2016-2017學年度生物技術實踐試題

2016-2017學年度生物技術實踐

學校:姓名：班級：考號：

一、選擇題

1.用涂布分離法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)，在對應稀釋倍數(shù)為IO'的培養(yǎng)基中，得

到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，其中正確的是（）

A.涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是230

B.涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是215和260,取平均值238

C.涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、212和256,取平均值163

D.涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210、240和256,取平均值235

2.下列能選擇出分解尿素的微生物的培養(yǎng)基是（）

A.NaCl、&HP。,、葡萄糖、尿素、瓊脂糖、水、酚紅

B.NaCkK2Hp八葡萄糖、瓊脂糖、水、酚紅

C.NaCl、K2HPO4、尿素、瓊脂糖、水

D.NaCl、DHPCh、牛肉膏、酵母提取物、瓊脂糖、水

3.細菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理，這些方

法依次用于殺滅哪些部位的雜菌（）

A.接種針、手、培養(yǎng)基B.高壓鍋、手、接種針

C.培養(yǎng)基、手、接種針D.接種針、手、高壓鍋

4.下列操作必需在嚴格無菌條件下進行的是（）

A.稱量牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基的各種成分

B.利用平板劃線法接種大腸桿菌

C.用酒精擦拭雙手

D.溶化牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基的各種成分

5.為了驗證土壤中的微生物可以分解淀粉，取兩只燒杯甲和乙，都放入等量的淀粉溶

液20mL,甲中加入30mL制備好的土壤浸出液，乙中放入等量的蒸儲水，在適宜的溫

度下放置7天。然后從甲中取出等量的溶液放入由、Az試管，從乙中也取出等量的溶液

放入試管R、B2,在由、BI中加入碘液，在A2和灰中加入斐林試劑并加熱。下列對該實

驗結(jié)果的預測正確的是（）

A.Ai和&都會有藍色出現(xiàn)，而且顏色深淺一致

B.A?有磚紅色沉淀出現(xiàn)，B?無磚紅色沉淀出現(xiàn)

C.A?和風都有磚紅色沉淀出現(xiàn)

D.以上結(jié)果都不正確

6.下列關于固定化酶和固定化細胞的敘述中，正確的是（）

A.溫度和pH值對固定化酶的活性沒有影響

B.作為消化酶使用，蛋白酶制劑以口服的方式給藥

C.尿糖試紙含有固定化的葡萄糖酶和過氧化氫酶，可以反復使用

D.固定化酶和固定化細胞相比，可以催化多步連續(xù)反應

7.小球藻可用于污水凈化，其繁殖能力（生長量）在一定程度上可以反映藻細胞消耗

N、P等的能力?？蒲腥藛T比較游離小球藻和用海藻酸鈉固定化后的小球藻生長量變化,

結(jié)果如右圖。相關敘述錯誤的是（）

A.本研究中固定化小球藻采用的方法是包埋法

B.實驗中可用CaCL浸泡凝膠珠使其形成穩(wěn)定結(jié)構(gòu)

C.結(jié)果表明固定化小球藻的生長期較短、生長速率低

D.使用固定化小球藻有利于重復使用且可避免水體二次污染

8.關于酶工程的敘述，正確的是（）

A.酶的分離提純要依次經(jīng)過過濾、層析、沉淀、提純等步驟

B.利用枯草桿菌生產(chǎn)的a-淀粉醐可用于降解水體中的某些污染物

C.加酶洗衣粉能提高去污能力是因為運用了酶的固定化技術

D.尿糖試紙中含有葡萄糖竣化前和過氧化氫醐

10.有關DNA聚合酶與RNA聚合酶的說法，不氐砸的是（）

A.均以DNA的兩條鏈作為模板

B.均可催化形成磷酸二酯健

C.均以氨基酸作為基本組成單位

D.催化生成的產(chǎn)物不相同

11.關于泡菜發(fā)酵的敘述，不正確的是（）

A.泡菜發(fā)酵過程中所產(chǎn)生的亞硝酸鹽有致癌性，攝入過多對身體會造成傷害

B.煮沸泡菜鹽水的目的是除去水中的氧氣和殺滅鹽水中的其他雜菌

C.制作泡菜利用的菌種是乳酸菌，其代謝類型為異養(yǎng)厭氧型

D.泡菜腌制時間過長，食鹽用量過低，溫度過高，都容易造成細菌大量滋生，亞硝酸

鹽含量增加

12.關于制作果酒和果醋實驗的敘述，正確的是（）

A.在變酸的果酒液面觀察到的菌膜，一般是醋酸菌大量繁殖形成的

B.酵母菌和醋酸菌的發(fā)酵過程均需在密閉的容器中進行

C.在果酒制作過程中無需接種酵母菌，只需控制適宜的溫度即可

D.果酒的酒精度越高，接種醋酸菌后得到的果醋酸度就越高

13.下列有關生物技術和工程的說法正確的是（）

A.細胞工程中所運用的技術都體現(xiàn)了細胞全能性原理

B.胚胎工程和基因工程都要利用細胞培養(yǎng)

