下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)內(nèi)分泌機(jī)制

下丘腦孤啡肽參與電針調(diào)整去卵巢大鼠LH異常釋放的神經(jīng)(shénjīng)內(nèi)分泌機(jī)制江蘇省中醫(yī)院內(nèi)分泌科安曉飛論文(lùnwén)匯報(bào)第一頁，共三十頁。精選課件OFQ對下丘腦GnRH和垂體(chuítǐ)LH釋放的藥理作用（3-1）第二頁，共三十頁。精選課件

孤啡肽（OFQ）1995年下丘腦◆孤兒(gūér)受體(ORL1)內(nèi)源性配體◆EOP家族新成員，結(jié)構(gòu)的同源性◆痛覺的調(diào)制◆多種生理功能活動◆神經(jīng)內(nèi)分泌？1998PRLGH

研究(yánjiū)背景第三頁，共三十頁。精選課件下丘腦卵巢(luǎncháo)垂體(chuítǐ)GnRHFSHLHE2PHPOAOFQ及其受體分布(fēnbù)GnRH調(diào)控部位（MBH)MPO（內(nèi)側(cè)視前區(qū)）VMH（腹內(nèi)側(cè)核）ARC（弓狀核）下丘腦OFQ與GnRH釋放的調(diào)節(jié)有關(guān)系嗎？第四頁，共三十頁。精選課件◆EOP系統(tǒng)(xìtǒng)的比較◆1998年電生理膜片鉗臨床療效和動物實(shí)驗(yàn)◆針灸和血b-內(nèi)啡肽◆圍絕經(jīng)期婦女雌激素替代治療◆電針調(diào)整去卵巢大鼠HPOA異常功能問題OFQ?GnRH-LH-E2第五頁，共三十頁。精選課件研究方法(fāngfǎ)◆實(shí)驗(yàn)動物去卵巢大鼠◆實(shí)驗(yàn)方法icvinjection

invitroincubationRIAICCRT-PCRWesternblot第六頁，共三十頁。精選課件Thedoseresponsecurves

fortheeffectofOFQonplasmaLHlevelsofOVXrats(bP<0.05vscontrol)第七頁，共三十頁。精選課件◆實(shí)驗(yàn)(shíyàn)分組Control組（ACSF，10l,icv）OFQ組(20nmolOFQ，10l,icv)NC13+OFQ組(20nmolNC13+20nmolOFQ,icv)NC13組(20nmolNC13，10l,icv)OFQORL1LHORL1受體的選擇性受體拮抗劑[Nphe1]NC(1-13)NH2（NC13）?第八頁，共三十頁。精選課件EffectofpretreatmentwithNC13onthedecreaseofplasmaLHlevelinducedbyOFQ(bP<0.05vscontrol)第九頁，共三十頁。精選課件

M:MarkerA:hippocampusB:pituitaryC:hypothalamus

RT-PCRanalysisfortheexpressionofORL1receptor

問題

OFQ對垂體LH釋放(shìfàng)是否直接作用？第十頁，共三十頁。精選課件EffectofOFQontheLHreleasefrompituitaryfragmentsinvitro

WesternblotanalysisfortheexpressionofORL1receptorAhypothalamus

BpituitaryChippocampus第十一頁，共三十頁。精選課件ThedoseresponsecurvesfortheeffectofOFQonGnRHreleaseinPOAofhypothalamusinPPP第十二頁，共三十頁。精選課件OFQ對垂體LH釋放（間接(jiànjiē)作用）是否通過GnRH？

OFQGnRHOFQ

LH

40min2hOFQLH?GnRH直接觀察OFQ抑制LH分泌過程(guòchéng)中GnRH的變化第十三頁，共三十頁。精選課件GnRH神經(jīng)元在腦內(nèi)的分布(fēnbù)第十四頁，共三十頁。精選課件

ThedifferentsubtypesofGnRH-IRneurons(800×)A1~3:spinssubtypeB1~3:smoothsubtype第十五頁，共三十頁。精選課件

EffectofOFQonthenumberofGnRH-IRneuronsofOVXrats

（bP<0.05vscontrol）第十六頁，共三十頁。精選課件

大鼠下丘腦區(qū)冠狀切面(qiēmiàn)概觀（10х）第十七頁，共三十頁。精選課件下丘腦神經(jīng)(shénjīng)解剖和正中隆起GnRH陽性纖維第十八頁，共三十頁。精選課件EffectofNC13andOFQonGnRH-IRfibersinME(800×)

第十九頁，共三十頁。精選課件

TherelativedensityanalysisforGnRH-IRfibersinMEhypothalamus(bP<0.05vscontrol)第二十頁，共三十頁。精選課件

Co-localizationofORL1mRNAinGnRH-IRneuronsinrathypothalamus.(ORL1green;GnRHredanddoublelabeledcellsyellow)第二十一頁，共三十頁。精選課件OFQhasnosignificanteffectonthereleaseofNEandDAfrommedialbasalhypothalamusofrats(HPLC)國外研究(yánjiū)◆OFQ可抑制神經(jīng)細(xì)胞Glu的釋放（invitroandinvivo)◆Glu是調(diào)節(jié)GnRH釋放興奮性神經(jīng)遞質(zhì)（NMDAandKA)調(diào)控(diàokònɡ)GnRH釋放的因素(+NE,DA,Glu)(-NPY?)第二十二頁，共三十頁。精選課件◆

NMDA受體的選擇性受體拮抗劑MK-801（0.2mg/kg,sc

）◆實(shí)驗(yàn)(shíyàn)分組Control組（ACSF，icv）OFQ組(200nmolOFQ，icv)MK801+OFQ組(0.2mg/kg,sc+200nmolOFQ,icv)MK801組(0.2mg/kg,sc)NMDA第二十三頁，共三十頁。精選課件EffectofpretreatmentwithMK801onthedecreaseofplasmaLHlevelsinducedbyOFQ

(bP<0.05vscontrol.eP<0.05vsOFQgroup)第二十四頁，共三十頁。精選課件ThedoseresponsestudyfortheeffectofNC13onplasmaLHlevelsofOVXrats

(bP<0.05vscontrol)第二十五頁，共三十頁。精選課件小結(jié)◆下丘腦OFQ可能通過ORL1受體介導(dǎo)抑制GnRH的釋放，從而減少垂體LH的分泌(fēnmì)，使血LH水平降低。NMDA受體也可能部分介導(dǎo)了該作用。提示OFQ可能參與了對GnRH和LH釋放的生理調(diào)節(jié)作用，下丘腦可能存在OFQ-Glu-GnRH神經(jīng)調(diào)節(jié)通路。第二十六頁，共三十頁。精選課件思考(sīkǎo)？◆OFQ可抑制GnRH和LH的釋放的藥理和生理作用（OFQ和NC13有潛在的治療(zhìliáo)作用）?！鬙FQ及其受體ORL1可能為調(diào)整更年期綜合癥和性早熟神經(jīng)內(nèi)分泌異常提供等新的藥物治療靶點(diǎn)。（丹參酮）◆下丘腦OFQmRNA及其蛋白水平可以作為篩選調(diào)節(jié)GnRH分泌中西藥物的探針。第二十七頁，共三十頁。精選課件發(fā)表(fābiǎo)論文InvolvementofNociceptin/OrphaninFQinreleaseofhypothalamicGnRHmediatedbyORL1receptorinovariectomizedratsActaPharmacologicaSinica(SCI,IF=1.125)2005Sep,26(9):1039~1044

第二十八頁，共三十頁。精選課件Thankyou第