2024屆高三生物一輪復(fù)習(xí)課件細(xì)胞工程、發(fā)酵工程復(fù)習(xí)

細(xì)胞工程、發(fā)酵工程復(fù)習(xí)植物組織培養(yǎng)技術(shù)外植體愈傷組織脫分化芽根植株再分化激素含量一般不需需要適宜時(shí)間和強(qiáng)度的特殊條件>>共同條件關(guān)鍵過程生長(zhǎng)素=細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素光光無菌、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素、適宜的溫度和PH植物體細(xì)胞雜交技術(shù)過程

a

，

b

，

c

，

d

，

e

，

f

，

g

。

去壁原生質(zhì)體融合再生細(xì)胞壁植物細(xì)胞融合脫分化再分化植物組織培養(yǎng)123

方法

，

方法

，

，標(biāo)志

，

原理

，

原理

。

纖維素酶和果膠酶電融合、聚乙二醇（PEG）離心法、高Ca2+—高pH融合法細(xì)胞融合完成細(xì)胞膜流動(dòng)性植物細(xì)胞全能性原理植物細(xì)胞全能性特點(diǎn)：未分化、不定形、薄壁

方法機(jī)械法或胰蛋白酶、

膠原蛋白酶細(xì)胞懸液原代傳代細(xì)胞生長(zhǎng)特點(diǎn)：

生長(zhǎng)生長(zhǎng)(少)(多)接觸抑制方法:胰蛋白酶、膠原蛋白酶懸浮貼壁原理：細(xì)胞增殖

處理目的：

。

形成。

顯微操作去核去核卵母細(xì)胞胚重構(gòu)激活方法：電融合方法目的電刺激、Ca2+載體、乙醇和蛋白酶合成抑制劑分裂發(fā)育原理：動(dòng)物細(xì)胞核全能性核移植涉及技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合早期胚胎培養(yǎng)胚胎移植胚胎分割充分利用胚胎方法電融合法PEG融合法滅活病毒誘導(dǎo)法膜核細(xì)胞融合完成標(biāo)志：雜交原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性特點(diǎn)：有兩或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息雜交細(xì)胞篩選雜交瘤細(xì)胞多種方法選擇培養(yǎng)基分泌特定抗體的多次篩選克隆化培養(yǎng)專一抗體檢驗(yàn)陽性體外培養(yǎng)小鼠腹腔單克隆抗體培養(yǎng)液腹水提取原理：細(xì)胞增殖細(xì)胞膜的流動(dòng)性ADC=

++抗體-藥物偶聯(lián)物單克隆抗體接頭藥物位置準(zhǔn)確、療效高、副作用小發(fā)揮作用的過程ADC識(shí)別進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)方式胞吞ADC分離溶酶體藥物細(xì)胞凋亡植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成分過程結(jié)果相同點(diǎn)固體培養(yǎng)基葡萄糖、動(dòng)物血清液體培養(yǎng)基細(xì)胞增殖植物細(xì)胞的全能性許多細(xì)胞蔗糖、植物激素①都進(jìn)行有絲分裂，不涉及減數(shù)分裂；②均需無菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件新的植株外植體↓脫分化愈傷組織