C.用于制果酒、果醋和腐乳的微生物都含有線粒體

D.單克隆抗體的特點是能大量繁殖，產(chǎn)生專一抗體

14.恰當選擇實驗材料有助于獲得科學的結(jié)論，下列實驗材料的選擇不能達到實驗目的

的是

A.以病毒為材料探究培養(yǎng)液中其種群數(shù)量的變化

試卷第2頁，總6頁

B.以花生種子勻漿為材料檢測生物組織中的脂肪

C.以高等動物的睪丸為材料觀察細胞的有絲分裂

D.以兔的血液為材料進行血紅蛋白的提取和分離

15.下列有關植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（）

A、愈傷組織是一團有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細胞

B、二倍體植株的花藥經(jīng)植物組織培養(yǎng)后得到穩(wěn)定遺傳的植株

C、用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子

D、植物耐鹽突變體可通過添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得

二、綜合題

16.回答下列關于微生物和酶的問題.

高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性.研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫

淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如圖1所示.

圖1

明2

（1）嗜熱菌屬于古細菌，下列對嗜熱菌的描述正確的是（多選）

A.嗜熱菌因生活在極端環(huán)境下，故為古細菌

B.嗜熱菌的蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)能耐高溫，但不耐高壓

C.嗜熱菌對青霉素不敏感，原因是細胞壁的組成不同

D.嗜熱菌含有核糖體、線粒體等細胞器

（2）①過程稱為,②過程是為了.

（3）嗜熱菌屬于古細菌，下列對嗜熱菌的描述正確的是（多選）

A.嗜熱菌因生活在極端環(huán)境下，故為古細菌

B.嗜熱菌的蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)能耐高溫，但不耐高壓

C.嗜熱菌對青霉素不敏感，原因是細胞壁的組成不同

D.嗜熱菌含有核糖體、線粒體等細胞器

（4）①過程稱為,②過程是為了.

（5）I號培養(yǎng)基稱為（按功能分）；該培養(yǎng)基中除了加入淀粉外，還需加入另一

種重要的營養(yǎng)成分的是.

A.瓊脂B.葡萄糖C.硝酸筱D.碳酸氫鈉

（6）I號培養(yǎng)基和U號培養(yǎng)基圖采用了不用的接種方式，分別為、.一

般對配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌，其中“高壓”是為了.

在高溫淀粉酶運用到工業(yè)生產(chǎn)前，需對該酶的最佳溫度范圍進行測定.圖2中的曲線①

表示酶在各種溫度下酶活性相對最高酶活性的百分比.將酶在不同溫度下保溫足夠長的

時間，再在酶活性最高的溫度下測其殘余酶活性，由此得到的數(shù)據(jù)為酶的熱穩(wěn)定性數(shù)據(jù),

即圖2中的曲線②.

（7）根據(jù)圖2中的數(shù)據(jù)，判斷該酶使用的最佳溫度范圍是.

A.40r—50℃B.50℃—60℃

C.60℃—70℃D.70℃-80℃

（8）據(jù)圖2判斷下列敘述錯誤的是.

A.該酶只能在最佳溫度范圍內(nèi)測出活性

B.曲線②35℃數(shù)據(jù)點是在80℃時測得的

C.曲線①表明80℃是該酶活性最高的溫度

D.曲線②表明該酶的熱穩(wěn)定性在70C之后急劇下降.

17.某地是全國最適宜生產(chǎn)水果的生態(tài)區(qū)之一，生產(chǎn)的蘋果濃縮果汁酸度優(yōu)于其他地區(qū)

的蘋果，深受歐美市場歡迎，發(fā)展無病毒苗木成為建立高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)商品蘋果基地的重要措

施。

（1）下面是某地農(nóng)林科學院進行蘋果試管苗培養(yǎng)的一般過程：

請?zhí)顚慳、c所表示的內(nèi)容。a.___c.

（2）實驗室一般使用保存的培養(yǎng)基母液來制備MS固體培養(yǎng)基，配制母液時，無機物中

濃縮10倍，濃縮100倍。

（3）該過程中a、c的啟動關鍵在于培養(yǎng)基中所加生長素和細胞分裂素的濃度、

以及。

（4）醋酸桿菌是生產(chǎn)蘋果醋必用的菌種，可以從食醋中分離得到純化的醋酸桿菌。擴

大培養(yǎng)醋酸桿菌時，一般采用平板倒置培養(yǎng)，原因是

（5）在傳統(tǒng)發(fā)酵技術中，果醋的制作往往在果酒制作基礎上進行，請用相關反應式表

示：

18.廢紙主要成分是木質(zhì)纖維。左下圖是工業(yè)上利用廢紙生產(chǎn)乙醇的基本工作流程。回

答下列問題。

（1）自然界中①環(huán)節(jié)需要的微生物大多分布在（2分）的環(huán)境中。

②中獲得的酶是酶。

（2）若從土壤中分離出上述微生物，應以為唯一碳源的培養(yǎng)基進行培養(yǎng),

并加入形成紅色復合物進行篩選，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心

的。

（3）接種后一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如右上圖所示，推測接種時可能的操作失誤

是

（3分）。向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時，若試管口粘附有培養(yǎng)基，需要用酒精棉球

