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認(rèn)證信息

認(rèn)證類型：個(gè)人認(rèn)證

認(rèn)證主體：熊**（實(shí)名認(rèn)證）

IP屬地：上海

IP屬地：上海 上傳時(shí)間：2023-07-21 格式：DOCX 頁數(shù)：4 大?。?2.53KB 積分：13 舉報(bào) 版權(quán)申訴

如何檢驗(yàn)?zāi)崛旱仄狡奈⑸锵薅热绾螜z驗(yàn)?zāi)崛旱仄狡奈⑸锵薅缺疚年P(guān)鍵詞：尼群地平，微生物，限度，檢驗(yàn)

如何檢驗(yàn)?zāi)崛旱仄狡奈⑸锵薅缺疚暮喗椋阂?、材?.樣品：尼群地平片批號：151001151002151003.2.培養(yǎng)基：胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基。3.試劑：氯化鈣、PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液。4.菌種：金黃色葡萄球菌[C

如何檢驗(yàn)?zāi)崛旱仄狡奈⑸锵薅缺疚膬?nèi)容：

一、材料

1.樣品：尼群地平片批號：151001151002151003.

2.培養(yǎng)基：胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基、胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基、麥康凱液體培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基。

3.試劑：氯化鈣、PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液。

4.菌種：金黃色葡萄球菌[CMCC〔B〕26003]、大腸埃希菌[CMCC〔B〕44102]、銅綠假單胞菌[CMCC〔B〕10104]、枯草芽孢桿菌[CMCC〔B〕63501]、白色念珠菌[CMCC〔F〕98001]、黑曲霉[CMCC〔F〕98003].

二、儀器

臥式壓力蒸汽滅菌器WS-200YDB江陰濱江醫(yī)療設(shè)備、

立式滅菌器LMQ.C型山東新華醫(yī)療器械股份、

YG組裝式空調(diào)器靖江興國空調(diào)制冷、

生物平安柜BSC-1600IIAz蘇州安泰空氣技術(shù)、

生化培養(yǎng)箱LRP-250廣東省醫(yī)療器械廠

三、驗(yàn)證過程

驗(yàn)證方法：照2022版四部非無菌產(chǎn)品微生物限度檢查

〔1〕微生物計(jì)數(shù)法：計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)

〔2〕控制菌檢查法：控制菌檢查方法適用性試驗(yàn)

1、菌液制備

檢查用菌種：大腸埃希[CMCC〔B〕44102]、銅綠假單胞菌[CMCC〔B〕10104],金黃色葡萄球菌[CMCC〔B〕26003],枯草芽孢桿菌[CMCC〔B〕63501],白色念珠菌[CMCC〔F〕98001],黑曲霉[CMCC〔F〕98003],菌株不得超過5代。來源：浙江省食品藥品檢驗(yàn)所。將上述菌種的新穎培養(yǎng)物分別接種至規(guī)定培養(yǎng)基培養(yǎng)，細(xì)菌、酵母菌取此培養(yǎng)液1mL至0.9%無菌氯化鈉溶液9mL中，采用10倍遞增稀釋法，稀釋至使菌液濃度小于100cfu/mL;黑曲霉用含0.05%〔ml/ml〕聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1mL含孢子量不大于100cfu的孢子懸液，備用。

2、供試液的制備：

取本品10g,加PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100mL,混勻，即為1:10供試液。

3、計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)

3.1試驗(yàn)組制備：

3.1.1需氧菌總數(shù)測定。取1:10供試液9.9mL,5份，每份分別參加金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、黑曲霉、白色念珠菌的菌懸液0.1mL后搖勻，然后分別汲取上述混合液1mL注入無菌平皿中，并立即傾注15-20mL溫度不超過45℃的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，倒置培養(yǎng)。每種試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)皿，以均值作為計(jì)數(shù)結(jié)果

3.1.2霉菌和酵母菌總數(shù)測定。取1:10供試液9.9mL,2份，每份分別參加黑曲霉、白色念珠菌的菌懸液0.1mL后搖勻，然后分別汲取上述混合液1mL注入無菌平皿中，并立即傾注15-20mL溫度不超過45℃的沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，混勻，凝固，倒置培養(yǎng)。每種試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)皿，以均值作為計(jì)數(shù)結(jié)果。