↓再分化芽、根或胚狀體↓生長(zhǎng)發(fā)育植物體動(dòng)物的組織

↓機(jī)械法或胰蛋白酶、

↓膠原蛋白酶處理細(xì)胞懸液↓原代培養(yǎng)↓細(xì)胞懸液↓傳代培養(yǎng)獲得雜種植株細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞的全能性去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合胰蛋白酶處理細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合制備單克隆抗體離心法、電融合法、聚乙二醇（PEG）、高Ca2+—高pH融合法電融合法PEG融合法滅活病毒誘導(dǎo)法（特有）植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較植物細(xì)胞工程植物組織培養(yǎng)技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞工程細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)胚胎工程原理目標(biāo)單克隆抗體植株植物細(xì)胞全能性雜交細(xì)胞發(fā)育新植物植物細(xì)胞全能性細(xì)胞膜流動(dòng)性動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞增殖克隆動(dòng)物動(dòng)物細(xì)胞核全能性雜交細(xì)胞細(xì)胞膜流動(dòng)性雜交細(xì)胞產(chǎn)物細(xì)胞膜流動(dòng)性細(xì)胞增殖個(gè)體具體分類各種細(xì)胞工程比較意義？克服遠(yuǎn)緣雜交障礙（克服生殖隔離）意義？動(dòng)物細(xì)胞工程基礎(chǔ)胚胎工程的理論基礎(chǔ)——受精和早期胚胎發(fā)育1受精前的準(zhǔn)備精子獲能卵子準(zhǔn)備雌性生殖道或獲能液（Ca2+載體、肝素等）MⅡ期（減二中期）輸卵管2受精防止多精入卵屏障穿越卵細(xì)胞膜外結(jié)構(gòu)精子釋放多種酶透明帶反應(yīng)卵細(xì)胞膜反應(yīng)發(fā)生時(shí)間精子頭接觸卵細(xì)胞膜瞬間精子入卵后受精作用標(biāo)志受精完成標(biāo)志雌雄原核核膜消失形成合子觀察到兩個(gè)極體或者雌、雄原核排出第二極體時(shí)間精子入卵后細(xì)胞核變化精子核膜消失，形成雄原核卵細(xì)胞排出第二極體，形成雌原核受精卵桑葚胚囊胚原腸胚（致密細(xì)胞團(tuán)）開始分化內(nèi)細(xì)胞團(tuán)滋養(yǎng)層各種組織細(xì)胞胎盤、胎膜囊胚腔內(nèi)含液體胚胎早期發(fā)育透明帶破裂孵化細(xì)胞全能性獲取胚胎干中胚層表面外胚層內(nèi)胚層向內(nèi)遷移中間細(xì)胞卵裂干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱

細(xì)胞，特點(diǎn)

)成體干細(xì)胞全能性ES(特點(diǎn)

)無全能性

細(xì)胞造血干細(xì)胞神經(jīng)干細(xì)胞精原干細(xì)胞誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱

細(xì)胞)iPS成纖維細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞誘導(dǎo)方法①借助載體將特定基因或特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞；②用小分子化合物誘導(dǎo)來源特點(diǎn)胚胎工程技術(shù)體外受精胚胎移植胚胎分割實(shí)質(zhì)早期胚胎對(duì)象桑葚胚或囊胚早期胚胎在相同生理環(huán)境條件空間位置轉(zhuǎn)移注意事項(xiàng)供受體相同生理狀態(tài)同期發(fā)情處理供體排出更多的卵母細(xì)胞超數(shù)排卵促性腺激素獲能精子和成熟卵細(xì)胞在適當(dāng)培養(yǎng)液中目的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割同卵雙或多胎可看成繁殖方式動(dòng)物的無性繁殖或克隆作用提高動(dòng)物繁殖能力作用充分發(fā)揮雌性優(yōu)良動(dòng)物繁殖潛力作用提高胚胎利用率場(chǎng)所性別鑒定部位滋養(yǎng)層細(xì)胞同時(shí)激素處理（時(shí)期）（處理方法）（處理方法）胚胎移植胚胎來源有性生殖無性生殖①②③④⑤試管動(dòng)物克隆動(dòng)物考點(diǎn)3細(xì)胞工程1．脫毒苗采用植物分生區(qū)附近(如莖尖)細(xì)胞原因是無病毒。(

)2．動(dòng)物體細(xì)胞核移植過程中，從屠宰場(chǎng)收集牛卵巢，采集卵母細(xì)胞，可直接用于實(shí)驗(yàn)。(

)3．核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行的100%復(fù)制。(

)4．目前核移植技術(shù)中使用的去核方法只是顯微操作去核法。(

)5．與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)相比，動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素為滅活的病毒。(

)6．體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體。(

)×××××√7．對(duì)供體注射性激素，使其超數(shù)排卵。(

)8．細(xì)胞核移植主要在同種動(dòng)物、同種組織的細(xì)胞之間進(jìn)行。(

)9．初級(jí)卵母細(xì)胞需經(jīng)過減數(shù)分裂才能變成成熟的卵子，減數(shù)分裂Ⅱ是在精子和卵子結(jié)合的過程中完成的。(

)10．卵裂期細(xì)胞分裂方式為有絲分裂，細(xì)胞數(shù)量不斷增加，胚胎體積變大。(

)11．囊胚期形成的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育為胎膜和胎盤，滋養(yǎng)層將來發(fā)育為胎兒的各種組織。(

