醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)章診斷預(yù)防治療

醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)章診斷預(yù)防治療第1頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

依遺傳病診斷的時(shí)間不同分：

&現(xiàn)癥病人診斷：臨床病人(患者)的診斷。&癥狀前診斷：

癥狀出現(xiàn)前的確認(rèn)(延遲顯現(xiàn)、攜帶者)。

&

產(chǎn)前診斷：★

胎兒出生前診斷(染色體、基因、酶)。

第2頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

產(chǎn)前診斷和癥狀前診斷均可較早地發(fā)現(xiàn)遺傳病患者或攜帶者。產(chǎn)前診斷選擇性流產(chǎn)可減少患者/攜帶者出生。癥狀前診斷在癥狀出現(xiàn)前早治療以控制或延遲癥狀出現(xiàn)的時(shí)間及嚴(yán)重程度。

所以遺傳病產(chǎn)前診斷和癥狀前診斷就比現(xiàn)癥病人的診斷重要得多。產(chǎn)前診斷可避免所有染色體異常胎兒的出生和減少部分單基因病患兒出生。第一節(jié)遺傳病的臨床診斷第3頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月產(chǎn)前診斷(出生前診斷；prenataldiagnosis）對(duì)胎兒羊水或絨毛細(xì)胞染色體、基因、酶的分析。

適宜產(chǎn)前診斷的對(duì)象依遺傳病的嚴(yán)重程度和發(fā)病率的高低，產(chǎn)前診斷的適宜對(duì)象排序如下：①夫婦之一有染色體畸變或是平衡易位攜帶者，夫婦染色體正常但生過(guò)染色體病患兒。

②

35歲以上的高齡孕婦。③夫婦之一是神經(jīng)管畸形或生該畸形患兒的孕婦。第4頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月④夫婦之一患先天性酶病或生過(guò)該病患兒的孕婦。⑤

X連鎖遺傳病致病基因攜帶者(生過(guò)患兒)孕婦。⑥習(xí)慣性流產(chǎn)史(2次以上不明原因流產(chǎn))的孕婦。

⑦羊水過(guò)多(≥2000ml;一般800-1200ml)的孕婦。⑧夫婦之一有致畸因素(射線、藥物)接觸史的孕婦。

⑨有AR遺傳病家族史，又近親結(jié)婚的孕婦。已出現(xiàn)先兆流產(chǎn)、妊娠時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、有出血傾向

的孕婦不宜做產(chǎn)前診斷。

第5頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月產(chǎn)前診斷的技術(shù)和方法

①B超

B超是一種安全無(wú)創(chuàng)的檢測(cè)方法，能夠詳細(xì)檢查胎兒的外部形態(tài)和內(nèi)部結(jié)構(gòu)，使許多遺傳性疾病得到早期診斷?？稍\斷疾病有;神經(jīng)管缺陷、腦積水、無(wú)腦畸形；唇裂、腭裂，頸部淋巴管腫瘤；先天性心臟病，支氣管及肺發(fā)育異常、胸腔積液。其他的異常，如先天性單側(cè)腎缺如，先天性幽門狹窄、先天性巨結(jié)腸等。

第6頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

②羊膜穿刺

羊膜穿刺是在B超的監(jiān)視下，有經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)生用消毒的注射器抽取胎兒羊水（圖）。羊膜穿刺一般在妊娠16~20周進(jìn)行，流產(chǎn)的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較小。抽取的羊水進(jìn)行生化檢測(cè)；胎兒脫落細(xì)胞培養(yǎng)后進(jìn)行生化檢測(cè)、染色體分析或基因檢測(cè)。如；羊水中甲胎蛋白濃度過(guò)高時(shí)，提示胎兒可能有無(wú)腦、開(kāi)放性脊柱裂、脊髓脊膜膨出和腦積水等異常。第7頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

孕16~20周羊水取樣示意圖恥骨與肚臍連線1/2處進(jìn)針,抽取15-20ml。第8頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月③絨毛取樣法

妊娠7~9周進(jìn)行，是早期診斷方法。在B超監(jiān)視下，用特制取樣器，從陰道經(jīng)宮頸進(jìn)入子宮，沿子宮壁到達(dá)取樣處，吸取絨毛(圖)。優(yōu)點(diǎn)；時(shí)間早，需作選擇性流產(chǎn)時(shí)，孕婦損傷和痛苦較小。

缺點(diǎn)；取樣操作要求高，易污染，胎兒、母體易感染，流產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)是羊膜取樣的兩倍。

范圍；診斷染色體病，遺傳性酶病，性別鑒定及可做基因診斷的所有遺傳病。第9頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月孕7~9周絨毛取樣法示意圖第10頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月④臍帶穿刺術(shù)

在B超監(jiān)視下，用細(xì)針經(jīng)腹壁、子宮進(jìn)入胎兒臍帶抽取胎兒血液。取樣最好在妊娠18周，常用于因錯(cuò)過(guò)絨毛取樣或羊膜取樣最佳時(shí)機(jī)或羊水檢查失敗的補(bǔ)救措施?？蓹z測(cè)胎兒血液系統(tǒng)疾病，先天性代謝缺陷病及某些單基因病。

第11頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月⑤胎兒鏡檢查(羊膜腔鏡或?qū)m腔鏡)它可在羊膜腔直接觀察胎兒外形、性別和發(fā)育狀況及有否畸形。還可抽取羊水或胎血檢查及宮內(nèi)治療。因此，理論上這是一種最理想的方法。但因操作困難，易引起并發(fā)癥，目前還不被廣泛采用。胎兒鏡最佳檢查時(shí)間妊娠18~20周，可診斷大皰性表皮松懈癥及某些皮膚病。

第12頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月⑥分離孕婦外周血中的胎兒細(xì)胞

前述產(chǎn)前診斷材料的獲得對(duì)于胎兒和母體都有創(chuàng)傷，存在流產(chǎn)和感染風(fēng)險(xiǎn)。

20世紀(jì)90年代末，利用胎兒細(xì)胞可通過(guò)胎盤屏障進(jìn)入母體血液中，用流式細(xì)胞儀分離技術(shù)，磁激活細(xì)胞分選技術(shù)，免疫磁珠法，顯微操作分選法，分離胎兒細(xì)胞。該法富集的胎兒細(xì)胞很少，需用高靈敏的技術(shù)方法進(jìn)行一步分析檢測(cè)，常用方法PCR。

第13頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月⑦植入前診斷

隨著體外受精，試管嬰兒和胚胎移植技術(shù)的開(kāi)展，以及單細(xì)胞基因診斷技術(shù)的應(yīng)用，目前正探索胚胎植入前的診斷技術(shù)。

體外培養(yǎng)的4-8細(xì)胞胚胎或受精后6天胚胎著床前，用顯微操作技術(shù)取出一個(gè)細(xì)胞，應(yīng)用PCR等技術(shù)進(jìn)行特定基因和染色體畸變的檢測(cè)，將人類遺傳缺陷掌控在最早階段。是遺傳病產(chǎn)前診斷的重大突破。第14頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

二、病史、癥狀與體征

1．病史：主要采集與遺傳病有關(guān)項(xiàng)目：(1)家族史:患者父、母家系中各成員健康狀況。(2)婚姻史:

