艾滋病實驗室的質(zhì)量管理

（優(yōu)選）艾滋病實驗室的質(zhì)量管理本文檔共57頁；當(dāng)前第1頁；編輯于星期三\17點25分一、質(zhì)量保證(QA）質(zhì)量保證是指從接收樣本起，到實驗室發(fā)出報告止，為確保實驗室最終報告結(jié)果的正確性所進行的全過程，包括采取各種行政和技術(shù)上的措施和方法。本文檔共57頁；當(dāng)前第2頁；編輯于星期三\17點25分行政支持（行政部門關(guān)心實驗室發(fā)展、建設(shè)，人員穩(wěn)定，足夠經(jīng)費）人員培訓(xùn)（新人員上崗前培訓(xùn)獲得合格證書，接受復(fù)訓(xùn)，篩查實驗室人員至少2年一次。檢測人員應(yīng)分為檢驗人、復(fù)核人、簽發(fā)人。復(fù)核人和簽發(fā)人應(yīng)具備對檢測過程進行分析和解決問題的能力）環(huán)境條件（實驗室設(shè)置、建筑、設(shè)備符合要求）標(biāo)本采集、運送和處理檢測方法和試劑的選擇設(shè)備維護與校準(zhǔn)（酶標(biāo)儀、移液器、高壓滅菌器、溫度計等）文件和文件管理本文檔共57頁；當(dāng)前第3頁；編輯于星期三\17點25分檢測方法和試劑的選擇使用經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局注冊批準(zhǔn)的試劑，選擇敏感性高，特異性好的，根據(jù)參比室組織的國家級艾滋病診斷試劑臨床質(zhì)量評價各實驗室更換試劑批號時，應(yīng)進行平行試驗所有試劑盒要嚴格按照要求條件保存。本文檔共57頁；當(dāng)前第4頁；編輯于星期三\17點25分設(shè)備維護與校準(zhǔn)本文檔共57頁；當(dāng)前第5頁；編輯于星期三\17點25分目前常用的艾滋病檢測設(shè)備類安全類：生物安全柜、洗眼器、普通冰箱、超低溫冰箱、高壓滅菌器。檢測類：微量加樣器、搖擺平臺、全自動蛋白印跡儀、普通離心機、震蕩器、移液器、恒溫水浴、酶標(biāo)儀+洗板機、病毒載量儀、流式細胞儀其它：計算機、空調(diào)本文檔共57頁；當(dāng)前第6頁；編輯于星期三\17點25分規(guī)范化管理的意義遵照《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》、《全國艾滋病檢測工作管理辦法》。檢測質(zhì)量保證延長設(shè)備的使用時間便于設(shè)備的管理節(jié)約資源本文檔共57頁；當(dāng)前第7頁；編輯于星期三\17點25分HIV實驗室的設(shè)備維護日常維護定期檢定和校準(zhǔn)本文檔共57頁；當(dāng)前第8頁；編輯于星期三\17點25分設(shè)備對環(huán)境的普通要求電源：電壓一定要匹配，插線板合適，專用的.經(jīng)常停電或電壓不穩(wěn)的實驗室，建議配備穩(wěn)壓器和不間斷電源環(huán)境：清潔，溫、濕度合適良好通風(fēng)長時間不用的設(shè)備，注意特別容易壞本文檔共57頁；當(dāng)前第9頁；編輯于星期三\17點25分酶標(biāo)儀本文檔共57頁；當(dāng)前第10頁；編輯于星期三\17點25分移液器的檢定一年至少檢定一次需檢定的原因-經(jīng)常使用-要求高的準(zhǔn)確性本文檔共57頁；當(dāng)前第11頁；編輯于星期三\17點25分超低溫冰箱定期清理灰塵過濾器（建議每月一次）