)12．性別鑒定常取內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞進(jìn)行DNA分析。(

)13．對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)應(yīng)將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。(

)14．ES細(xì)胞又名造血干細(xì)胞，具有很強(qiáng)的分裂、分化能力。(

)×××√××√×15．利用胚胎分割技術(shù)，同卵多胎較同卵雙胎成功率更高。(

)16．利用物理法或化學(xué)法，可以直接將兩個(gè)植物細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)融合。(

)17．植物體細(xì)胞雜交過程中，細(xì)胞融合成功的標(biāo)志是再生出新的細(xì)胞壁。(

)18．突變體培育通常對(duì)植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理，而工廠化生產(chǎn)的細(xì)胞產(chǎn)物也是來自愈傷組織細(xì)胞。(

)19．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，95%O2是細(xì)胞代謝所必需的，5%CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。(

)20．制備單克隆抗體時(shí)，要選用已免疫的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞。(

)√×√×××傳統(tǒng)發(fā)酵現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵菌種培養(yǎng)基種類條件控制發(fā)酵速度產(chǎn)品品質(zhì)生產(chǎn)規(guī)模原材料天然存在微生物上次發(fā)酵的發(fā)酵物中微生物多為不同方式獲得單一菌種多為固體或半固體液體過程的控制更為嚴(yán)格控制缺乏標(biāo)準(zhǔn)慢快品質(zhì)不一小(家庭式、作坊式)品質(zhì)穩(wěn)定大傳統(tǒng)發(fā)酵于現(xiàn)代工業(yè)發(fā)酵區(qū)別項(xiàng)目泡菜果酒果醋菌種分類代謝方式最適溫度應(yīng)用發(fā)酵原理乳酸菌酵母菌醋酸菌原核生物原核生物真核生物異養(yǎng)厭氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)兼性厭氧型28℃(18~30℃)30~35℃乳制品、泡菜釀酒、發(fā)面制醋C6H12O62C3H6O3（乳酸）酶+能量2C2H5OH＋2CO2＋能量酶C6H12O6C6H12O6＋2O2酶2CH3COOH＋2H2O

＋2CO2＋能CH3COOH＋H2O＋能量C2H5OH＋O2酶糖充足糖不足乙醇

乙醛

乙酸泡菜、果酒、果醋制作比較（先通氧、后無氧）產(chǎn)物或者產(chǎn)品發(fā)酵菌種分類（真、原核）啤酒和果酒泡菜腐乳果醋檸檬酸谷氨酸醬油發(fā)酵菌種和產(chǎn)物酵母菌乳酸菌酵母菌、曲霉和毛霉（主）醋酸菌黑曲霉谷氨酸棒狀桿菌黑曲霉真核原核真核原核真核原核真核泡菜腌制中乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變化發(fā)酵時(shí)期乳酸菌乳酸亞硝酸鹽發(fā)酵初期發(fā)酵中期發(fā)酵后期變化曲線少少增加(硝酸鹽還原菌的作用)最多增多、pH下降減少下降(硝酸鹽還原菌受抑制，部分亞硝酸鹽被分解)下降至相對(duì)穩(wěn)定(硝酸鹽還原菌被完全抑制)繼續(xù)增多pH繼續(xù)下降O2抑制乳酸菌乳酸抑制其他菌活動(dòng)(原因)(原因)(原因)pH繼續(xù)下降滅菌和消毒比較方法特點(diǎn)效果具體方法針對(duì)對(duì)象操作滅菌消毒消毒溫和理化生法殺滅表面、內(nèi)部部分微生物強(qiáng)烈理、化法溫和理、化、生法殺滅所有微生物培養(yǎng)基吸管、培養(yǎng)皿接種用具涂布器、接種環(huán)接種針金屬用具濕熱滅菌法干熱滅菌法灼燒滅菌法煮沸消毒巴氏消毒紫外燈消毒化學(xué)藥物消毒121℃15~30min160~170℃2~3h酒精燈火焰充分燃燒層菌體芽孢孢子不耐高溫液體等接種室、箱超凈工作臺(tái)62~65℃30min80~90℃30s~1min30min接種室、箱超凈工作臺(tái)等酒精擦手氯氣消毒水源毛巾等開水中加熱關(guān)于培養(yǎng)基物理性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基組成成分天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基用途選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基微生物分離培養(yǎng)鑒定保存積累代謝物液體或固體物理性質(zhì)一般固體一般固體液體或固體液體獲取菌體液體植物植物組織培養(yǎng)物理性質(zhì)植物細(xì)胞培養(yǎng)固體一般液體植物體細(xì)胞雜交固體動(dòng)物物理性質(zhì)液體（培養(yǎng)液）具體處理目的原理選擇培養(yǎng)基加入青霉素不加氮源篩選分解尿素的細(xì)菌鑒別培養(yǎng)基加入酚紅培養(yǎng)基尿素被分解產(chǎn)生氨，培養(yǎng)基呈堿性，酚紅指示劑變紅。加入剛果紅