婚齡、次數(shù)、配偶及配偶家系健康狀況，特別注意是否有近親結(jié)婚。(3)生育史:

育齡、健康及患病子女?dāng)?shù)，有無(wú)流產(chǎn)、死產(chǎn)、早產(chǎn)、畸胎等歷史。第15頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

2．癥狀與體征

遺傳病常表現(xiàn)特異癥狀和體征：

（1）特異性癥候群：遺傳病的癥狀與體征常許多關(guān)聯(lián)性狀并列出現(xiàn)。

如；與智力低下相關(guān)的疾病(PKU、半乳糖血癥)，

PKU的特殊性狀尿臭可區(qū)別于其它疾病。

（2）絕大多數(shù)遺傳病可見(jiàn)形態(tài)學(xué)改變(畸形)。

（3）多數(shù)遺傳病有早期癥狀，如發(fā)育遲緩等。

（4）遺傳病的最后確診，需遺傳學(xué)的特殊診斷。第16頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、系譜分析1．群體普查：

某時(shí)間對(duì)某一群體進(jìn)行某些遺傳病發(fā)病率調(diào)查。

樣本要求：占地區(qū)人口1/10~1/100，≥10萬(wàn)人。

2．家系調(diào)查：

對(duì)患者1、2、3級(jí)親屬發(fā)病率的調(diào)查。

3．系譜分析：

經(jīng)過(guò)回顧性分析以確定疾病遺傳方式。第17頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

系譜分析時(shí)的注意事項(xiàng)；★（1）系統(tǒng)、完整：

至少收集三代或更多代資料，力求詳細(xì)、準(zhǔn)確。如；死因、死胎、流產(chǎn)、新生兒死亡、夭折、有無(wú)近婚、重婚、非婚生子女、半同胞、養(yǎng)子女及嫁出和嫁入者的家族資料等。（2）去偽存真：

與患者溝通要熱情、耐心、有同情心以取得信任。要講明意義，曉以利害，并進(jìn)行必要的核查。第18頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月(3)系譜分析時(shí)要考慮全面：

遺傳方式、單基因遺傳、線粒體遺傳、多基因遺傳、遺傳異質(zhì)性、外顯不全、延遲顯性、限性顯性、從性顯性、遺傳印記、動(dòng)態(tài)突變，以及散發(fā)病例的新基因突變引發(fā)等。特別是有遺傳異質(zhì)性的疾??；如耳聾，50%-單；

AR占43.5%;AD占6.5%;

XR0.5%;環(huán)境占30%；特發(fā)占20%。

先天性白內(nèi)障；10%單基因(多AD)、20%染色體畸變、25%宮內(nèi)感染、34%特發(fā)。第19頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié)細(xì)胞遺傳學(xué)檢查★

核型分析是確診染色體病的主要方法。家族中有智力發(fā)育不全、先天畸形(生殖器畸形)、

生殖能力異常(不育、閉經(jīng)、多發(fā)性流產(chǎn))的個(gè)體以及確認(rèn)染色體異常者或攜帶者時(shí)均宜檢查染色體。

如;

發(fā)育遲緩：常見(jiàn)1q與11p相互易位。乳腺癌的多種染色體異常t(1q;11q)第20頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月染色體檢查適應(yīng)征★有下列情況之一的應(yīng)建議其作核型分析①有多個(gè)出生缺陷患者的家系。②習(xí)慣性流產(chǎn)的夫婦雙方。③可疑是先天愚型的個(gè)體及其雙親。④X或Y染色質(zhì)數(shù)目異常者。⑤體態(tài)和精神發(fā)育異常并伴有先天畸型者。⑥卵巢或睪丸發(fā)育不全者。⑦原發(fā)性閉經(jīng)，女性不孕和男性不育者。⑧外生殖器兩性畸形者。⑨身材高大(1.80以上)且性格粗暴者。

⑩惡性血液病(慢粒、急淋等)患者。第21頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

性染色質(zhì)檢查(X/Y染色質(zhì))：

針對(duì)兩性畸形或性染色體數(shù)目異常疾病而進(jìn)行的檢查，可作為染色體檢查的一種輔助手段。易取材(口腔上皮、發(fā)根毛囊)、時(shí)間短、費(fèi)用低、易接受。第22頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)蛋白質(zhì)水平診斷(生化檢查)P193常見(jiàn)疾病的生化檢查

苯丙酮尿癥粘多糖病楓糖尿癥白化病中間代謝產(chǎn)物血清（↑）苯丙氨酸

纈氨酸

亮氨酸

異亮氨酸

尿（↑）苯丙酮酸

苯乙酸硫酸皮膚素

硫酸乙肝素

硫酸角質(zhì)素酮衍生物

缺陷酶酶活性（↓）苯丙氨酸羥化酶

支鏈酮酸羧化酶酪氨酸酶酶檢測(cè)采樣部位肝

肝

白細(xì)胞

成纖維細(xì)胞毛囊以生化手段定性、定量地分析患者的酶和蛋白質(zhì)。臨床診斷單基因病首選法，最常用檢測(cè)酶的缺陷。第23頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第四節(jié)基因診斷★

直接檢查基因結(jié)構(gòu)，對(duì)被檢查者是否有基因缺陷做出狀態(tài)和疾病的診斷。

簡(jiǎn)悅威(YWKan

1978)首次用DNA重組法進(jìn)行HbS產(chǎn)前診斷，目前臨床上普遍開(kāi)始試用基因診斷技術(shù)。

可做基因診斷疾病已達(dá)4000余種(包括亞型)。

基因診斷的出現(xiàn)，使對(duì)疾病的診斷模式由表型診斷過(guò)渡為基因型診斷或稱逆向診斷。

基因→基因型→表型第24頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

生化分析僅在發(fā)病前或產(chǎn)前對(duì)少數(shù)遺傳病做診斷.因待測(cè)物是蛋白質(zhì)、酶或激素等基因的產(chǎn)物，而基因表達(dá)有個(gè)體發(fā)育的階段性和組織特異性,故局限了疾病檢測(cè)的類型。

基因診斷則不受限制，任何來(lái)源的有核細(xì)胞,基因的組成是一致的(免疫球蛋白基因、T細(xì)胞受體基因、腫瘤細(xì)胞例外)。

基因診斷特別適用于生化分析無(wú)法確診遺傳病。

第25頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

如；PKU，生化檢測(cè)需取肝組織來(lái)測(cè)定苯丙氨酸羥化酶活性，因無(wú)法取得胎兒的肝組織細(xì)胞而不能做產(chǎn)前診斷?；蛟\斷直接以基因?yàn)樘綔y(cè)對(duì)象，可用所有有核細(xì)胞為標(biāo)本。

PKU可取絨毛或羊水細(xì)胞進(jìn)行診斷。第26頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、基因診斷的特點(diǎn)★

直接檢測(cè)基因結(jié)構(gòu)→基因型→表型。逆向診斷改變了傳統(tǒng)表型診斷模式，可在發(fā)病前，產(chǎn)前和對(duì)攜帶者做出準(zhǔn)確診斷，并不受時(shí)間、細(xì)胞類型、年齡限制。

因基因診斷的特點(diǎn):針對(duì)性強(qiáng)、特異性高、靈敏度高、適應(yīng)性廣。第27頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

