第六講-動(dòng)物疾病模型課件

第六講人類疾病的動(dòng)物模型第一節(jié)動(dòng)物模型的概念（animalmodelofhumandisease)一、人類疾病動(dòng)物模型：是生物醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬性表現(xiàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象和材料。精品PPT二、動(dòng)物模型的意義1、避免人體實(shí)驗(yàn)造成的危害2、可復(fù)制臨床上平時(shí)不易見到的疾病3、可復(fù)制發(fā)病率低、潛伏期和病程長(zhǎng)的疾病4、嚴(yán)格控制試驗(yàn)條件，增加實(shí)驗(yàn)的可比性5、樣品易得，實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)化6、有助于全面認(rèn)識(shí)疾病本質(zhì)精品PPT第二節(jié)動(dòng)物模型分類一動(dòng)物模型分類一）按產(chǎn)生原因分類1、自發(fā)性動(dòng)物模型（SpontaneousAnimalModel）如肥胖小鼠、高血壓大鼠、突變裸鼠等2、誘發(fā)性或?qū)嶒?yàn)性動(dòng)物模型（ExperimentalAnimalModel）通過(guò)化學(xué)、放射線等3、陰性動(dòng)物模型不能復(fù)制某些疾病的動(dòng)物品種或品系，即一定的刺激或處理對(duì)一些實(shí)驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生效應(yīng)但對(duì)另外的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物無(wú)反應(yīng)4、孤立動(dòng)物模型某種疾病最初在一些動(dòng)物身上發(fā)現(xiàn)并被研究，但在人體內(nèi)無(wú)法證實(shí)，如哺乳動(dòng)物上皮乳頭瘤，瘋牛病二）按系統(tǒng)范圍分類如心血管、消化等系統(tǒng)疾病模型精品PPT嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷小鼠（severe-combinedimmuodeficientmiceSCID）

外觀正常與正常小鼠無(wú)異，生長(zhǎng)發(fā)育正常胸腺、脾、淋巴結(jié)重量不及正常的30%,組織學(xué)上表現(xiàn)為T、B淋巴細(xì)胞缺失T、B細(xì)胞功能陰性，對(duì)外來(lái)抗原無(wú)細(xì)胞免疫和抗體反應(yīng)，但其巨噬細(xì)胞、紅細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞等功能正常。精品PPT第三節(jié)動(dòng)物模型的選擇和設(shè)計(jì)一）原則1相似性結(jié)扎兔的闌尾血管，可以使闌尾壞死、穿孔并導(dǎo)致腹膜炎，但這與人類急性梗阻性闌尾炎合并穿孔和腹膜炎不一樣。結(jié)扎兔闌尾基部而保留原來(lái)的血液供應(yīng)。2重復(fù)性品種、品系、年齡、性別、體重、健康3可靠性鉛中毒使沙鼠出現(xiàn)相應(yīng)的腎病變4適用性、可控性5易行性和經(jīng)濟(jì)性精品PPT二）注意事項(xiàng)