剛果紅與纖維素能形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈。分離酵母菌、霉菌等真菌分離固氮菌分離自養(yǎng)微生物鑒別分解尿素的細(xì)菌鑒別纖維素分解菌選擇、鑒定培養(yǎng)基的配制方法、原理、目的何時(shí)加入？滅菌前不加有機(jī)碳源尿素唯一氮源該細(xì)菌合成脲酶，將尿素催化成NH3青霉素能抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，對(duì)真菌無作用固氮微生物能利用空氣中的氮?dú)庾责B(yǎng)型微生物能利用無機(jī)碳源培養(yǎng)基成分微生物植物動(dòng)物①

碳源②

氮源③

無機(jī)鹽④

水自養(yǎng)微生物無機(jī)碳源：CO2、CO32-、HCO3-等有機(jī)碳源：葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等異養(yǎng)微生物無機(jī)氮源：NH4＋、NO3-、NH3等硝化細(xì)菌等有機(jī)氮源：牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等調(diào)節(jié)酸堿平衡、維持一定的滲透壓特殊需求加維生素調(diào)至酸性調(diào)至中性或弱堿性厭氧微生物無氧的條件細(xì)菌乳酸桿菌霉菌激素、蔗糖、無機(jī)鹽、氨基酸、維生素、煙酸、肌醇、瓊脂、水等MS培養(yǎng)基成分血清、

糖類（葡萄糖）、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、水等表1-11000ml牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)組成組分含量提供的主要營(yíng)養(yǎng)牛肉膏5g碳源、磷酸鹽和維生素等蛋白胨10g氮源和維生素等NaCl5g無機(jī)鹽H2O定容至1000ml水方法純化原理接種工具單菌落的獲得用途接種效果圖相同點(diǎn)連續(xù)劃線，將聚集的菌種逐步稀釋分散菌液一系列梯度稀釋后分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面培養(yǎng)，以得到單菌落接種環(huán)涂布器從最后劃線的區(qū)域挑取稀釋度合適，整個(gè)平板上都可找到單菌落分離純化菌種，獲得單菌落①分離純化菌種，獲得單菌落②用于計(jì)數(shù)①都能分離純化菌種；②都是在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行的兩種純培養(yǎng)方法的比較平板劃線法稀釋涂布平板法比較兩種微生物計(jì)數(shù)的方法項(xiàng)目直接計(jì)數(shù)法間接計(jì)數(shù)法原理主要用具計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)計(jì)算公式利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。顯微鏡、細(xì)菌計(jì)數(shù)板平板菌體本身固體培養(yǎng)基上菌落數(shù)計(jì)數(shù)方便、操作簡(jiǎn)單計(jì)數(shù)的是活菌死菌、活菌都計(jì)算操作較復(fù)雜，有一定誤差每毫升原液含菌數(shù)＝培養(yǎng)基上平均菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)÷涂布液體積（計(jì)數(shù)偏

）?。ㄓ?jì)數(shù)偏

）大10g土樣

0.2mL菌液3個(gè)平板平均30個(gè)菌落

30

0.2ⅹ107個(gè)/ml果酒果醋制作過程擰松原因？先讓酵母菌進(jìn)行快速繁殖，后酒精發(fā)酵防止發(fā)酵產(chǎn)生的CO2