擦凈的原因是（2分）。

（4）生產(chǎn)中可以滿足④環(huán)節(jié)的常見菌種是。玉米秸稈中的纖維素經(jīng)充分水解后

的產(chǎn)物可為該微生物的生長提供。從玉米胚芽中提取的胚芽油不易揮發(fā)，

宜選用（2分）法從玉米胚芽中提取。

試卷第4頁，總6頁

19.某工廠生產(chǎn)了一種加酶洗衣粉，其包裝袋上印有如下部分說明。

①成分：含堿性蛋白酶等；②用法：洗滌前先將衣物浸于洗衣粉的水內(nèi)數(shù)小時。使用溫

水效果更佳；③注意：切勿用于絲質(zhì)及羊毛衣料。用后徹底清洗雙手。請回答以下問題:

⑴質(zhì)檢局針對該洗衣粉設計了如下裝置進行實驗：

涂上蛋白

膜的膠片

適宜溫度適宜溫度

該實驗的目的是O

⑵一學生為探索該洗衣粉中酶催化作用的最適溫度，參考上述⑴的實驗材料及方法進

行了有關實驗，并把結(jié)果以下列曲線圖A、B表示。

催

催

化

化

效

效

率

率

I、.7------i諒港----->,溫比

45七or45七45t75t45七

AB

①由圖可知，使用該加酶洗衣粉的最適宜溫度約為O

②在0℃和75℃時，酶的催化效率基本都降為零，但溫度再度回到45℃,后者的催化

作用已不能恢復，這是因為o

③該學生在實驗過程中可通過直接測定指標來表示酶的催化效率。

(3)加酶洗衣粉不能用于洗滌絲質(zhì)及羊毛衣料，其原因是o

20.牛等反芻動物的胃中含有大量的分解纖維素的微生物。我們可以利用這些微生物將

植物桔稈分解成可溶性糖類，從而實現(xiàn)碳能源的再利用。請回答相關問題：

(1)為了從牛胃中分離所需的微生物，可將纖維素作為唯一的加入培養(yǎng)基，依

物理性質(zhì)該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。

(2)常用法統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)量，統(tǒng)計結(jié)果一般用培養(yǎng)基中出現(xiàn)的數(shù)表

/JxO

(3)酵母菌在條件下可將可溶性糖發(fā)酵成酒精。同時我們可以采用法固

定酵母菌細胞，以降低生產(chǎn)成本。

(4)利用職務秸稈造紙時，常用易溶于有機溶劑的植物色素著色，人們采用法

提取植物色素，提取過程中要進行加熱，以防止有機溶劑遇明火易引起燃燒、爆

炸。

21.乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖，具有重要應用價值。乳糖酶的制備及

固定化步驟如下：

產(chǎn)乳郵微生產(chǎn)乳楣鞠生乳糖新的提取乳糖船的固定

4.

物L的篩選物L的培養(yǎng)純化化

(1)篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L時，宜用作為培養(yǎng)基中的唯一碳源。培養(yǎng)基中

瓊脂的作用是。從功能上講，這種培養(yǎng)基屬于。

(2)培養(yǎng)微生物L前，宜采用方法對接種環(huán)進行滅菌。

(3)純化后的乳糖酶可用電泳法檢測其分子量大小。在相同條件下，帶電荷相同的蛋

白質(zhì)電泳速度越快，說明其分子量越。

（4）乳糖酶宜采用化學結(jié)合法（共價鍵結(jié)合法）進行固定化，可通過檢測固化乳糖酶

的確定起應用價值。除化學結(jié)合法外，酶的固定化方法還包

括、、離子吸附法及交聯(lián)法等。

22.回答下列果酒和果醋制作的相關問題：

（1）果酒和果醋的制作分別利用了和（填微生物名稱）。由果酒

轉(zhuǎn)變成果醋的制作時，需要改變的環(huán)境條件是_______和_______,主要原因是

（答出兩點）。

（2）果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可用來檢驗，在酸性條件下呈現(xiàn)

色，證明有酒精產(chǎn)生。

（3）果酒制作時的葡萄是否需要滅菌？為什么？0

23.生物技術實踐與人們生產(chǎn)和生活密切相關。請分析并回答：

（1）無菌技術主要通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。常用的滅菌方法有滅菌、

干熱滅菌和—滅菌。

（2）在腐乳、泡菜制作過程中，需要氧氣的是，該過程中起主要作用的微生

物是o

（3）因為水中蒸儲會導致原料焦糊和有效成分等問題，所以橘皮精油的提取

一般采用法。而玫瑰精油的提取一般采用法。胡蘿卜素提取可以考慮

方法。

（4）進行菊花組織培養(yǎng)的基本實驗操作步驟是：制備、、接種、

培養(yǎng)、移栽、栽培。

24.請回答下列在生物技術實踐過程中，對某些實驗步驟的操作中的相關問題：

（1）在腐乳的制作時，用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用—消毒；在提取植

物細胞的DNA時，需要先用洗滌劑溶解—。

（2）葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮紅素和大量葡萄風味物質(zhì)等，這些物質(zhì)易溶

于乙醇、乙酸乙酯中，因此常采用法來分離提取，還可以用和_等提取植物芳

香油的方法。

（3）為了檢測某致病菌對于抗生素的敏感性，取該單菌落適當稀釋，接種于固體培養(yǎng)

