原核生物基因表達(dá)的調(diào)控啟動(dòng)子教學(xué)課件2

第七章外源基因的表達(dá)及其優(yōu)化策略第一節(jié)影響外源基因表達(dá)的因素第二節(jié)外源基因在原核細(xì)胞中的表達(dá)第三節(jié)外源基因在真核細(xì)胞中的表達(dá)第一節(jié)影響外源基因表達(dá)的因素基因表達(dá):從DNA分子有序地將其所承載的遺傳信息通過密碼子和反密碼子系統(tǒng)轉(zhuǎn)變由特定氨基酸順序構(gòu)成的多肽或蛋白質(zhì)分子過程,從而決定生物有機(jī)體遺傳表型。第一節(jié)影響外源基因表達(dá)的因素基因表達(dá)是指結(jié)構(gòu)基因在生物體中的轉(zhuǎn)錄、翻譯以及所有加工過程。基因工程中基因高效表達(dá)研究是指外源基因在某種細(xì)胞中的表達(dá)活動(dòng),即剪切下外源基因片段,拼接到另一個(gè)基因表達(dá)體系中,使其能獲得原生物活性又可高產(chǎn)的表達(dá)產(chǎn)物。第一節(jié)影響外源基因表達(dá)的因素DMMMMRAHlication基因表達(dá)遺傳信息從DNA到蛋白質(zhì)的傳遞過程中心法則(centraRNAdogma)。Protein第一節(jié)影響外源基因表達(dá)的因素克隆基因的表達(dá)外源基因在宿主細(xì)胞中表達(dá)導(dǎo)入宿主細(xì)胞在宿主細(xì)胞中表達(dá)出蛋白質(zhì)宿主細(xì)胞原核細(xì)胞或真核細(xì)胞第一節(jié)影響外源基因表達(dá)的因素影響外源基因表達(dá)的因素主要有:閱讀框架順式作用元件翻譯過程表達(dá)體系第一節(jié)影響外源基因表達(dá)的因素、閱讀框架對轉(zhuǎn)化基因的影響什么是閱讀框架(openreadingframe,ORF)?二、順式作用元件對基因表達(dá)的影響1對基因轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控1)啟動(dòng)子2)增強(qiáng)子3沉默子第一節(jié)影響外源基因表達(dá)的因素順式作用元件對基因表達(dá)的影響2對基因轉(zhuǎn)錄終止的調(diào)控1)終止子2)衰減子3對DNA結(jié)構(gòu)的影響1)核基質(zhì)結(jié)合區(qū):一段與核基質(zhì)特異結(jié)合的DNA序列。2)絕緣子:對一側(cè)有作用,對另一側(cè)沒有。3)基因座控制區(qū):通過改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)導(dǎo)致基因轉(zhuǎn)錄第一節(jié)影響外源基因表達(dá)的因素三、翻譯過程對表達(dá)的影響1翻譯起始對基因表達(dá)的影響2密碼子偏愛性對基因表達(dá)的影響3翻譯終止對基因表達(dá)的影響四、表達(dá)系統(tǒng)對表達(dá)產(chǎn)物的影響第二節(jié)外源基因在原核細(xì)胞中的表達(dá)外源基因表達(dá)系統(tǒng)由基因表達(dá)載體和相應(yīng)的受體細(xì)胞兩部分組成。宿主細(xì)胞分為兩大類第一類為原核細(xì)胞大腸桿菌、枯草芽胞桿菌、鏈霉菌等;第二類為真核細(xì)胞酵母、絲狀真菌、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等。目前使用最廣泛的宿主菌