無(wú)菌保證工藝

無(wú)菌保證工藝第一頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三一、前言二、無(wú)菌保證工藝選擇的原則三、無(wú)菌保證工藝驗(yàn)證要求四、申報(bào)資料要求五、總結(jié)第二頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三一、前言注射劑無(wú)菌保證工藝

是指為實(shí)現(xiàn)規(guī)定的無(wú)菌保證水平所采取的經(jīng)過(guò)充分驗(yàn)證后的滅菌（無(wú)菌）生產(chǎn)工藝。

第三頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三一、前言

無(wú)菌安全的藥害事件

“欣弗”事件—-無(wú)菌檢查的局限性

滅菌產(chǎn)品的無(wú)菌保證不能依賴于最終產(chǎn)品的無(wú)菌檢驗(yàn)，而是取決于生產(chǎn)過(guò)程中采用合格的滅菌工藝、嚴(yán)格的GMP管理和良好的無(wú)菌保證體系第四頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三

《注射劑無(wú)菌保證工藝研究及評(píng)價(jià)的原則要求》

2007年8月14日國(guó)家藥審中心正式印發(fā)并上網(wǎng)公布國(guó)食藥監(jiān)注[2008]7號(hào)關(guān)于發(fā)布化學(xué)藥品注射劑和多組分生化藥注射劑基本技術(shù)要求的通知明確要求進(jìn)行制備工藝研究包括：制備工藝的選擇工藝參數(shù)的確定工藝的驗(yàn)證

注射劑滅菌工藝及其驗(yàn)證一、前言第五頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三一、前言現(xiàn)行法規(guī)要求

《藥品注冊(cè)管理辦法》（局令第28號(hào)）附件2申報(bào)資料項(xiàng)目8制劑處方及工藝的研究資料及文獻(xiàn)資料：應(yīng)包括起始物料、處方篩選、生產(chǎn)工藝及驗(yàn)證資料第六頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三一、前言

共識(shí)--無(wú)菌保證工藝的研究與驗(yàn)證

是確保無(wú)菌制劑達(dá)到無(wú)菌要求的重要措施是無(wú)菌制劑質(zhì)量控制研究的重要組成部分第七頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三二、無(wú)菌保證工藝選擇的原則（一）與產(chǎn)品無(wú)菌保證相關(guān)的影響因素

環(huán)境廠房、設(shè)備

原材料（原輔料、包裝材料）無(wú)菌保證工藝生產(chǎn)過(guò)程控制人員衛(wèi)生（無(wú)菌環(huán)境中人是最大的污染源）第八頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三（二）不同滅菌方式的無(wú)菌保證水平

中國(guó)藥典、美國(guó)藥典、歐洲藥典都將最終滅菌產(chǎn)品的無(wú)菌保證水平規(guī)定為微生物污染概率不超過(guò)百萬(wàn)分之一；采用無(wú)菌生產(chǎn)工藝的產(chǎn)品，其無(wú)菌保證水平為微生物污染概率不超過(guò)千分之一凡是可以最終滅菌的產(chǎn)品務(wù)必要最終滅菌第九頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三

滅菌工藝的選擇濕熱滅菌法干熱滅菌法除菌過(guò)濾法環(huán)氧乙烷滅菌法輻射滅菌法第十頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三滅菌工藝的選擇濕熱滅菌是首選的滅菌方法按產(chǎn)品的熱穩(wěn)定性分為二種過(guò)度殺滅法殘存概率法第十一頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三無(wú)菌藥品常用滅菌工藝的比較類別Fo值微生物存活概率要點(diǎn)說(shuō)明過(guò)度殺滅法Fo≥12≤10-6熱穩(wěn)定產(chǎn)品以殺滅微生物作為實(shí)現(xiàn)無(wú)菌的手段殘存概率法8<Fo<12≤10-6熱穩(wěn)定性較差產(chǎn)品工藝過(guò)程將防止產(chǎn)品被耐熱菌污染放在首位而不是依賴最終滅菌去消除污染流通蒸汽法不計(jì)算Fo≤10-3熱不穩(wěn)定產(chǎn)品加熱是除菌過(guò)濾的補(bǔ)充手段除菌過(guò)濾法不大于10-3不能加熱的產(chǎn)品不能除去病毒、支原體等微生物依賴于無(wú)菌生產(chǎn)工藝是否嚴(yán)格按照藥品GMP的要求進(jìn)行生產(chǎn)與驗(yàn)證