基表面，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,使其均勻生長，布滿平板。將分別含有A,B,C三

種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含A的濾紙片周圍

出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A（填“敏感”或“不敏感”）；含B的

濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素B（填“敏感”或“不敏感”）；

含C濾紙片周圍的透明圈比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，在排除雜菌污染的

情況下，此菌落很可能是。

（4）用來判斷某選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇分解纖維素的細菌作用，要設置的對照是

（）

A.未接種的選擇培養(yǎng)基

B.未接種的牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基

C.接種了的牛肉膏蛋白膝培養(yǎng)基

D.接種了的選擇培養(yǎng)基

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參考答案

1.D

【解析】

試題分析：檢測土壤中細菌總數(shù)，可以看出采用的計數(shù)方法是稀釋涂布平板法進行計數(shù).用

稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)時，在每一個梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個平

板，選擇菌落數(shù)在30?300的進行記數(shù)，求起平均值，再通過計算得出土壤中細菌總數(shù).

解：用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)時，在每一個梯度濃度內(nèi)，至少要涂布

3個平板，確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30?300的進行記數(shù)，求其平均值，再通過計

算得出土壤中細菌總數(shù).

故選：D.

考點：測定某種微生物的數(shù)量.

2.A

【解析】

試題分析：1、微生物的培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分主要有碳源、氮源、水和無機鹽等.

2、微生物篩選的關鍵是選擇培養(yǎng)基的使用，通過選擇培養(yǎng)混合的微生物，僅得到或篩選出

所需要的微生物，其他不需要的種類在這種培養(yǎng)基上是不能生存的.篩選尿素分解菌的培養(yǎng)

基中必須使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，用酚紅指示劑進行鑒定.

解：A、該配方中尿素是唯一氮源，用酚紅指示劑鑒定尿素分解菌，A正確；

B、該配方缺少尿素為唯一氮源，B錯誤；

C、該配方缺少碳源C,錯誤；

D、該配方不是選擇培養(yǎng)基，不能篩選尿素分解菌，D錯誤.

故選：A.

考點：微生物的分離和培養(yǎng).

3.C

【解析】

試題分析：消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有

害的微生物.消毒方法有煮沸消毒法和巴氏消毒法，此外也使用化學試劑進行消毒，如用酒

精擦拭雙手等.滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽泡和抱

子.滅菌方法有灼燒滅菌（接種工具：接種環(huán)、接種針等）、干熱滅菌（如玻璃器皿）和高

壓蒸汽滅菌（培養(yǎng)基）.

解：高壓蒸汽氣滅菌鍋是滅菌的一個設備，通常用于培養(yǎng)基的滅菌；用酒精擦拭雙手是消毒

的一種方法；火焰灼燒，可以迅速徹底地滅菌，適用于微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種

環(huán)等金屬用具.

故選：C.

考點：微生物的分離和培養(yǎng).

4.B

【解析】

試題分析：微生物實驗的操作根據(jù)是無菌技術，防止外來雜菌的污染，所以實驗過程中要做

好消毒和滅菌.

解：A、稱量牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基的各種成分要求清潔和消毒，A錯誤；

B、利用平板劃線法接種大腸桿菌必需在嚴格無菌條件下進行，否則混入雜菌，不能提取到

目的菌，B正確；

C、用酒精擦拭雙手為清潔和消毒，C錯誤；

D、配制好的培養(yǎng)基還要進行滅菌，所以溶化牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基的各種成分無需滅菌，D

答案第1頁，總9頁

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錯誤.

故選：B.

考點：用大腸桿菌為材料進行平面培養(yǎng)，分離菌落.