①以特定基因?yàn)槟繕?biāo)，檢測(cè)基因變化，特異性強(qiáng)。

②分子雜交和PCR技術(shù)具有信號(hào)放大作用，微量樣品即可進(jìn)行診斷，靈敏度高。③在疾病尚無(wú)臨床表現(xiàn)前和產(chǎn)前，以及特定人群的篩查等，針對(duì)性強(qiáng)。

④檢測(cè)樣品獲得便利，不受個(gè)體發(fā)育階段性和基因表達(dá)與否限制，適應(yīng)廣泛?；蛲蛔兙叨鄻有裕笔?、倒位、點(diǎn)突變、動(dòng)態(tài)突變可進(jìn)行基因檢測(cè)外，大多數(shù)基因突變的分析復(fù)雜而繁瑣，有較高的難度。

第28頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

★二、基因診斷的基本途徑2、致病基因未知或不清的-間接診斷分直接診斷和間接診斷兩種；

1、致病基因已知的疾病-直接診斷使用基因本身或緊鄰的DNA序列為探針，檢測(cè)有無(wú)突變、缺失等異常。

致病基因不清時(shí)，不能直接檢測(cè)，可采用DNA

多態(tài)性標(biāo)記的檢測(cè)法，利用已知多態(tài)性遺傳標(biāo)記與疾病的連鎖關(guān)系間接診斷疾病。第29頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

（2）基因突變?cè)\斷舉例★

①RFLP對(duì)PKU(AR)的基因診斷用克隆的PAH基因(苯丙氨酸羥化酶)做探針，

Southern雜交：

用3種限制酶(MapI、SphI)對(duì)7個(gè)PKU家系進(jìn)行長(zhǎng)度片段多態(tài)性(RFLP)分析。第30頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

Msp酶切顯示；僅有19kb片段是患者,

說(shuō)明19kb片段與PKU致病基因連鎖

。含23kb片段者正常；同時(shí)有19kb和23kb是攜帶者。

1212

M23/M19M23/M19

S9.7/S7.0

S9.7/S7.03434M19/M19

M23/M23

S9.7/S9.7S7.0/S7.0

Msp酶切Sph酶切23kb

11kb

19kb

9.7kb7.0kb

12341234SphI酶切結(jié)果顯示;9.7kb片段與致病基因連鎖，7.0Kb正常，僅有9.7kb片段是患者。第31頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月現(xiàn)在對(duì)PAH基因已有了更深入了解，它位于12q22-24.1，長(zhǎng)約90kb，PKU的基因診斷就不僅限于使用RFLP法，也可用SSCP技術(shù)直接檢測(cè)基因的突變。在高加索人中已發(fā)現(xiàn)40多種由點(diǎn)突變及缺失引起的PAH突變基因，在中國(guó)PKU患者中檢出了14種點(diǎn)突變。第32頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

2、血友病A的基因診斷

★

血友病A是凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因缺陷，主要為堿基取代或堿基缺失、插入，這些突變產(chǎn)物是不完整、無(wú)活性或不穩(wěn)定FⅧ肽鏈，故臨床癥狀輕重不一?；蛟\斷法可檢出有部分缺失的患者和女?dāng)y帶者。產(chǎn)前基因診斷可通過(guò)RFLP連鎖分析。目前多采用PCR與RFLP相結(jié)合方法，先用

PCR技術(shù)將包含突變DNA片段擴(kuò)增，然后用識(shí)別該位點(diǎn)的限制酶來(lái)酶解，電泳后直接檢測(cè)多態(tài)性位點(diǎn)的狀態(tài)。第33頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月ⅠⅡ1212345675/5

5/-5/55/205/-5/2020/-5/-20/-20Kb-

-

-

-5Kb-------AB上圖可知；母親是5.0和20雜合體；Ⅱ6得到5.0片段是患者，Ⅱ7得到20片段正常；說(shuō)明5.0是帶致病基因片段；Ⅱ1、Ⅱ3是5.0純合子,其父Ⅰ2具有5.0等位片段(功能正常)，故Ⅰ2正常。從檢測(cè)結(jié)果提示；Ⅱ1、Ⅱ3是5.0/5.0，如懷孕，應(yīng)做產(chǎn)前基因診斷。血友病A系譜BglⅠ酶切？？第34頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

3、DNA序列測(cè)定技術(shù)

目前的兩種序列測(cè)定技術(shù)是Sanger等(1977)提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化學(xué)降解法。兩種方法都是同樣生成互相獨(dú)立的若干組帶放射性標(biāo)記的寡核苷酸，每組寡核苷酸都有固定的起點(diǎn)，但卻隨機(jī)終止于特定的一種或者多種殘基上。由于DNA上的每個(gè)bp出現(xiàn)在可變終止端的機(jī)會(huì)均等，這些寡核苷酸的長(zhǎng)度由某一種特定堿基在原DNA全片段上的位置所決定。然后在可區(qū)分長(zhǎng)度僅差一個(gè)核苷酸的不同DNA分子的條件下,對(duì)各組寡核苷酸電泳分析,只要把幾組寡核苷酸加樣于測(cè)序凝膠中若干個(gè)相鄰的泳道這上，即可從凝膠的放射自影片上直接讀出DNA上的核苷酸順序。第35頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

為適應(yīng)大規(guī)模測(cè)序的需要，高速DNA測(cè)序技術(shù)在不斷發(fā)展，1987美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司(AppliedBiosystem)年推出自動(dòng)DNA序列測(cè)定儀(370和373型)。90年代初，歐洲分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室(EMBL)與瑞典的Pharacia公司也聯(lián)手推出最新型的全自動(dòng)激光序列分析儀(A.L.F)，使用該儀器每克隆能分離到1000bp,兩條DNA模板分別測(cè)序后精確率>99.17%。完成了DNA序列測(cè)定的又一次重大突破。第36頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4、基因芯片

基因芯片又稱DNA芯片(DNAchip

)或DNA微陣列(DNAmicroarray)。

其原理是采用光導(dǎo)原位合成或顯微印刷等方法將大量特定序列的探針?lè)肿用芗⒂行虻毓潭ㄓ诮?jīng)過(guò)相應(yīng)處理的硅片、玻片、硝酸纖維素膜等載體上，然后加入標(biāo)記的待測(cè)樣品，進(jìn)行多元雜交，通過(guò)雜交信號(hào)的強(qiáng)弱及分布，來(lái)分析目的DNA的有無(wú)、數(shù)量及序列，從而獲得受檢樣品的遺傳信息。

其工作原理是應(yīng)用已知核酸序列與互補(bǔ)的靶序列雜交，根據(jù)雜交信號(hào)進(jìn)行定性與定量分析。

第37頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

基因芯片能夠同時(shí)平行分析數(shù)萬(wàn)個(gè)基因,進(jìn)行高通量篩選與檢測(cè)分析。根據(jù)所用探針類型,基因芯片可分為cDNA(complementDNA)芯片和寡核苷酸芯片。根據(jù)檢測(cè)目的又可分為表達(dá)譜芯片和單核苷酸多態(tài)性(singlenucleotidepolymorphisms,SNP)芯片。隨著芯片技術(shù)在其他生命科學(xué)領(lǐng)域的延伸,基因芯片的概念已泛化為生物芯片；包括基因芯片、蛋白質(zhì)芯片、糖芯片、細(xì)胞芯片、流式芯片、組織芯片等。第38頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月基因診斷相關(guān)概念

