正交實驗法優(yōu)選六味木香片的醇提工藝

正交實驗法優(yōu)選六味木香片的醇提工藝【摘要】目的優(yōu)選乙醇回流法提取六味木香片中醇溶性成分的最佳工藝。方法采用正交實驗法，以固含量和胡椒堿含量為考察指標，對乙醇濃度、回流次數(shù)、乙醇用量等影響因素進行研究。結果確定最佳工藝為加10倍量80％乙醇，回流提取3次，1h/次。結論應用該工藝提取效率高，穩(wěn)定性好，適于工業(yè)化生產(chǎn)。

【關鍵詞】六味木香片；正交設計；胡椒堿；醇提工藝

Abstract：ObjectiveTooptimizetheconditionsforthealcoholextractionofLiuWeiMuXiangtablet.MethodsWiththeextractyieldandpiperylpiperidinecontentasindex,orthogonaltestwasusedtoevaluatetheinfluencefactors,includingtheconcentrationofalcohol,theextractingtimeandtheamountofalcohol.ResultsTheoptimumprocesswas10timesof80%alcohol,extracting3timesand1houreachtime.ConclusionTheprocessisefficient,stableandsuitableforindustrialproduction.

Keywords：LiuWeiMuXiangtablet；Orthogonaltest;Piperylpiperidine;Alcoholextraction

六味木香膠囊［1］源于蒙古族驗方，由木香、豆蔻、蓽茇、梔子、石榴皮、鬧羊花等6味組成，具有開郁行氣、止痛的功效，但該劑型的缺點是未經(jīng)提取，粉末直接入藥，導致服用量偏大，6粒/次，患者順應性差。本研究根據(jù)處方中六味中藥的有效成分及活性部位，采用多種提取方法相結合，對六味木香膠囊進行劑型改革，制成六味木香片，將服用量減至2片/次［2］。由于木香、豆蔻、蓽茇所含揮發(fā)油均為有效成分，必須先對其提取完全后，提油后藥渣再與鬧羊花合并，考慮其均含有醇溶性有效成分，用乙醇回流法進行提取，以固含量和蓽茇中活性成分胡椒堿為指標成分，運用正交實驗設計進行醇提工藝的優(yōu)選研究。

1材料與儀器

材料

木香、豆蔻、蓽茇及鬧羊花均購于江西省中醫(yī)醫(yī)院藥劑科，經(jīng)江西中醫(yī)學院中藥鑒定教研室鑒定；胡椒堿含量測定用對照品；乙醇；甲醇；水為重蒸水。

儀器

P200Ⅱ高效液相色譜儀，UV200Ⅱ紫外檢測器；METTLERAE240型十萬分之一天平；KQ3200超聲波清洗器；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮儀。

2方法與結果

正交實驗設計根據(jù)預實驗，回流提取的效率與乙醇濃度、回流次數(shù)以及乙醇用量有關，固定回流時間為1h，以固含量和有效成分胡椒堿的含量為指標，采用L9(34)正交實驗表對以上3個因素進行考察。因素水平列于表1。表1乙醇回流提取因素水平

胡椒堿的含量測定

色譜條件

色譜柱：HyperODSC18(mm×200mm)；流動相：甲醇水；檢測波長：343nm；柱溫：室溫；流速：ml/min；進樣量：10μl；理論塔板數(shù)按胡椒堿計不低于2000。

對照品溶液的制備精密稱取胡椒堿對照品mg置于50ml棕色量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，備用。

供試品溶液的制備取木香、豆蔻、蓽茇三味提油后烘干的藥渣17g，加鬧羊花5g，按正交表條件進行回流提取，將回流液濾過，回收乙醇，濃縮，真空干燥得干浸膏。取相當于g蓽茇藥材的干膏［3］，精密稱定，置100ml棕色量瓶中,加無水乙醇約80ml，超聲處理至少30min，放置至室溫后，加無水乙醇至刻度，搖勻，濾過。

標準曲線的制定

分別精密吸取胡椒堿對照品溶液1，2，5，，10，μl，注入高效液相色譜儀，記錄峰面積。以胡椒堿的量為橫坐標，峰面積為縱坐標，求得回歸方程為：Y=1－，r=9。表明胡椒堿在4～μg范圍內(nèi)線性關系良好。

精密度實驗

取胡椒堿對照品溶液，在上述色譜條件下連續(xù)測定6次，以峰面積計算RSD為%。

穩(wěn)定性實驗

取同一供試樣品，分別在每隔2h進樣，測定峰面積，結果10h內(nèi)基本穩(wěn)定。

正交實驗結果取木香、豆蔻、蓽茇3味提油后烘干的藥渣17g，加上鬧羊花5g，按正交表條件進行回流提取，將回流液濾過，回收乙醇，濃縮，真空干燥得干浸膏，稱重，計算固含量。同時，采用HPLC法測定9份干膏中胡椒堿含量，色譜條件同前所述，結果見表2。固含量方差分析結果見表3，胡椒堿含量方差分析結果見表4。表2L9(34)回流提取正交實驗表3固含量方差分析結果

表4干膏胡椒堿含量方差分析結果

3討論

從固含量看，影響因素主次順序為B﹥C﹥A，由于B因素對結果有顯著影響，其水平優(yōu)勢為B3＞B2＞B1。

從峰面積百分比看，影響因素主次順序為A﹥B﹥C，其中A、B因素對結果有極顯著影響，C因素對結果有顯著影響，其水平優(yōu)勢為A3＞A2＞A1,B3＞B1＞B2，C3＞C1＞C2，最佳組合為A3B3C3，綜合兩方面考慮，最后確定回流提取最佳工藝為A3B3C3，即用10倍量80％乙醇，回流提取3次，1h/次。

按照最佳回流工藝條件A3B3C3重復提取，工藝穩(wěn)定，結果可靠。

【參考文獻】

［1］WS3-169-2001,國家藥品監(jiān)