本文檔共57頁；當(dāng)前第12頁；編輯于星期三\17點25分超低溫冰箱注意事項要求環(huán)境溫度控制在28度以下空間的清潔穩(wěn)定的電源供應(yīng)不宜放得太擠本文檔共57頁；當(dāng)前第13頁；編輯于星期三\17點25分生物安全柜HEPA-過濾裝置容納有害生物氣體。需提供人員保護也為產(chǎn)品提供保護(按等級而定)二級生物安全柜本文檔共57頁；當(dāng)前第14頁；編輯于星期三\17點25分生物安全柜的維護每年檢定一次安全柜保持所有操作在窗扇4英寸以內(nèi)清潔物質(zhì)和污染物隔離開，減少相互干擾使用后及時清理柜內(nèi)不宜放太多的物品，不能儲藏化學(xué)物質(zhì)本文檔共57頁；當(dāng)前第15頁；編輯于星期三\17點25分離心機的維護本文檔共57頁；當(dāng)前第16頁；編輯于星期三\17點25分轉(zhuǎn)頭、套桶本文檔共57頁；當(dāng)前第17頁；編輯于星期三\17點25分使用離心機的注意事項離心力、離心速度平穩(wěn)的儀器臺不用時，松轉(zhuǎn)頭；使用時，擰緊轉(zhuǎn)子保持平衡使用安全：蓋子要嚴使用后要擦干或開蓋至晾干防止液體泄漏到腔內(nèi)本文檔共57頁；當(dāng)前第18頁；編輯于星期三\17點25分高壓滅菌器本文檔共57頁；當(dāng)前第19頁；編輯于星期三\17點25分滅菌器的維護壓力表需要定期檢驗（一年兩次）等氣壓和溫度下降到正常后,再開閥高壓時,放入指示紙,以便判定滅菌效果本文檔共57頁；當(dāng)前第20頁；編輯于星期三\17點25分設(shè)備的檢定和校準(zhǔn)

對檢驗的準(zhǔn)確性和有效性有影響的儀器設(shè)備必須進行檢定和校準(zhǔn)。

有國家計量檢定規(guī)程的儀器設(shè)備，由法定計量檢定機構(gòu)或經(jīng)計量行政部門授權(quán)的技術(shù)機構(gòu)進行檢定；

沒有國家檢定規(guī)程的，可以由廠家、自行檢定和校準(zhǔn)。本文檔共57頁；當(dāng)前第21頁；編輯于星期三\17點25分制訂儀器設(shè)備檢定計劃。經(jīng)檢定的儀器設(shè)備校驗結(jié)果貼上標(biāo)志：合格標(biāo)志為綠色、準(zhǔn)用標(biāo)志為黃色、停用標(biāo)志為紅色。凡檢定不合格或超過檢定有效期的儀器設(shè)備，一律不得用于檢驗工作。對超過檢定期，但暫時不用的儀器設(shè)備，貼上停用標(biāo)志。

本文檔共57頁；當(dāng)前第22頁；編輯于星期三\17點25分強制檢定的工作計量器具目錄

HIV檢測強制檢定儀器：加樣器、酶標(biāo)儀、溫度計、高壓滅菌器

本文檔共57頁；當(dāng)前第23頁；編輯于星期三\17點25分強制檢定的周期，由執(zhí)行強制檢定的計量檢定機構(gòu)根據(jù)計量檢定規(guī)程確定。

屬于強制檢定的工作計量器具，未按照本辦法規(guī)定申請檢定或者經(jīng)檢定下合格的，任何單位或者個人不得使用。

本文檔共57頁；當(dāng)前第24頁；編輯于星期三\17點25分文件及文件管理

1.標(biāo)準(zhǔn)操作程序

(SOP)

2.實驗原始記錄表

3.結(jié)果報告

4.樣品登記和保存

5.文件存檔

本文檔共57頁；當(dāng)前第25頁；編輯于星期三\17點25分

1.標(biāo)準(zhǔn)操作程序

(SOP)