1、探針(probe)

帶有可以檢出標(biāo)記物的一段特定核苷酸序列。

可以是基因本身或基因的一部分，也可是與目的基因緊密連鎖的遺傳標(biāo)記，它能專一地與目的基因或標(biāo)記互補(bǔ)結(jié)合。探針貯存形式有重組質(zhì)粒和含重組質(zhì)粒的細(xì)菌

或噬菌體兩種。依探針來(lái)源的不同，可分為5種：

第39頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

①基因組探針；

從基因組中分離制備出的探針。

②cDNA探針；

以mRNA為模板，反轉(zhuǎn)錄得到cDNA制成的探針。

③人工合成的寡核苷酸探針；

④病毒的DNA或RNA片段；

⑤人類特定RNA探針；第40頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月標(biāo)記：放射性同位素：32P、3H、14C、35S、125I、…檢測(cè)：液閃儀記數(shù)：適于點(diǎn)雜交。放射自顯影：X光片；乳膠(適于原位雜交)。

標(biāo)記：非放射性：銀、二硝基苯、磺基。

熒光物質(zhì)：羅丹明(FITC)、

半抗原、毛地黃甙、三硝基苯酚、生物素。

酶：辣根過(guò)氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶(ARP)。第41頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、限制性內(nèi)切酶(RestrictionEndozymes；RE）

RE是一類具有嚴(yán)格識(shí)別位點(diǎn)的酶類，屬水解酶類，均從細(xì)菌中提取而來(lái)。依識(shí)別位置和切割位置的相關(guān)性可分三類；即Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型。

Ⅱ型識(shí)別與切割位點(diǎn)一致，為基因工程使用。

RE的命名；依來(lái)源菌株命名；

屬名+種名+株名-酶編號(hào)縮寫字符組合而成。

如EcoRⅠ；來(lái)自大腸桿菌(Escherichiacoli)R菌株、分離到的第一種酶。第42頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

限制性內(nèi)切酶Ⅱ(TypeⅡRE）

最常用的是限制性內(nèi)切酶Ⅱ，它可以特異地識(shí)別和切割核苷酸序列，其識(shí)別接合與切割均在同一位（迴文結(jié)構(gòu)，4~7個(gè)核苷酸）點(diǎn)，該位點(diǎn)稱為限制性酶酶切位點(diǎn)或切點(diǎn)。在利用DNA多態(tài)性進(jìn)行的基因診斷中，限制性內(nèi)切

酶的選擇是否正確有效，以及酶解的好壞直接決定了基因診斷的準(zhǔn)確與否。第43頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、分子雜交

同源或異源的兩條DNA單鏈，依據(jù)堿基配對(duì)原則形成一條雙鏈DNA的過(guò)程。分子雜交按雜交介質(zhì)分按雜交體系分液相雜交固相雜交膜上雜交(印跡雜交)斑點(diǎn)雜交轉(zhuǎn)膜雜交菌落雜交玻片或乳膠雜交甲酰胺體系無(wú)甲酰胺體系第44頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月現(xiàn)在常用的是固相雜交，特別是在人工生物膜上進(jìn)行的膜上印跡雜交，人工生物膜主要有硝酸纖維素膜和尼龍膜。

探針與待測(cè)DNA分子雜交的主要過(guò)程待測(cè)DNA樣本→限制性內(nèi)切酶消化→

變性成單鏈→加入變性好的探針→雜交

→洗脫(除去未雜交上的樣本DNA和探針)

→分析(檢測(cè)探針信號(hào)，確認(rèn)是否雜交上)第45頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月①斑點(diǎn)雜交

膜上印跡雜交的一種。用打點(diǎn)器將待測(cè)DNA樣本(經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化后)直接點(diǎn)于生物膜上形成圓點(diǎn)(斑點(diǎn))印跡，而后進(jìn)行的雜交稱-斑點(diǎn)雜交。

DNA樣本若形成狹縫狀稱狹縫雜交。

屬于斑點(diǎn)雜交的變型。第46頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

②

Southern轉(zhuǎn)移與Southern雜交膜上印跡雜交中的轉(zhuǎn)膜雜交。

Southern轉(zhuǎn)移就是將DNA從凝膠轉(zhuǎn)移到生物膜上的技術(shù)，是英國(guó)Southern建立的。

特點(diǎn)是；待測(cè)DNA樣本點(diǎn)在凝膠上，經(jīng)Southern轉(zhuǎn)移，將凝膠電泳分離的DNA樣本片段原位轉(zhuǎn)移到生物膜上再進(jìn)行的雜交。Southern雜交即是轉(zhuǎn)移后進(jìn)行的雜交。第47頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

Southern轉(zhuǎn)移解決了探針與電泳分離后在凝膠中的

DNA片段進(jìn)行雜交的問(wèn)題（凝膠因軟易碎而不適于作雜交介質(zhì))，在早期DNA多態(tài)性分析中發(fā)揮了突出的作用。后來(lái)，有人將RNA電泳結(jié)果從凝膠轉(zhuǎn)移到生物膜上的過(guò)程稱為Northern轉(zhuǎn)移，經(jīng)過(guò)Northern過(guò)程而進(jìn)行的雜交稱為Northern雜交。將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移至生物膜上進(jìn)行檢測(cè)的過(guò)程稱為Western轉(zhuǎn)移。第48頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

4、DNA多態(tài)性(1)限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP）群體中不同個(gè)體在用同一限制酶切割和用同一探針進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，DNA酶切片段長(zhǎng)度可能出現(xiàn)差異。

RFLP反映了DNA多態(tài)性，是第一代多態(tài)性遺傳標(biāo)記。

因基因突變致限制酶的酶切位點(diǎn)發(fā)生改變，從而導(dǎo)致酶切片段在長(zhǎng)度上表現(xiàn)出的多態(tài)性。第49頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月多態(tài)性可能與疾病無(wú)關(guān)或相關(guān)聯(lián)，當(dāng)一疾病與某RFLP片段緊密連鎖，且酶切片段長(zhǎng)度及變異可用電泳及分子雜交法加以鑒定時(shí)，則可結(jié)合家系，利用RFLP連鎖分析對(duì)疾病做出基因診斷。較準(zhǔn)確的RFLP診斷，常需2或2種以上限制性內(nèi)切酶處理并進(jìn)行染色體單體型分析。即對(duì)一條染色體上兩個(gè)或兩個(gè)以上多態(tài)性位點(diǎn)狀態(tài)的組合的分析。第50頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月(2)串聯(lián)重復(fù)序列(VNTR)與DNA指紋圖

人基因組DNA中有許多可變的高度串聯(lián)重復(fù)序列(VNTR)，VNTR均由核心序列構(gòu)成的重復(fù)單位形成。是DNA的第二代多態(tài)性遺傳標(biāo)記。

VNTR有兩類；一小衛(wèi)星DNA，核心序列長(zhǎng)11~16bp，多存在于異染色質(zhì)區(qū)(端粒、隨體、非編碼區(qū))。另一微衛(wèi)星DNA，其核心序列僅2~5bp，故稱短串聯(lián)重復(fù)序列(STR)，廣布于基因組中。