3.2供試品對照組的制備：取1:10供試液，以PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液代替菌液，同試驗(yàn)組操作，參加相應(yīng)培養(yǎng)基。

3.3菌液對照組制備：取PH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液代替供試液，按試驗(yàn)組操作參加試驗(yàn)菌液，參加相應(yīng)培養(yǎng)基。

3.4培養(yǎng)。將上述各組含胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基平板倒置，置30~35℃培養(yǎng)，其中含金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌的試驗(yàn)菌的平皿培養(yǎng)3天，含黑曲霉、白色念珠菌的試驗(yàn)菌的平皿培養(yǎng)5天；將上述各組含沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板倒置，置20~25℃培養(yǎng)5天。

3.5觀察和計(jì)數(shù)。對每個(gè)平皿逐目檢查計(jì)數(shù)，結(jié)果以培養(yǎng)終的計(jì)數(shù)為準(zhǔn)。平行3批樣品。

4、驗(yàn)證結(jié)果

4.1需氧菌總數(shù)測定結(jié)果：供試品對照組菌落計(jì)數(shù)分別為0、0、0.

金黃色葡萄球菌，3個(gè)批號試驗(yàn)組的菌落計(jì)數(shù)分別為53、54、51,菌液對照組菌落計(jì)數(shù)為83,相應(yīng)比值為0.64、0.65、0.61.

銅綠假單胞菌，3個(gè)批號試驗(yàn)組的菌落計(jì)數(shù)分別為18、18、16,菌液對照組菌落計(jì)數(shù)為19,相應(yīng)比值為0.95、0.95、0.84.

枯草芽孢桿菌，3個(gè)批號試驗(yàn)組的菌落計(jì)數(shù)分別為28、30、30,菌液對照組菌落計(jì)數(shù)為34,相應(yīng)比值為0.82、0.88、0.88.

白色念珠菌，3個(gè)批號試驗(yàn)組的菌落計(jì)數(shù)分別為49、45、47,菌液對照組菌落計(jì)數(shù)為49,相應(yīng)比值為1.0、0.92、0.96.

黑曲霉，3個(gè)批號試驗(yàn)組的菌落計(jì)數(shù)分別為48、54、54,菌液對照組菌落計(jì)數(shù)為51,相應(yīng)比值為0.94、1.1、1.1.

白色念珠菌，3個(gè)批號試驗(yàn)組的菌落計(jì)數(shù)分別為35、34、32,菌液對照組菌落計(jì)數(shù)為37,相應(yīng)比值為0.95、0.92、0.86.

黑曲霉，3個(gè)批號試驗(yàn)組的菌落計(jì)數(shù)分別為35、33、38,菌液對照組菌落計(jì)數(shù)為45,相應(yīng)比值為0.78、0.73、0.84.

4.2經(jīng)上述實(shí)驗(yàn)證明，采用平皿法檢驗(yàn)丙酸氟替卡松乳膏供試品對金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉的回收率可以到達(dá)?中國藥典?要求。

5、控制菌檢查方法適用性試驗(yàn)

本品為空服制劑，控制菌必須檢查大腸埃希菌，驗(yàn)證方法如下：取1:10供試液10mL及試驗(yàn)菌1mL接種至100mL的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，混勻。30~35℃培養(yǎng)，18~24h.按照?中國藥典?2022年版大腸埃希菌檢查方法檢查〔表1〕。

由上圖結(jié)果顯示，說明供試品在該實(shí)驗(yàn)條件下對大腸埃希菌沒有抑菌作用或是其抑菌作用可以忽略不計(jì)。說明采用此法進(jìn)展本品的大腸埃希菌檢查可行。

6、討論

6.1本試驗(yàn)中所采用的培養(yǎng)基均按藥典要求進(jìn)展了培養(yǎng)基適用性試驗(yàn)，符合要求。

6.2通過驗(yàn)證，尼群地平片采用常規(guī)法進(jìn)展需氧菌、霉菌和酵母菌檢查，金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、白色念