免疫組化應用課件

免疫組化應用免疫組化應用免疫組化應用免疫組化的原理根據(jù)抗原和抗體特異性反應的免疫學原理，應用標記抗體檢測組織中未知抗原的方法?？乖?抗體（標記）→抗原抗體復合物通過抗原和抗體的特異性結合檢測組織中的化學成分（蛋白—抗原）顯示系統(tǒng)：抗原抗體復合物+檢測系統(tǒng)將二抗和酶通過一個多聚葡聚糖骨架聯(lián)接成一個多聚體（即）免疫組化的原理根據(jù)抗原和抗體特異性反應的免疫學原理，應用標記抗體檢測組織中未知抗原的方法?？乖?抗體（標記）→抗原抗體復合物通過抗原和抗體的特異性結合檢測組織中的化學成分（蛋白—抗原）顯示系統(tǒng)：抗原抗體復合物+檢測系統(tǒng)將二抗和酶通過一個多聚葡聚糖骨架聯(lián)接成一個多聚體（即）PrimaryAntibodyPolymercomplexSubstrate-chromogensolution染色方法(1)、將切片撈至膠片上，放入60℃溫箱中烘烤1小時。(2)、經(jīng)二甲苯脫蠟，梯度酒精脫水后流水沖洗。(3)、過3％H2O2中20后流水沖洗。(4)、修復高火3后，低火15后，自然冷卻至室溫。(5)、取出玻片放至濕盒，沖洗，33。擦干玻片，每張玻片加1滴或50μl的第一抗體40。(6)、沖洗，33。擦干玻片，每張玻片加1滴或50μl的聚合物增強劑(試劑A），室溫孵育20。(7)、沖洗，33。擦干玻片，每張玻片加1滴或50μl的酶標鼠/兔聚合物(試劑B），室溫下孵育30。(8)、沖洗，33。擦干玻片，每張玻片加2滴或100μl的液，顯微鏡下觀察，10顯色。(9)、流水沖洗，蘇木素復染1-2，0.1％鹽酸分化，自來水沖洗后返藍。(10)、梯度酒精脫水干燥，二甲苯透明，中性樹膠封片。免疫組化的使用范圍組織學標本中的應用細胞塊中的應用各系統(tǒng)腫瘤的抗體表達對腫瘤進行來源分類上皮性腫瘤的標記物間葉腫瘤的標記物淋巴造血系統(tǒng)腫瘤的標記物神經(jīng)內分泌腫瘤的標記物、、56各系統(tǒng)腫瘤的抗體表達上皮性腫瘤中的腺癌CK7+CK20-Villin+Villin-可見于：胃腺癌(41.67%)、乳頭狀腎細胞癌(17.39%)、乳腺浸潤性導管癌(5.36%)、卵巢漿液性腺癌(3.7%)少見于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、嫌色細胞癌、前列腺癌、直腸腺癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢粘液性癌?？梢娪冢喝橄俳櫺托∪~癌(100%）、肺腺癌(95.83%）、乳腺浸潤型導管癌(78.57%)、卵巢漿液性腺癌(70.37%）、嫌色細胞癌(66.67%）、卵巢粘液性腺癌(37.5%）、肺鱗癌(11.43%）、前列腺癌(9.09%）、直腸腺癌(2.78%）、胃腺癌(2.78%）、腎透明細胞癌(2.33%）。少見于：肺小細胞癌、乳頭狀腎細胞癌。CK7+CK20+Villin+Villin-可見于：胃腺癌(13.89%）、卵巢粘液性腺癌(12.5%）、直腸腺癌(5.56%），乳頭狀腎細胞癌(4.35%）少見于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、腎嫌色細胞癌、乳腺癌、卵巢漿液性癌?？梢娪冢郝殉舱骋盒韵侔?12.5%）乳腺浸潤性導管癌(3.57%）、胃腺癌(2.78%）、直腸腺癌(2.78%）。少見于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、乳頭狀腎細胞癌、嫌色細胞癌、前列腺癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢漿液性癌。CK7-CK20-Villin+Villin-可見于：乳頭狀腎細胞癌(43.47%）、胃腺癌(18.06%）、直腸腺癌(16.67%）、卵巢粘液腺癌(12.5%）、嫌色細胞癌(11.11%）、前列腺癌(4.54%）。少見于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、乳腺浸潤型導管癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢漿液性癌?？梢娪冢悍涡〖毎?100%）、腎透明細胞癌(42/43，97.67%）肺鱗癌(88.57%）、前列腺癌(86.36%）、乳頭狀腎細胞癌(34.78%）、嫌色細胞癌(22.22%）、卵巢漿液腺癌(18.52%）、乳腺浸潤型導管癌(16.07%）、胃腺癌(13.89%）、直腸腺癌(5.56%）、肺腺癌(4.17%）。少見于：乳腺浸潤性小葉腺癌、卵巢粘液腺癌。CK7-CK20+Villin+Villin-可見于：直腸腺癌(52.78%)、卵巢粘液性腺癌(25%)、胃腺癌(6.94%)、卵巢漿液性癌(3.7%）。少見于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、乳頭狀腎細胞癌、嫌色細胞癌、前列腺癌、乳腺浸潤性導管癌、乳腺浸潤性小葉癌?？梢娪冢褐蹦c腺癌(13.89%）、卵巢漿液性腺癌(3.7%）。少見于：肺鱗癌、肺腺癌、肺小細胞癌、腎透明細胞癌、乳頭狀腎細胞癌、嫌色細胞癌、前列腺癌、乳腺浸潤性導管癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢粘液性癌、胃腺癌1、軟組織小圓細胞腫瘤

