DB13T 5688-2023蜜蜂微孢子蟲病綠色防治技術(shù)規(guī)程

ICS65.020CCSB16河北省地13方標(biāo)準(zhǔn)DBT023河北省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布前言河北省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出?？刂浦行?。軍、郭偉婷、張艷紅、杜義明、劉旭東、孫繼強(qiáng)、姚慧敏、謝峰、馬麗榮、路偉、張晨、賈二國(guó)、蜜蜂微孢子蟲病綠色防治技術(shù)規(guī)程適用于蜜蜂微孢子蟲病癥狀、形態(tài)及分子生物學(xué)診斷和綜合防治。范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用GBT9168蜜蜂病蟲害綜合防治規(guī)范SNT3蜜蜂微孢子蟲病診斷方法OIE物衛(wèi)生法典定義是一種侵染成年蜜蜂中腸上皮細(xì)胞引起蜜蜂發(fā)病的致病性真菌，包括蜜蜂微孢子蟲和東方蜜蜂種。指為殺滅包括蜜蜂疫病病原體或寄生蟲而采取的一種措施，適用于可能被直接或間接污染的場(chǎng)指系統(tǒng)而持續(xù)地收集、整理和分析與蜜蜂微孢子蟲病有關(guān)的信息，并及時(shí)向相關(guān)人士傳遞信息4蜜蜂微孢子蟲病綠色防治技術(shù)防治技術(shù)流程圖(如圖1)：程圖診斷與鑒定5.1診斷流程當(dāng)觀察到蜂群出現(xiàn)典型癥狀時(shí)，應(yīng)遵循先通過個(gè)體癥狀觀察初步確診，再取樣后通過顯微鏡鑒.2癥狀2.1蜂群癥狀.2.1.1急性重癥感染變深現(xiàn)象；5.2.1.2輕度感染.2.2蜜蜂個(gè)體癥狀后可通過如下癥狀進(jìn)行初步判斷。b型癥狀的蜜蜂腹部末端夾出中腸及后腸仔細(xì)觀察，健康蜜蜂中腸呈棕色，5.3實(shí)驗(yàn)室鑒定.3.1顯微鏡鑒定.3.1.1樣品處理，分離腹部置于研缽中，加入5mL~10mL蒸餾水研磨。取研磨的組織涂片，在明場(chǎng)或相差光學(xué)顯微鏡下以400~600倍進(jìn)行檢查。.3.1.2鑒定5.3.1.2.1初診mmmm的孢子，邊界折光明顯，則可初步確5.3.1.2.2鑒別SNT脂肪體或馬氏管變形蟲囊包進(jìn)行鑒別。見表1：DNA液配方sANaCl沖液最終用ddH2O將pH值調(diào)至8.0標(biāo)引序號(hào)說明:R5.3.2.3擴(kuò)增產(chǎn)物的分離與鑒定5.3.2.4診斷結(jié)果與辨別孢子蟲病原及種類：p.4取樣.4.1取樣數(shù)量采集的樣品具有代表性，應(yīng)按以下標(biāo)準(zhǔn)確定樣品數(shù)量。.4.2取樣方法應(yīng)分別遵循如下方法采集樣品。ab時(shí)，隨機(jī)選取蜂群并隨機(jī)提取群內(nèi)1張巢脾，隨機(jī)抓取脾上的成.4.3樣品保存養(yǎng)蜂場(chǎng)場(chǎng)址選擇GBT191683.1蜂場(chǎng)場(chǎng)址的選擇給出的要求進(jìn)行選擇。飼養(yǎng)管理飼料.1春繁飼料春繁期飼喂蜂蜜花粉時(shí)，不使用來歷不明的花粉，飼喂前應(yīng)對(duì)花粉進(jìn)行不少于20min的蒸汽消1.2越冬飼料a)飼喂越冬飼料前應(yīng)對(duì)飼料進(jìn)行顯微鏡檢查，如巢脾中的蜂蜜或花粉中發(fā)現(xiàn)有微孢子蟲則應(yīng)料進(jìn)行消毒；b)補(bǔ)飼選擇蜂蜜或白糖，白糖需要高溫溶解；c)越冬飼料的儲(chǔ)備量，視群勢(shì)強(qiáng)弱與越冬期長(zhǎng)短貯備蜜脾。預(yù)防消毒a)養(yǎng)蜂器具：春繁前應(yīng)對(duì)養(yǎng)蜂器具進(jìn)行修整，巢框、巢脾及起刮刀等養(yǎng)蜂器具用2%~3%氫氧inb)巢脾、蜂箱：長(zhǎng)期保存的巢脾應(yīng)置于空蜂箱中，蜂箱應(yīng)整齊疊放并將所有縫隙密封，然后監(jiān)測(cè)每年從去除越冬包裝開始，直至下次越冬包裝前，應(yīng)至少每3個(gè)月對(duì)蜂群進(jìn)行1次蜜蜂微孢子蟲病的病原監(jiān)測(cè)，定量調(diào)查蜂群受感染程度。根據(jù)上兩個(gè)年度的監(jiān)測(cè)記錄及當(dāng)前監(jiān)測(cè)結(jié)果隨時(shí)調(diào)整本控措施。防治預(yù)防治療附錄A(規(guī)范性)er362注1：3對(duì)引物的正負(fù)引物各1μL注2：反應(yīng)體系15μLA.2引物序列A及擴(kuò)增產(chǎn)物信息rwardPrimerrsePrimer(bp)(NosemaCeranae)CGATGTGATATGAAAATATTAACATTCTCAAACAAAAAACCG(NosemaApis)CATGTCTTTG