5.B

【解析】據(jù)題意驗證土壤中的微生物可以分解淀粉，實驗處理中甲組因加入了土壤浸出液能

將淀粉分解為還原糖，能與斐林試劑反應出現(xiàn)磚紅色沉淀物，故A1是碘液的顏色A2有磚紅

色沉淀出現(xiàn)，乙組不能將淀粉分解B1應該呈藍色，B2是斐林試劑的顏色。故B正確。

【考點】植物組織中還原糖、淀粉的檢測

6.B

【解析】

試題分析：溫度和pH值會影響前的活性，對固定化酶的活性也有影響，A項錯誤；作為消

化酶使用，蛋白酶制劑外包一層糖衣，而胃液中沒有消化糖類的酶，因此蛋白酶制劑是在小

腸中發(fā)揮作用的，可以以口服的方式給藥，B項正確；試紙法檢測尿糖的原理是利用試紙上

的葡萄糖氧化酶將葡萄糖分解成葡萄糖酸和過氧化氫，過氧化氫又與試紙上的苯酚等無色物

質(zhì)反應形成紅色物質(zhì)，將其與標準比色卡比對，即可知道尿樣中葡萄糖的含量，因此尿糖試

紙不能反復使用，C項錯誤；固定化酶實質(zhì)上是將相應酶固定在不溶于水的載體上，實現(xiàn)酶

的反復利用，并提高酶穩(wěn)定性，酶的各項特性（如高效性、專一性和作用條件的溫和性）依

然保持，而固定化細胞技術固定的是一系列酶，所以在多步連續(xù)催化反應方面固定化細胞技

術優(yōu)勢明顯，D項錯誤。

考點：本題考查酶、固定化酶和固定化細胞的相關知識，意在考查考生能理解所學知識的要

點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)的能力。

7.C

【解析】海藻酸鈉固定化一般是包埋法，A正確；CaCL浸泡凝膠珠使其形成穩(wěn)定結(jié)構(gòu)，B正

確；固定化小球藻生長量更大，說明生長速率快，C錯誤；固定化小球藻有利于重復使用且

可避免水體二次污染，D正確。

【考點定位】制備和應用固相

【名師點睛】固定化酶技術和固定化細胞技術

①固定化酶技術的應用

a、固定化酶：固定化酶是指用物理學或化學的方法將酶與固相載體結(jié)合在一起形成的仍具

有酶活性的酶復合物.在催化反應中，它以固相狀態(tài)作用于底物，反應完成后，容易與水溶

性反應物和產(chǎn)物分離，可被反復使用.

b、制備固定化酶：目前，制備固定化酶的方法主要有吸附法、交聯(lián)法、包埋法等.吸附法

的顯著特點是工藝簡便且條件溫和，在生產(chǎn)實踐中應用廣泛；交聯(lián)法是利用多功能試劑進行

酶與載體之間的交聯(lián)，在酶和多功能試劑之間形成共價鍵，從而得到三維的交聯(lián)網(wǎng)架結(jié)構(gòu)；

包埋法是將酶包埋在能固化的載體中.

c、應用：固定化酶己被廣泛地應用在人們的日常生活、醫(yī)院、工業(yè)等方面.例如，固定化

酶在新型青霉素的生產(chǎn)中具有重要作用。

②固定化細胞技術的應用

a、固定化細胞技術：通過各種方法將細胞與一定的載體結(jié)合，使其仍保持原有的生物活性,

這一過程稱為細胞固定化。

b、細胞固定化的方法：

1'吸附法：是制備固定化動物細胞的主要方法，此法也可制備固定化植物細胞，它既可將

植物細胞吸附在泡沫塑料的大孔隙或裂縫之中，也可將植物細胞吸附在中空纖維的外壁上；

2’包埋法：是指將細胞包埋在多空載體的內(nèi)部而制成固定化細胞的方法.其中，凝膠包埋

答案第2頁，總9頁

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法是應用最廣泛的細胞固定化方法，它所使用的載體主要有瓊脂、海藻酸鈉凝膠、角叉菜膠、

明膠等.

C、固定化細胞技術的優(yōu)點：可以取代游離的細胞進行發(fā)酵，生產(chǎn)各種物質(zhì)。

8.B

【解析】層析是利用各組分物理性質(zhì)的不同，將多組分混合物進行分離及測定的

方法.層析后不需要沉淀，A錯誤；利用枯草桿菌生成的a-淀粉酶可用于降解

水體中的某些污染物，B正確；加酶洗衣粉能提高去污能力是利用酶的催化作用，

C錯誤；尿糖試紙中含有葡萄糖氧化酶和過氧化氫酶，D錯誤。

【考點定位】固相化酶的應用價值；制備和應用固相化酶

【名師點睛】本題主要考查酶工程的相關知識.

前工程就是將酶或者微生物細胞、動植物細胞、細胞器等在一定的生物反應裝置

中，利用酶所具有的生物催化功能，借助工程手段將相應的原料轉(zhuǎn)化成有用物質(zhì)

并應用于社會生活的一門科學技術.它包括酶制劑的制備，酶的固定化，酶的修

飾與改造及酶反應器等方面內(nèi)容.酶工程的應用，主要集中于食品工業(yè)，輕工業(yè)

以及醫(yī)藥工業(yè)中。

9.D

【解析】

試題分析：固定化酶和固定化細胞技術是利用物理或化學的方法將酶或細胞固定

在一定空間內(nèi)的技術，包括包埋法、化學結(jié)合法和物理吸附法.固定化酶優(yōu)點是

使前既能與反應物接觸，又能與產(chǎn)物分離，還可以被反復利用.在裝置中酶是固

定不動的，反應物是動的。

考點：本題考查制備和應用固定化酶，要求考生識記固定化酶的優(yōu)點、實例、操

作過程等基礎知識，能結(jié)合所學的知識作出準確的判斷，屬于考綱識記層次的考

查。

10.A

【解析】

試題分析：DNA聚合酶催化合成DNA時，以DNA分子兩條鏈為模板；RNA聚合酶催

化轉(zhuǎn)錄合成mRNA時，以DNA分子一條鏈為模板，A錯誤；由于磷酸與五碳糖是

通過磷酸二酯鍵相連，所以DNA聚合酶與RNA聚合酶都是通過形成磷酸二酯鍵逐

個連接上核甘酸，B正確；DNA聚合酶與RNA聚合酶的成分為蛋白質(zhì)，都以氨基酸作為

基本組成單位，C正確；DNA聚合酶催化合成DNA,RNA聚合酶催化轉(zhuǎn)錄合成mRNA,

D正確；

考點：本題考查DNA復制和轉(zhuǎn)錄及DNA聚合酶與RNA聚合酶的相關知識，意在考

查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題的能力。

11.D

【解析】

試題分析：制作泡菜所用微生物是乳酸菌，實驗原理：

(1)乳酸菌在無氧條件下，將糖分解為乳酸.