1、要盡可能再現(xiàn)所要求的人類疾病2、注意實(shí)用價(jià)值（易于管理飼養(yǎng)3、注意環(huán)境的影響（出血、麻醉、噪聲）4、不盲目用近交系5、靈長(zhǎng)類不一定接近人6、正確評(píng)估模型價(jià)值7、中醫(yī)中動(dòng)物不能脈診。精品PPT第四節(jié)、動(dòng)物模型的建立一、誘發(fā)性腫瘤模型一）概念二）誘發(fā)腫瘤動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法經(jīng)口給藥法涂抹法注射法氣管灌注法穿線法埋藏法精品PPT三）誘發(fā)腫瘤的要求1方法簡(jiǎn)單易行重復(fù)性高2腫瘤誘發(fā)率高3所誘發(fā)的腫瘤與人類腫瘤有相似性4選擇對(duì)致癌劑敏感的種系5致癌劑量要適當(dāng)6輔以誘癌動(dòng)物的飼養(yǎng)條件精品PPT四）誘發(fā)腫瘤的要求和注意事項(xiàng)1設(shè)置陰性和陽(yáng)性對(duì)照2有的實(shí)驗(yàn)要輔以促癌劑才能成功3動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果注意種屬的區(qū)別4注意對(duì)人和環(huán)境的保護(hù)5注意將腫瘤發(fā)生的內(nèi)外因結(jié)合起來(lái)精品PPT1、肺水腫模型P1840.1%腎上腺素按照5ml/g靜脈注射0.8%一氧化氮給大鼠吸入精品PPT2、誘發(fā)性肝癌（LiverCarcinoma）1）二乙基亞硝胺誘發(fā)肝癌0.25%DEN灌胃，10mg/kg,每周一次，其余5天0.025%DEN飲水，4個(gè)月可成功精品PPT3、誘發(fā)性鼻咽癌1二甲基膽蒽插管法半年后動(dòng)物死亡2二乙基亞硝胺滴鼻法半年后死亡4、誘發(fā)性皮膚癌方法：甲基膽蒽蓖麻油涂抹皮膚，每周3次，150~200天后出現(xiàn)乳頭狀瘤精品PPT（三）移植性腫瘤動(dòng)物模型1）實(shí)體瘤的移植人肝癌胰腺癌原位移植

方法：18～20g的裸鼠，新鮮癌組織切成2mm3小塊，暴露肝臟或胰腺，植入，縫合，長(zhǎng)到2cm3時(shí)（3～5周后）取出。人肺癌（LungCarcinoma）裸鼠原位移植：暴露氣管，用8號(hào)針頭于氣管環(huán)之間刺小孔，用6號(hào)針頭向右支氣管注射4×105PG（肺巨細(xì)胞癌），4～5周后死亡。精品PPT2）腹水瘤移植2.5～3.0×107／mL，每只鼠接種0.2mL。作腹腔注射（接種成腹水瘤）或皮下注射（接種成實(shí)體瘤）精品PPT

消化系統(tǒng)動(dòng)物模型一）幽門螺桿菌感染動(dòng)物模型經(jīng)口感染無(wú)特異病原CD1小鼠4～8周內(nèi)，為胃腺體消失，上皮細(xì)胞脫落，潰瘍形成及粘膜固有層炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。精品PPT二）胃潰瘍動(dòng)物模型1、造模機(jī)制1)常用方法：應(yīng)激法：以各種傷害性刺激引起潰瘍2）藥物法投予組胺、胃泌素等3）燒灼法用電極燒灼胃壁精品PPT三）呼吸系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型（一）慢性支氣管炎動(dòng)物模型（animalmodelofchronicbronchitis)二氧化硫法：小鼠1%so2每天20s，20d煙霧法：大鼠，鋸目、煙葉、干辣椒、硫磺混合點(diǎn)燃，每天1h，44d精品PPT二）肺炎1、大腸桿菌肺炎家兔：菌液3.0×107／mL，通過(guò)支氣管注射，回抽見氣泡后注射入氣管。2、白念珠菌肺炎Wistar大鼠：氣管內(nèi)注射菌液，對(duì)照組同時(shí)用生理鹽水氣管內(nèi)注入。3、支原體肺炎金黃地鼠：鼻腔滴入精品PPT