第十二頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三影響濕熱滅菌效果的因素待滅菌產(chǎn)品中含有微生物的種類和數(shù)量待滅菌產(chǎn)品的包裝形式待滅菌產(chǎn)品的裝載方式和裝載數(shù)量濕熱滅菌工藝條件濕熱滅菌設(shè)備第十三頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三（三）歐盟滅菌方法選擇的決策樹(shù)歐盟1999年8月正式開(kāi)始執(zhí)行滅菌方法選擇的決策樹(shù)決策樹(shù)的作用是在考慮各種復(fù)雜因素的情況下輔助選擇最佳的滅菌方法第十四頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三第十五頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三第十六頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三決策樹(shù)越往下，風(fēng)險(xiǎn)越大需要提供的必要證據(jù)越多第十七頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三基本原則:無(wú)菌產(chǎn)品應(yīng)在灌裝到最終容器后進(jìn)行最終滅菌（首選）如因產(chǎn)品對(duì)熱不穩(wěn)定不能進(jìn)行最終滅菌時(shí)，可采用最終滅菌方法的替代方法--過(guò)濾除菌和/或無(wú)菌生產(chǎn)工藝（退而求其次）第十八頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三同時(shí)明確如下要求：無(wú)菌藥品生產(chǎn)企業(yè)，首先應(yīng)根據(jù)特定的處方選擇最佳的滅菌方法，然后再選擇包裝材料使用熱不穩(wěn)定的包裝材料不能作為選擇無(wú)菌生產(chǎn)工藝的理由因其他因素選擇的包裝容器不能進(jìn)行最終滅菌，藥品生產(chǎn)企業(yè)仍有責(zé)任不斷尋找可接受的替代容器，使得產(chǎn)品可以在可接受的時(shí)間范圍內(nèi)采用最終滅菌的方法

任何商業(yè)考慮均不能作為不使用具有最高無(wú)菌保證水平的最終滅菌方法的理由第十九頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三三、無(wú)菌保證工藝研究及驗(yàn)證要求（一）注射劑劑型選擇的原則（二）無(wú)菌保證工藝研究及驗(yàn)證的技術(shù)要求第二十頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三（一）注射劑劑型選擇的原則注射劑：大容量注射劑（50ml以上）小容量注射劑（20ml以下）粉針劑（凍干、無(wú)菌分裝）

不同劑型采用的滅菌工藝可能不同，進(jìn)而會(huì)影響產(chǎn)品的SAL（無(wú)菌保證水平），因此，在評(píng)價(jià)無(wú)菌保證工藝時(shí)，首先應(yīng)評(píng)價(jià)劑型選擇的合理性

注射劑型選擇合理性的考慮要素：

主藥的穩(wěn)定性和制劑的無(wú)菌保證水平第二十一頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三

首先考慮所選劑型采用滅菌工藝的無(wú)菌保證水平首選劑型能采用最終滅菌工藝（F0≥8），SAL≥6如有充分依據(jù)證明不適宜采用最終滅菌工藝且臨床必需的品種，可考慮選擇采用無(wú)菌生產(chǎn)工藝的劑型。通常無(wú)菌生產(chǎn)工藝僅限于粉針劑或部分小容量注射劑大容量注射劑、小容量注射劑和粉針劑之間互改，如無(wú)充分的依據(jù)，所改劑型的無(wú)菌保證水平不得低于原劑型第二十二頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三無(wú)菌保證工藝的選擇研究

無(wú)菌保證工藝的驗(yàn)證要求---最終滅菌工藝的驗(yàn)證---無(wú)菌生產(chǎn)工藝的驗(yàn)證容器系統(tǒng)的密封性驗(yàn)證（二）無(wú)菌保證工藝研究及驗(yàn)證的技術(shù)要求第二十三頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三無(wú)菌保證工藝的選擇研究---為選擇滅菌工藝進(jìn)行的研究

包括：主藥穩(wěn)定性研究主藥穩(wěn)定性影響因素分析控制影響主藥穩(wěn)定性的內(nèi)因和外因?yàn)榕袛鄿缇に噷?duì)產(chǎn)品質(zhì)量的影響，應(yīng)進(jìn)行滅菌前后產(chǎn)品質(zhì)量對(duì)比的研究

第二十四頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三無(wú)菌保證工藝的驗(yàn)證要求基本概念：F0值--標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間SAL--無(wú)菌保證水平SAL＝F0/D121