(2)利用乳酸菌制作泡菜的過程中會引起亞硝酸鹽的含量的變化.

溫度過高,食鹽用量不足10%、腌制時間過短，容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加.一

般在腌制10天后，亞硝酸鹽的含量開始下降.

(3)測定亞硝酸鹽含量的原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化

反應后，與N-1-蔡基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的標準顯色液目

測比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量.

答案第3頁，總9頁

本卷由系統(tǒng)自動生成，請仔細校對后使用，答案僅供參考。

解：A、泡菜發(fā)酹過程中所產(chǎn)生的亞硝酸鹽有致癌性，攝入過多對身體會造成傷害，A正確；

B、煮沸泡菜鹽水的目的是除去水中的氧氣和殺滅鹽水中的其他雜菌，B正確；

C、制作泡菜利用的菌種是乳酸菌，其代謝類型為異養(yǎng)厭氧型，C正確；

D、泡菜腌制時間過短，容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加，D錯誤.

故選：D.

考點：制作泡萊.

12.A

【解析】

試題分析：酵母菌是兼性厭氧微生物，酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，因此發(fā)酵條件

之一是無氧環(huán)境，醋酸菌是好氧菌，只有在有氧氣存在的條件下才能生長繁殖，因此發(fā)酵條

件之一是通入氧氣；果酒制作過程中菌種、溫度等條件會影響果酒的品質(zhì).

解：A、果酒表面與氧氣接觸，變酸的果酒液面觀察到的菌膜，一般是醋酸菌大量繁殖形成

的，A正確；

B、醋酸菌是好氧性細菌，發(fā)酵時需要氧氣，不能與酵母菌發(fā)酵制作果酒一樣在密閉的容器

中進行，B錯誤；

C、在果酒制作過程中為了提高果酒的品質(zhì)需要在果汁中加入人工培養(yǎng)的酵母菌菌種，C錯

誤；

D、過高濃度的酒精會對醋酸菌有毒害作用，因此不是果酒的酒精度越高，接種醋酸菌后得

到的果醋酸度就越高，D錯誤.

故選：A.

考點：酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋.

13.B

【解析】

試題分析：1、細胞工程分為植物細胞工程和動物細胞工程，植物細胞工程主要包括植物組

織培養(yǎng)和植物體細胞雜交技術，這兩者都能體細胞細胞全能性；動物細胞工程包括動物細胞

培養(yǎng)、動物細胞融合、核移植和單克隆抗體，這些都不能體現(xiàn)細胞的全能性.

2、參與果酒制作的微生物是酵母菌，屬于真核生物，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型；

參與果醋制作的微生物是醋酸菌，屬于原核生物，其代謝類型是異養(yǎng)需氧型；參與腐乳制作

的微生物是毛霉，屬于真核生物，其代謝類型為異養(yǎng)需氧型.

解：A、細胞工程中所運用的技術不都能體現(xiàn)細胞全能性原理，如動物細胞培養(yǎng)、動物細胞

融合、核移植等技術，A錯誤；

B、胚胎工程和基因工程都要利用細胞培養(yǎng)，B正確；

C、用于制果酒、果醋和腐乳的微生物依次是酵母菌、醋酸菌和毛霉，其中醋酸菌屬于原核

生物，其細胞中都不含有線粒體，C錯誤；

D、單克隆抗體的特點是靈敏度高、專一性強，可大量制備，D錯誤.

故選：B.

考點：胚胎工程的概念及操作對象；酒酵母制酒及乙酸菌由酒制醋；基因工程的原理及技術;

細胞工程的概念；單克隆抗體的制備過程.

14.A

【解析】

試題分析：病毒是寄生生物，必須在活細胞中才能進行代謝活動，因此以病毒為材料探究培

養(yǎng)液中其種群數(shù)量的變化不能達到實驗目的，A項正確；花生種子的子葉肥厚，富含脂肪，

且為白色，因此以花生種子勻漿為材料檢測生物組織中的脂肪，能達到實驗目的，B項錯誤:

睪丸中的精原細胞能夠通過有絲分裂的方式進行增殖，因此以高等動物的睪丸為材料觀察細

答案第4頁，總9頁

本卷由系統(tǒng)自動生成，請仔細校對后使用，答案僅供參考。

胞的有絲分裂能達到實驗目的，c項錯誤；兔的紅細胞沒有細胞核和眾多的細胞器而且富含

血紅蛋白，因此以兔的血液為材料進行血紅蛋白的提取和分離，能達到實驗目的，D項錯誤。

考點：本題考查探究種群數(shù)量的變化、檢測生物組織中的脂肪、觀察細胞的有絲分裂、血紅

蛋白的提取和分離的相關知識，意在考查學生能理解相關的實驗目的、原理、方法和操作步

驟，掌握相關的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用的能力。

15.D

【解析】愈傷組織是一團無定型狀態(tài)的薄壁細胞，處于未分化狀態(tài)，具有發(fā)育的全能性，

沒有特點的功能，故A錯誤；二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到是單倍體植株，此

植株高度不育，因此不能穩(wěn)定遺傳，故B錯誤；人工種子是指植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、