凡是核心序列相同的VNTR，盡管有長(zhǎng)度、重復(fù)次數(shù)和分布位點(diǎn)不一樣,但屬于同一種VNTR。第51頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

單位點(diǎn)VNTR：

VNTR在基因組中只有一個(gè)拷貝。如；用PYH24探針?biāo)鶛z測(cè)的VNTR，僅一對(duì)等位基因，雜交譜帶僅有2條。

多位點(diǎn)VNTR：

某VNTR可以分布于同一條染色體的不同區(qū)帶或散布在不同的染色體上，如；用33.15探針檢測(cè)到的VNTR，存在于多個(gè)位點(diǎn)上，有多對(duì)等位基因，各位點(diǎn)VNTR

在長(zhǎng)度、重復(fù)次數(shù)上不盡相同，所以用探針檢測(cè)到的雜交譜帶有幾十條。VNTR特點(diǎn)如下：第52頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月①在人群中呈現(xiàn)出高度多態(tài)性，即不同的人，同一種VNTR在染色體上的分布、數(shù)目和長(zhǎng)度不盡相同。

②對(duì)于每一個(gè)個(gè)體來(lái)說(shuō)，其VNTR的組成與分布卻相對(duì)穩(wěn)定（無(wú)論是在體細(xì)胞還是在生殖細(xì)胞中）。

③呈孟德?tīng)柟诧@性遺傳。以上特點(diǎn)構(gòu)成了VNTR獨(dú)有的可檢測(cè)的個(gè)體特異性。

第53頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

凡是以VNTR序列為探針或擴(kuò)增對(duì)象所得到的個(gè)體特異的電泳圖譜稱DNA指紋圖(DNAfingerprints）。

指紋圖譜帶的多少，取決于VNTR的位點(diǎn)數(shù)。

DNA指紋圖如同人指紋一樣具個(gè)體特異性。法醫(yī)學(xué)：親子鑒定、個(gè)體識(shí)別、性別鑒定等?？捎梦⒘垦?、牙髓和部分腐敗的碎尸塊等材料。

物種生物學(xué)研究：種系篩選、系統(tǒng)分類、物種之間的遺傳距離、性選擇與配偶外交配、合作行為、器官移植的配型試驗(yàn)及來(lái)源鑒別等。

DNA指紋圖應(yīng)用：第54頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

腫瘤研究：染色體丟失、擴(kuò)增后以及腫瘤發(fā)生發(fā)展階段不同，則指紋圖不同。故可進(jìn)行腫瘤鑒定、癌組織與非癌組織辨別、基因重排的分析等。如胃腸腫瘤、肝癌、鼻咽癌、急粒病等的研究。

遺傳病診斷與預(yù)后：與VNTR標(biāo)記連鎖的疾病基基因突變的檢測(cè)與系譜分析。如；XX/XY、Wilson病、外周神經(jīng)纖維瘤、成人多

囊腎、視網(wǎng)膜病、共濟(jì)失調(diào)、慢性粒細(xì)胞性白血病、葡萄胎等疾病。

流行病學(xué)研究：傳染源的鑒定與傳染途徑研究。第55頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月(3)單個(gè)核苷酸多態(tài)性(SNP)指DNA片段僅單個(gè)核苷酸改變而形成的多態(tài)性。

它是DNA的第三代多態(tài)性遺傳標(biāo)記。與第一代(RFLP)和第二代(VNTR)標(biāo)記不同的是；

SNP不反映片段長(zhǎng)度上的變化，而是片段堿基類型上的變化。

基因芯片技術(shù)可同時(shí)檢測(cè)數(shù)百個(gè)等位基因的SNP。

第56頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月(4)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）

PCR是模擬天然DNA復(fù)制過(guò)程的體外DNA擴(kuò)增法，即應(yīng)用耐熱的DNA聚合酶使位于兩個(gè)寡核苷酸引物之間的特定DNA片段在體外（試管中）得到擴(kuò)增。它可以增加DNA的拷貝數(shù)，擴(kuò)增率達(dá)105~108。

PCR的主要過(guò)程如下：

第57頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

①設(shè)計(jì)引物；

寡核苷酸引物可以限定擴(kuò)增片段的起點(diǎn)與終點(diǎn)，以得到特定擴(kuò)增片段。引物一般用一對(duì)(在待擴(kuò)增DNA區(qū)域的上游與下游各一個(gè)），也可以只在上游用一個(gè)（如隨機(jī)擴(kuò)增PCR、單向PCR等）。

②高溫變性；

使待擴(kuò)增DNA在高溫變性解鏈，形成單鏈。變性溫度92℃~97℃。

③低溫退火；

引物與待擴(kuò)增DNA單鏈結(jié)合。退火溫度40℃~60℃。第58頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

④引物延伸；

以引物為起點(diǎn)，以加入的dNTPs(dATP、dTTP、

dCTP、dGTP）為原料，在DNA聚合酶的作用下，形成與待擴(kuò)增DNA互補(bǔ)的新片段。延伸溫度65℃~72℃。

⑤重復(fù)；重復(fù)第②～④步，進(jìn)行下一循環(huán)。從第3次循環(huán)開(kāi)始，產(chǎn)生特定序列片段。從第4次循環(huán)開(kāi)始，特定序列擴(kuò)增。

PCR反應(yīng)特異性強(qiáng)，靈敏度高，極微量樣本DNA即可得到大量的擴(kuò)增片段，可為許多基因分析技術(shù)提供充足的樣本和靈敏的檢測(cè)手段，因此用途廣泛。

第59頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月6、其他相關(guān)技術(shù)（1）單鏈DNA構(gòu)象多態(tài)性(SSCP)

單鏈DNA自我卷曲構(gòu)象因堿基的不同而不同。因此當(dāng)DNA出現(xiàn)點(diǎn)突變時(shí)其構(gòu)象改變，而構(gòu)象改變將造成相同長(zhǎng)度的單鏈DNA出現(xiàn)不同的電泳遷移率，顯現(xiàn)不同的帶。

如果DNA發(fā)生點(diǎn)突變時(shí)，可在電泳結(jié)果中觀察到突變的電泳帶，如該點(diǎn)突變的多態(tài)性與疾病連鎖，即可用SSCP檢測(cè)點(diǎn)突變疾病。SSCP構(gòu)象多態(tài)性ATCGATCG第60頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（2)變性梯度凝膠電泳（DGGE）DNA一個(gè)堿基變化就可引起解離溫度(Tm)細(xì)微差異，致在聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)中遷移率不同。

電泳中DNA由低強(qiáng)度→高泳動(dòng)，

解離溫度(Tm)較低的DNA片段先達(dá)到其解離強(qiáng)度(變性梯度)而解離，

電泳速率減慢；而解離溫度較高的DNA片段保持原來(lái)的速率繼續(xù)前進(jìn)。這樣，不同解離溫度的DNA片段被分離開(kāi)。第61頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（1）常用方法：

RFLP:

包括RAPD（隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA）、AP-PCR（任意引物PCR）等。DNA指紋圖：AFLP(擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性)等。SSCP：?jiǎn)捂淒NA構(gòu)象多態(tài)性

DGGE：變性梯度凝膠電泳DHPLC：變性高效液相第62頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