–lgN0N0：滅菌前染菌量D121：121℃微生物殘存率為10％時(shí)所需的滅菌時(shí)間SAL：產(chǎn)品經(jīng)滅菌后微生物殘存概率的負(fù)對(duì)數(shù)SAL與F0值有關(guān)，還與染菌量及所染菌的耐熱性有關(guān)第二十五頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三注意：污染菌在不同產(chǎn)品中耐熱性可能不同eg:嗜熱脂肪芽孢桿菌常規(guī)D值在1.5-3.0分鐘在復(fù)方氨基酸注射液中的D值為0.8分鐘左右在30％的葡萄糖溶液中的D值為2.2分鐘第二十六頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三最終滅菌工藝的驗(yàn)證要求最終滅菌工藝：過(guò)度殺滅法（F0≥12）殘存概率法（8≤F0＜12）目標(biāo)：滅菌后的微生物殘存概率＜10-6

第二十七頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三過(guò)度殺滅法殘存概率法適用范圍主藥熱穩(wěn)定性好主藥熱穩(wěn)定性較好目標(biāo)防止產(chǎn)品被耐熱菌污染，保證SAL大于6適度滅菌，同時(shí)控制污染原理所采用的滅菌條件下可保證D121＝1分鐘的微生物下降12個(gè)對(duì)數(shù)（即F0≥12）根據(jù)所染菌的數(shù)量及耐熱性來(lái)確定滅菌溫度和時(shí)間過(guò)程控制一般無(wú)需進(jìn)行微生物負(fù)荷的測(cè)定需進(jìn)行微生物負(fù)荷量測(cè)定及污染菌的耐熱性測(cè)定第二十八頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三工藝驗(yàn)證要求：過(guò)度殺滅法和殘存概率法均應(yīng)進(jìn)行工藝驗(yàn)證驗(yàn)證內(nèi)容：空載熱分布滿載熱分布熱穿透試驗(yàn)

微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)（殘存概率法）滅菌前微生物污染水平---數(shù)量和耐熱性---過(guò)程控制第二十九頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三空載熱分布試驗(yàn)－找出冷點(diǎn)多個(gè)溫度探頭均勻/重點(diǎn)分布在腔室內(nèi)，重復(fù)運(yùn)行代表性滅菌程序，記錄各點(diǎn)溫度變化曲線，計(jì)算各點(diǎn)溫差通過(guò)比較各點(diǎn)溫度與平均溫度的差異確定冷點(diǎn)滿載熱分布試驗(yàn)－找出裝載方式下的冷點(diǎn)以空載試驗(yàn)結(jié)果為基礎(chǔ)更接近實(shí)際情況以上試驗(yàn)通常要求重復(fù)運(yùn)行三次第三十頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三

熱穿透試驗(yàn)－測(cè)定產(chǎn)品實(shí)際溫度和F0值以熱分布（空載、滿載）試驗(yàn)結(jié)果為基礎(chǔ)，進(jìn)一步確定實(shí)際樣品（或模擬樣品）的冷點(diǎn)（與平均溫度差超過(guò)1.5度為冷點(diǎn)）重要標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品中F0MEAN±3SD符合注冊(cè)F0值標(biāo)準(zhǔn)第三十一頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三注意：同品種不同濃度—考察不同濃度對(duì)熱穿透的影響不同包裝規(guī)格—進(jìn)行最大和最小包裝規(guī)格的試驗(yàn)不同裝載量—進(jìn)行最小和最大裝載量的試驗(yàn)不同滅菌溫度—進(jìn)行最高溫度條件下的試驗(yàn)第三十二頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)證明通過(guò)該工藝能殺滅一定污染量和D值的微生物生物指示劑根據(jù)D值計(jì)算接種量植入芽孢的產(chǎn)品放在冷點(diǎn)部位運(yùn)行滅菌程序后含芽孢的產(chǎn)品應(yīng)通過(guò)無(wú)菌檢查第三十三頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三空載、滿載熱分布試驗(yàn)---考察滅菌設(shè)備的特性和狀況熱穿透和微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)---考察滅菌設(shè)備在執(zhí)行特定滅菌工藝時(shí)賦予產(chǎn)品的F0值，以及對(duì)微生物孢子的實(shí)際殺滅效果第三十四頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三無(wú)菌生產(chǎn)工藝的驗(yàn)證要求無(wú)菌生產(chǎn)工藝：過(guò)濾除菌＋無(wú)菌生產(chǎn)工藝無(wú)菌組裝工藝第三十五頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三選擇無(wú)菌生產(chǎn)工藝的前提：同品種均未采用最終滅菌工藝經(jīng)過(guò)深入的研究（化學(xué)反應(yīng)機(jī)理、窮盡方法并證明在合理的技術(shù)條件下無(wú)法有效阻止化學(xué)反應(yīng)的發(fā)生）臨床需要注射劑型第三十六頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三最終滅菌工藝與無(wú)菌生產(chǎn)工藝的差異最終滅菌工藝－以控制微生物污染量為目的嚴(yán)格原輔料微生物標(biāo)準(zhǔn)控制微生物污染，制定滅菌前微生物污染水平限度標(biāo)準(zhǔn)控制藥液存放溫度和時(shí)間藥液取樣、污染菌的鑒別第三十七頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三無(wú)菌生產(chǎn)工藝－以防止污染為目的，消除后續(xù)導(dǎo)致二次污染的各種可能性對(duì)進(jìn)入無(wú)菌區(qū)的物料充分滅菌，消除污染源所有接觸經(jīng)除菌過(guò)濾的藥液的設(shè)備都經(jīng)過(guò)清潔和滅菌驗(yàn)證避免人員直接接觸除菌后的藥液、容器防止人員活動(dòng)干擾層流第三十八頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三過(guò)濾除菌＋無(wú)菌生產(chǎn)工藝凍干粉針劑

