試劑與主要儀器

試劑與主要儀器第一頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三引言茶葉的神奇功效：利尿排毒；除脂解膩，促進(jìn)消化；消除疲勞；增強(qiáng)記憶力；消炎抑菌；預(yù)防齲齒；抗癌、抗輻射、抗衰老；防止高血壓等第二頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三分類含量（在干重中）具體成分生理作用蛋白質(zhì)20％～30％各種蛋白質(zhì)氨基酸1％～4％茶氨酸、谷氨酸、天門冬氨酸和異亮氨酸等25種以上是人體必須的營養(yǎng)成分；降低血氨，治療肝昏迷；調(diào)整脂肪代謝生物堿2％～5％以咖啡堿的含量最多提神；利尿；促進(jìn)血液循環(huán)；降膽固醇；防止動脈粥樣硬化等茶多酚20％～35％兒茶素、黃酮類、花青素和酚酸等四大類物質(zhì)降血脂；消炎抑菌；防輻射；抗癌、抗突變等糖類20％～25％淀粉、纖維素、半纖維素、木質(zhì)素類脂類8％脂肪、磷脂、甘油脂、糖酯和硫酯調(diào)節(jié)人細(xì)胞的滲透壓

維生素0．6％～1％維生素A、維生素D、維生素C、維生素B族保護(hù)視力；增加抵抗力；抗壞血病，抗氧化、抗衰老等礦質(zhì)元素3．5％～7．0％Ca、K、P、Mg、Mn、F、Cu、Zn、I、Se等防止味覺異樣；防止皮膚過敏；抗氧化；增強(qiáng)免疫力；預(yù)防蛀牙等第三頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三茶葉中主要成分含量的測定

蛋白質(zhì)的測定茶多酚的測定咖啡堿的測定金屬元素的測定第四頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三結(jié)束語本文所述的對茶葉中主要成分含量的測定各有優(yōu)缺點(diǎn)。但只要我們能夠根據(jù)具體情況選取合適的方法，都會為研究茶葉作為藥用及保健品的進(jìn)一步開發(fā)利用提供參考依據(jù)。第五頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三參考文獻(xiàn)賈林艷，宋偉新，莊志萍，周靖，宿艷華《高效液相色譜法測定茶葉中水溶性維生素的含量》《中國農(nóng)林副產(chǎn)品》2003年5月2.張國文劉永華楊振華朱志懷《贛南信豐茶葉中蛋白質(zhì)、茶多酚、咖啡堿的測定》《南昌大學(xué)學(xué)報(bào)》(工科版)1996年12月楊明索南《微波加熱快速測定茶葉中的茶多酚》《青海大學(xué)學(xué)報(bào)》(自然科學(xué)版)1998年第4期3.1.第六頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三6.謝立群《火焰原子吸收法測定茶葉中的金屬元素》

4.林鄭和嚴(yán)蘭芳《紫外分光光度法測定茶葉中的咖啡堿》《茶葉科學(xué)技術(shù)》2001年第4期5.曾建民伍炳華楊亞軍《茶葉可溶性蛋白質(zhì)的SDS電泳分析法》《中國茶葉》1998年6月北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)2000年12月第七頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三謝謝大家!第八頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三蛋白質(zhì)的測定1）凱氏定氮法

2）SDS－PAGE電泳分析法

3）色譜法十二烷基硫酸鈉－聚丙烯酰胺凝膠電泳法第九頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三試劑及主要儀器

1)濃硫酸(A.R)2)硫酸鉀(A.R)3)硫酸銅(A.R)4)3.0%NaOH溶液

5)2%硼酸溶液

6)0.05mol/L的標(biāo)準(zhǔn)HCl溶液7)0.1%混合指示劑:0.1%甲基紅酒精溶液和0.1%甲基藍(lán)酒精溶液按1：1混合8)微量凱氏定氮儀第十頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三處理樣品準(zhǔn)確稱取樣品2g,小心移入燒瓶中,再CuSO41g,K2SO410g和濃H2SO450mL。用電爐加熱消化至液體變成藍(lán)綠透明后,冷卻,定容至100mL。測定先用蒸汽洗滌微量凱氏定氮裝置后,精確移取消化液10.00mL,量取NaOH25mL,加至反應(yīng)室中,蒸氣蒸餾直至硼酸溶液由葡萄紫色變成綠色,最后再用0.05mol／LHCl溶液滴定至淡葡萄紫色。處理樣品測定第十一頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三粗蛋白百分含量=式中:V1—樣品消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的毫升數(shù);V2—試劑空白消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的毫升數(shù);C—鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的濃度;0.014—1mol／LHCl標(biāo)準(zhǔn)液1mL相當(dāng)于氮的克數(shù);6.25—氮換算成蛋白質(zhì)的因數(shù)。返回第十二頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三茶多酚的測定1)高錳酸鉀容量法2)微波加熱法

