高中生物-動物細(xì)胞融合和單克隆抗體的制備教學(xué)課件設(shè)計(jì)

？？？？再分化？植物細(xì)胞雜交技術(shù)利用什么原理？用什么方法可以誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合？一、原理：細(xì)胞膜具有流動性細(xì)胞的全能性二、誘導(dǎo)方法：離心振動電激、聚乙二醇植物細(xì)胞雜交技術(shù)有什么目的？三、目的：獲得雜種植株脫分化(一)概念

動物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個或多個動物細(xì)胞結(jié)合形成一個細(xì)胞的過程。（二）動物細(xì)胞融合的過程與植物原生質(zhì)體融合原理相同，方法類似。雜交細(xì)胞:融合后形成的具有原來兩個或多個細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞。一、動物細(xì)胞融合⑴.原理：1、動物細(xì)胞融合的基本原理是什么？2、動物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)方式是什么？與植物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)方式有什么不同？與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，即細(xì)胞膜的流動性。⑵.誘導(dǎo)方式：物理法：電激、振動、離心化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）生物法：滅活的病毒例如：仙臺病毒細(xì)胞A細(xì)胞B雜交細(xì)胞滅活的病毒物理法化學(xué)法為什么滅活病毒能夠作為誘導(dǎo)劑？不滅活的是否可以？

因?yàn)闇缁畹牟《灸苁辜?xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合，不滅活的話會感染細(xì)胞，而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。滅活的病毒顆粒黏附于細(xì)胞表面細(xì)胞膜被病毒顆粒穿通細(xì)胞膜連接細(xì)胞融合，形成雜交細(xì)胞（細(xì)胞膜具有一定的流動性）(三)動物細(xì)胞融合的應(yīng)用1.突破有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。2.成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段。鼠—雞、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、人—雞、人—蛙、酵母菌—雞、人—胡蘿卜等3、重要用途：制備單克隆抗體。二、單克隆抗體（一）、什么是抗體？

抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā)生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。

三、單克隆抗體1、抗體是由何種細(xì)胞產(chǎn)生的？漿細(xì)胞（效應(yīng)B細(xì)胞）2、抗體是如何產(chǎn)生的？B淋巴細(xì)胞抗原增殖分化成漿細(xì)胞3.獲得抗體的傳統(tǒng)方法把某種抗原反復(fù)注射到動物體內(nèi)，然后從動物血清中分離出所需的抗體。缺點(diǎn)：

產(chǎn)量低，純度低，特異性差。4、一種B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生幾種抗體？一種1、在體外培養(yǎng)的條件下，一個B淋巴細(xì)胞有沒有可能無限增殖？不可能2、我們學(xué)過的什么細(xì)胞具有這樣的能力？癌細(xì)胞3、有什么辦法讓B淋巴細(xì)胞也具有這樣的能力？細(xì)胞融合一個B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體骨髓瘤細(xì)胞（癌細(xì)胞）能無限增殖雜交細(xì)胞動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)（三）、實(shí)驗(yàn)原理：動物細(xì)胞融合單克隆抗體既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體，（四）、單克隆抗體的制備過程3.過程：①免疫動物注射抗原的目的是什么？獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）誘導(dǎo)細(xì)胞融合常用方法是什么？滅活的仙臺病毒如何進(jìn)行篩選？具有篩選作用的培養(yǎng)基（選擇培養(yǎng)基）？種BB、B瘤、瘤瘤、雜交細(xì)胞如何獲得大量的單克隆抗體？②免疫B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的制備③細(xì)胞融合④雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng)⑤雜交瘤細(xì)胞的篩選⑥分泌單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞系的建立⑦單克隆抗體的大量制備？

？抗原效應(yīng)B細(xì)胞篩選篩選（AA型、BB型）AB型雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞過程：抗原小鼠效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞細(xì)胞融合篩選細(xì)胞培養(yǎng)篩選能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞群體外培養(yǎng)體內(nèi)培養(yǎng)提取出單克隆抗體考考你！單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是（）①淋巴細(xì)胞②小鼠骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞④小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞⑤雜交瘤細(xì)胞A．②④B．①③⑤C．①②③④D．②③五、單克隆抗體的應(yīng)用請同學(xué)們自學(xué)課本，談?wù)剢慰寺】贵w的應(yīng)