小容量注射劑除菌工藝步驟—0.22μm(或更?。V膜過(guò)濾第三十九頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三工藝驗(yàn)證要求：---培養(yǎng)基模擬灌裝試驗(yàn)對(duì)生產(chǎn)系統(tǒng)的驗(yàn)證---除菌過(guò)濾系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)包括過(guò)濾系統(tǒng)相容性測(cè)試、過(guò)濾前后濾膜完整性測(cè)試、濾膜的微生物截留量測(cè)試第四十頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三小容量注射劑和凍干粉針劑驗(yàn)證項(xiàng)目差異不同劑型驗(yàn)證項(xiàng)目小容量注射劑凍干粉針劑過(guò)濾系統(tǒng)驗(yàn)證需要需要培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證驗(yàn)證至灌裝結(jié)束除灌裝外，尚包括部分凍干程序，目的是尚要考察凍干區(qū)域的裝載和卸載過(guò)程第四十一頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三無(wú)菌組裝工藝嚴(yán)格執(zhí)行藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）是無(wú)菌粉針劑生產(chǎn)的重要質(zhì)量保證生產(chǎn)工藝的控制和驗(yàn)證要求對(duì)不同的無(wú)菌組裝產(chǎn)品是一致的工藝驗(yàn)證：培養(yǎng)基灌裝驗(yàn)證無(wú)菌原料藥，精、烘、包需在百級(jí)環(huán)境下進(jìn)行無(wú)菌輔料的技術(shù)要求與無(wú)菌原料藥一致第四十二頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三四、申報(bào)資料要求

按照《藥品注冊(cè)管理辦法》，申報(bào)資料需提供生產(chǎn)工藝及驗(yàn)證資料生產(chǎn)工藝研究與驗(yàn)證內(nèi)容的完整體現(xiàn)生產(chǎn)工藝技術(shù)評(píng)價(jià)的重要試驗(yàn)依據(jù)批準(zhǔn)前檢查、現(xiàn)場(chǎng)核查等監(jiān)管的檔案依據(jù)

第四十三頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023年，星期三無(wú)菌保證工藝研究及驗(yàn)證資料的格式和內(nèi)容簡(jiǎn)述無(wú)菌保證工藝，以及用到的滅菌設(shè)備、原理和型號(hào)（一）原輔料、藥包材的來(lái)源及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（二）原輔料、藥包材的準(zhǔn)備：原輔料的預(yù)處理、直接接觸藥品的內(nèi)包裝材料等的清洗、滅菌等。（三）無(wú)菌保證工藝研究與驗(yàn)證試驗(yàn)的過(guò)程及結(jié)果（四）結(jié)論（五）再驗(yàn)證（擬進(jìn)行再驗(yàn)證的時(shí)間和內(nèi)容）第四十四頁(yè)，共四十九頁(yè)，編輯于2023