3)分光光度法4)原子吸收法

第十三頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三試劑及主要儀器1)微波爐

2)724型分光光度計(jì)3)酒石酸亞鐵溶液:稱取1000g硫酸亞鐵和5000g酒石酸鉀鈉,用水溶解并定容至1L,pH=7.54)磷酸鹽緩沖液:取mol／L的mol／L磷酸二氫鉀溶液850ml和磷酸二氫鉀溶液150ml混合均勻第十四頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三稱取磨碎茶葉試樣0.3g(準(zhǔn)確至0.0001g)于100mL容量瓶中,加蒸餾水40mL,用密封帶密封瓶口,橡皮筋系緊,置于微波爐內(nèi),于中檔功率微波加熱5min,端出轉(zhuǎn)盤,取下密封帶,過濾至50mL容量瓶中,定容。準(zhǔn)確吸取上述試液1.00mL,注入25mL的容量瓶中,加水4mL和酒石酸亞鐵溶液5mL,充分混合再加pH=7.5的緩沖液至刻度,用10mm比色杯,在波長540nm處,以試劑空白溶液作參比,測定吸光度(A)

第十五頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三茶多酚(%)=式中:L1—試樣的總量(ml);L2—測定時(shí)的用液量(ml);M—試樣的質(zhì)量(g);m—試樣干物質(zhì)含量的百分率(%);1.957—用10mm比色杯,當(dāng)吸光度等于0.50時(shí),每毫升茶湯中含茶多酚相當(dāng)于1.957mg。返回第十六頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三咖啡堿的測定

碘量法重量法紫外分光光度法薄層掃描法

第十七頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三為什么？利用咖啡堿結(jié)構(gòu)上的嘌呤環(huán)具有共軛雙鍵體系，因而具有獨(dú)特的吸收光譜，在波長272～274nm處具有最大吸收值，其消光度與咖啡堿含量呈線性關(guān)系。故可通過消光度求其含量第十八頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三試劑及主要儀器

8)0.01NHCl溶液:取比重1.19的濃HCl0.831)電子分析天平2)752分光光度計(jì)3)恒溫水浴鍋4)吸濾裝置5)移液管6)錐形瓶7)堿性乙酸鉛溶液:稱取50g堿性乙酸鉛,加水100mL,靜置過夜；ｍL,稀釋至１升。9)咖啡堿標(biāo)液:準(zhǔn)確稱取100mg咖啡堿（純度不低于99％）溶于100mL水中，作為母液。準(zhǔn)確吸取5.00mL加水至100mL作為工作液。（每毫升含0.05mg）第十九頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三

準(zhǔn)確稱取3.0000g均勻地磨碎茶樣于500mL錐形瓶中,加沸蒸鎦水450mL,立即移入沸水浴中，浸提完畢立即趁熱減壓過濾。濾液移入500mL容量瓶中，殘?jiān)蒙倭繜嵴翩y水洗滌2～3次，并將濾液拼入上述容量瓶中，用水稀釋至刻度。用移液管準(zhǔn)確吸取試液10.00mL，移入100mL容量瓶,加入5mL0.01N鹽酸和1mL堿性乙酸鉛溶液，用水稀釋至刻度，充分混勻，靜置過濾。準(zhǔn)確吸取25.00mL濾液注入50mL容量瓶中，加入3滴6N硫酸溶液，加水稀釋至刻度、混勻、靜置過濾。用10mm比色杯，在波長274nm處，以試劑空白為溶液參比，測定其吸光度（Ａ）。

準(zhǔn)確稱取均勻磨碎的茶樣3.0000g于500mL錐形瓶中,加沸蒸鎦水450mL,立即移入沸水浴中，浸提完畢立即趁熱減壓過濾。濾液移入500mL容量瓶中，殘?jiān)蒙倭繜嵴翩y水洗滌2～3次，并將濾液倒入上述容量瓶中，用水稀釋至刻度。返回第二十頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三金屬元素的測定

1)火焰原子吸收法

2)離子色譜法3)電感耦合等離子體質(zhì)譜法

第二十一頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三試劑與主要儀器1)WFX－1F2B2原子吸收分光光度計(jì);2)Ca,Mg,Mn,Fe,Zn,Cu,Ni,Co3)二氯化鍶：5%分析純;的標(biāo)準(zhǔn)貯備液：1ｍg/ｍＬ(北京國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心);4)硝酸、鹽酸、高氯酸：分析純。第二十二頁，共二十五頁，編輯于2023年，星期三樣品來源及樣品的制備準(zhǔn)確稱取茶葉5.0ｇ于燒瓶中,加20mLHNO3,靜置消化12min,次日加入5mL高氯酸,于小火加熱至無色透明近干為止,冷卻后轉(zhuǎn)移到25mL容量瓶中,用3%HNO3定容,搖勻備用。標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制配制各元素標(biāo)準(zhǔn)工作使用液,按儀器工作參數(shù)表測定溶液的吸光度,繪制工作曲線,并計(jì)算回歸方程和相關(guān)系數(shù)。第二十三頁，共二十五頁，編