艾滋病檢測實驗室要建立覆蓋主要工作內(nèi)容的SOP文件。

SOP由各崗位工作人員起草，實驗室主任審定，并應(yīng)定期修訂。修訂應(yīng)該在實驗室主管人員的領(lǐng)導(dǎo)下進行，每年至少一次。所有工作人員要在所從事工作的SOP文件上簽名表示已經(jīng)閱讀并掌握了有關(guān)內(nèi)容。.本文檔共57頁；當(dāng)前第26頁；編輯于星期三\17點25分艾滋病檢測實驗室應(yīng)建立以下SOP1、樣品的接收、登記、處理、保存和運輸2、檢測方法和步驟3、試劑使用方法和保存4、儀器的使用維護和校準(zhǔn)5、實驗中的質(zhì)量控制要求及程序6、結(jié)果解釋與報告7、保密程序8、實驗室數(shù)據(jù)、相關(guān)文件記錄與保存9、不確定樣本的追蹤和處理10、實驗室安全防護及實驗室的的清理和消毒11、職業(yè)暴漏本文檔共57頁；當(dāng)前第27頁；編輯于星期三\17點25分SOP通常包括以下內(nèi)容（1）標(biāo)題和編號（2）編寫和修改日期（3）編寫和修訂人員姓名（4）方法、目的和應(yīng)用范圍（5）相應(yīng)的職業(yè)規(guī)范（6）檢測設(shè)備和試劑（7）安全防護相關(guān)步驟（8）結(jié)果的解釋和報告（9）附錄（包括相關(guān)的附加文件如標(biāo)準(zhǔn)表格、設(shè)備和試劑盒說明書等。）

本文檔共57頁；當(dāng)前第28頁；編輯于星期三\17點25分寫你所做的做你所寫的本文檔共57頁；當(dāng)前第29頁；編輯于星期三\17點25分2、實驗原始記錄表

應(yīng)按實驗要求，設(shè)計操作的原始記錄表，標(biāo)明空白對照、陽性對照、陰性對照、外部對照以及待檢樣品的位置，便于指導(dǎo)實驗人員加樣。要注明試劑廠家、測定方法、批號、有效期、操作人員和復(fù)核人員姓名及檢測日期。

本文檔共57頁；當(dāng)前第30頁；編輯于星期三\17點25分ELISA原始記錄快速原始記錄表實驗室樣本交接記錄08高壓滅菌器.實驗室所有設(shè)備的使用記錄和維護記錄本文檔共57頁；當(dāng)前第31頁；編輯于星期三\17點25分

3、結(jié)果報告分析結(jié)果及發(fā)出檢測報告前，應(yīng)注意須在試劑盒及外部質(zhì)控結(jié)果滿足要求的前提下，對樣品進行分析。試劑盒及外部質(zhì)控不合格，樣品需要重新檢測復(fù)核人對檢測結(jié)果進行仔細復(fù)核并對結(jié)果提出結(jié)論簽發(fā)人對試驗結(jié)論進行審核、分析、總結(jié)、簽字本文檔共57頁；當(dāng)前第32頁；編輯于星期三\17點25分4、樣品登記和保存

收到樣品后，建立唯一編碼，及時登記有關(guān)信息，包括受檢者姓名或代號、試管編號、性別、職業(yè)、送檢單位、人群類別、檢測結(jié)果、送檢日期、報告日期、通訊地址本文檔共57頁；當(dāng)前第33頁；編輯于星期三\17點25分5、文件存檔

實驗原始記錄表、打印數(shù)據(jù)、膜反應(yīng)條帶或其照片、檢測記錄表、標(biāo)本登記、標(biāo)本保存記錄以及儀器設(shè)備維修和校準(zhǔn)記錄等都應(yīng)該妥善存檔保存10年以上。最好同時使用計算機保存各種文件和記錄。

本文檔共57頁；當(dāng)前第34頁；編輯于星期三\17點25分二、質(zhì)量控制(QC)p15

質(zhì)量控制是指為確保實驗工作正常進行而在每一步實驗過程中必須采取的各種措施。是對檢驗結(jié)果的即時性評價，通過對質(zhì)控結(jié)果的連續(xù)觀察，監(jiān)測實驗室結(jié)果的精密性。本文檔共57頁；當(dāng)前第35頁；編輯于星期三\17點25分