四、心血管系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型一、高血壓模型一）常用動(dòng)物犬、大鼠二）自發(fā)性高血壓大鼠用WISTAR大鼠繁殖近親交配得到三）實(shí)驗(yàn)性高血壓模型精品PPT1實(shí)驗(yàn)性腎動(dòng)脈狹窄性高血壓二腎一夾(two—kidney—one—clip)腎性高血壓：用套環(huán)縮小腎動(dòng)脈，同時(shí)給予青霉素鈉注射液1O萬(wàn)U／只，四周可成。2腎外包扎性高血壓乳膠膜繞腎門交叉包扎，并切除右腎3神經(jīng)源性及應(yīng)急性高血壓：噪音加電刺激大鼠：每天二次，20d，足底電擊精品PPT二高血脂和動(dòng)物粥樣硬化模型一）高脂飼料誘發(fā)高血脂及粥樣硬化模型方法：小型豬：1%~2%高脂食物飼喂6個(gè)月,小鼠：雄性小鼠飼以1%膽固醇及10%豬油的高脂食物精品PPT二）非喂養(yǎng)法誘發(fā)高血脂及動(dòng)脈粥樣硬化癥模型1、免疫誘發(fā)模型大鼠主動(dòng)脈勻漿給兔注射，可引起血膽固醇升高2、兒茶酚胺誘發(fā)模型給兔靜注去甲腎上腺素1mg/24h3、半光氨酸誘發(fā)模型給兔皮下注射半胱氨酸硫代內(nèi)酯每天20~25mg/kg精品PPT二、肝膽疾病動(dòng)物模型一）四氯化碳誘發(fā)急性中毒性肝炎1、造模機(jī)制進(jìn)入肝細(xì)胞后，溶解線粒體膜的脂質(zhì)，造成酶的破壞，使肝細(xì)胞壞死。精品PPT2、造模方法1）小鼠40%CCL4橄欖油口服0.4ml2)大鼠CCL40.05ml/100g皮下注射3）兔CL41.2ml/kg一次性口服二)肝纖維化動(dòng)物模型1、造模機(jī)制引起肝組織長(zhǎng)期損傷，導(dǎo)致肝纖維化2、造模方法精品PPT1）免疫法雄性Wistar大鼠，取豬血清腹腔注射，每周2次共8次2）四氯化碳法Wistar大鼠，皮下注射40%~50%油溶液，每周2次，從第2周起，隔日經(jīng)20%~30%酒精1ml灌胃3、模型特點(diǎn)1）免疫法肝纖維化86%左右，對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育無(wú)影響，是較理想的模型精品PPT2）四氯化碳模型大鼠成活率60%~80%三）膽石癥動(dòng)物模型1病因:與生活習(xí)慣有關(guān)膽囊的慢性炎癥盲目節(jié)食減肥膽固醇的代謝失調(diào)。感染腸道寄生蟲者2、造模機(jī)制感染、膽汁淤滯、膽固醇代謝障礙、自主神經(jīng)調(diào)節(jié)障礙精品PPT4、造模方法1）感染法膽囊注入蛔蟲卵2）食餌法雌性豚鼠，飼喂高膽固醇食物如：酪蛋白1%，蔗糖1.5%,豬油1%，纖維素1%，膽酸0.02%,膽固醇0.05%3）狹窄成石法包括膽囊、膽總管結(jié)扎法4）切除迷走神經(jīng)法5）異物植入法精品PPT五胰腺炎動(dòng)物模型一病因:膽汁返流胰液分泌亢進(jìn),使胰管內(nèi)壓升高----暴飲暴食，酒精

二方法:一）結(jié)扎胰管二）牛膽酸鈉致急性出血性胰腺炎大鼠注射牛膽酸鈉導(dǎo)致胰腺細(xì)胞壞死出血治療:

解痙止痛.胰酶抑制劑,針取陽(yáng)陵泉、足三里,胰腺切除精品PPT第六節(jié)內(nèi)分泌、營(yíng)養(yǎng)代謝性疾病動(dòng)物模型一、甲狀腺疾病動(dòng)物模型1、模型機(jī)制飼喂甲狀腺腫病區(qū)糧食、抗甲狀腺藥物、手術(shù)摘除、口服甲狀腺素等2、造模方法1）缺碘及功能減退法飼喂缺碘食物2）實(shí)驗(yàn)性甲狀腺腫法腹腔注射PTU精品PPT3)淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎法選用Beagle犬4）實(shí)驗(yàn)性甲亢法腹腔注射T43、模型特點(diǎn)精品PPT二、糖尿病動(dòng)物模型1、造模機(jī)制注射高血糖因子、引起胰島細(xì)胞損傷的藥物、手術(shù)切除胰腺、自發(fā)性糖尿病鼠2、造模方法1）自發(fā)性糖尿病鼠2）四氧嘧啶法1％的生理鹽水配制，40mg/kg靜注,注射后2h高血糖，6h低血糖，18h高血糖，穩(wěn)定2周后作為成功模型,但對(duì)肝腎有損傷。3）鏈脲佐菌素法SD大鼠，禁食12h，PH4.5，1％的生理鹽水配制，STZ50mg／kg尾靜脈內(nèi)注射造模，3d后測(cè)血糖，大于16．7mmol／L為模型精品PPT3治療:磺脲類降糖藥---刺激胰島β細(xì)胞釋放胰島素雙胍類降糖藥---促進(jìn)外周組織對(duì)血糖的利用