②Southern法診斷β地中海貧血★

HbS的基因突變發(fā)生在珠蛋白基因內(nèi)部，可以用限制性內(nèi)切酶MstⅡ進(jìn)行檢測(cè)。因第6位密碼GAG→GTG，改變了MstⅡ酶切位點(diǎn)。當(dāng)酶解正常人DNA和患者DNA后再用標(biāo)記的珠蛋白基因?yàn)樘结樧鱏outhern雜交時(shí)，就會(huì)出現(xiàn)不同DNA條帶。

MstⅡ切割序列是CCTNAGG(N任何一種核苷酸），切割正常DNA產(chǎn)生1.2kb和0.2Kb片段；切割患者DNA時(shí)，形成1.4kb片段，雜合體則形成

1.4、1.2、0.2三個(gè)片段（圖）。第63頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月鐮狀細(xì)胞貧血的基因診斷

基因型

βＡβＡ

βＡβＳ

βＳβＳ1.4Kb1.2Kb0.2Kb

1.20.21.2Kb1.4KbβＡβＡ—1.2、0.2

βＡβＳ—

1.4、1.2、0.2

βＳβＳ—1.4第64頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月下一節(jié)第65頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第十五章遺傳病的預(yù)防

P202

學(xué)習(xí)要求掌握：遺傳咨詢的概念

預(yù)防遺傳病患兒出生的對(duì)策。p204-205熟悉：需要遺傳咨詢的適應(yīng)癥。

p202了解：遺傳咨詢的倫理原則。p206第66頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月概述

因大多數(shù)遺傳病難于治療，有些雖能治療，但代價(jià)極高，所以遺傳病的預(yù)防就格外重要。

目前國(guó)際上采用遺傳咨詢、產(chǎn)前診斷和遺傳篩查相結(jié)合的對(duì)策和方法，可有效降低患者的出生。第67頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)遺傳咨詢(遺傳商談)咨詢醫(yī)生應(yīng)用遺傳學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的基本原理，對(duì)咨詢者提出的有關(guān)遺傳學(xué)的問(wèn)題予以解答、商談和提出建議的過(guò)程稱遺傳咨詢。

如；確定某病是否為遺傳病，發(fā)病原因、遺傳方式、診斷、防治、預(yù)后以及再現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)等，并提出建議、進(jìn)行婚姻、生育指導(dǎo)。第68頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1、一般咨詢：常遇到的問(wèn)題是：

①有遺傳病家族史，會(huì)否累及本人或子女。

②習(xí)慣性流產(chǎn)是否與遺傳有關(guān)？多年不孕的原因及生育指導(dǎo)。

③有致畸因素接觸史，是否會(huì)影響后代。

④某些畸形是否與遺傳有關(guān)？

⑤確診的遺傳病能否治療、有何方法、代價(jià)？

一、常見(jiàn)的遺傳咨詢問(wèn)題

（一）遺傳咨詢的種類及內(nèi)容第69頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2、婚前咨詢：主要涉及的問(wèn)題：

①本人或?qū)Ψ郊易宓哪撤N遺傳病對(duì)后代的影響？②男、女雙方有一定的親屬關(guān)系，能否結(jié)婚，如果結(jié)婚對(duì)后代的影響如何？

③雙方之一患某種遺傳病，能否結(jié)婚？若結(jié)婚后代發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)如何？第70頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、產(chǎn)前咨詢已婚夫婦在孕前或孕后涉及問(wèn)題的咨詢：

①雙方之一或家屬中有遺傳病患者，子女是否會(huì)患病，患病概率的大小。②曾生過(guò)遺傳病患兒，再孕是同樣患兒的風(fēng)險(xiǎn)？

③雙方之一有致畸因素接觸史，會(huì)否影響胎兒健康。

④雙方之一是染色體平衡易位攜帶者，后代風(fēng)險(xiǎn)？第71頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（二）遺傳咨詢門診和咨詢醫(yī)師的條件

遺傳咨詢一般是在醫(yī)學(xué)遺傳中心和綜合性醫(yī)院附設(shè)的遺傳咨詢門診進(jìn)行。

遺傳咨詢是一項(xiàng)復(fù)雜的工作，需要有較高素質(zhì)的醫(yī)生和遺傳咨詢醫(yī)師，應(yīng)具備以下條件：①對(duì)遺傳學(xué)的基本理論、原理、基本知識(shí)有全面的認(rèn)識(shí)與理解。

②掌握診斷各種遺傳病基本知識(shí)。如；臨床診斷、酶學(xué)診斷、細(xì)胞學(xué)診斷、基因診斷等技術(shù)。第72頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

③能熟悉的運(yùn)用遺傳學(xué)理論對(duì)各種遺傳病進(jìn)行病因分析，確定遺傳方式，并能區(qū)分出是遺傳而來(lái)還是新的突變；能區(qū)分出AD遺傳病的外顯不全，表現(xiàn)度不一或延遲顯性，再發(fā)風(fēng)險(xiǎn)的計(jì)算等。

④掌握某些遺傳病群體資料；如發(fā)病率，基因頻率、攜帶者頻率和突變率。⑤對(duì)患者及家屬在咨詢商談時(shí)要熱情、耐心，具同情心，詳細(xì)的檢查，盡可能正確診斷。對(duì)患者及其家屬耐心地從心理上給予開(kāi)導(dǎo)，幫助患者減輕痛苦和精神上的壓力。第73頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月由于遺傳病的多樣性和復(fù)雜性，不論是遺傳病的診斷、治療、預(yù)后、再發(fā)風(fēng)險(xiǎn)計(jì)算，還是某一對(duì)策的選擇與執(zhí)行，都不是一位臨床醫(yī)師所能承擔(dān)的。所以，遺傳咨詢應(yīng)是由臨床各科醫(yī)生與醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)專家共同組成的隊(duì)伍承擔(dān)咨詢工作。

第74頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

（三）有一定條件的實(shí)驗(yàn)室和輔助檢查手段

實(shí)驗(yàn)室除常規(guī)化驗(yàn)外，還應(yīng)有細(xì)胞遺傳學(xué)、生化遺傳學(xué)及分子遺傳學(xué)等方面的檢測(cè)。輔助性檢查，如X線、超聲診斷、心、腦電圖、肌電圖、各種內(nèi)窺鏡、造影技術(shù)、斷層掃描等。

（四）有各種輔助性工作基礎(chǔ)

例如病案的登記，特別是婚姻史、生育史、家族史(包括繪制系譜)的記錄和管理；產(chǎn)前診斷必需的絨毛、羊水，胎血采集技術(shù)的配合；以及所需的避孕、流產(chǎn)、絕育、人工受精等手段。第75頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

二、遺傳咨詢程序遺傳咨詢目的：降低遺傳病發(fā)病率，提高總體人口素質(zhì)。（1）確診：遺傳咨詢時(shí)，咨詢醫(yī)師首先要依照遺傳病的診斷方法判斷患者罹患的疾病是否為遺傳病。（2）家系調(diào)查：

據(jù)上一過(guò)程中得到的患者信息及婚姻史、生育史等，繪制系譜圖，估計(jì)再現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)。第76頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（3）告知：