100小細胞未分化癌+-+-----神經(jīng)內分泌癌+-+-++--神經(jīng)母細胞瘤-+--++-尤文肉瘤-+--++-胚胎性橫紋肌肉瘤-+----+-惡性淋巴瘤---+----惡性黑色素瘤-+----+(45+)、、、、、45胞漿胞膜/胞漿胞膜100胞核/漿間皮：、陽性橫紋?。?+)、1（弱+）血管：31、34陽性顆粒細胞瘤：100、342100神經(jīng)纖維瘤+++孤立性纖維性腫瘤++-滑膜肉瘤-+-孤立性纖維性腫瘤99+滑膜肉瘤、雙陽2、乳腺P635/634βE12導管原位癌+-+-浸潤性導管癌--+-浸潤性小葉癌---+P63胞核5/6胞漿胞漿、胞膜34βE12胞漿

乳腺病理、顯示腫瘤的內分泌表達，與腫瘤的內分泌治療反應率相關2腫瘤相關因子，靶向治療67顯示細胞增殖指數(shù)、胞核2胞膜67胞核中間型上皮成熟型5/68/18+5/68/18+干細胞5/68/18-63-中間型肌上皮成熟型5/663+5/663+5/6,8/18，胞漿P63胞核2的染色意義陽性強度的判斷：強的著色是指4x或10x物鏡下易于觀察到，弱的強的著色是指需要用40x物鏡觀察。2與治療及預后的關系不僅與浸潤型乳腺癌的不良預后有關，并能預測多種化療藥機內分泌治療的敏感性。靶向藥物赫賽汀2的染色意義0+浸潤性腫瘤細胞無著色1+任何比例的浸潤性腫瘤細胞呈弱而不完整的包膜著色或＜10%的腫瘤細胞呈弱且完整著色2+≥10%的腫瘤細胞呈現(xiàn)弱或不一致的、完整的包膜著色；或≤30%的腫瘤細胞呈現(xiàn)強且完整的包膜著色3+＞30%的浸潤性腫瘤細胞呈強且完整包膜著色指導治療267:60-70%的內分泌治療反應率:10%的內分泌治療反應率:40%的內分泌治療反應率:46%的內分泌治療反應率陽性分級（或陽性細胞數(shù)比例）與治療反應的相關性尚缺乏統(tǒng)一認識3、消化720+胃腸間質瘤117，34肝1漿陽、、2主要表達于結腸，胃癌和卵巢粘液性腺癌也有表達117胞膜/胞漿，34胞膜2胞核7，20，，胞漿4、泌尿腎10117透明細胞-++-+(膜)+-（乳頭狀癌）嫌色細胞癌++-+（漿）鐵++（嗜酸細胞腺瘤）集合管癌+++-±、–L、胞漿10胞膜、117、胞膜/胞漿

移行上皮：正常7陽性，20陽性提示腫瘤5、生殖卵巢上皮性腫瘤720-，125卵巢上皮（+）無性細胞瘤（女性）=精原細胞瘤（男性），，117胚胎性癌，30，子宮

合體滋養(yǎng)葉弱+細胞滋養(yǎng)葉--中間滋養(yǎng)葉弱+，胞漿

子宮內膜樣癌++-宮頸癌--+胞漿胞核胞膜/胞漿前列腺基底細胞陽性標記：高分子量（34βE125/6）P504s腫瘤性腺泡（+），良性腺泡（-）前列腺上皮（+）34βE12，5/6，，P504s胞漿6、神經(jīng)內分泌甲狀腺156乳頭狀癌++--濾泡癌++-+髓樣癌-+++甲狀腺乳頭狀癌3，19、胞漿1胞核56胞膜腎上腺皮質1、、、陽性髓質、、15陽性1、、、胞漿胞核/胞漿15胞膜/胞漿7、肺鱗狀細胞癌14、5/6、34βE12和p63；腺癌7和；神經(jīng)內分泌癌56、、、13、18、。