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文檔簡介
實驗二植物染色體核型分析一、實驗目的:了解什么是核型分析;知道核型分析的方法;了解染色體的形態(tài)結構;學習染色體組分析的工藝,掌握染色體組分析的方法。熟悉染色體組型分析中的各項指標。二、實驗原理:各物種染色體的形態(tài)、數目和結構是相對穩(wěn)定的。核型分析就是研究一個物種細胞核內染色體的數目及各染色體的形態(tài)特征,如:對染色體的長度、著絲點位置、臂比和隨體有無進行觀察,從而描述和闡明該生物的染色體組成,為細胞遺傳學、分類學和進化遺傳學等研究提供實驗依據。細胞有絲分裂中期的染色體具有較典型的特征且易于計數,因而核型分析大多以這一時期進行觀察二、實驗原理:染色體組通常是指生物體細胞染色體所有可測定的表型特征的總稱,包括染色體的總數,染色體組的數目,組內染色體基數、每條染色體大小、形態(tài)等。它是物種特有的染色體信息之一,具有很高的穩(wěn)定性和再現性。染色組型分析是對染色體進行分組,對核型的各種特征進行定量和定性的描述,如對染色體長度、著絲點位置、臂比和隨體有無等。為細胞遺傳學、分類學和進化遺傳學等研究提供實驗依據。三、實驗材料:蠶豆、洋蔥、蛙、小白鼠等有絲分裂中期標本和顯微攝影所得放大照片。要求染色體分散良好,無重疊或重疊很少,著絲粒、隨體等形態(tài)清晰可辨。四、實驗用具藥品1.儀器用具:顯微鏡(附攝影裝置)、冰箱、恒溫水浴鍋、135膠卷、載玻片、蓋玻片、剪刀、漿糊、鑷子、白紙、解剖針、刀片及毫米尺。2.藥品試劑:無水酒精、70%酒精、冰乙酸、堿性品紅、苯酚、甲醛、山梨醇、對二氯苯、1N鹽酸、0.05%秋水仙堿。五、實驗步驟:(以大麥2n=14為例)種子萌發(fā)和取材:大麥種子置于培養(yǎng)皿內濕濾紙上,25℃恒溫箱中,根長2—3cm切取。預處理:a、幼根放在蒸餾水中,置0—4℃冰箱中處理20小時;b、幼根用0.05%秋水仙溶液處理7小時;固定:新配的材料用卡諾氏固定液固定24小時后,放入70%乙醇中置于冰箱中備用。解離:蒸餾水清洗后,放于1N鹽酸中,60℃恒溫水浴10分鐘。染色和壓片:鏡檢:五、實驗步驟:染色體照片的測量和對比:測量:依次測量染色體相對長度,長臂和短臂的長度和臂比(長臂/短臂)配對:剪下染色體,根據隨體有無及大小、臂比是否相等、染色體長度是否相等來配對;排列:染色體長的在前,帶隨體的染色體排在最后(大隨體在前,小隨體在后)五、實驗步驟:染色體照片的測量和對比:剪貼:將上述染色體按順序粘貼在實驗報告上,粘貼時,應使著絲點處于同一水平線上,一律短臂在上,長臂在下,構成核型圖。要求:染色體從大到小,短臂向上,長臂向下,各染色體著絲粒排在同一直線上。有特殊標記的染色體(如含有隨體的)及性染色體可單獨排列。編號123456……絕對長度(μm)相對長度短臂(μm)長臂(μm)臂比著絲粒指數隨體有無染色體類型Totallength:μm
P217染色體類型由臂比值確定。Totallength:μm
P217染色體類型由臂比值確定。臂比(長臂/短臂)形態(tài)特征1-1.7m中著絲粒染色體1.71-3.0sm
近中著絲粒染色體3.01-7.0st
近端著絲粒染色體>7.01t端著絲粒染色體核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之染色體自動核型分析系統(tǒng)核型分析之教師用圖片1-132-93-7
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