不定芽、頂芽和腋芽等為材料，通過人工薄膜包裝得到的種子，故C錯誤；篩選植物的耐鹽

突變體可以采用含有適量NaCl的選擇培養(yǎng)基，故D正確。

【考點定位】植物組織培養(yǎng)

16.(1)AC

(2)梯度稀釋篩選單菌落

(3)AC

(4)梯度稀釋篩選單菌落

(5)選擇C

(6)稀釋涂布平板法平板劃線法殺死培養(yǎng)基中的細菌芽抱

(7)C

(8)C

【解析】

試題分析：據(jù)圖分析：①過程是梯度稀釋，②過程是稀釋涂布平板法接種，目的是篩選單菌

落.從功能上看，I號培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，從物理狀態(tài)上來說屬于固體培養(yǎng)基.II號培

養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基.采用的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法.常用的滅菌方法有

高壓蒸汽滅菌、灼燒滅菌和干熱滅菌.

解：(1)A、古細菌(又可叫做古生菌、古菌、古核生物的結(jié)構(gòu)核細胞或原細菌)是一類很

特殊的細菌，多生活在極端的生態(tài)環(huán)境中.具有原核生物的某些特征，科學家在深海的火山

口等極端特殊的環(huán)境中發(fā)現(xiàn)了古細菌，說明古細菌的適應能力很強，A正確；

B、嗜熱菌的蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)能耐高溫，常常生存在海底的火山口，所以耐高壓，B錯

誤；

C、青霉素主要是破壞細菌的細胞壁，而細菌的細胞壁的主要成分是肽聚糖；古細菌細胞壁

不含肽聚糖，有的以蛋白質(zhì)為主，有的含雜多糖，有的類似于肽聚糖，但都不含胞壁酸、D

型氨基酸和二氨基庚二酸，C正確：

D、嗜熱菌是原核生物，不含線粒體，D錯誤.

故選：AC.

(2)據(jù)圖分析：①是過程是梯度稀釋，②過程是稀釋涂布平板法接種，目的是篩選單菌落.

(3)A、古細菌是一類很特殊的細菌，多生活在極端的生態(tài)環(huán)境中，A正確；

B、嗜熱菌的蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)能耐高溫，常常生存在海底的火山口，所以耐高壓，B錯

誤；

C、青霉素主要是破壞細菌的細胞壁，而細菌的細胞壁的主要成分是肽聚糖；古細菌細胞壁

不含肽聚糖，有的以蛋白質(zhì)為主，有的含雜多糖，有的類似于肽聚糖，但都不含胞壁酸、D

型氨基酸和二氨基庚二酸，C正確；

I)、嗜熱菌是原核生物，不含線粒體，D錯誤.

故選：AC.

答案第5頁，總9頁

本卷由系統(tǒng)自動生成，請仔細校對后使用，答案僅供參考。

（4）據(jù)圖分析：①是過程是梯度稀釋，②過程是稀釋涂布平板法接種，目的是篩選單菌落.

（5）圖中I為選擇培養(yǎng)基稱，因其營養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源水和無機鹽等，所以需要添

加氮源硝酸錢，故選：C.

（6）I號培養(yǎng)基上的接種方式為稀釋涂布平板法，II號培養(yǎng)基的接種方式為平板劃線法.細

菌芽抱是在極端環(huán)境中產(chǎn)生的，具有耐高溫等特點，只有用高溫高壓，才能殺死細菌芽胞，

防止培養(yǎng)基污染.

（7）根據(jù)題意可知，使用該酶的最佳情況是相對酶活性（酶活性與酶最大活性的百分比）

和殘余酶活性都較高的時候，從曲線圖中可以看出溫度為60℃?70℃時，相對酶活性和殘

余酶活性都較高，因此該酶使用的最佳溫度范圍是60℃?70C.故選：C.

（8）酶活性受溫度影響，在不同的溫度下，都可以測定酶的活性，A錯誤；由曲線①可知，

該酶的最適溫度是80℃,曲線②中的數(shù)據(jù)是將酶在不同溫度下保溫足夠長的時間，再在酶

活性最高的溫度下測其殘余酶活性，對于B選項而言是將該酶在35℃下上時間保存，然后

在80℃下測定該酶活性，B、C正確；曲線②顯示，酶的熱穩(wěn)定性從300c開始不斷下降，在

70℃后，急劇下降，D正確.故選C.

故答案為：（1）AC

（2）梯度稀釋篩選單菌落

（3）AC

（4）梯度稀釋篩選單菌落

（5）選擇C

（6）稀釋涂布平板法平板劃線法殺死培養(yǎng)基中的細菌芽抱

（7）C

（8）C

考點：微生物的分離和培養(yǎng).

17.