（一）抗體檢測的統(tǒng)計學(xué)室內(nèi)質(zhì)量控制

在所有實驗中必須包含有試劑盒內(nèi)部對照質(zhì)控血清和室內(nèi)質(zhì)控品（外部對照質(zhì)控血清）。1、試劑盒內(nèi)部對照質(zhì)控品即為試劑盒內(nèi)提供的陽性和陰性對照血清。試劑盒內(nèi)部對照用于判斷每次實驗的有效性，但不能做為室內(nèi)質(zhì)控品使用。內(nèi)部對照是質(zhì)量控制的基礎(chǔ)。每一次檢測必須使用內(nèi)部對照，而且只能在同批號的試劑盒中使用。內(nèi)部對照結(jié)果無效必須重新實驗。

本文檔共57頁；當(dāng)前第36頁；編輯于星期三\17點25分2、室內(nèi)質(zhì)控品（外部對照）為非試劑盒組份的外部質(zhì)控品，是為了監(jiān)控檢測的重復(fù)性而設(shè)置的，包括強陽性、弱陽性和陰性質(zhì)控血清。也可以只設(shè)置一個弱陽性質(zhì)控，以該試劑盒臨界值（cutoff）的2-3倍為宜。外部質(zhì)控品的作用是，判斷該批臨床樣本檢測的有效性，因此，每次實驗必須包含室內(nèi)質(zhì)控品，其結(jié)果無效，必須重新實驗。室內(nèi)質(zhì)控品可以是商品或?qū)嶒炇易孕兄苽浔疚臋n共57頁；當(dāng)前第37頁；編輯于星期三\17點25分室內(nèi)質(zhì)控品的保存

（1）按一周實驗用量分裝、分類、標(biāo)記、封口、-20℃凍存。

（2）外部對照血清不可反復(fù)凍融，一旦融化后應(yīng)該存放2-8℃，一周內(nèi)使用。本文檔共57頁；當(dāng)前第38頁；編輯于星期三\17點25分3、室內(nèi)質(zhì)控品的使用每一次實驗必須使用室內(nèi)質(zhì)控品，以便監(jiān)控實驗的重復(fù)性。同時可以了解各批試劑盒的批間差異或孔間差異，繪制質(zhì)量控制圖。

本文檔共57頁；當(dāng)前第39頁；編輯于星期三\17點25分統(tǒng)計室內(nèi)質(zhì)控的主要方法----

建立質(zhì)控圖最常用的質(zhì)控圖是Levey-Jennings質(zhì)控圖，該圖使用累計和技術(shù)或趨勢分析技術(shù)的圖形提供系統(tǒng)偏移和漂移的狀況。下面以ELISA方法檢測HIV抗體為例，描述建立質(zhì)控圖步驟：本文檔共57頁；當(dāng)前第40頁；編輯于星期三\17點25分（二）質(zhì)控圖的建立及應(yīng)用

1.建立質(zhì)控圖參數(shù)2.繪制質(zhì)控圖3.質(zhì)控圖的判斷和分析4.繪制和分析質(zhì)控圖的要點5.變異系數(shù)（CV）分析6.灰區(qū)

本文檔共57頁；當(dāng)前第41頁；編輯于星期三\17點25分1、建立質(zhì)控圖參數(shù)

（1）算術(shù)平均值(x)代表一組S/CO值的平均值。為了統(tǒng)計學(xué)上有顯著性意義，應(yīng)該采用至少20次(天)所測得的外部對照質(zhì)控血清S/CO值結(jié)果計算出平均值。（2）標(biāo)準(zhǔn)差(s)是描述樣本與均數(shù)之間離散程度的一個指標(biāo)，是與對照值的均值有關(guān)的預(yù)期范圍。一組S/CO值的標(biāo)準(zhǔn)差以s表示。