在上一過(guò)程基礎(chǔ)上，醫(yī)師有責(zé)任告知來(lái)咨詢者該病的發(fā)病原因、遺傳方式、治療方法、預(yù)后及再現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)。（4）商談：

據(jù)實(shí)際情況給患者及家屬提供一個(gè)切實(shí)的、可供參考的建議，并與患者及家屬反復(fù)商討，

幫助他們作出最恰當(dāng)?shù)倪x擇。第77頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（5）隨訪：

為證實(shí)咨詢者所提供信息的可靠性，觀察遺傳咨詢效果，有時(shí)需要對(duì)咨詢者進(jìn)行隨訪。醫(yī)生應(yīng)主動(dòng)追溯患者家庭成員的患病情況。特別要查明該家系中的攜帶者，這樣對(duì)遺傳病的預(yù)防和降低一個(gè)地區(qū)遺傳病發(fā)病率有很大幫助。第78頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、婚姻及生育指導(dǎo)★

咨詢結(jié)論得出后；應(yīng)把再現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)及應(yīng)對(duì)措施全

面(有利、不利)告知；提出建議和對(duì)策。

1、產(chǎn)前診斷：

適于發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)高、病損嚴(yán)重又難以治療(21三體)且求子心切的對(duì)象。告知應(yīng)對(duì)措施的時(shí)間、方法、地方、費(fèi)用、風(fēng)險(xiǎn)；咨詢者自行決定或預(yù)約。

2、冒風(fēng)險(xiǎn)生育：

適于發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)低(≦4~6%)、病損不嚴(yán)重的疾病。如；單側(cè)唇裂、味盲、色盲等。第79頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3、不再生育：適于再現(xiàn)風(fēng)險(xiǎn)高、無(wú)法產(chǎn)前診斷，而又嚴(yán)重致殘且無(wú)有效治療的情況。

4、過(guò)繼或認(rèn)領(lǐng)：

同3；迫切希望有健康孩子的夫婦。

5、輔助生殖：同3；或夫婦之一不孕不育者。接受捐精、捐卵、捐胚胎或體外受精(試管嬰兒)。應(yīng)告知患者費(fèi)用和成功率，并為其保密。第80頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月6、植入前診斷：經(jīng)濟(jì)條件許可、技術(shù)成熟(基因診斷、染色體分析)的可有目的進(jìn)行植入前診斷。對(duì)宮內(nèi)植入的胚胎一般應(yīng)再次進(jìn)行產(chǎn)前診斷(絨毛或羊水)，以防新的基因突變或染色體畸變。7、終止婚約或離婚：戀人有同種遺傳病家族史，或近親結(jié)婚者。

8、結(jié)婚但不生育：

感情確實(shí)好的戀人或夫婦，又獲親屬理解。第81頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月不同情況咨詢者應(yīng)提供不同建議和對(duì)策后，一定要遵循“非指令性原則”，盡量提供全面、準(zhǔn)確的信息，對(duì)策的選擇咨詢者自行決定或與親屬商議后決定。一但決定了對(duì)策方案，把對(duì)會(huì)談內(nèi)容有扼要記錄的副本應(yīng)交給咨詢者(未必能全面、準(zhǔn)確理解所有問(wèn)題)，讓其回家慎重考慮后再做最后決定。第82頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月四、癥狀出現(xiàn)前預(yù)防

一定條件誘發(fā)才表現(xiàn)的遺傳病，盡早診斷避免接觸誘發(fā)因素。

如；G6PD缺乏癥患者禁服抗瘧藥、解熱止痛劑或進(jìn)食蠶豆。

發(fā)病率高、危害性大的遺傳病，群體普查。

如G6PD癥、地貧、家族性甲狀腺功能低下等。第83頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月五、出生、前后預(yù)防：

胎兒高膽紅素血癥(孕婦服苯巴比妥)；

隱性遺傳型癲癇(孕婦服用維生素B2)；

半乳糖血癥、苯丙酮尿癥(新生兒禁食全乳制品)等。

蠶豆病；終生禁食蠶豆，禁服磺胺類藥物等。第84頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月六、加強(qiáng)環(huán)境保護(hù)

孕期應(yīng)避免環(huán)境中的誘變劑、致畸劑、染色體斷裂劑和病原生物等對(duì)遺傳物質(zhì)的損害,保障個(gè)體及胚胎安全。有害物質(zhì)主要以下幾類：

電離輻射：致基因突變和DNA損傷,如射線、電磁波、放射性同位素等。

化學(xué)品：致染色體畸變、癌癥和先天畸形。如；洗衣粉生產(chǎn)劑、除草劑、殺蟲劑、5-BrdU等。第85頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

某些食品：

食用色素、咖啡因、可可堿等,誘發(fā)染色體畸變。

某些藥物：

可損傷生殖細(xì)胞或致畸胚胎。

①毒品：天然毒品(海洛因、可卡因、大麻)與人工毒品(冰毒)等。②成癮物質(zhì)：香煙(尼古丁)、酒精等。③孕婦禁忌藥物：腎上腺素、苯、甲苯、氨基蝶呤、眠爾通等。

④病毒:

風(fēng)疹病毒、巨細(xì)胞病毒、單純皰疹病毒等。第86頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

檢出遺傳缺陷攜帶者：①AR遺傳的致病基因攜帶者。

②染色體平衡易位攜帶者。

③染色體倒位的攜帶者。

④AD延遲顯年齡小表型正常個(gè)體。

⑤AD外顯不全有致病基因不發(fā)病的個(gè)體。

第87頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

攜帶者檢出的方法:

臨床水平：

從臨床表現(xiàn)來(lái)分析某人是一個(gè)攜帶者的概率，

但一般不能準(zhǔn)確檢出。

細(xì)胞水平:染色體(攜帶者)及X、Y染色質(zhì)檢查。

酶和蛋白質(zhì)水平：檢測(cè)酶和蛋白質(zhì)的量及活性。

基因水平：在分子水平上直接檢測(cè)致病基因。必要時(shí)應(yīng)結(jié)合系譜分析的方法。第88頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月七、新生兒篩查

新生兒階段，有針對(duì)性的對(duì)某種疾病檢查，以確定其是否為患兒。

新生兒篩查是在癥狀出現(xiàn)前及時(shí)診斷

先天代謝病患者的有效手段，對(duì)預(yù)防及減輕遺傳病的損害具有重要意義。

第89頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

八、遺傳咨詢的倫理原則（書P206）

咨詢應(yīng)遵循“有利公正原則”；特別是尊重原則。（一）尊重自主權(quán)

1、尊重并保護(hù)個(gè)人選擇的權(quán)利。

2、尊重當(dāng)事人接受或不接受何種醫(yī)療服務(wù)項(xiàng)目。

3、尊重當(dāng)事人自主權(quán)和價(jià)值觀和非指導(dǎo)性原則。（二）尊重知情權(quán)

充分告知咨詢者全部相關(guān)信息(供精、卵、胚胎除外)。必要時(shí)，可介紹給親屬或?qū)＜摇５?0頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）尊重隱私權(quán)

咨詢醫(yī)生有義務(wù)為咨詢者保守資料的秘密，

不得向第三方泄露咨詢者的隱私(相關(guān)專家病案討論除外)。咨詢醫(yī)生為咨詢者守密是一種職業(yè)道德。第91頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第十六章遺傳病的治療P212學(xué)習(xí)要求