（l）a.脫分化c.再分化

（2）大量元素微量元素

（3）使用的先后順序用量的比例

（4）防止培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基造成污染（2分）

（5）C2H5OH+02-^CHjCOOH+H,0

【解析】

（1）植物組織培養(yǎng)過程包括離體的植物組織或細胞經(jīng)a脫分化形成b愈傷組織，再經(jīng)c再

分化形成胚狀體或叢芽最后發(fā)育成完整的植物。

（2）制備MS固體培養(yǎng)基，配制母液時，無機物中大量元素濃縮10倍，微量元素濃縮100

倍。

（3）脫分化和再分化地啟動關鍵是培養(yǎng)基中所加生長素和細胞分裂素的濃度、使用的先后

順序和用量的比例。

（4）微生物純化過程中平板倒置培養(yǎng)，原因是防止培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基造成

污染。

（5）醋酸桿菌是需氧型生物，在氧氣充足，糖源缺乏時.，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將?/p>

醛變?yōu)榇姿幔磻揭姶鸢浮?/p>

【考點】本題考查植物組織培養(yǎng)、傳統(tǒng)發(fā)酵技術的應用及微生物的純化等知識，意在考查考

生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)的能力。

18.

答案第6頁，總9頁

本卷由系統(tǒng)自動生成，請仔細校對后使用，答案僅供參考。

(1)富含纖維素(或“落葉較多”等)(2分)纖維素

(2)纖維素剛果紅(CR)透明圈

(3)涂布不均勻(3分)避免培養(yǎng)基污染棉塞(2分)

(4)酵母菌碳源壓榨(或萃取)(2分)

【解析】

試題分析：

(1)分析圖示可知：①環(huán)節(jié)是從自然界中尋找纖維素分解菌，因此需要的微生物大多分布

在富含纖維素(或“落葉較多”等)的環(huán)境中。②中獲得的酶能夠催化纖維素分解，是纖維

素酶。

(2)纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶能夠催化纖維素分解，因此培養(yǎng)纖維素分解菌，其培養(yǎng)

基應以纖維素為唯一碳源。剛果紅可與纖維素形成紅色復合物；當纖維素被纖維素酶水解后，

剛果紅一纖維素復合物就無法形成，培養(yǎng)基中就會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。因

此，篩選纖維素分解菌，需在培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR),培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為

中心的透明圈。

(3)右上圖所示的菌落集中分布在偏左上方，可能是由于接種時涂布不均勻?qū)е碌?。向?/p>

管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時，若試管口粘附有培養(yǎng)基，需要用酒精棉球擦凈，以避免培養(yǎng)基

污染棉塞。

(4)④環(huán)節(jié)接種的微生物可以將糖類轉(zhuǎn)化為乙醇，據(jù)此可判斷生產(chǎn)中可以滿足此環(huán)節(jié)的常

見菌種是酵母菌。玉米秸稈中的纖維素經(jīng)充分水解后的產(chǎn)物是纖維二糖和葡萄糖，可為該微

生物的生長提供碳源。因玉米胚芽油不易揮發(fā)，宜選用壓榨(或萃取)法從玉米胚芽中提取。

考點：本題考查微生物的培養(yǎng)與應用的相關知識，意在考查學生能理解所學知識的要點，把

握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)的能力。

19.

(1)探究溫度對加酶洗衣粉效果的影響

(2)①45°C②高溫使酶失活③蛋白膜消失的時間

(3)酶具有專一性

【解析】

試題分析：

(1)由圖可知單一變量是是否將洗衣粉煮沸加熱，如果含有酶的話，酶在高溫下會變性，

經(jīng)過煮沸的洗衣粉洗滌效果較差，如果洗滌效果相同說明該洗衣粉不含有酶，故目的是檢驗

該洗衣粉是否含有蛋白酶。

(2)①由圖可知該酶在45℃下催化效率最高，故該溫度是最適合溫度。

②酶在低溫下是活性被抑制但空間結(jié)構(gòu)沒有被破壞，而在高溫時空間結(jié)構(gòu)被破壞，會永久失

活。

③酶的催化效率可以通過反應物的減少，即蛋白膜消失所需時間的長短。

(3)因為含的是蛋白酶，絲質(zhì)和毛質(zhì)衣物所含的蛋白質(zhì)會被加酶洗衣粉中的蛋白酶分解，

從而破壞衣物。

考點：本題考查酶和實驗設計相關知識，意在考察考生對知識點的理解掌握和分析能力。

20.

(1)碳源(1分)固體

(2)稀釋涂布平板菌落

(3)無氧包埋

(4)萃取水浴

【解析】

答案第7頁，總9頁

本卷由系統(tǒng)自動生成，請仔細校對后使用，答案僅供參考。

試題分析：

(1)纖維素含有C、H、0元素，為微生物提供C元素，所以是碳源；固體培養(yǎng)基，易于分

離純化微生物。

(2)統(tǒng)計活菌的方法一般是稀釋涂布平板法。

(3)酵母菌在無氧條件下可以無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳；酵母菌體積大，一般采用包

埋的方法處理，可以重復利用，降低生產(chǎn)成本。

(4)萃取的原理就是利用相似相溶原理，提取人們需要的物質(zhì)；水浴加熱具有溫度溫度，

避免明火的優(yōu)點。

考點：本題考查微生物的純化和計數(shù)、酶和細胞固定化技術、植物芳香油提取的方法等相關

知識，意在考查學生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)的

能力。

21.

(1)乳糖凝固劑選擇培養(yǎng)基