本文檔共57頁；當(dāng)前第42頁；編輯于星期三\17點25分

（3）控制限：外部對照S/CO值的±2s

（4）變異系數(shù)(cv)，是反映各次S/CO值相對于均值離散程度的一個指標(biāo)，可以用來衡量檢測的重復(fù)性或精密度。

本文檔共57頁；當(dāng)前第43頁；編輯于星期三\17點25分計算公式為：

Σx

x=──

n

s

計算公式為：───────

∑(xn-x)2

s=───────

n-1

cv

計算公式為：

s

cv=──x100%

x

本文檔共57頁；當(dāng)前第44頁；編輯于星期三\17點25分2、繪制質(zhì)控圖

質(zhì)控圖是把檢測數(shù)據(jù)與計算出的“控制限”進行比較的圖，包含一條中心橫線和其上、下兩條平行的控制線，并有按時間順序點入的質(zhì)控血清測定值。

本文檔共57頁；當(dāng)前第45頁；編輯于星期三\17點25分質(zhì)控圖的繪制步驟是

（1）在常規(guī)條件下，對同一批血清連續(xù)測定20次（天）或以上，獲得一組S/CO值，求均數(shù)(x)和標(biāo)準(zhǔn)差(s),超出2s或3s的數(shù)據(jù)不應(yīng)刪除。

（2）將均值(x)和標(biāo)準(zhǔn)差(s)分別在質(zhì)控框架圖中標(biāo)示出來。以S/CO值作縱座標(biāo)(Y軸)，每一次(天)試驗作橫座標(biāo)(x軸)，繪制質(zhì)控圖。

本文檔共57頁；當(dāng)前第46頁；編輯于星期三\17點25分 （3）從第21次起，將每次檢測的質(zhì)控血清的結(jié)果依次點入該質(zhì)控框架圖中，檢驗進入質(zhì)控狀態(tài)。

本文檔共57頁；當(dāng)前第47頁；編輯于星期三\17點25分質(zhì)控圖本文檔共57頁；當(dāng)前第48頁；編輯于星期三\17點25分3、質(zhì)控圖的判定和分析

（1）告警：外部對照的S/CO值超出±2s，系統(tǒng)處于告警狀態(tài)，應(yīng)予以注意，是否可以繼續(xù)檢測需要進一步觀察。

(2)失控：外部對照的S/CO值超出±3s，稱為失控，則本次實驗結(jié)果不能被接受?？赡苁窍到y(tǒng)誤差或外部對照滴度下降造成。

（3）移漂：連續(xù)幾個（3-5次）外部對照S/CO值都落在均值的一側(cè)則稱為位移，提示實驗條件發(fā)生了較大的變化。應(yīng)重新繪制質(zhì)控圖。

（4）趨勢：連續(xù)幾個（5-7個）外部對照質(zhì)控血清S/CO值幾乎按一個方向分布時稱為趨勢，通常由參數(shù)的緩慢改變引起。

本文檔共57頁；當(dāng)前第49頁；編輯于星期三\17點25分4、繪制和分析質(zhì)控圖的要點

（1）要在最佳條件下建立質(zhì)控圖參數(shù)。

（2）用S/CO比值繪制質(zhì)控圖。

（3）由專人負責(zé)建立質(zhì)控圖，每月定期召開質(zhì)控分析會，討論本月的質(zhì)量控制情況。每次檢測之前都應(yīng)了解質(zhì)控結(jié)果。

（4）建議長期和穩(wěn)定地使用一種質(zhì)量好的試劑盒。

本文檔共57頁；當(dāng)前第50頁；編輯于星期三\17點25分（5）更換不同廠家的試劑盒后，必須重新繪制質(zhì)控圖。改用新批號試劑盒如結(jié)果偏離較大也應(yīng)重新制作質(zhì)控圖。使用新批號或不同廠家的試劑盒必須在質(zhì)控圖上注明使用日期。

（6）如發(fā)現(xiàn)質(zhì)控值劇烈位移或失控，應(yīng)填寫報告單，上交質(zhì)量負責(zé)人，分析原因并決定是否發(fā)出檢測報告。

（7）使用新批次的外部對照質(zhì)控血清時，必須重新繪制質(zhì)控圖。

（8）及時發(fā)現(xiàn)質(zhì)控結(jié)果失控

本文檔共57頁；當(dāng)前第51頁