān)。臨床意義：見(jiàn)于自身免疫性肝炎、PBC、酒精性肝硬化。第四十二頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗角蛋白抗體（AKA）熒光模式：大鼠食管，僅限于上皮角質(zhì)層的較強(qiáng)的線性分層的均質(zhì)熒光。第四十三頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗角蛋白抗體（AKA）自身抗原：絲聚蛋白（filaggrin）為AKA的靶抗原。臨床意義：見(jiàn)于RA，陽(yáng)性率36~59%，特異性95~99%。還是一個(gè)潛在的預(yù)后標(biāo)志，高抗體滴度可能預(yù)示著較嚴(yán)重的RA類型。第四十四頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗肝腎微粒體抗體（LKM）有三種熒光模式：LKM-1：肝細(xì)胞胞漿明顯熒光，呈細(xì)顆粒到均質(zhì)狀，腎臟近近端腎小管有熒光。LKM-2：門靜脈周圍的肝組織熒光比其他部位強(qiáng)，腎臟近近端腎小管有熒光。LKM-3：肝和腎均為陰性，靈長(zhǎng)類睪丸間質(zhì)細(xì)胞熒光明顯。第四十五頁(yè)，共五十二頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗肝腎微粒體抗體（LKM）自身抗原：LKM-1：細(xì)胞色素P450ⅡD6，為50KD蛋白。LKM-2：細(xì)胞色素P450同工酶，藥物替尼酸的結(jié)合部位LKM-3：UDP葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶，為55KD蛋白。臨床意義：自免肝按血清學(xué)分型可