生物學(xué)活性檢測_第1頁
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生物學(xué)活性檢測第一頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三2023/6/12第二頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三2023/6/12第三頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三2023/6/12第四頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三1.生物學(xué)活性檢測必要性藥品有效性必須是療效確切，且含有特定的有效活性成分和一定濃度含量凡是不能用理化方法測定其含量或有效成分或雖有理化方法測定但不能真實(shí)反映臨床實(shí)際應(yīng)用價值的藥物效價測定，可用生物測定法進(jìn)行測定生物學(xué)活性測定是生物測定的重要內(nèi)容2023/6/12第五頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三2.生物技術(shù)藥物的生物學(xué)活性檢測方法體內(nèi)：動物模型分析體外：細(xì)胞（組織、器官）培養(yǎng)分析酶促反應(yīng)法、免疫學(xué)法（體外）2023/6/12第六頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三

蛋白藥物的細(xì)胞學(xué)活性檢測原理：相同條件下通過實(shí)驗(yàn)組與對照組對特定細(xì)胞生理或生存狀況的影響程度來判斷藥物的活性例：抗腫瘤藥物活性檢測2023/6/12第七頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三例：抗腫瘤藥物細(xì)胞學(xué)活性檢測腫瘤細(xì)胞（對數(shù)期）胰蛋白酶處理細(xì)胞懸液稀釋96孔板培養(yǎng)24h實(shí)驗(yàn)組、對照組設(shè)置培養(yǎng)4~5d棄去上清液加MTT，37℃繼續(xù)培養(yǎng)4

h小心棄上清，加

DMSO37℃繼續(xù)培養(yǎng)4

h測定光密度值腫瘤細(xì)胞生長抑制率％＝(1-

OD實(shí)驗(yàn)/OD對照)

×100％

在酶標(biāo)儀上以實(shí)驗(yàn)波長為570

nm，參比波長為450

nm2023/6/12第八頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三細(xì)胞培養(yǎng)分析優(yōu)點(diǎn)：時間較短（1~3d）成本低、重復(fù)性好缺點(diǎn)：不精確如：MTT顯色反應(yīng)2023/6/12第九頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三酶促反應(yīng)、免疫學(xué)法優(yōu)點(diǎn)：簡單、靈敏、快速、精確缺點(diǎn)：不一定反應(yīng)整體活性2023/6/12第十頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三3.藥物生物學(xué)活性檢測的意義

2023/6/12第十一頁，共十二頁，編輯于2023年，星期三

思考題:1.重組蛋白藥物的生物學(xué)活性檢測方法主要有哪些？2.抗腫瘤藥物細(xì)胞學(xué)活性檢測一般步驟？

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