三、肥胖動(dòng)物模型一）營(yíng)養(yǎng)性肥胖動(dòng)物模型造模方法1）基礎(chǔ)或者營(yíng)養(yǎng)飼料精品PPT

第七節(jié)外科學(xué)動(dòng)物模型小腸缺血再灌注方法：麻醉，展開腸系膜，結(jié)扎動(dòng)靜脈，并設(shè)置對(duì)照組。于不同時(shí)相去除結(jié)扎線，恢復(fù)血循環(huán)。如去除結(jié)扎線后血循環(huán)未恢復(fù)者要剔除。腎缺血再灌注

方法：結(jié)扎腎動(dòng)脈，不同時(shí)間解除結(jié)扎，并注射胰島素觀察不同濃度的胰島素的作用。

需要設(shè)置對(duì)照組，并同時(shí)選用多只大鼠或家兔。精品PPT癲癇模型方法：注射馬桑內(nèi)酯：雄性以3mg／kg，雌性以2.5mg／kg為宜。腦缺血再灌注模型方法：暴露并用魚線阻塞頸總動(dòng)脈，一定時(shí)間后抽去線，恢復(fù)血循環(huán)。治療：可采用注射干細(xì)胞法。精品PPT第八節(jié)五官、皮膚科一耳鼻喉科1氨基甙類抗生素中毒性耳聾抗生素破壞毛細(xì)胞，改變內(nèi)耳微循環(huán)等，大鼠肌注慶大霉素80～250mg/kg,持續(xù)1~4周。鼻超敏反應(yīng)

10％的2、4二異氰酸甲苯酯（TDI)橄欖油10ml滴入兩個(gè)鼻孔，連續(xù)7日后改為隔日滴，出現(xiàn)噴嚏，鼻癢，大量酸性和肥大細(xì)胞出現(xiàn)于鼻粘膜上，組胺含量增多。精品PPT二系統(tǒng)性紅斑狼瘡方法：1、淋巴細(xì)胞分離取出親代鼠脾、淋巴結(jié)細(xì)胞，按2：1混合制成細(xì)胞懸液。

2、淋巴細(xì)胞靜脈注射1x107個(gè)，0天和7天各注射一次，同時(shí)注射50IU肝素第四周就出現(xiàn)SLE病變。癥狀：大量抗組蛋白、抗dsDNA抗體等。治療：糖皮質(zhì)激素，IL-2等精品PPT陽(yáng)虛動(dòng)物模型

輕化可的松小鼠每日肌注0.4~1.25g/kg，連續(xù)10天后出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍，豎毛等癥狀。用于補(bǔ)陽(yáng)藥物篩選，陽(yáng)虛本質(zhì)研究。陰虛動(dòng)物模型每天甲狀腺素3mg和利血平20mg予小鼠灌胃3周即可，造成甲亢癥狀，口渴，煩躁，體重減輕，用于補(bǔ)陰藥物篩選和陰虛的研究。第九節(jié)中醫(yī)證候動(dòng)物模型p216精品PPT血虛動(dòng)物模型

2％的乙酰苯肼，1ml/100g體重皮下注射。造成口唇粘膜發(fā)白，四肢無(wú)力，毛發(fā)失澤。血瘀動(dòng)物模型

10%高分子右