掌握：基因治療的概念。p215

基因治療的策略。p216熟悉：基因治療的程序。p216了解：基因治療方法。

轉(zhuǎn)基因治療的問(wèn)題與風(fēng)險(xiǎn)性。第92頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

遺傳病的治療，通常還只是改善或矯正患者的臨床癥狀，尚無(wú)根治的方法。

近年來(lái)，基因治療的研究已取得了一些突破性的進(jìn)展，正在逐步進(jìn)入臨床，并獲得了可喜的成果。這為徹底根治遺傳病開(kāi)辟了廣闊的道路。

醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)中所談的外科治療與內(nèi)科治療，并非醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)的專有技術(shù)，而是針對(duì)不同遺傳病所應(yīng)該采取的策略與原則。

具體的治療方案與技術(shù)屬于“臨床遺傳學(xué)”范疇。第93頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)手術(shù)(外科)治療(略)一、矯正畸形

唇裂和腭裂的修補(bǔ)，先天性心臟畸形和性器官畸形的矯正等。

二、改善癥狀

高脂蛋白血癥Ⅱa型患者癥狀的回腸-空腸旁路手術(shù)和某些遺傳性溶血病的脾切除治療等。三、器官的替換與移植

先天性免疫缺陷性病-骨髓移植，少年性糖尿病-胰腺移植、家族性多囊腎、先天性腎病-腎移植等。

第94頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié)藥物治療(內(nèi)科治療；略)原則是“補(bǔ)其所缺”、“去其所余”，實(shí)施過(guò)程可分

出生前治療、癥狀前治療和現(xiàn)癥患者治療。

一、出生前藥物治療

★

藥物治療可在胎兒出生前進(jìn)行，可大幅減輕胎兒出生后癥狀。

例；羊水中甲基丙二酸含量增高，提示胎兒可能患甲基丙二酸尿癥。該病會(huì)造成發(fā)育遲緩和酸中毒，給母體和胎兒補(bǔ)充VB12，胎兒或嬰兒可基本正常。產(chǎn)前確診是VB2依賴型癲癇胎兒，給孕婦服用VB2，胎兒出生后可不出現(xiàn)癲癇。

第95頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、癥狀前藥物治療

某些遺傳病，采用癥狀前藥物治療也可以預(yù)防遺傳病的病癥發(fā)生而達(dá)到治療的效果。如發(fā)現(xiàn)新生兒甲狀腺功能低下，可給予甲狀腺素制劑終生服用，以防止其發(fā)生智能和體格發(fā)育障礙。苯丙酮尿癥、楓糖尿癥、同型胱氨酸尿癥或半乳糖血癥等，如能通過(guò)篩查在癥狀出現(xiàn)前做出診斷，及時(shí)給予治療，可獲得最佳效果。第96頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、現(xiàn)癥患者治療

若在出生后，遺傳病的各種癥狀已經(jīng)出現(xiàn)，機(jī)體器官已經(jīng)受到損害，這時(shí)治療的作用就僅限于對(duì)癥治療。藥物治療的原則可概括為；

禁其所忌去其所余補(bǔ)其所缺第97頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月禁其所忌：

肝豆?fàn)詈俗冃?Wilson病)限制銅的攝入。

PKU限制苯丙氨酸的攝入等。去其所余：

地中海貧血-血漿過(guò)濾除鐵。

胱氨酸尿癥-D-青霉胺除銅與胱氨酸等。

補(bǔ)其所缺：

先天性免疫球蛋白缺失癥-補(bǔ)丙種球蛋白。

45,X綜合征-補(bǔ)性激素。

垂體性侏儒癥-補(bǔ)生長(zhǎng)激素等。

第98頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第四節(jié)飲食療法(略)

飲食療法治療遺傳病原則“禁其所忌”。對(duì)因酶缺乏而造成底物或中間產(chǎn)物堆積的患者?？芍贫ㄌ厥獾氖匙V或配以藥物,以控制底物或中間產(chǎn)物攝入,達(dá)到治療目的。

第99頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、產(chǎn)前飲食治療

有些遺傳病可以在其母親懷孕期間就進(jìn)行飲食治療，使患兒癥狀得到改善。

例；遺傳病飲食治療第一個(gè)獲得成功的例子是對(duì)患有半乳糖血癥風(fēng)險(xiǎn)的胎兒。

在孕婦飲食中限制乳糖和半乳糖攝入量而代以其他水解蛋白(大豆水解蛋白)，胎兒出生后再禁用人乳和牛乳喂養(yǎng)，患兒可得以發(fā)育正常。第100頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（二）臨癥患者治療

1953年，Bickle等首次用低苯丙氨酸飲食法治療苯丙酮尿癥患兒，治療后患兒體內(nèi)苯丙氨酸明顯減少，癥狀得到緩解?，F(xiàn)在已有商品化的低苯丙氨酸奶粉出售，出生后，立即給患兒服用配方奶粉，患兒可不出現(xiàn)智力低下等癥狀。患兒年齡的越大，飲食治療的效果越差，所以要早診斷，早治療。針對(duì)不同代謝病已設(shè)計(jì)出100多種奶粉和食譜。

第101頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

減少患者對(duì)所忌物質(zhì)的吸收是飲食療法的另一途徑，可減輕癥狀出現(xiàn)，且更易被接受。

例如，在苯丙酮尿癥患兒常規(guī)進(jìn)食后，服用苯丙氨酸氨基水解酶膠囊，該酶腸內(nèi)釋放后，可將食物消化后形成的苯丙氨酸→苯丙烯酸，使苯丙氨酸在未被腸道吸收前就選擇性清除。給家族性高膽固醇血癥患者服用糠麩，可減少腸道對(duì)膽固醇吸收，延緩和減輕動(dòng)脈粥樣硬化癥狀的形成。第102頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

★三、基因治療(genetherapy)

運(yùn)用DNA重組技術(shù)，將外源基因引入靶細(xì)胞，糾正或補(bǔ)償缺陷基因，使細(xì)胞恢復(fù)正常功能，達(dá)到治療遺傳病的目的。

據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，全世界共約4000例病人進(jìn)行基因治療，美國(guó)最多，約2260人(65.1%),英國(guó)260人(7.5%)加拿大120例(3.5%）、中國(guó)4人(0.1%）。目前，基因治療的疾病主要是癌癥(70.7%)，其次是HIV病毒感染(11.9%)和單基因遺傳病(8.8%）。第103頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

一、基因治療的分類★

按靶細(xì)胞(受體細(xì)胞)不同分生殖細(xì)胞基因治療和體細(xì)胞基因治療。1、生殖細(xì)胞基因治療

將正?；蜣D(zhuǎn)移到患者的生殖細(xì)胞(精子、卵、受精卵)中而使其發(fā)育成一個(gè)正常個(gè)體。受精卵顯微注射法轉(zhuǎn)基因是可行的治療方案。

“轉(zhuǎn)基因人”存在技術(shù)與倫理問(wèn)題，人生殖細(xì)胞基因治療目前僅是個(gè)理想方案而不能付諸實(shí)施，組織或器官“克隆”有很好應(yīng)用前景。

第104頁(yè)，課件共139頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

2、體細(xì)胞基因治療★